魚制品和肉制品中揮發(fā)性亞硝胺檢測方法及前處理裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食品安全分析領(lǐng)域，尤其是涉及一種肉制品和魚制品中揮發(fā)性N-亞 硝胺檢測方法以及前處理裝置。
【背景技術(shù)】
[0002] N-亞硝胺是具有N-亞硝胺結(jié)構(gòu)的一種亞硝基化合物，主要由其前體物質(zhì)胺類在 亞硝化試劑的作用下形成。RJPR2可以為烷基，如二甲基亞硝胺（NDMA)、二乙基亞硝胺 (NDEA)、二丙基亞硝胺（NDPA)等；或者為芳烴，如二苯基亞硝胺（NDPhA)等；或者為環(huán)烷 基，如N-亞硝基吡咯烷（NPYR)、N-亞硝基嗎啉（NM0R)等。常溫下，低分子量的N-亞硝胺 一般為黃色油狀液體，如NDMA等，高分子量的N-亞硝胺多為固體。大多數(shù)N-亞硝胺不溶 于水，僅溶于有機(jī)溶劑中。由于N-亞硝胺分子量不同，導(dǎo)致蒸汽壓大小不同，可分為揮發(fā)性 N-亞硝胺和非揮發(fā)性N-亞硝胺。揮發(fā)性N-亞硝胺可由水蒸汽蒸餾出來，不經(jīng)衍生化直接 由氣相色譜法測定；非揮發(fā)性N-亞硝胺則難以由水蒸汽蒸餾出來。N-亞硝胺（NOCs)是加 工過程中可能形成的一類有機(jī)污染物，比較典型的是N-二甲基亞硝胺（NDMA)，在腌制和熏 制肉類制品中普遍存在，檢出率達(dá)到80%左右。N-亞硝胺化合物的前體物包括含氮的硝酸 鹽、亞硝酸鹽和胺類。肉類制品中由于食品添加劑亞硝酸鹽的使用，導(dǎo)致可能形成亞硝胺， 而魚類中有氧化三甲胺，因此可以發(fā)生N-亞硝化反應(yīng)，形成亞硝胺。此外，亞硝胺在其它 食品，如可可、奶酪和乳粉蛋粉、咖啡、速溶湯料和調(diào)味料（魚露、蠔油等）中也存在。
[0003]N-亞硝胺是國際公認(rèn)的毒性較大的污染物。N-亞硝胺是一類強(qiáng)致癌物，具有肝 毒性和致癌性。在研究的300多種亞硝胺化合物中，90%以上具有動物致癌作用，IARC把許 多N-亞硝胺劃分為人類"很可能"（2A)或者"可能"（2B)的致癌物，對N-亞硝胺的主要關(guān) 注點(diǎn)是其致癌性和遺傳毒性。吸煙是人群N-亞硝胺暴露的主要途徑，對于非吸煙人群，膳 食則是主要暴露途徑，食品N-亞硝胺的主要來源，包括啤酒、亞硝酸鹽腌制的臘肉、加工奶 酪、以及魚肉等，其它來源還有吸煙、內(nèi)源性合成如亞硝酸鹽與飲食胺的反應(yīng)等。常用的檢 測方法氣相色譜-熱能分析儀（GC-TEA)法、氣相色譜質(zhì)譜（GC-MS)法、氣相色譜-氮磷檢 測器（GC-NPD)法、固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜（SPME-GC-MS)法和膠束電動毛細(xì)管色譜 法（MEKC)等，其中較為經(jīng)典的是GC-TEA檢測，美國A0AC和我國國標(biāo)第一法采用此法，雖然 該法靈敏度高，特異性強(qiáng)，但檢測器適用范圍小，難以推廣；氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS)需要 價(jià)格昂貴的高分辨質(zhì)譜，不易獲得，我國國標(biāo)第二法采用該法；SPME-GS-MS法可同時(shí)完成 取樣、萃取、富集和進(jìn)樣過程，簡化了樣品的前處理過程，但存在萃取纖維頭價(jià)格昂貴、使用 壽命短等缺點(diǎn)；其它方法雖各有特點(diǎn)，但也存在儀器適用范圍小、重現(xiàn)性差、或只能檢測某 種組分的N-亞硝胺等缺點(diǎn)。因此有必要建立一種耗時(shí)短、靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、 檢測成本低且能同時(shí)測定食品中多種N-亞硝胺的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)肉制品和魚制品中揮發(fā)性N-亞硝胺的檢測：
[0005] -種檢測肉制品和魚制品中揮發(fā)性N-亞硝胺檢測蒸餾裝置，其特征在于所述裝 置包括加熱裝置、蒸汽發(fā)生瓶、第一磨口玻璃接口、安全管、第一磨口玻璃轉(zhuǎn)接頭、第二玻璃 磨口轉(zhuǎn)接頭、樣品瓶、第二磨口玻璃轉(zhuǎn)接頭、冷凝管、接收管、蒸餾液收集瓶、冰浴瓶以及蒸 汽輸送管組成，所述加熱裝置對蒸汽發(fā)生瓶加熱產(chǎn)生蒸汽，所述蒸汽發(fā)生瓶通過第一磨口 玻璃接口、蒸汽輸送管以及第一磨口玻璃轉(zhuǎn)接頭與樣品瓶相連，所述樣品瓶通過第一磨口 玻璃轉(zhuǎn)接頭、第二玻璃磨口轉(zhuǎn)接頭以及蒸汽輸送管與冷凝管的一端相連，所述冷凝管的另 一端通過接收管的一端與所述蒸餾液收集瓶相連，所述接收管另一端插入蒸餾液收集瓶 內(nèi)，所述蒸餾液收集瓶放置于冰浴瓶中；所述安全管通過第一磨口玻璃接口插入到蒸汽發(fā) 生瓶中。
[0006] 根據(jù)上述的裝置，該裝置還包括升降裝置，升降裝置的臺面上放置樣品瓶，以調(diào)整 樣品瓶的高度。
[0007] 根據(jù)上述的裝置，該裝置還包括第一高度調(diào)節(jié)固定裝置和第二高度調(diào)節(jié)固定裝 置，第一調(diào)節(jié)固定裝置和升降裝置配合使用，并對樣品瓶的頸部進(jìn)行夾持固定；第二高度調(diào) 節(jié)固定裝置夾持住冷凝管并調(diào)整冷凝的高度。
[0008] 根據(jù)上述的裝置，安全管為直管或?yàn)樯隙瞬繌澢?0度的管。
[0009] 根據(jù)上述的裝置，冷凝管為蛇形冷凝管或直形冷凝管。
[0010] 利用根據(jù)上述的裝置檢測揮發(fā)性N-亞硝胺的檢測方法，該方法包括如下步驟：
[0011] (1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別準(zhǔn)確吸取濃度為l.Oug/mL25iiL、50iiL、100iiL、 200iiL、300iiLN-亞硝胺混合標(biāo)準(zhǔn)工作液于1. 0ml容量瓶中并準(zhǔn)確加入100iiL1. 0iig/ mLN-二丙基亞硝胺內(nèi)標(biāo)工作液，用二氯甲烷定容至1.OmL，N-亞硝胺濃度分別為25ng/mL、 50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、300ng/mL,充分混勻，供帶有氮化學(xué)發(fā)光檢測器的氣相色譜 分析；
[0012] ⑵樣品的制備：
[0013] (2. 1)水蒸汽蒸餾：稱取一定量的粉碎好的肉制品或魚制品樣品于樣品瓶中，力口 入適量N-二丙基亞硝胺內(nèi)標(biāo)工作液后再加入25mL?60mL水，超聲后，在蒸餾液接收瓶中 加入二氯甲烷，并將其置于盛有冷凍10 - 12h的飽和氯化鈉溶液的冰浴瓶中，連接好上述 蒸餾裝置，確認(rèn)所述蒸餾裝置不漏氣后，打開加熱裝置進(jìn)行蒸餾，并用蒸餾液收集瓶收集 蒸餾液；
[0014] (2.2)液-液萃?。簩⒄麴s液收集瓶中的蒸餾液轉(zhuǎn)移至三角瓶中，加入適量氯化 鈉，使蒸餾液中的氯化鈉達(dá)到過飽和后，按照一定比例加入硫酸溶液，用磨口玻璃塞蓋緊 三角瓶，將三角瓶至于振蕩儀上振蕩一定時(shí)間后，將三角瓶中的液體轉(zhuǎn)入漏斗中，靜置分 層后，將二氯甲烷層轉(zhuǎn)入另一三角瓶中，再加入二氯甲烷于分液漏斗以萃取水層中殘余的 N-亞硝胺類物質(zhì)，合并兩次二氯甲烷