專利名稱：快速測定循環(huán)水中含菌量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有微生物的定量測定方法，尤其是一種測定循環(huán)水中含菌量的方法。
在工業(yè)生產(chǎn)的循環(huán)水系統(tǒng)中，需要經(jīng)常測定水中含菌情況，特別是所含有的異養(yǎng)菌，以進(jìn)行水中含菌的控制和處理，確保生產(chǎn)裝置的正常運(yùn)行及提高設(shè)備的使用周期。目前，現(xiàn)有的測定循環(huán)水中含菌量的方法是平板菌落計(jì)數(shù)法，主要采用瓊脂、蛋白胨、肉膏為培養(yǎng)基，需在無菌室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)基的制備和操作，且操作繁瑣，從測定準(zhǔn)備到制出培養(yǎng)液需要8-10小時(shí)，再將培養(yǎng)液置于專門的細(xì)菌培養(yǎng)箱中經(jīng)72小時(shí)培養(yǎng)后方才能出結(jié)果，測定時(shí)間較長，為生產(chǎn)現(xiàn)場提供的水質(zhì)含菌數(shù)測定報(bào)告滯后，特別是在水質(zhì)惡化時(shí)難以及時(shí)測定出含菌量，從而給水處理造成損失。
本發(fā)明之目的是提供一種改進(jìn)的測定循環(huán)水中含菌量的方法，使其制備培養(yǎng)液操作工藝簡便，測定菌數(shù)時(shí)間短，快速，能及時(shí)為生產(chǎn)現(xiàn)場提供水質(zhì)含菌量測定結(jié)果，適應(yīng)水處理及相關(guān)生產(chǎn)裝備的需要。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的解決方案是選擇氯化三苯基四氮唑(TTC)作為測定循環(huán)中含菌量的染色劑，將TTC和蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉加蒸餾水按重量比為TTC0.1-0.2、蛋白胨4-6、牛肉膏1-2、氯化鈉2-3、蒸餾水800-1200配制成PH7.5-8.5的染色培養(yǎng)基液，組裝入試管經(jīng)滅菌后備用；再取定量的被測循環(huán)水移入備好的染色培養(yǎng)基液試管中封閉搖勻后，置入溫度為35-38℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，至試管內(nèi)培養(yǎng)液變成為淺粉紅色，按所用培養(yǎng)時(shí)間計(jì)算出單位容積被測水中所含菌數(shù)。
由于氯化三苯基四氮唑(TTC)溶解于水呈無色溶液。它能進(jìn)入生物的細(xì)胞內(nèi)，作為人工受氫體，接受脫氫酶從基質(zhì)上脫下來的氫，而本身被還原成紅色的沉淀物。因此，TTC能使包括好氧及厭氧、自養(yǎng)及異養(yǎng)等活菌體染上紅色。經(jīng)數(shù)次試驗(yàn)結(jié)果表明，選擇TTC染色法，應(yīng)用染色培養(yǎng)基液培養(yǎng)測定循環(huán)水含菌量僅需幾小時(shí)至十幾小時(shí)，在常規(guī)化驗(yàn)室便可操作，其操作簡便，測定快速，節(jié)省人力物力，能及時(shí)為生產(chǎn)現(xiàn)場提供水質(zhì)含菌量的測定報(bào)告。該方法可廣泛應(yīng)用于化肥、煉油、化工、制藥、紡織等行業(yè)循環(huán)水系統(tǒng)中測定含菌量，亦適用于篩選評價(jià)殺菌藥劑的功效性能，系一種快速測定工業(yè)循環(huán)水中含菌量的新方法。
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
本發(fā)明實(shí)施例1、染色培養(yǎng)基液的配制(1)染色培養(yǎng)基液配方(重量比)材料名稱配方1配方2TTC 0.15g0.18g蛋白胨 4.5g 5g牛內(nèi)膏 1.4g 1.8g氯化鈉 2.2g 2.6g蒸餾水 1000g1000g(2)配制方法如按上述配方1配制成PH8的染色培養(yǎng)基液，分別按每管5毫升組裝試管，再進(jìn)行滅菌后備用。
2、菌數(shù)測定方法取1毫升被測水移入備好的5毫升染色培養(yǎng)液試管中，在酒精燈上將試管蓋塞封閉，充分搖勻。每種被測水樣做三支平行樣管，并做一支不加被測水樣的空白培養(yǎng)液試管。然后移入37±1℃的細(xì)菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，至裝有被測水樣的試管中培養(yǎng)液變?yōu)闇\粉紅色，按所用培養(yǎng)時(shí)間由下列“含菌量與TTC變色時(shí)間對應(yīng)表”得出單位容積被測水中含菌量。
對含菌量較大的被測水，也可用無菌水稀釋一定倍數(shù)后再對照檢測。
3、含菌量與TTC變色時(shí)間對應(yīng)表<
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權(quán)利要求
1.一種快速測定循環(huán)水中含菌量的方法，包括由蛋白胨、牛肉膏和蒸餾水配制的培養(yǎng)基液，其特征是該測定方法還包括菌體染色劑氯化三苯基四氮唑(TTC)和培養(yǎng)基氯化鈉，是按重量配比為TTC0.1-0.2、蛋白胨4-6、牛肉膏1-2、氯化鈉2-3、蒸餾水800-1200配成為PH7.5-8.5的染色培養(yǎng)基液，組裝試管滅菌后備用，再將定量的被測水移入備好的染色培養(yǎng)基液試管中封閉搖勻后，置入溫度為35-38℃的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，至試管內(nèi)培養(yǎng)基液變成淺粉紅色，按所用培養(yǎng)時(shí)間由含菌量與TTC變色時(shí)間對應(yīng)表得出單位容積被測水中的含菌量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述快速測定循環(huán)水中含菌量的方法，其特征是含菌量與TTC變色時(shí)間對應(yīng)表為
全文摘要
本發(fā)明提供了一種測定循環(huán)水中含菌量的方法。它采用TTC為染色劑,并與蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、蒸餾水配制成染色培養(yǎng)基液,經(jīng)組裝試管后滅菌備用;再將定量的被測水移入備好的染色培養(yǎng)基液試管中封閉搖勻后,置入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),至試管內(nèi)培養(yǎng)液變?yōu)闇\粉紅色,按所培養(yǎng)時(shí)間得出單位容積被測水中含菌數(shù)。本發(fā)明操作簡便,測定快速,能及時(shí)為生產(chǎn)現(xiàn)場提供水質(zhì)含菌量的測定報(bào)告,系一種快速測定工業(yè)循環(huán)水中含菌量的新方法。
文檔編號G01N33/48GK1171550SQ97112019
公開日1998年1月28日 申請日期1997年5月15日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月15日
發(fā)明者趙書培 申請人:河北滄州大化集團(tuán)有限責(zé)任公司