本發(fā)明屬于生物檢測領(lǐng)域，具體涉及一種檢測血清自身抗體的試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、近些年來，全球乳腺癌的發(fā)病率和死亡率呈現(xiàn)上升的趨勢，成為發(fā)展中國家和發(fā)達(dá)國家女性的主要癌癥。乳腺癌早期的篩查和診斷是降低乳腺癌死亡率的最好辦法，因此，早期的疾病的預(yù)防至關(guān)重要。在目前乳腺癌檢測方法中，乳房x光檢查是一種比較普遍的篩查技術(shù)，但是存在明顯的局限性。乳房x光檢查缺乏敏感性，不適合檢測原發(fā)性乳腺癌，而且可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。因此，亟須一種更有效的診斷早期乳腺癌的手段。目前，早期乳腺癌的檢測手段主要是通過檢測腫瘤相關(guān)抗原，例如甲胎蛋白cea、抗原ca19-9、蛋白afp等，這些標(biāo)志物的含量隨著腫瘤大小的增長而升高，所以腫瘤相關(guān)抗原靈敏度和特異性比較差。因此，亟待尋找一種腫瘤標(biāo)志物來解決目前的國際難題。

2、20世紀(jì)60年代研究證實(shí)了人體的免疫系統(tǒng)能夠?qū)δ[瘤產(chǎn)生免疫反應(yīng)，腫瘤相關(guān)抗原的過表達(dá)、異常突變導(dǎo)致癌癥患者產(chǎn)生自身免疫應(yīng)答，能夠在癌癥患者體內(nèi)檢測到高表達(dá)的自身抗體來，來實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤患者早期診斷。自身抗體是針對(duì)自身組織、器官、細(xì)胞成分的抗體，產(chǎn)生可能先于確診腫瘤數(shù)月或者數(shù)年，能夠在腫瘤患者出現(xiàn)臨床癥狀之前檢測到。抗原本身在健康細(xì)胞中以低濃度表達(dá)，少量的刺激就可以引起b細(xì)胞產(chǎn)生大量的自身抗體，對(duì)抗原信號(hào)起到了一定的放大作用，所以自身抗體的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于抗原，因此在腫瘤抗原表達(dá)很低的時(shí)候也能夠檢測到自身抗體。此外，自身抗體穩(wěn)定性好，存在于血清中的時(shí)間較長，便于長期存放及大規(guī)模篩查。

3、因此，特異性檢測自身抗體的試劑盒可以作為醫(yī)學(xué)上癌癥早期檢測的補(bǔ)充手段，實(shí)現(xiàn)對(duì)癌癥簡單、快速、靈敏的檢測。尋找腫瘤特異的靶抗原以及其誘導(dǎo)產(chǎn)生的自身抗體，對(duì)于自身抗體應(yīng)用于腫瘤的檢測至關(guān)重要，也是該領(lǐng)域研究的重點(diǎn)以及難點(diǎn)。異質(zhì)核糖核蛋白（hnrnps）是高等真核生物中含量最豐富的核蛋白，也是一種rna結(jié)合蛋白。異質(zhì)核糖核蛋白主要包括hnrnpa0、hnrnpa1、hnrnpa2b1和hnrnpa3四種亞型。hnrnpa3是?hnrnps家族中研究相對(duì)較少的成員，是一種重要的蛋白。hnrnpa3作為腫瘤抗原誘導(dǎo)自身抗體產(chǎn)生，參與乳腺癌的發(fā)展過程尚未報(bào)道，目前已經(jīng)報(bào)道的標(biāo)志物缺乏在早期乳腺癌或者乳腺癌前病變方面的研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的之一在于提供一種檢測血清自身抗體的試劑盒，可用于特異性檢測血清中的hnrnpa3自身抗體，作為高表達(dá)hnrnpa3自身抗體類的癌癥的輔助診斷手段，具有檢測方法簡便、準(zhǔn)確性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。

2、本發(fā)明的目的之二在于提供一種檢測血清自身抗體的試劑盒的應(yīng)用。

3、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

4、一種檢測血清自身抗體的試劑盒，所述試劑盒包括標(biāo)準(zhǔn)品、包被重組抗原蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、顯色液、反應(yīng)終止液；所述的重組抗原蛋白為帶有his標(biāo)簽的重組hnrnpa3抗原蛋白。

5、進(jìn)一步地，所述標(biāo)準(zhǔn)品為含有hnrnpa3自身抗體的血清。

6、進(jìn)一步地，所述重組hnrnpa3抗原蛋白的包被濃度為0.5-1μg/ml。

7、進(jìn)一步地，所述重組hnrnpa3抗原蛋白最佳包被濃度為0.5μg/ml。

8、進(jìn)一步地，所述酶標(biāo)二抗為辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人igg抗體。

9、進(jìn)一步地，所述顯色液為tmb顯色液；所述反應(yīng)終止液為硫酸。

10、上述檢測血清自身抗體的試劑盒在制備乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用。

11、進(jìn)一步地，所述試劑盒用于檢測血清樣本中hnrnpa3自身抗體含量。

12、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果主要在于：本發(fā)明公開了一種檢測血清自身抗體的試劑盒及其應(yīng)用，通過蛋白質(zhì)質(zhì)譜技術(shù)篩選出來能夠檢測早期乳腺癌血清hnrnpa3自身抗體，該試劑盒可特異性檢測hnrnpa3自身抗體含量，特異性強(qiáng)，靈敏度高，可以用于乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括標(biāo)準(zhǔn)品、包被重組抗原蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、顯色液、反應(yīng)終止液；所述的重組抗原蛋白為帶有his標(biāo)簽的重組hnrnpa3抗原蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)品為含有hnrnpa3自身抗體的血清。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述重組hnrnpa3抗原蛋白的包被濃度為0.5-1μg/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述重組hnrnpa3抗原蛋白最佳包被濃度為0.5μg/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述酶標(biāo)二抗為辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗人igg抗體。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒，其特征在于，所述顯色液為tmb顯色液；所述反應(yīng)終止液為硫酸。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒在制備乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述一種檢測血清自身抗體的試劑盒在制備乳腺癌前期病變篩查以及診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑盒用于檢測血清樣本中hnrnpa3自身抗體含量。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物檢測領(lǐng)域，具體涉及一種檢測血清自身抗體的試劑盒及其應(yīng)用。所述試劑盒包括標(biāo)準(zhǔn)品、包被重組抗原蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、顯色液、反應(yīng)終止液；所述的重組抗原蛋白為帶有His標(biāo)簽的重組HNRNPA3抗原蛋白。本發(fā)明提供的用于檢測乳腺癌的試劑盒特異性強(qiáng)，可特異性檢測HNRNPA3自身抗體含量，作為高表達(dá)HNRNPA3自身抗體乳腺癌輔助診斷手段，對(duì)癌癥早期的篩查和診斷至關(guān)重要。

技術(shù)研發(fā)人員：楊琴,楊成杰
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣州醫(yī)太通生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19