本發(fā)明屬于環(huán)境分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體是涉及一種沉積物中氯代有機(jī)污染物高通量非靶向篩查鑒定方法。

背景技術(shù)：

目前，天然和人工合成的氯代有機(jī)物越來越受到人們的關(guān)注，主要是因?yàn)檫@些物質(zhì)在環(huán)境中的可持久性、生物富集性以及潛在的生物毒性。氯代有機(jī)物主要包括氯聯(lián)苯、氯代農(nóng)藥抗生素、氯代消毒副產(chǎn)物以及大部分的持久性有機(jī)污染物(pops)等。據(jù)報(bào)道，這些化合物以及相應(yīng)的類似物已經(jīng)在環(huán)境水體、空氣、土壤、底泥、生物體中被檢測出，另外，流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，暴露于氯代有機(jī)物下，會(huì)對人體和生物體產(chǎn)生各種各樣的影響，存在著一定的安全隱患；而且一些天然產(chǎn)生的氯代有機(jī)物相比于人工合成的物質(zhì)具有更大的毒性，因此，鑒定和定量這些天然環(huán)境中的氯代有機(jī)物對保護(hù)人體及生物體的健康有著重要的作用。

在天然的水體中，水體中很多的有機(jī)物質(zhì)都會(huì)沉積在底泥中，底泥沉積物是大量有機(jī)污染物的沉積場所，有機(jī)物質(zhì)從水體進(jìn)入底泥，使得它們的檢測和定量維持在痕量水平。隨著提取、富集、分析程序的改善，越來越多的有機(jī)物質(zhì)被檢測出來，尤其是高分辨、高靈敏度的質(zhì)譜的出現(xiàn)大大的加快了這一研究的進(jìn)展。大量的氯代有機(jī)物，如氯酚等在底泥中被檢測出，被檢測出的物質(zhì)濃度水平通常為ng/g(干重)，但是實(shí)際情況是，海洋生物和底泥中檢測出的總氯濃度卻達(dá)到μg/g的水平，這一定程度上說明，當(dāng)前，我們已知并關(guān)注的氯代化合物的濃度還不到總量的0.1％，由此可見對于未知的環(huán)境樣品還有大量的氯代化合物未被檢測識別出來。

經(jīng)過大量的關(guān)于沉積物中有機(jī)污染物篩查的文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，目前國內(nèi)關(guān)于氯代有機(jī)物的篩查鑒定研究主要為靶向性篩查和可疑性篩查研究，在非靶向篩查方向研究極少。在沉積物中氯代有機(jī)物的篩查研究中，已有的靶向性篩查和可疑性篩查方法，篩查鑒定出來的氯代有機(jī)物的種類有限，數(shù)量較少，主要為目前比較關(guān)注的氯代化合物，對于大量的未知氯代有機(jī)物則無法鑒定分析，從而限制了有機(jī)物篩查分析的通量。

申請公布號為cn104237436a的中國專利，公開了一種沉積物中半揮發(fā)性鹵代有機(jī)污染物定性篩查方法，該方法通過復(fù)合硅膠柱凈化，全二維氣相色譜聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀檢測的方法實(shí)現(xiàn)樣品中半揮發(fā)性鹵代有機(jī)污染物定性篩查的目的。該方法包括以下幾個(gè)步驟：1)沉積物樣品經(jīng)索氏抽提和復(fù)合硅膠柱凈化制成樣品；2)優(yōu)化全二維氣相色譜聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀參數(shù),建立不同鹵代化合物的色譜圖譜庫；3)沉積物抽提樣品濃縮后進(jìn)行全二維氣相色譜聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜檢測；4)將獲取的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行深度分析,定向和非定向篩查沉積物中主要鹵代有機(jī)污染物類型；該發(fā)明方法前處理方法復(fù)雜，索氏提取用時(shí)久且需消耗大量的有機(jī)溶劑，氣相色譜聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀對揮發(fā)性和半揮發(fā)性鹵代有機(jī)物可以實(shí)現(xiàn)很好的檢測，但是對于大量的極性鹵代化合物很難測定，并且該發(fā)明中提到的非定向篩查其實(shí)本質(zhì)上為可疑性篩查方法，定性出的氯代有機(jī)物種類均為已知數(shù)據(jù)庫中的物質(zhì)，并未實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)化合物和非目標(biāo)化合物的聯(lián)合分析。

申請公布號為cn105092748a的中國專利，公開了一種篩查污泥中有機(jī)污染物的方法，該方法步驟包括對活性污泥或/和剩余污泥依次進(jìn)行萃取處理、硅膠柱層析處理和gc-ms分析、測定，測定活性污泥或/和剩余污泥中微量有機(jī)污染物的種類和計(jì)算活性污泥或/和剩余污泥中微量有機(jī)污染物的含量。該發(fā)明方法能夠檢測到活性污泥或/和剩余污泥中低含量的有機(jī)污染物，并準(zhǔn)確測定其含量。該發(fā)明方法僅僅是局限于污水處理后的污泥，并未涉及到環(huán)境中湖泊、河流等水底沉積物，并且該發(fā)明方法采用靶向性篩查和可疑性篩查方法，確定出的氯代有機(jī)污染物的種類有限，對于污泥中未知的大量氯代有機(jī)物無法實(shí)現(xiàn)定性定量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明目的：為了克服現(xiàn)有技術(shù)中針對沉積物中氯代有機(jī)污染物的篩查鑒定種類有限，數(shù)目較少，對于大量的未知氯代有機(jī)物無法鑒定分析，限制了有機(jī)物篩查分析的通量等缺陷，本發(fā)明提供一種沉積物中氯代有機(jī)污染物高通量非靶向篩查鑒定方法，對沉積物中氯代有機(jī)物實(shí)現(xiàn)高通量識別鑒定，能夠在單獨(dú)進(jìn)行的一次分析測定中對沉積物中氯代有機(jī)物的一級和二級質(zhì)譜信息進(jìn)行快速收集和處理，通過篩查技術(shù)對氯代有機(jī)物進(jìn)行分析篩查，篩查出的氯代有機(jī)物種類多，數(shù)量多，可以實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)方法不能達(dá)到的篩查效果。

技術(shù)方案：為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的一種沉積物中氯代有機(jī)污染物高通量非靶向篩查鑒定方法，包括以下步驟：

s1將沉積物樣品進(jìn)行前處理操作得到目標(biāo)檢測樣品，該目標(biāo)檢測樣品為液體；

s2將目標(biāo)檢測樣品上機(jī)檢測，通過液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀對目標(biāo)檢測樣品進(jìn)行檢測，液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜條件為：

液相色譜儀：hplc-agilent1260；

色譜柱：zorbaxeclipsexdb-c18，agilent(2.1mm×150mm，3.5μm)；

柱溫：40℃；

流速：0.4ml/min；

進(jìn)樣體積：5μl；

梯度洗脫流動(dòng)相：

a：加入乙腈的水，乙腈體積：水體積＝5:95；

b：甲醇；

流動(dòng)相梯度：

質(zhì)譜儀：tripletof5600-absciex；

離子源：esi，apci；

電離模式：正負(fù)離子模式；

ms掃描范圍：50-1250m/z；

ms-ms掃描范圍：30-1250m/z；

霧化氣：55psi；

加熱氣：55psi；

氣簾氣：35psi；

離子源溫度：550℃；

離子捕獲電壓：正離子5500v/負(fù)離子-4500v；

去簇電壓：80v；

碰撞能量：正離子20ev、40ev、60ev/負(fù)離子-20ev、-40ev、-60ev；

s3針對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖信息，利用非靶向篩查分析方法確定物質(zhì)的種類。

進(jìn)一步地，所述步驟s1包括以下步驟：

s11先將沉積物樣品在-80℃下凍實(shí)，然后在真空凍干機(jī)中凍干；

s12將凍干后的沉積物樣品研磨并過篩；

s13利用加速溶劑萃取方法對沉積物樣品中的氯代有機(jī)物進(jìn)行提取，得到氯代有機(jī)物萃取液；

s14將氯代有機(jī)物萃取液濃縮定容至1ml；

s15通過envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱對濃縮液進(jìn)行凈化；

s16利用有機(jī)溶劑將殘留在envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱上的目標(biāo)物洗脫下來，將洗脫液再次濃縮定容至1ml，得到目標(biāo)檢測樣品。

進(jìn)一步地，所述步驟s3中非靶向篩查分析方法包括[m]:[m+2n]篩查方法和特征離子碎片篩查方法。

進(jìn)一步地，所述[m]：[m+2n]篩查方法包括以下步驟：

s311從各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖出發(fā)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析，利用peakview軟件進(jìn)行各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖色譜峰的提取；

s312采用matlab循環(huán)分析，提取一級質(zhì)譜質(zhì)荷比相差2的系列色譜峰，將該系列色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成可疑性清單；

s313在peakview軟件中分別設(shè)置同位素分布參數(shù)、一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)和二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)，利用peakview軟件計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的分子式；

s314將peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式；

s315將可疑性清單中各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，從而確定物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式和名稱。

進(jìn)一步地，所述特征離子碎片篩查方法包括以下步驟：

s321從各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖出發(fā)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析，利用abfconverter軟件對二級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)格式轉(zhuǎn)換；

s322通過軟件ms-dial進(jìn)行二級質(zhì)譜圖特征離子碎片提取，提取特征離子碎片中含cl的質(zhì)量數(shù)為34.97±(34.97*10ppm)的色譜峰，將該色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成可疑性清單；

s323在peakview軟件中分別設(shè)置同位素分布參數(shù)、一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)和二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)，利用peakview軟件計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的分子式；

s324將peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，計(jì)算各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式；

s325將各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，從而確定該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式和名稱。

進(jìn)一步地，所述步驟s13中，利用加速溶劑萃取方法：采用加速溶劑萃取儀為戴安ase350，thermoscientificdionex；加速溶劑萃取條件：萃取劑：二氯甲烷和正己烷，體積比為1:1；萃取溫度：80℃；靜態(tài)萃取時(shí)間：8min；萃取循環(huán)：3；淋洗體積：60％；吹掃時(shí)間：110s。

進(jìn)一步地，所述步驟s14中，采用multivaporp-6平行蒸發(fā)儀將氯代有機(jī)物萃取液濃縮，采用organomationassociates氮吹儀吹掃溶劑，氯代有機(jī)物萃取液置于玻璃接收管中。

進(jìn)一步地，所述步驟s15中，通過envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱對濃縮液進(jìn)行凈化，在凈化前預(yù)先使用6ml二氯甲烷進(jìn)行活化，活化結(jié)束后立即對濃縮液進(jìn)行凈化，整個(gè)過程保證小柱濕潤。

進(jìn)一步地，所述步驟s16中，分別利用有機(jī)溶劑二氯甲烷和甲醇將殘留在小柱上的目標(biāo)物洗脫下來；將兩種洗脫液置于玻璃接收管合并后再次濃縮定容至1ml。

進(jìn)一步地，在濃縮定容至1ml的過程中要間隔地對玻璃接收管進(jìn)行渦旋，使得析出在玻璃接收管壁上的物質(zhì)溶解在玻璃接收管中的溶劑中。

有益效果：本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)比較，具有的優(yōu)點(diǎn)是：

1、本發(fā)明建立了加速溶劑萃取與固相凈化的前處理方法，相對于傳統(tǒng)的索氏提取和超聲波提取方法，加速溶劑萃取方法自動(dòng)化程度高、節(jié)省人力，同時(shí)可以節(jié)約大量有機(jī)溶劑，通過多次對加速溶劑萃取方法的優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)選用二氯甲烷和正己烷為萃取劑，溫度設(shè)定為80℃，可萃取的有機(jī)物極性范圍廣，萃取結(jié)果包括極性和非極性氯代有機(jī)物，萃取效果好，且該前處理方法簡單快捷，操作易行；

2、本發(fā)明利用高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜儀，對沉積物樣品中的氯代有機(jī)物進(jìn)行高通量的非靶向篩查鑒定，在一級質(zhì)譜和二級質(zhì)譜模式下分別進(jìn)行全掃，分辨率高、準(zhǔn)確度高；

3、本發(fā)明高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜條件為：

液相色譜儀：hplc-agilent1260；

色譜柱：zorbaxeclipsexdb-c18，agilent(2.1mm×150mm，3.5μm)；

柱溫：40℃；

流速：0.4ml/min；

進(jìn)樣體積：5μl；

梯度洗脫流動(dòng)相：

a：加入乙腈的水，乙腈體積：水體積＝5:95；

b：甲醇；

流動(dòng)相梯度：

質(zhì)譜儀：tripletof5600-absciex；

離子源：esi，apci；

電離模式：正負(fù)離子模式；

ms掃描范圍：50-1250m/z；

ms-ms掃描范圍：30-1250m/z；

霧化氣：55psi；

加熱氣：55psi；

氣簾氣：35psi；

離子源溫度：550℃；

離子捕獲電壓：正離子5500v/負(fù)離子-4500v；

去簇電壓：80v；

碰撞能量：正離子20ev、40ev、60ev/負(fù)離子-20ev、-40ev、-60ev；

取這個(gè)條件，檢測速度快，準(zhǔn)確度高；

4、本發(fā)明提出了[m]:[m+2n]篩查方法和特征離子碎片篩查方法，兩種方法分別從一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖兩個(gè)角度對氯代有機(jī)物進(jìn)行定性篩查，在一定程度上互相彌補(bǔ)了各自篩查方法可能忽略掉的結(jié)果；采用非靶向篩查方法，一方面可以盡可能的實(shí)現(xiàn)對未知氯代有機(jī)物的分析，發(fā)現(xiàn)大量的未知化合物，另一方面可以大大提高氯代有機(jī)物篩查的通量。

附圖說明

圖1是本發(fā)明非靶向分析方法步驟流程圖。

圖2是實(shí)施例樣品中三氯生的一級質(zhì)譜圖。

圖3是標(biāo)樣中三氯生的一級質(zhì)譜圖。

圖4是實(shí)施例樣品中三氯生的二級質(zhì)譜圖。

圖5是標(biāo)樣中三濾生的二級質(zhì)譜圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作更進(jìn)一步的說明。

實(shí)施例一：

本實(shí)施例的一種沉積物中氯代有機(jī)污染物高通量非靶向分析方法，首先需對沉積物樣品進(jìn)行前處理操作得到目標(biāo)檢測樣品，該目標(biāo)檢測樣品為液體；然后將目標(biāo)檢測樣品上機(jī)檢測，通過高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀對目標(biāo)檢測樣品進(jìn)行檢測，得到目標(biāo)檢測樣品中各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖；最后針對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖信息，利用非靶向篩查分析方法確定物質(zhì)的種類，具體到物質(zhì)的名稱和結(jié)構(gòu)式。

將目標(biāo)檢測樣品上機(jī)檢測，通過高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀對目標(biāo)檢測樣品進(jìn)行檢測，本實(shí)施例中高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜條件為：

高效液相色譜儀：hplc-agilent1260；色譜柱：zorbaxeclipsexdb-c18，agilent(2.1mm×150mm，3.5μm)；柱溫：40℃；流速：0.4ml/min；進(jìn)樣體積：5μl；梯度洗脫流動(dòng)相：a：加入乙腈的水，乙腈體積：水體積＝5:95；b：甲醇；

流動(dòng)相梯度：

質(zhì)譜儀：tripletof5600-absciex；離子源：esi，apci；電離模式：正負(fù)離子模式；ms掃描范圍：50-1250m/z；ms-ms掃描范圍：30-1250m/z；霧化氣(gs1)：55psi；加熱氣(gs2)：55psi；氣簾氣(cur)：35psi；離子源溫度：550℃；離子捕獲電壓(isvf)：5500v(正離子)/-4500v(負(fù)離子)；去簇電壓(dp)：80v；碰撞能量(ce)：20ev、40ev、60ev(正離子)/-20ev、-40ev、-60ev(負(fù)離子)；

通過設(shè)置上述高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜條件得到各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖；針對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖信息，利用非靶向篩查分析方法確定物質(zhì)的種類；

參照圖1，非靶向篩查分析方法包括[m]:[m+2n]篩查方法和特征離子碎片篩查方法，其中[m]:[m+2n]篩查方法和特征離子碎片篩查方法同時(shí)進(jìn)行，[m]:[m+2n]篩查方法對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，特征離子碎片篩查方法對各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，實(shí)現(xiàn)對各物質(zhì)的定性分析，將兩種方法得到的物質(zhì)的種類比較，互相彌補(bǔ)各自方法結(jié)果的不足，確定物質(zhì)的種類，進(jìn)一步提高了物質(zhì)篩查分析的準(zhǔn)確性；

在[m]:[m+2n]篩查方法和特征離子碎片篩查方法中使用數(shù)據(jù)分析軟件peakview1.2和matlab2013，peakview1.2是廠家儀器上自帶的數(shù)據(jù)分析軟件，peakview1.2通過xicmanager、ida以及non-targetpeakfounding功能可以實(shí)現(xiàn)對樣品中各物質(zhì)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行提??；matlab2013可實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)分析；通過軟件analysisbasefileconverter，ms-dial實(shí)現(xiàn)對二級質(zhì)譜圖的二級離子碎片進(jìn)行提取。

[m]:[m+2n]篩查方法是從各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖出發(fā)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析，具體流程如下：

提取色譜峰：利用數(shù)據(jù)分析軟件peakview1.2對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖色譜峰進(jìn)行提取，首先需要在peakview1.2軟件中設(shè)置xicmanager、ida以及non-targetpeakfounding功能參數(shù)，最終得到各物質(zhì)對應(yīng)的系列色譜峰；

m/z計(jì)算：利用matlab2013軟件循環(huán)分析，提取一級質(zhì)譜質(zhì)荷比相差2的系列色譜峰，將該系列色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成可疑性清單；

在peakview1.2軟件中，分別設(shè)置同位素分布參數(shù)、一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)和二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)，利用peakview1.2軟件計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的分子式；

將peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，chemspider數(shù)據(jù)庫中包括各種分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，通過peakview軟件軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，可以計(jì)算得到與各種分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，這樣就得到各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式，通過該步驟得到的各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式不是唯一的，包括一種或多種，還需要通過下述步驟來確定物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式；

將可疑性清單中各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，若與其中一個(gè)結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖一致，則可確定該物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式及名稱。

特征離子碎片篩查方法是從各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖出發(fā)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析，具體流程如下：

利用abfconverter軟件對各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)格式轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)格式為.abf數(shù)據(jù)格式，以便ms-dial進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；

通過軟件ms-dial提取ms/ms：利用ms-dial進(jìn)行各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖特征離子碎片進(jìn)行提取，提取所有含cl的質(zhì)量數(shù)為34.97±(34.97*10ppm)的色譜峰，將該色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成得到可疑性清單；

在peakview1.2軟件中，分別設(shè)置同位素分布參數(shù)、一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)和二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)，利用peakview1.2軟件計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的分子式；

將peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式；

將可疑性清單中各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，若與其中一個(gè)結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖一致，則可確定該物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式及名稱。

通過[m]：[m+2n]篩查方法得到的物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式與名稱，與通過特征離子碎片篩查方法得到的物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式和名稱進(jìn)行比較，如果一致，則說明結(jié)果準(zhǔn)確無誤，進(jìn)一步提高了物質(zhì)定性的準(zhǔn)確性。

實(shí)施例二：

在實(shí)施例一的基礎(chǔ)上，本實(shí)施例的一種沉積物中氯代有機(jī)污染物高通量非靶向分析方法，將沉積物樣品進(jìn)行前處理操作得到目標(biāo)檢測樣品，具體包括以下步驟：

先將沉積物樣品在-80℃下凍實(shí)，然后在真空凍干機(jī)中凍干；

將凍干后的沉積物樣品研磨并過100目篩；

利用加速溶劑萃取方法對沉積物樣品中氯代有機(jī)物進(jìn)行提取，得到氯代有機(jī)物萃取液，具體是采用加速溶劑萃取儀：戴安ase350，thermoscientificdionex；加速溶劑萃取條件為：采用萃取劑：二氯甲烷和正己烷，體積比1:1；萃取溫度：80℃；靜態(tài)萃取時(shí)間：8min；萃取循環(huán)：3；淋洗體積：60％；吹掃時(shí)間：110s。

將氯代有機(jī)物萃取液濃縮定容至1ml；采用multivaporp-6平行蒸發(fā)儀將氯代有機(jī)物萃取液濃縮，將濃縮液轉(zhuǎn)移至15ml玻璃接收管，之后可采用其它溶劑對濃縮液進(jìn)行清洗，再采用organomationassociates氮吹儀吹掃溶劑，定容至1ml。

通過envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱對濃縮液進(jìn)行凈化，在凈化前預(yù)先使用6ml二氯甲烷進(jìn)行活化，活化結(jié)束后立即對濃縮液進(jìn)行凈化，整個(gè)過程保證小柱濕潤。

利用有機(jī)溶劑將殘留在envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱上的目標(biāo)物洗脫下來，具體是：分別利用有機(jī)溶劑二氯甲烷和甲醇將殘留在小柱上的目標(biāo)物洗脫下來，并置于玻璃接收管中，將兩種洗脫液合并后再次濃縮定容至1ml，在濃縮定容至1ml的過程中要間隔地對玻璃接收管進(jìn)行渦旋，使得析出在玻璃接收管壁上的物質(zhì)溶解在玻璃接收管中的溶劑中，對洗脫液進(jìn)行濃縮使用高純氮?dú)饩従彺祾呷軇?，定容采用甲醇定容?ml；甲醇定容后的濃縮液過濾膜并轉(zhuǎn)移至1ml進(jìn)樣小瓶中，待檢測。

實(shí)施例三：

本實(shí)施例的一種沉積物中氯代有機(jī)污染物高通量非靶向分析方法，在實(shí)施例二的基礎(chǔ)上，對采集的太湖沉積物中氯代有機(jī)物進(jìn)行檢測；

首先對太湖沉積物樣品進(jìn)行前處理操作得到目標(biāo)檢測樣品，使得目標(biāo)檢測樣品為液體，具體包括以下步驟：

首先將采集的太湖沉積物樣品放在-80℃下凍實(shí)，然后再將凍實(shí)的樣品放在真空凍干機(jī)中凍干；

然后采用研缽將凍干后的沉積物樣品研磨并過100目篩；

接著采用加速溶劑萃取方法對沉積物樣品中的氯代有機(jī)物進(jìn)行萃取，得到氯代有機(jī)物萃取液，具體是：取5g已經(jīng)凍干研磨過篩的沉積物樣品，加入到34ml的ase萃取池中，加入2g弗羅里硅土，將弗羅里硅土和沉積物樣品混勻，并采用加速溶劑萃取儀：戴安ase350，thermoscientificdionex；加速溶劑萃取條件為：采用萃取劑：二氯甲烷和正己烷，體積比1:1；萃取溫度：80℃；靜態(tài)萃取時(shí)間：8min；萃取循環(huán)：3；淋洗體積：60％；吹掃時(shí)間：110s；從而得到氯代有機(jī)物萃取液；

接著將通過上述步驟得到的氯代有機(jī)物萃取液濃縮定容至1ml，具體是：采用multivaporp-6平行蒸發(fā)儀將氯代有機(jī)物萃取液濃縮，濃縮至3ml，將濃縮液轉(zhuǎn)移至15ml玻璃接收管中，之后采用3ml二氯甲烷和3ml正己烷清晰該濃縮液，清洗3次，每次采用1ml二氯甲烷和1ml正己烷，之后再采用organomationassociates氮吹儀吹掃溶劑，使?jié)饪s液定容至1ml；

接著通過envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱對1ml濃縮液進(jìn)行凈化，在凈化前預(yù)先使用6ml二氯甲烷進(jìn)行活化，活化結(jié)束后立即對濃縮液進(jìn)行凈化，整個(gè)過程中需要保證小柱濕潤；

最后對小柱進(jìn)行洗脫，利用有機(jī)溶劑將殘留在envi-florisil硅酸鎂固相萃取小柱上的目標(biāo)物洗脫下來，分別利用有機(jī)溶劑二氯甲烷6ml和甲醇6ml將殘留在小柱上的目標(biāo)物洗脫下來，兩種洗脫液合并并置于玻璃接收管中，將洗脫液再次進(jìn)行濃縮定容至1ml，在濃縮定容至1ml的過程中要間隔地對玻璃接收管進(jìn)行渦旋，使得析出在玻璃接收管壁上的物質(zhì)溶解在玻璃接收管中的溶劑中，對洗脫液進(jìn)行濃縮使用高純氮?dú)饩従彺祾呷軇?，定容采用甲醇定容?ml；甲醇定容后的濃縮液過濾膜并轉(zhuǎn)移至1ml進(jìn)樣小瓶中，得到目標(biāo)檢測樣品，待檢測。

將目標(biāo)檢測樣品上機(jī)檢測，通過高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀對目標(biāo)檢測樣品進(jìn)行檢測，本實(shí)施例中高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜條件為：高效液相色譜儀：hplc-agilent1260；色譜柱：zorbaxeclipsexdb-c18，agilent(2.1mm×150mm，3.5μm)；柱溫：40℃；流速：0.4ml/min；進(jìn)樣體積：5μl；梯度洗脫流動(dòng)相：a：加入乙腈的水，乙腈體積：水體積＝5:95；b：甲醇；

流動(dòng)相梯度：

質(zhì)譜儀：tripletof5600-absciex；離子源：esi，apci；電離模式：正負(fù)離子模式；ms掃描范圍：50-1250m/z；ms-ms掃描范圍：30-1250m/z；霧化氣(gs1)：55psi；加熱氣(gs2)：55psi；氣簾氣(cur)：35psi；離子源溫度：550℃；離子捕獲電壓(isvf)：5500v(正離子)/-4500v(負(fù)離子)；去簇電壓(dp)：80v；碰撞能量(ce)：20ev、40ev、60ev(正離子)/-20ev、-40ev、-60ev(負(fù)離子)；

通過設(shè)置上述高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜條件得到目標(biāo)檢測樣品中各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖；針對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和二級質(zhì)譜圖信息，利用非靶向篩查分析方法確定物質(zhì)的種類，通過[m]:[m+2n]篩查方法對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，實(shí)現(xiàn)對各物質(zhì)的定性分析，通過特征離子碎片篩查方法對各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，實(shí)現(xiàn)對各物質(zhì)的定性分析，兩種方法同時(shí)進(jìn)行。

提取色譜峰，利用peakview1.2對各物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖色譜峰進(jìn)行提取，peakview1.2軟件中non-targetpeakfounding(非靶向色譜峰提取)功能參數(shù)設(shè)置為如表1所示：

表1

最終得到各物質(zhì)對應(yīng)的系列色譜峰；

m/z計(jì)算：利用matlab2013軟件循環(huán)分析，提取上述得到的各物質(zhì)對應(yīng)的系列色譜峰中一級質(zhì)譜質(zhì)荷比相差2的系列色譜峰，將該系列色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成可疑性清單，下面列舉可疑性清單中的一種物質(zhì)的系列色譜峰，如表2所示：

表2

上述表2中，m/z表示一級質(zhì)譜質(zhì)荷比，rentiontime表示保留時(shí)間，單位是min；表2中物質(zhì)的一級質(zhì)譜質(zhì)荷比相差為2；

在peakview1.2軟件中，分別設(shè)置同位素分布參數(shù)、一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)和二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)，設(shè)置同位素分布<20％，一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差<5ppm，二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差<10ppm，利用peakview1.2軟件計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的分子式，其中一種物質(zhì)的分子式被計(jì)算得到為c12h7cl3o2；

將peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，chemspider數(shù)據(jù)庫中包括各種分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，通過peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，計(jì)算得到與各種分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，這樣就得到可疑性清單中各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式，c12h7cl3o2分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式包括9種，分別為：

triclosan(三氯生)

1-[5-(2,4,6-trichlorophenyl)-2-furyl]ethanone(1-[5-(2,4,6-三氯苯基)-2-呋喃基]乙酮)

4-chloro-2-(2,4-dichlorophenoxy)phenol(4-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚)

2',4',6'-trichloro-3,4-biphenyldiol(2,4,6-三氯-3,4-聯(lián)苯二酚)

3,3',5-trichloro-4,4'-biphenyldiol(3,3,5-三氯-4,4-聯(lián)苯二酚)

3,3',5-trichloro-2,4'-biphenyldiol(3,3,5-三氯-2,4,-聯(lián)苯二酚)

2-naphthyltrichloroacetate(三氯乙酸-2-萘酯)

4-(2,4,6-trichlorophenoxy)phenol(4-(2,4,6-三氯苯氧基)苯酚)

3,4,5-trichloro-2-phenoxyphenol(3,4,5-三氯-2-苯氧基苯酚)

通過以下步驟來確定物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式：

將可疑性清單中各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖一般被公開在數(shù)據(jù)庫或文獻(xiàn)中，數(shù)據(jù)庫如massbank，hmdb，nist數(shù)據(jù)庫，將分子式為c12h7cl3o2的物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與9種結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與triclosan(三氯生)標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖一致，該物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖如圖2所示，triclosan(三氯生)標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖如圖3所示，同時(shí)可以看出該物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和triclosan(三氯生)標(biāo)樣的一級質(zhì)譜圖一致，該物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖參照圖4，triclosan(三氯生)標(biāo)樣的一級質(zhì)譜圖參照圖5，則最終確定該物質(zhì)為triclosan(三氯生)；

將太湖沉積物通過[m]:[m+2n]篩查方法篩查出的氯代有機(jī)物質(zhì)量數(shù)和分子式如表3所示；

表3

從表3得到，對太湖沉積物中氯代有機(jī)物的篩查，通過[m]:[m+2n]篩查方法，定性出分子式的有機(jī)物一共460種，其中有29種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式經(jīng)過確認(rèn)，還有46種物質(zhì)由于尚無標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可參照，故無法確定是否含有，為可疑性存在有機(jī)物；

特征離子碎片篩查方法：

從各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖出發(fā)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析，具體流程如下：

利用abfconverter軟件對各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)格式轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)換成.abf數(shù)據(jù)格式，以便ms-dial進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；

通過軟件ms-dial提取ms/ms，以esi-neagtive模式下的質(zhì)譜數(shù)據(jù)為例，ms-dial參數(shù)設(shè)置為如表4所示：

表4

將上述步驟提取的結(jié)果保存成文本文檔格式；

在上述步驟中得到的ms/ms碎片數(shù)據(jù)中，將所有含cl的質(zhì)量數(shù)為34.97(±10ppm)的色譜峰進(jìn)行提取，將該色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成可疑性清單，通過上述步驟得到的ms/ms碎片數(shù)據(jù)如表5所示：

表5

上述表5中其中一個(gè)含cl的質(zhì)量數(shù)為34.97035的色譜峰被提取出來，該色譜峰信息如表6所示：

表6

將上述步驟得到的所有含cl的質(zhì)量數(shù)為34.97(±10ppm)的色譜峰對應(yīng)的物質(zhì)組成可疑性清單；

對于上述步驟提取出的包含特征離子碎片的色譜峰，在peakview1.2軟件中，分別設(shè)置同位素分布參數(shù)、一級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)和二級質(zhì)譜質(zhì)荷比誤差參數(shù)，按照同位素分布<20％，一級質(zhì)譜誤差<5ppm，二級質(zhì)譜誤差<10ppm，利用peakview1.2軟件計(jì)算可疑性清單中各物質(zhì)的分子式，其中一種物質(zhì)的分子式被計(jì)算得到為c12h7cl3o2；

將peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，chemspider數(shù)據(jù)庫中包括各種分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，通過peakview軟件鏈接chemspider數(shù)據(jù)庫，計(jì)算得到與各種分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式，這樣就得到可疑性清單中各物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式，c12h7cl3o2分子式對應(yīng)的結(jié)構(gòu)式包括9種，分別為：

triclosan(三氯生)

1-[5-(2,4,6-trichlorophenyl)-2-furyl]ethanone(1-[5-(2,4,6-三氯苯基)-2-呋喃基]乙酮)

4-chloro-2-(2,4-dichlorophenoxy)phenol(4-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚)

2',4',6'-trichloro-3,4-biphenyldiol(2,4,6-三氯-3,4-聯(lián)苯二酚)

3,3',5-trichloro-4,4'-biphenyldiol(3,3,5-三氯-4,4-聯(lián)苯二酚)

3,3',5-trichloro-2,4'-biphenyldiol(3,3,5-三氯-2,4,-聯(lián)苯二酚)

2-naphthyltrichloroacetate(三氯乙酸-2-萘酯)

4-(2,4,6-trichlorophenoxy)phenol(4-(2,4,6-三氯苯氧基)苯酚)

3,4,5-trichloro-2-phenoxyphenol(3,4,5-三氯-2-苯氧基苯酚)

通過以下步驟來確定物質(zhì)的最終結(jié)構(gòu)式：

將可疑性清單中各物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖一般被公開在數(shù)據(jù)庫或文獻(xiàn)中，數(shù)據(jù)庫如massbank，hmdb，nist數(shù)據(jù)庫，將分子式為c12h7cl3o2的物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與9種結(jié)構(gòu)式對應(yīng)的標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖與triclosan(三氯生)標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖一致，該物質(zhì)的二級質(zhì)譜圖如圖2所示，triclosan(三氯生)標(biāo)樣的二級質(zhì)譜圖如圖3所示，同時(shí)可以看出該物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖和triclosan(三氯生)標(biāo)樣的一級質(zhì)譜圖一致，該物質(zhì)的一級質(zhì)譜圖參照圖4，triclosan(三氯生)標(biāo)樣的一級質(zhì)譜圖參照圖5，則最終確定該物質(zhì)為triclosan(三氯生)；

太湖沉積物通過特征離子碎片篩查方法篩查出的氯代有機(jī)物質(zhì)量數(shù)和分子式如表7所示；

表7

從表7得到，對太湖沉積物中氯代有機(jī)物的篩查，通過特征離子碎片篩查方法，定性出分子式的有機(jī)物一共309種，其中有21種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式經(jīng)過確認(rèn)，還有37種物質(zhì)由于尚無標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可參照，故無法確定是否含有，為可疑性存在有機(jī)物；

氯代有機(jī)物的非靶向篩查方法如上所述，其中對篩查出的部分氯代有機(jī)物購買標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行對方法結(jié)果的確定，如上述三氯生的標(biāo)準(zhǔn)譜圖，發(fā)現(xiàn)沉積物樣品中的物質(zhì)一級和二級質(zhì)譜圖與標(biāo)準(zhǔn)樣品完全吻合，說明了非靶向篩查方法的可靠性；

對太湖沉積物中氯代有機(jī)物的篩查，以上兩種篩查方法存在著一定的差異，但是結(jié)果基本一致，能定性出的分子式一共545種(參照表3和表7)的有機(jī)物中，進(jìn)一步對某一部分物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式進(jìn)行確認(rèn)，確定出的結(jié)構(gòu)式為33種，還有65種物質(zhì)由于尚無標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖可參照，故無法確定是否含有，為可疑性存在有機(jī)物。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出：對于本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。