本發(fā)明涉及材料檢測(cè)和分析技術(shù)領(lǐng)域，具體地指一種用于測(cè)定樣品中胺類物質(zhì)含量的方法。

背景技術(shù)：

我國(guó)是染料生產(chǎn)大國(guó)，紡織染料工業(yè)近年來(lái)快速發(fā)展，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，我國(guó)的染料產(chǎn)量已占世界產(chǎn)量的60%左右，染料中含有各類復(fù)雜的化合物，其中的含氮基團(tuán)的還原斷裂容易在廢水中形成具有毒性的胺，染料廢水處理的重要指標(biāo)之一就是其中胺類物質(zhì)的含量。

現(xiàn)有技術(shù)通常采用氣相色譜法和化學(xué)法對(duì)樣品中的胺類物質(zhì)進(jìn)行分析檢測(cè)，其檢出限高，分別在20mg/kg和1000mg/kg左右，并且抗干擾性差，檢測(cè)結(jié)果易受其他雜質(zhì)的影響，測(cè)量結(jié)果的專屬性低，作為判定胺類物質(zhì)殘留的參數(shù)結(jié)果而言，存在著較大的缺陷，易將毒性大的染料廢水不經(jīng)察覺(jué)的直接排出，危害生態(tài)環(huán)境和人體健康。

不僅在染料廢水領(lǐng)域，食品安全、環(huán)境監(jiān)控等其他領(lǐng)域也均涉及胺類物質(zhì)的檢測(cè)，需要低檢出限、高專屬性的胺類物質(zhì)檢測(cè)方法。

實(shí)際上，為了降低檢測(cè)結(jié)果的檢出限，人們想到采用更精密的檢測(cè)儀器如質(zhì)譜來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，為了提高其檢測(cè)專屬性，則需要對(duì)樣品進(jìn)行前處理以使得待測(cè)樣品在進(jìn)行檢測(cè)之前與雜質(zhì)盡量分離開(kāi)來(lái)，如頂空進(jìn)樣、采用色譜柱對(duì)樣品進(jìn)行分離等。

如申請(qǐng)公布號(hào)為cn102746187a的中國(guó)發(fā)明專利公開(kāi)了一種液質(zhì)聯(lián)用lc-ms級(jí)高級(jí)乙腈試劑的制備方法，采用液質(zhì)聯(lián)用對(duì)乙腈試劑進(jìn)行凈化和檢測(cè)。

目前的現(xiàn)有技術(shù)中，尚未發(fā)現(xiàn)采用此法對(duì)樣品中的胺類物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)和分析的先例。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就是要提供一種檢測(cè)方法，用于低檢出限、高專屬性地對(duì)樣品中的胺類物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。

本發(fā)明設(shè)計(jì)的液質(zhì)聯(lián)用方法是以高效液相色譜為分離手段、質(zhì)譜為檢測(cè)器的一門綜合性分析技術(shù)，具有液相色譜的高分離能力和質(zhì)譜的高靈敏度、極強(qiáng)的定性專屬特異性的特點(diǎn)。本發(fā)明設(shè)計(jì)的液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)不僅能對(duì)胺類萃取劑的殘留進(jìn)行了定性定量分析，還探索得到了最優(yōu)的液相色譜測(cè)定條件和質(zhì)譜條件。

用于測(cè)定樣品中胺類物質(zhì)含量的方法，包括如下步驟：

①第一前處理步驟：對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行萃取，萃取液待用；

②第二前處理步驟：采用流動(dòng)相稀釋所述萃取液并對(duì)其進(jìn)行定容；

③樣品分離步驟：將定容后的萃取液注入到液相色譜中，液相色譜的流動(dòng)相與步驟②中所述流動(dòng)相相同，均為甲酸水溶液與乙腈的混合液；

④檢測(cè)步驟：萃取液經(jīng)液相色譜柱分離后導(dǎo)入到質(zhì)譜內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，所述質(zhì)譜采用電噴霧離子源和正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式，即可檢出待測(cè)樣品中胺類物質(zhì)的濃度。

所述待測(cè)樣品可以為溶解有有機(jī)胺的水溶液；優(yōu)選的，所述待測(cè)樣品中還含有水溶性有機(jī)酸鹽或無(wú)機(jī)鹽。

所述胺類物質(zhì)可以為烷基胺；優(yōu)選為c21-c36的烷基胺；進(jìn)一步優(yōu)選為三月桂胺、三辛胺、三壬胺和三癸胺中的至少一種。

第一前處理步驟存在的必要性在于：所述待測(cè)樣品為萃取后得到的無(wú)機(jī)相是最為優(yōu)選的方案。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，步驟①中，首先將待測(cè)樣品的ph值調(diào)節(jié)至2~5，再依次加入萃取液和鹽析劑，進(jìn)行振蕩萃取，收集一次萃取液；至少重復(fù)萃取一次，將收集到的萃取液合并。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，步驟①中，所述萃取液為乙醚，所述鹽析劑為氯化鈉。

乙醚作為提取劑時(shí)對(duì)胺類物質(zhì)的回收率較高，其中對(duì)三辛胺的提取回收率可達(dá)85%，作為對(duì)比，甲基叔丁基醚對(duì)三辛胺的提取回收率為82%，氯仿對(duì)三辛胺的提取回收率為83%。

氯化鈉作為鹽析劑增大了水相的極性，利于水相和有機(jī)相的分離，也就是鹽析，抑制乳化層的形成，利于萃??；通過(guò)加入氯化鈉，還可以減少胺類物質(zhì)在水相中的溶解度，使在有機(jī)相中的分配更多，提高萃取率。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，步驟②和步驟③中所述流動(dòng)相采用0.1%的甲酸水溶液和乙腈以體積比為4:6的比例混合而成。

所用流動(dòng)相具有一定的ph緩沖能力，因此ph不易變化，從而保證了分析結(jié)果的重復(fù)性和重現(xiàn)性。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，步驟③中所述液相色譜的色譜柱規(guī)格為2.1mmｘ50mmｘ1.7μm，流動(dòng)相的流速為0.4ml/min，進(jìn)樣量為10μl，柱溫為10~30℃。

作為上述技術(shù)方案的優(yōu)選，步驟④中，質(zhì)譜的霧化器壓力為45psi，干燥器流速為10l/min，掃描范圍為50~360m/z，加熱溫度為100℃。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果：

（1）本發(fā)明所述的胺類物質(zhì)含量的檢測(cè)方法較為靈敏，檢出限低，可達(dá)7μg/kg；

（2）本發(fā)明所述的胺類物質(zhì)含量的檢測(cè)方法相較于傳統(tǒng)方法還具有快速的特點(diǎn)；

（3）本發(fā)明所述的胺類物質(zhì)含量的檢測(cè)方法抗干擾能力強(qiáng)，專屬性好；

（4）本發(fā)明所述的胺類物質(zhì)含量的檢測(cè)方法具有一定的通用性，可用于檢測(cè)復(fù)雜待測(cè)物中胺類物質(zhì)的含量。

附圖說(shuō)明

圖1為三辛胺的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖；

圖2為三辛胺的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖；

圖3為實(shí)施例1中添加濃度的樣品的色譜圖；

圖4為實(shí)施例1中的方法標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖4所述的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線將濃度在0.1~1.0μg/ml的三辛胺注入液質(zhì)聯(lián)用儀，以標(biāo)準(zhǔn)工作曲線樣品峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，即可制得。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述：

實(shí)施例1：一種用于測(cè)定印染廢水中三辛胺含量的方法，在本實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)儀器采用：美國(guó)安捷倫公司的agilent1260-6460高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀和zorbaxeclipseplusc18液相色譜分析柱，以及上海安譜科學(xué)儀器有限公司的津騰針筒式微孔濾膜0.22μm有機(jī)系濾膜。

在本實(shí)施例中，首先采用三辛胺標(biāo)準(zhǔn)品摸索并確定最佳的色譜條件和質(zhì)譜條件。

①第一前處理步驟：準(zhǔn)確量取印染廢水樣品200ml于500ml分液漏斗中，制備上述樣品共4份，其中3份分別加入濃度為0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml三辛胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，調(diào)節(jié)ph值為5，先加入45ml乙醚，再加入20g氯化鈉，震蕩萃取15min，重復(fù)3次，合并萃取液；

②第二前處理步驟：萃取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至3ml后，流動(dòng)相定容至10ml。

③分離步驟：將定容后的萃取液注入到液相色譜中，液相色譜的色譜柱規(guī)格為2.1mmｘ50mmｘ1.8μm，流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液-乙腈，甲酸水溶液-乙腈的體積比為4:6，流速為0.4ml/min，進(jìn)樣量為1μl，柱溫為室溫；

④檢測(cè)步驟：將分離后的組分用質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜采用電噴霧離子源，正離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描；霧化器壓力為45psi；干燥器流速為10l/min；掃描范圍為50~360m/z，加熱溫度為100℃。

實(shí)施例1的回收率和精密度測(cè)試：

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：

分別精密稱取50mg三辛胺標(biāo)準(zhǔn)品，用乙醇溶解并定容至100ml，配成濃度為500μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，再稀釋50倍即為10μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作液，4℃下保存。

方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)：

取六個(gè)濃度分別為0.1μg/ml，0.2μg/ml，0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml，1.0μg/ml注入液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀，線性方程及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表1。

表1實(shí)施例1所述三辛胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)

表1中y為色譜峰面積；x為樣品濃度；

對(duì)添加了0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml三辛胺標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)。每個(gè)濃度分三天重復(fù)7次測(cè)試，根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算回收率和精密度，結(jié)果見(jiàn)表4。

表2實(shí)施例1所述三辛胺的回收率和精密度

根據(jù)儀器響應(yīng)值與噪音的比值為3來(lái)計(jì)算方法檢出限，則三辛胺的檢出限為7μg/kg。

實(shí)施例2：一種用于測(cè)定高鹽萃取液廢水中三辛胺含量的方法，實(shí)驗(yàn)儀器同實(shí)施例1。

①第一前處理步驟：準(zhǔn)確量取高鹽萃取液廢水樣品200ml于500ml分液漏斗中，制備上述樣品共4份，其中3份分別加入濃度為0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml三辛胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，調(diào)節(jié)ph值為2，先加入20ml乙醚，再加入20g氯化鈉，震蕩萃取15min，重復(fù)3次，合并萃取液；

②第二前處理步驟：萃取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至2ml后，流動(dòng)相定容至10ml。

③分離步驟：將定容后的萃取液注入到液相色譜中，液相色譜的色譜柱規(guī)格為2.1mmｘ50mmｘ1.8μm，液相色譜分離條件同實(shí)施例1；

④檢測(cè)步驟：將分離后的組分用質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜檢測(cè)條件同實(shí)施例1。

實(shí)施例2的回收率和精密度測(cè)試：

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：

方法同實(shí)施例1，三辛胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表3。

表3實(shí)施例2所述三辛胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)

對(duì)添加了0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml三辛胺標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)。每個(gè)濃度分三天重復(fù)7次測(cè)試，根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算回收率和精密度，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4實(shí)施例2所述三辛胺的回收率和精密度

根據(jù)儀器響應(yīng)值與噪音的比值為3來(lái)計(jì)算方法檢出限，則三辛胺的檢出限為8μg/kg。

實(shí)施例3：

一種用于測(cè)定萃取液廢水中三壬胺含量的方法，實(shí)驗(yàn)儀器同實(shí)施例1。

①第一前處理步驟：準(zhǔn)確量取萃取液廢水樣品200ml于500ml分液漏斗中，制備上述樣品共4份，其中3份分別加入濃度為0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml三壬胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，調(diào)節(jié)ph值為2，先加入20ml乙醚，再加入20g氯化鈉，震蕩萃取15min，重復(fù)3次，合并萃取液；

②第二前處理步驟：萃取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至2ml后，流動(dòng)相定容至10ml。

③分離步驟：將定容后的萃取液注入到液相色譜中，液相色譜的色譜柱規(guī)格為2.1mmｘ50mmｘ1.8μm，液相色譜分離條件同實(shí)施例1；

④檢測(cè)步驟：將分離后的組分用質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)譜檢測(cè)條件同實(shí)施例1。

實(shí)施例3的回收率和精密度測(cè)試：

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：

方法同實(shí)施例1，三壬胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表5。

表5實(shí)施例3所述三辛胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)

對(duì)添加了0.4μg/ml，0.6μg/ml，0.8μg/ml三壬胺標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)。每個(gè)濃度分三天重復(fù)7次測(cè)試，根據(jù)測(cè)定結(jié)果計(jì)算回收率和精密度，結(jié)果見(jiàn)表6。

表6實(shí)施例3所述三壬胺的回收率和精密度

根據(jù)儀器響應(yīng)值與噪音的比值為3來(lái)計(jì)算方法檢出限，則三壬胺的檢出限為7μg/kg。