1.一種用于MALDI-TOF檢測的微納米結(jié)構(gòu)基片的制備方法,包括:
(1)選用質(zhì)地堅韌、平面度佳的基片作為基底;
(2)用硅烷偶聯(lián)劑處理基片:
(i)清洗基片:將基片先后浸入丙酮、甲醇水溶液、氯仿,分別清洗后,取出干燥;
(ii)在加熱條件下,將濃酸和雙氧水緩慢加入含有基片的水溶液中,進(jìn)行充分氧化反應(yīng)后,分別在氯仿、超純水中進(jìn)行清洗,該步驟可重復(fù)多次;
(iii)將基片置于干凈容器中,加入預(yù)先水解的硅烷偶聯(lián)劑溶液,并加入氨水催化,直至硅烷化反應(yīng)充分完成;
(iv)取出基片,分別置于乙醇、超純水、氯仿中,超聲清洗;
(v)將清洗后的基片,測量并選擇接觸角>120°的基片,作為合格基片;
(3)點樣區(qū)的親水性處理:將調(diào)制后的酸性試劑直接滴在點樣區(qū)內(nèi),通過該酸性試劑對表面進(jìn)行化學(xué)修飾后,形成親水性孔狀結(jié)構(gòu),然后超聲清洗;
其中,
步驟(1)所述基片是質(zhì)地堅韌、平面度佳的不銹鋼、金剛石、單晶硅、石英晶體的基片;
步驟(2)所述硅烷偶聯(lián)劑選自乙烯基硅烷、氨基硅烷、二甲基二氯硅烷;
步驟(3)所述酸性試劑選自氫氟酸(HF)、硫酸(H4SO2)、溴化氫(HBr)。
2.權(quán)利要求1的方法,其中方法包括:
步驟(4)激光刻印二維碼,該二維碼通過與病人的生物信息或樣品的來源信息關(guān)聯(lián),可用于識別基片身份識別。
3.權(quán)利要求1或2的方法,其中所述基片是單面拋光的硅基片或石英基片;所述接觸角>150°,以形成超疏水表面,或者所述疏水表面的厚度在納米到微米量級。
4.權(quán)利要求1或2的方法,其中點樣區(qū)被劃隔成適合MALDI-TOF樣品室規(guī)格的長方形,劃隔精度小于10μm;并通過光刻掩膜版,在基片表面形成親疏水區(qū)域,并將邊界精度達(dá)到微米級別。
5.權(quán)利要求1-4中任一所述的方法,其中在進(jìn)行質(zhì)譜檢測時,可用讀碼器或掃碼器讀取二維碼,并將基片對應(yīng)的病人生物信息或樣品的來源信息以及對應(yīng)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)同時輸入電腦進(jìn)行編碼、存儲和識別。
6.權(quán)利要求5的方法,其中所述基片上的親水點樣區(qū)數(shù)量為48、56、70、96、384或其他數(shù)量,親水區(qū)形狀可以選擇圓形,正方形,三角形,多邊形等。
7.權(quán)利要求6的方法,其中所述親水區(qū)域尺寸范圍為100×100μm至1×1mm,所述基片尺寸為20×30-83×125mm。
8.通過權(quán)利要求1-7任一方法所制備的基片。
9.權(quán)利要求8的基片,其中基片包括具有親水性的點樣區(qū)、點樣區(qū)外的疏水區(qū)基片,其中
所述基片的表面被硅烷偶聯(lián)劑處理,從而形成疏水區(qū);
所述點樣區(qū)被酸性試劑處理,去除硅烷偶聯(lián)劑,并發(fā)生化學(xué)反應(yīng)修飾后,從而形成親水區(qū)。
10.權(quán)利要求9的基片,其中:
點樣區(qū)被劃隔成適合MALDI-TOF樣品室規(guī)格的長方形,劃隔精度小于10μm;
親水點樣區(qū)數(shù)量為48、56、70、96、384或其他數(shù)量,親水區(qū)形狀可以選擇圓形,正方形,三角形,多邊形等;
所述親水區(qū)域尺寸范圍為100×100μm至1×1mm,所述基片尺寸為20×30-83×125mm。
11.權(quán)利要求8-10中任一項所述的基片,其中基片具有用于基片身份識別的二維碼區(qū)域,其中通過光刻或蝕刻來印制二維碼圖形,至少分成8×8~15×15的陣列,該二維碼通過與病人的生物信息或樣品的來源信息關(guān)聯(lián),可用于識別基片身份識別。
12.權(quán)利要求11的基片,其中病人的生物信息可包括但不限于,病人病例、生活習(xí)慣、個人背景;樣品的來源信息可以包括但不限于,樣品的環(huán)境信息或樣品的產(chǎn)品信息。
13.權(quán)利要求11的基片,其中所述基片是用于MALDI-TOF BIOMARK檢測的基片。
14.通過權(quán)利要求8-13的基片用于質(zhì)譜檢測生物分子或生物標(biāo)記物樣品的用途。
15.權(quán)利要求14的用途,其中基片是用于MALDI-TOF BIOMARK檢測的基片。
16.權(quán)利要求15的用途,其中所述生物分子或生物標(biāo)記物是蛋白或多肽樣品,核酸樣品。
17.權(quán)利要求14-16中任一項的用途,其中在進(jìn)行質(zhì)譜檢測時,可用讀碼器或掃碼器讀取二維碼,并將基片對應(yīng)的病人生物信息或樣品的來源信息以及對應(yīng)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)同時輸入電腦進(jìn)行編碼、存儲和識別。