本實(shí)用新型涉及生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域,尤其應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)對(duì)于線(xiàn)蟲(chóng)趨利及趨避的檢測(cè)。
背景技術(shù):
模式生物秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)是適合研究高等動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)的最簡(jiǎn)單模型,具有易于飼養(yǎng)、生長(zhǎng)周期短、遺傳操作簡(jiǎn)單、基因背景及細(xì)胞譜系清楚等優(yōu)點(diǎn)。線(xiàn)蟲(chóng)的神經(jīng)系統(tǒng)雖然相對(duì)簡(jiǎn)單,但卻對(duì)機(jī)械感覺(jué)、化學(xué)物質(zhì)、溫度等外界刺激具有靈敏的感知及反應(yīng)能力,其神經(jīng)系統(tǒng)含有高等動(dòng)物腦的大多數(shù)分子成分,包括多巴胺、5-羥色胺、腎上腺素等。線(xiàn)蟲(chóng)具有靈敏的嗅覺(jué),用測(cè)定趨避指數(shù)和趨向指數(shù)的方法發(fā)現(xiàn),線(xiàn)蟲(chóng)可以被一些香精香料如安息香醛所趨化。因此可以推測(cè)線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)煙草的反應(yīng)并不只是局限于對(duì)尼古丁,還包括對(duì)煙草中的香精香料。線(xiàn)蟲(chóng)對(duì)香精香料的趨向/趨避指數(shù)可以用來(lái)反應(yīng)這些香精香料化學(xué)成分對(duì)線(xiàn)蟲(chóng)嗅覺(jué)系統(tǒng)的刺激強(qiáng)度。
現(xiàn)有的測(cè)定線(xiàn)蟲(chóng)趨利、趨避指數(shù)一般通過(guò)平板分區(qū)的方法進(jìn)行,即在平板上劃分不同區(qū)域,然后將待測(cè)物質(zhì)放置于不同區(qū)域,一定時(shí)間后觀察區(qū)域內(nèi)的線(xiàn)蟲(chóng)數(shù)量。該方法存在一定的局限性,首先如果待測(cè)物質(zhì)是液體,則會(huì)在線(xiàn)蟲(chóng)培養(yǎng)基上緩慢擴(kuò)散,此外由于線(xiàn)蟲(chóng)會(huì)在平板上會(huì)進(jìn)行不規(guī)則的運(yùn)動(dòng),這兩者都會(huì)給趨利趨避帶來(lái)不準(zhǔn)確性。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
針對(duì)上述技術(shù)現(xiàn)狀,本實(shí)用新型通過(guò)構(gòu)建一個(gè)趨利、趨避的定向檢測(cè)系統(tǒng),線(xiàn)蟲(chóng)只能定向運(yùn)動(dòng),且有專(zhuān)門(mén)的加樣孔,從而避免待測(cè)物質(zhì)的擴(kuò)散,從而增加試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
本實(shí)用新型第一方面設(shè)計(jì)了一種線(xiàn)蟲(chóng)定向趨利、趨避檢測(cè)裝置,其包括培養(yǎng)皿1,所述培養(yǎng)皿1包括:
線(xiàn)蟲(chóng)滴加孔4,位于所述培養(yǎng)皿1的中部;
多個(gè)線(xiàn)蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)凹槽2,在培養(yǎng)皿1中成放射狀分布,其一端與所述線(xiàn)蟲(chóng)滴加孔4連通;
對(duì)照樣加樣孔3,與所述多個(gè)線(xiàn)蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)凹槽2的其中一個(gè)的另一端連通;
待測(cè)樣品加樣孔5,與剩余的所述多個(gè)線(xiàn)蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)凹槽2的另一端連通。
本實(shí)用新型第二方面涉及線(xiàn)蟲(chóng)定向趨利、趨避檢測(cè)方法,其使用根據(jù)上述的測(cè)定裝置來(lái)實(shí)施,并包括以下步驟:首先將線(xiàn)蟲(chóng)培養(yǎng)基加在線(xiàn)蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)凹槽2上;然后將對(duì)照樣品加入對(duì)照樣加樣孔3,將待測(cè)樣品加入待測(cè)樣品加樣孔5,在線(xiàn)蟲(chóng)滴加孔4上滴加線(xiàn)蟲(chóng);最后,在顯微鏡下觀察線(xiàn)蟲(chóng)的趨利趨避狀態(tài),計(jì)數(shù)對(duì)照樣加樣孔3和待測(cè)樣品加樣孔5的線(xiàn)蟲(chóng)數(shù)目。
本實(shí)用新型的有益效果:
本實(shí)用新型的線(xiàn)蟲(chóng)定向趨利、趨避檢測(cè)裝置克服了平板區(qū)域方法計(jì)數(shù)線(xiàn)蟲(chóng)所局限的線(xiàn)蟲(chóng)不規(guī)則運(yùn)動(dòng)狀態(tài),且能實(shí)時(shí)觀察線(xiàn)蟲(chóng)的遷移狀態(tài)并進(jìn)行記錄;對(duì)照和待測(cè)樣品間不會(huì)相互擴(kuò)散,增加實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性;可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)待測(cè)樣品,提高實(shí)驗(yàn)效率。
附圖說(shuō)明
圖1為本實(shí)用新型的線(xiàn)蟲(chóng)定向趨利、趨避檢測(cè)裝置。
附圖標(biāo)記為:1-培養(yǎng)皿;2-線(xiàn)蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)凹槽;3-對(duì)照樣加樣孔;4-線(xiàn)蟲(chóng)滴加孔;5-待測(cè)樣品加樣孔。
具體實(shí)施方式
利用本實(shí)用新型的線(xiàn)蟲(chóng)定向趨利、趨避檢測(cè)裝置,對(duì)線(xiàn)蟲(chóng)定向趨利、趨避進(jìn)行檢測(cè),首先將線(xiàn)蟲(chóng)培養(yǎng)基加在線(xiàn)蟲(chóng)運(yùn)動(dòng)凹槽2上;然后將對(duì)照樣品加入對(duì)照樣加樣孔3,將待測(cè)樣品加入待測(cè)樣品加樣孔5,在線(xiàn)蟲(chóng)滴加孔4上滴加線(xiàn)蟲(chóng);最后,在顯微鏡下觀察線(xiàn)蟲(chóng)的趨利趨避狀態(tài),計(jì)數(shù)對(duì)照樣加樣孔3和待測(cè)樣品加樣孔5的線(xiàn)蟲(chóng)數(shù)目。