本發(fā)明涉及化學(xué)成分的檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，且特別涉及一種乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法。

背景技術(shù)：

乳清粉是利用制造干酪或干酪素的副產(chǎn)品乳清粉為原料干燥制成的，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，且是制作高檔仔豬料的優(yōu)質(zhì)原料，其主要成分有乳糖、乳清粉蛋白等。為了以防摻假，就必須對(duì)乳清粉中的乳糖含量進(jìn)行檢測(cè)，因此乳清粉中乳糖含量的檢測(cè)就顯得尤為重要。

現(xiàn)有乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法，是試樣經(jīng)去除蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，以次甲基藍(lán)為指示劑，直接滴定已標(biāo)定過的費(fèi)林氏液，根據(jù)樣液消耗的體積，計(jì)算出乳糖含量(GB 5413.5-2010《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-嬰幼兒食品和乳品中乳糖、蔗糖的測(cè)定》第一法)。上述方法存在以下幾點(diǎn)不足：

(1)配制試劑較多，較繁瑣；

(2)需進(jìn)行預(yù)滴定和精確滴定，操作過程冗長(zhǎng)；

(3)滴定過程中生成的氧化亞銅若不加熱溶液又會(huì)變?yōu)樗{(lán)色，影響終點(diǎn)判定。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法，該測(cè)定方法快速、重復(fù)性好，所用試劑來源廣、價(jià)格適中，經(jīng)該測(cè)定方法測(cè)定所得的結(jié)果準(zhǔn)確有效。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明提出一種乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法，其包括以下步驟：

將試樣依次與硫酸溶液和鎢酸鈉溶液混合，過濾，收集濾液得樣品液，取部分樣品液得樣品分解液；

取乳糖標(biāo)準(zhǔn)品配置成不同濃度的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液，分別向樣品分解液和多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液中加入等量銅試劑后第一次熱處理，然后分別加入等量磷鉬酸試劑后第二次熱處理，冷卻后分別測(cè)定吸光度，根據(jù)測(cè)得的第二次熱處理后的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度繪制乳糖含量-吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

根據(jù)測(cè)得的第二次熱處理后的樣品分解液的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中獲取樣品分解液的乳糖含量，按以下公式計(jì)算：

試樣的乳糖含量＝(樣品分解液的乳糖含量×樣品液的體積)/(試樣的質(zhì)量×樣品分解液的體積×10⁶)×100。

本發(fā)明實(shí)施例的乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法的有益效果是：利用乳清粉中乳糖的醛基的還原性，其與銅試劑在堿性條件下混合加熱，可被氧化成羧基，該反應(yīng)還可使銅試劑中的Cu²⁺還原成Cu⁺，Cu⁺可使磷鉬酸還原成藍(lán)色化合物(鉬藍(lán))，并使溶液呈藍(lán)色，其顏色的深淺與乳糖含量成正比，通過測(cè)定溶液的吸光度，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)曲線即可測(cè)定出乳糖的含量。在試樣測(cè)定前加入硫酸和鎢酸鈉溶液，可生成蛋白質(zhì)沉淀劑鎢酸，以去除試樣中所含的蛋白質(zhì)，避免該類物質(zhì)影響乳糖的測(cè)定結(jié)果。本測(cè)定方法操作簡(jiǎn)單、快速，所用試劑和儀器價(jià)格低廉，降低了檢測(cè)成本，經(jīng)該測(cè)定方法測(cè)定所得的結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購(gòu)買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的飼料添加劑及飼料進(jìn)行具體說明。

本發(fā)明實(shí)施例提供的乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法，主要包含配制乳糖標(biāo)準(zhǔn)液、繪制乳糖含量-吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線、樣品測(cè)定及計(jì)算等步驟。

稱取乳糖標(biāo)準(zhǔn)品配置成多個(gè)不同濃度的乳糖標(biāo)準(zhǔn)液。具體的，例如可以稱取1g乳糖標(biāo)準(zhǔn)品于500mL容量瓶中定容，使其濃度為2g/L。分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL上述濃度為2g/L的溶液于25mL的具塞比色管中定容，即配制成濃度分別為8mg/L、16mg/L、32mg/L、48mg/L、64mg/L及80mg/L的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液。在標(biāo)準(zhǔn)液配制過程中，乳糖標(biāo)準(zhǔn)品的體積和濃度并不限于上述數(shù)據(jù)，可以根據(jù)實(shí)際操作需要進(jìn)行具體配制。為了使乳糖標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定更加準(zhǔn)確，可在制備標(biāo)準(zhǔn)液前，對(duì)其進(jìn)行干燥。例如可將其置于92-96℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘烤1-3h，再冷卻至室溫。

取待測(cè)乳清粉作為試樣，本測(cè)定方法中例如可稱取0.3-1.2g的試樣于50mL具塞比色管中定容，為了提高測(cè)定的準(zhǔn)確性，試樣質(zhì)量?jī)?yōu)選為0.6-0.8g。將試樣依次與硫酸溶液和鎢酸鈉溶液混合，例如可用移液槍向試樣中加入2mL濃度為10％的硫酸溶液，搖勻后再向該混合液中加入2mL濃度為120g/L的鎢酸鈉溶液，并用渦旋振蕩儀混勻。上述10％的硫酸溶液可通過以下方式配制：將10mL濃硫酸用水稀釋至100mL；120g/L的鎢酸鈉溶液可通過以下方式配制：稱取12.0g鎢酸鈉溶解于100mL水中。靜置上述混勻后的液體，待沉淀和清液完全分離后，過濾并收集濾液得到樣品液。較佳的，可用干燥濾紙對(duì)待過濾的液體進(jìn)行過濾，且棄去過濾初始階段的部分濾液，以提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。其中，向試樣中加入硫酸溶液和鎢酸鈉溶液的目的是：鎢酸鈉與硫酸作用，可生成鎢酸(Na₂WO₄+H₂SO₄→H₂WO₄+Na₂SO₄)。鎢酸作為蛋白質(zhì)沉淀劑可使蛋白質(zhì)等類似物質(zhì)凝固或沉淀，通過離心或過濾則可去除沉淀，得到無蛋白質(zhì)的濾液。因此，通過加入該兩者試劑可使試樣中的蛋白質(zhì)類的物質(zhì)被沉淀和去除，以避免該類物質(zhì)對(duì)乳糖的測(cè)定產(chǎn)生影響。

取部分樣品液得樣品分解液，并取與樣品分解液等體積的蒸餾水為空白液，以對(duì)測(cè)量?jī)x器進(jìn)行去背景處理。具體的，例如可用移液槍吸取0.1mL樣品液于25mL的具塞比色管中進(jìn)行定容，此操作過程中，0.1mL即作為樣品分解液的體積，25mL即為樣品液的體積。

取相同體積的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向上述液體中加入等量銅試劑(C₅H₁₀NS₂Na·3H₂O)并進(jìn)行第一次熱處理。例如可取均為25mL的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向25mL的上述液體中加入2mL的銅試劑，搖勻后，于98-100℃的條件下加熱5-7min，優(yōu)選于100℃的沸水浴中加熱6min。上述銅試劑可通過以下方式配制：將40g無水Na₂CO₃溶于400mL蒸餾水中，加入7.5g酒石酸，溶解后再加入4.5g的CuSO₄·5H₂O，混合后用水稀釋至1000mL。因乳清粉中乳糖所含有的醛基具有還原性，故加入堿性的銅試劑可使乳糖中的醛基與堿性銅試劑混合加熱后被氧化成羧基，并使堿性銅試劑中的Cu²⁺還原成Cu⁺。第一次熱處理完時(shí)，再分別向上述樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液中加入磷鉬酸試劑并進(jìn)行第二次熱處理。例如可分別向含有堿性銅試劑的上述液體中加入2mL的磷鉬酸試劑，于98-100℃的條件下加熱1-3min，優(yōu)選于100℃的沸水浴中加熱2min。上述磷鉬酸試劑可通過以下方式配制：稱取70g鉬酸和10g鎢酸鈉，加入400mL濃度為10％的NaOH和400mL蒸餾水，加熱煮沸20min-40min以除去溶液中的NH₃，放置冷卻，加蒸餾水至約700mL，再加濃度為85％的磷酸250mL，用蒸餾水稀釋至1000mL。加入的磷鉬酸試劑可與上述第一次熱處理后的樣品分解液和標(biāo)準(zhǔn)液中所含的Cu⁺發(fā)生反應(yīng)，使磷鉬酸還原成具有藍(lán)色的化合物(鉬藍(lán))，因此樣品分解液和標(biāo)準(zhǔn)液在第二次熱處理后呈藍(lán)色。值得說明的是，為提高本測(cè)定方法的準(zhǔn)確性和有效性，并使測(cè)定結(jié)果具有較好的重復(fù)性，本測(cè)定方法中同一待測(cè)分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液中加入的硫酸溶液、鎢酸鈉溶液、銅試劑和磷鉬酸試劑的體積優(yōu)選為等量，例如體積比為1:1:1:1。

第二次熱處理后將樣品分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液冷卻，然后再分別測(cè)定各溶液的吸光度。因不同顏色所對(duì)應(yīng)的測(cè)定波段不同，本測(cè)定方法中溶液的吸光度例如可用分光光度計(jì)在380-460nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，優(yōu)選于420nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行，該波長(zhǎng)下對(duì)藍(lán)色溶液的測(cè)量結(jié)果最為準(zhǔn)確。為盡量減少吸光度測(cè)量誤差對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，優(yōu)選將吸光度的測(cè)量結(jié)果控制在0.2-0.8范圍內(nèi)。此外，為使測(cè)定結(jié)果具有較好的重復(fù)性，吸光度的測(cè)量過程例如可優(yōu)選于20-25℃的條件下進(jìn)行。

根據(jù)上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定后所得的吸光度值，繪制乳糖含量-吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。該標(biāo)準(zhǔn)曲線例如可以將乳糖含量作為橫坐標(biāo)，吸光度值作為縱坐標(biāo)，也可將吸光度值作為橫坐標(biāo)，乳糖含量作為縱坐標(biāo)。

根據(jù)測(cè)得的第二次熱處理后的樣品分解液的吸光度，代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到樣品分解液的乳糖含量，再根據(jù)以下公式計(jì)算得試樣中的乳糖含量：

X＝(M₁×V)/(M×V₁×10⁶)×100。

其中，X代表以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示的乳糖含量，其單位為克每百克(g/100g)；M₁代表由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的樣品分解液的乳糖含量，其單位為克(g)；V代表樣品液的體積，其單位為毫升(mL)；M為試樣的質(zhì)量，其單位為克(g)；V₁代表樣品分解液的體積，其單位為毫升(mL)。

以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。

實(shí)施例1

稱取1g于92℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘烤3h后的乳糖標(biāo)準(zhǔn)品，并于500mL容量瓶中定容至濃度為2g/L。分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL上述溶液于25mL的具塞比色管中定容，配制成濃度分別為8mg/L、16mg/L、32mg/L、48mg/L、64mg/L及80mg/L的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液。稱取0.3g的試樣于50mL具塞比色管中定容，用移液槍向試樣中加入2mL濃度為10％的硫酸溶液，搖勻后再加入2mL濃度為120g/L的鎢酸鈉溶液，用渦旋振蕩儀混勻，過濾并收集濾液得到樣品液。用移液槍吸取0.1mL樣品液于25mL的具塞比色管中進(jìn)行定容。取均為25mL的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向25mL的上述液體中加入2mL的銅試劑，搖勻后，于98℃的條件下加熱7min。分別向含有堿性銅試劑的上述液體中再加入2mL的磷鉬酸試劑，并于98℃的條件下加熱3min。冷卻第二次熱處理后的樣品分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，于20℃的條件下用分光光度計(jì)在380nm的波長(zhǎng)下檢測(cè)各溶液的吸光度。根據(jù)上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定后所得的吸光度值，以乳糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣品分解液測(cè)得的吸光度代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到樣品分解液的乳糖含量，再根據(jù)以下公式計(jì)算得試樣中的乳糖含量：X＝(M₁×V)/(M×V₁×10⁶)×100。

實(shí)施例2

稱取1g于96℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘烤1h后的乳糖標(biāo)準(zhǔn)品，并于500mL容量瓶中定容至濃度為2g/L。分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL上述溶液于25mL的具塞比色管中定容，配制成濃度分別為8mg/L、16mg/L、32mg/L、48mg/L、64mg/L及80mg/L的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液。稱取1.2g的試樣于50mL具塞比色管中定容，用移液槍向試樣中加入2mL濃度為10％的硫酸溶液，搖勻后再加入2mL濃度為120g/L的鎢酸鈉溶液，用渦旋振蕩儀混勻，并用濾紙對(duì)待過濾的液體進(jìn)行過濾，去除過濾初始階段的部分濾液，收集其余濾液得到樣品液。用移液槍吸取0.1mL樣品液于25mL的具塞比色管中進(jìn)行定容。取均為25mL的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向25mL的上述液體中加入2mL的銅試劑，搖勻后，于100℃的條件下加熱5min。分別向含有堿性銅試劑的上述液體中再加入2mL的磷鉬酸試劑，并于100℃的條件下加熱1min。冷卻第二次熱處理后的樣品分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，于25℃的條件下用分光光度計(jì)在460nm的波長(zhǎng)下檢測(cè)各溶液的吸光度。根據(jù)上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定后所得的吸光度值，以乳糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣品分解液測(cè)得的吸光度代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到樣品分解液的乳糖含量，再根據(jù)以下公式計(jì)算得試樣中的乳糖含量：X＝(M₁×V)/(M×V₁×10⁶)×100。

實(shí)施例3

稱取1g于94℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘烤2h后的乳糖標(biāo)準(zhǔn)品，并于500mL容量瓶中定容至濃度為2g/L。分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL上述溶液于25mL的具塞比色管中定容，配制成濃度分別為8mg/L、16mg/L、32mg/L、48mg/L、64mg/L及80mg/L的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液。稱取0.6g的試樣于50mL具塞比色管中定容，用移液槍向試樣中加入2mL濃度為10％的硫酸溶液，搖勻后再加入2mL濃度為120g/L的鎢酸鈉溶液，用渦旋振蕩儀混勻，過濾并收集濾液得到樣品液。用移液槍吸取0.1mL樣品液于25mL的具塞比色管中進(jìn)行定容。取均為25mL的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向25mL的上述液體中加入2mL的銅試劑，搖勻后，于99℃的條件下加熱6min。分別向含有堿性銅試劑的上述液體中再加入2mL的磷鉬酸試劑，并于99℃的條件下加熱2min。冷卻第二次熱處理后的樣品分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，于23℃的條件下用分光光度計(jì)在420nm的波長(zhǎng)下檢測(cè)各溶液的吸光度。根據(jù)上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定后所得的吸光度值，以乳糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣品分解液測(cè)得的吸光度代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到樣品分解液的乳糖含量，再根據(jù)以下公式計(jì)算得試樣中的乳糖含量：X＝(M₁×V)/(M×V₁×10⁶)×100。

實(shí)施例4

稱取1g于94℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘烤2h后的乳糖標(biāo)準(zhǔn)品，并于500mL容量瓶中定容至濃度為2g/L。分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL上述溶液于25mL的具塞比色管中定容，配制成濃度分別為8mg/L、16mg/L、32mg/L、48mg/L、64mg/L及80mg/L的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液。稱取0.8g的試樣于50mL具塞比色管中定容，用移液槍向試樣中加入2mL濃度為10％的硫酸溶液，搖勻后再加入2mL濃度為120g/L的鎢酸鈉溶液，用渦旋振蕩儀混勻，過濾并收集濾液得到樣品液。用移液槍吸取0.1mL樣品液于25mL的具塞比色管中進(jìn)行定容。取均為25mL的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向25mL的上述液體中加入2mL的銅試劑，搖勻后，于100℃的條件下加熱6min。分別向含有堿性銅試劑的上述液體中再加入2mL的磷鉬酸試劑，并于100℃的條件下加熱2min。冷卻第二次熱處理后的樣品分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，于30℃的條件下用分光光度計(jì)在420nm的波長(zhǎng)下檢測(cè)各溶液的吸光度。根據(jù)上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定后所得的吸光度值，以乳糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣品分解液測(cè)得的吸光度代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到樣品分解液的乳糖含量，再根據(jù)以下公式計(jì)算得試樣中的乳糖含量：X＝(M₁×V)/(M×V₁×10⁶)×100。

實(shí)施例5

稱取1g于94℃的電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中烘烤2h后的乳糖標(biāo)準(zhǔn)品，并于500mL容量瓶中定容至濃度為2g/L。分別移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL和1.0mL上述溶液于25mL的具塞比色管中定容，配制成濃度分別為8mg/L、16mg/L、32mg/L、48mg/L、64mg/L及80mg/L的多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液。稱取0.7g的試樣于50mL具塞比色管中定容，用移液槍向試樣中加入2mL濃度為10％的硫酸溶液，搖勻后再加入2mL濃度為120g/L的鎢酸鈉溶液，用渦旋振蕩儀混勻，過濾并收集濾液得到樣品液。用移液槍吸取0.1mL樣品液于25mL的具塞比色管中進(jìn)行定容。取均為25mL的樣品分解液、多個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，分別向25mL的上述液體中加入2mL的銅試劑，搖勻后，于100℃的條件下加熱6min。分別向含有堿性銅試劑的上述液體中再加入2mL的磷鉬酸試劑，并于100℃的條件下加熱2min。冷卻第二次熱處理后的樣品分解液、標(biāo)準(zhǔn)液和空白液，于23℃的條件下用分光光度計(jì)在420nm的波長(zhǎng)下檢測(cè)各溶液的吸光度。根據(jù)上述不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定后所得的吸光度值，以乳糖含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將樣品分解液測(cè)得的吸光度代入上述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到樣品分解液的乳糖含量，再根據(jù)以下公式計(jì)算得試樣中的乳糖含量：X＝(M₁×V)/(M×V₁×10⁶)×100。

試驗(yàn)例1

取不同的乳清粉試樣1-5號(hào)，以本發(fā)明實(shí)施例1-5的測(cè)定法方法為實(shí)驗(yàn)組1-5，以現(xiàn)有的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定乳糖的方法為對(duì)照組，分別對(duì)比兩種方法對(duì)同一乳清粉試樣中乳糖含量的測(cè)定結(jié)果，其結(jié)果如表1所示：

表1乳糖含量的測(cè)定結(jié)果

從表1中可以看出，本發(fā)明實(shí)施例對(duì)乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法與現(xiàn)有的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定乳糖的方法所測(cè)定出的結(jié)果差別不大，說明本測(cè)定方法有效可行。此外，采用本測(cè)定方法經(jīng)對(duì)同一試樣進(jìn)行多次測(cè)定，其測(cè)定結(jié)果重復(fù)性良好，說明本發(fā)明的測(cè)定方法對(duì)乳清粉中的乳糖提取充分，可較準(zhǔn)確地測(cè)定乳清粉中乳糖的含量。

綜上所述，本發(fā)明實(shí)施例的乳清粉中乳糖含量的測(cè)定方法，利用乳清粉中乳糖的醛基具有還原性，其與銅試劑在堿性條件下混合加熱，可被氧化成羧基，該反應(yīng)還可使銅試劑中的Cu²⁺還原成Cu⁺，后者使磷鉬酸還原成藍(lán)色化合物(鉬藍(lán))，并使溶液呈藍(lán)色，其顏色的深淺與乳糖含量成正比，通過測(cè)定溶液的吸光度，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)曲線即可測(cè)定出乳糖的含量。在試樣測(cè)定前加入硫酸和鎢酸鈉溶液，可生成蛋白質(zhì)沉淀劑鎢酸，以去除試樣中所含的蛋白質(zhì)，避免該類物質(zhì)影響乳糖的測(cè)定結(jié)果。為提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度及確保其具有較好的重復(fù)性，本測(cè)定過程中還做了以下優(yōu)化：將乳糖標(biāo)準(zhǔn)品于稱取前先進(jìn)行干燥處理；試樣稱取量控制在0.6-0.8g之間；硫酸溶液、鎢酸鈉溶液、銅試劑和磷鉬酸試劑所加入的體積相同；吸光度于20-25℃的條件和380-460nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行測(cè)定，吸光度的測(cè)量結(jié)果控制在0.2-0.8范圍內(nèi)。因此，采用本發(fā)明方法能大大縮短測(cè)定乳糖含量的時(shí)間，解決用費(fèi)林氏法測(cè)定乳糖時(shí)操作繁瑣，滴定終點(diǎn)較難判斷易造成誤差等弊端。此外，本測(cè)定方法操作簡(jiǎn)單、快速，所用試劑和儀器價(jià)格低廉，不僅降低了檢測(cè)成本，還具有檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

以上所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。本發(fā)明的實(shí)施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。