1.一種原位實時監(jiān)測植物中果糖含量的微電極生物傳感器,具有三電極體系,包括Ag/AgCl的參比電極,鉑對電極,金工作電極,其特征在于,所述金工作電極上吸附有果糖脫氫酶。
2.如權(quán)利要求1所述的微電極生物傳感器,其特征在于,所述金工作電極上依次吸附有巰基乙酸,離子液體[Bmim]PF6,果糖脫氫酶與鐵氰化鉀媒介體小分子的混合物,離子液體[Bmim]PF6,果糖脫氫酶與鐵氰化鉀的混合物。
3.如權(quán)利要求1所述的微電極生物傳感器,其特征在于,所述金工作電極通過以下方法制備得到:
(1)在金工作電極上滴涂巰基乙酸TGA,得到TGA/Au電極;
(2)將離子液體[Bmim]PF6滴涂到TGA/Au電極上,
(3)逐步滴涂果糖脫氫酶FDH和鐵氰化鉀的混合PBS溶液,室溫放置,固定果糖脫氫酶,制得單層酶電極FDH/[Bmim]PF6/TGA/Au;
(4)再在FDH/[Bmim]PF6/TGA/Au電極上滴涂[Bmim]PF6,再逐步滴涂FDH和鐵氰化鉀的混合PBS溶液,制得雙層酶電極(FDH/[Bmim]PF6)2/TGA/Au。
4.如權(quán)利要求3所述的微電極生物傳感器,其特征在于,步驟(1)的巰基乙酸TGA濃度為1-5mM。
5.如權(quán)利要求3所述的微電極生物傳感器,其特征在于,步驟(3)的果糖脫氫酶FDH濃度為10-50mg/mL,鐵氰化鉀濃度為1-10mM,所述混合PBS溶液pH7.4,室溫放置1-4h固定果糖脫氫酶。
6.如權(quán)利要求1-5任一所述的微電極生物傳感器,其特征在于,微電極生物傳感器的電極外觀具有穿透植物組織的能力,裸露導(dǎo)電部分長度為10-20mm。
7.權(quán)利要求1-6任一所述的微電極生物傳感器在原位實時監(jiān)測植物果糖含量中的應(yīng)用。
8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物為農(nóng)作物、花卉、蔬菜或林木。
9.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,檢測部位為植物的莖、葉、果實或嫩芽。
10.一種原位實時監(jiān)測植物果糖含量的方法,其特征在于,包括:
(1)將權(quán)利要求1-6任一項所述的微電極生物傳感器連接至電化學(xué)工作站,與不同濃度的果糖標(biāo)準(zhǔn)溶液反應(yīng),在工作電壓下通過計時電流法進(jìn)行連續(xù)檢測,由濃度與電流關(guān)系獲得穩(wěn)定的監(jiān)測果糖的工作曲線;
(2)將權(quán)利要求1-6任一項所述的微電極生物傳感器插入待測植物組織,連接電化學(xué)工作站,獲取電流變化,導(dǎo)入工作曲線,計算被測樣本內(nèi)果糖的濃度。