本發(fā)明提供了一種多抗霉素在人參上的殘留分析方法，是對現(xiàn)有的殘留分析方法的改進(jìn)，屬于中草藥化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
多抗霉素是由日本理化學(xué)研究所鈴木三郎博士等人于1963年從熊本縣蘇郡坊中的土壤中分離出的一種放線菌，是一種廣譜性抗菌素類殺菌劑，具有內(nèi)吸傳導(dǎo)作用。1982年起在我國投產(chǎn)應(yīng)用，主要用于防治小麥白粉病，人參黑斑病，煙草赤星病，黃瓜霜霉病，瓜類枯萎病，水稻紋枯病，蘋果斑點落葉病，草莓及葡萄灰霉病，林木枯鞘病等多種真菌病害。其作用機(jī)制獨特，能夠干擾細(xì)胞壁殼多糖的生物合成，以殼多糖為基質(zhì)而構(gòu)成細(xì)胞壁的子囊菌綱、擔(dān)子菌綱和半知菌綱的一些真菌、芽管、菌絲體接觸藥劑后會局部膨大、破裂、溢出細(xì)胞內(nèi)含物，導(dǎo)致病菌死亡，從而達(dá)到殺菌抑菌作用。作為經(jīng)典殺菌劑，多抗霉素類殺菌劑自問世以來在世界各國農(nóng)藥市場所占份額迅速擴(kuò)大，廣泛應(yīng)用。隨著人們對環(huán)境安全及食品安全的關(guān)注，各類農(nóng)藥在環(huán)境介質(zhì)和各種作物中的殘留檢測方法成為農(nóng)藥領(lǐng)域研究熱點。因此，如何高效快速地測定多抗霉素類殺菌劑環(huán)境介質(zhì)和各種作物中的殘留檢測方法亦成為該藥劑的熱點問題。然而，由于藥劑自身特點，盡管國內(nèi)外也有文獻(xiàn)報道關(guān)于該類農(nóng)藥在土壤等環(huán)境介質(zhì)中的殘留分析方法，例如利用C18反相色譜柱和二極管陣列檢測品及藥材中的殘留限量成為農(nóng)藥科學(xué)工作者多年一直努力解決的問題。近年，我器、高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳－電致化學(xué)發(fā)光法(CE－ECL)等，但這些方法應(yīng)用到人參基質(zhì)上普遍存在回收率低，重現(xiàn)性差等現(xiàn)象，不具備借鑒性，因此，人參中多抗霉素類殺菌劑殘留量測定成為當(dāng)前殘留分析中的難點。多抗霉素類殺菌劑作為一種高效廣譜的殺菌劑，廣泛應(yīng)用于蔬菜、水果、藥材等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程，如何高效快速測定其在作物、果國在人參生產(chǎn)過程中，參農(nóng)大量使用多抗霉素類殺菌劑防治人參黑斑病等病害，為了避免多抗霉素成為國外限制我國人參出口的技術(shù)壁壘，并解決我國人參出口在多抗霉素殘留問題上陷于被動局面，針對多抗霉素類殺菌劑，成功篩選出一個操作簡單、回收率高、重現(xiàn)性好的殘留分析方法勢在必行。此項殘留分析方法的建立不僅可以使我國人參農(nóng)殘檢測技術(shù)水平、標(biāo)準(zhǔn)和國外完全同步，同時也可以避免人參出口過程中遭遇國外綠色壁壘。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
：本發(fā)明公開了一種多抗霉素在人參上的殘留分析方法，該方法主要用于測定人參、西洋參等復(fù)雜基質(zhì)中藥材中殘留的多抗霉素含量的方法，方法具有較強的重現(xiàn)性，回收率可達(dá)到80％以上。本發(fā)明所述的一種多抗霉素在人參上的殘留分析方法，包括以下步驟：1、樣品中多抗霉素B用甲酸水溶液提取：⑴鮮人參：稱取鮮人參樣品5.0g放入燒杯中，加入0.3％甲酸水溶液20mL，調(diào)節(jié)pH范圍2-5，勻漿約2min，在鋪有助濾劑的布氏漏斗中減壓抽濾，將濾液全部收集于具塞量筒中，取部分濾液于離心管中，12000rpm離心5min，過0.22μm濾膜，待液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測；⑵人參干粉：稱取人參干粉樣品5.0g于具塞三角瓶中，加入0.3％甲酸水溶液20mL，調(diào)節(jié)pH范圍2-5，振蕩提取1h，在鋪有助濾劑的布氏漏斗中減壓抽濾，將濾液全部收集于具塞量筒中，取部分濾液于離心管中，12000rpm離心5min，過0.22μm濾膜，待液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測；2、分析測試：⑴儀器條件：色譜柱：AgilentZorbaxRRHDEclipsePlusC183.0×100mm1.8μm；流動相：乙酸銨2.5mmol/L+0.05％甲酸水溶液∶甲醇梯度洗脫；梯度洗脫程序：流速：0.3mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μl。⑵質(zhì)譜分析條件：電離源模式：電噴霧離子化；電離源極性：正離子模式(ESI+)；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；霧化氣：氮氣；霧化氣壓力：45psi；毛細(xì)管電壓：4000V；干燥氣溫度：400℃；干燥氣流速：12L/min；多抗霉素：定量離子：508.1/490.1；定性離子：508.1/366；源內(nèi)碎裂電壓：120V；碰撞氣能量：508.1/490.1(10V)；508.1/366(20V)。3、用基質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，外標(biāo)法定量多抗霉素B；⑴標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：準(zhǔn)確稱取多抗霉素標(biāo)準(zhǔn)品0.0345g，用10％甲醇水溶液定容至10ml，配制成1000mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)母液，再將此標(biāo)準(zhǔn)母液稀釋成0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/kg系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述液相條件測定，進(jìn)樣量5μl，得到多抗霉素BMRM譜圖1，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，直線回歸方程為Y＝12216x-149.29，相關(guān)系數(shù)為r＝0.9994，結(jié)果見表1表1多抗霉素B的標(biāo)準(zhǔn)曲線⑵最小檢出限：在上述條件下，多抗霉素B的最低檢出量為1.05×10-1ng。⑶最低檢出濃度根據(jù)添加回收率實驗，在上述儀器條件下多抗霉素在土壤、植株、鮮人參和人參干粉中的最低檢出濃...