本發(fā)明涉及一種質(zhì)量檢測方法，具體涉及一種巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
巖黃連 (Corydalis saxicola Bunting)系罌粟科 (Papaveraceae)紫堇屬(Corydalis) 植物，為廣西壯族自治區(qū)特色藥材，中藥巖黃連的活性成分主要為生物堿類化合物?！皫r黃連化學(xué)成分”《中國天然藥物》研究表明 ：巖黃連全草可分離出 14 個(gè)化合物，分別為去氫巖黃連堿、黃連堿、齊墩果酸、刺檗堿、胡蘿卜苷、別隱品堿、β- 谷甾醇、白樺脂醇、環(huán)桉烯醇、白樺脂酸、β- 香樹脂醇乙酸脂、小檗堿、四氫掌葉防己堿、巴馬汀?！皫r黃連活性成分系統(tǒng)研究及荼蘆毒性成分研究”中采用色譜技術(shù)對巖黃連化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離，共得到 47 個(gè)化合物，其中脫氫卡維丁、脫氫阿樸卡維丁、脫氫異阿樸卡維丁、脫氫斯氏紫堇堿和黃連堿為巖黃連的主要化學(xué)成分。巖黃連藥材收載于《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》，記載主要功能與主治有：清利濕熱，散瘀消腫。用于瘡癤腫毒，肝炎，肝硬化，肝癌。巖黃連是廣西民間用于治療肝炎的特效秘方中草藥，臨床已上市的劑型為注射劑，屬公認(rèn)治肝良藥。
巖黃連注射液是1983年8月11日經(jīng)廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生局以桂衛(wèi)藥批（83）79號(hào)文批準(zhǔn)，由廣西東蘭制藥廠按其所附質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)組織生產(chǎn)，其批準(zhǔn)文號(hào)為桂衛(wèi)藥準(zhǔn)字（1983）第33025號(hào)，品種整頓后批準(zhǔn)文號(hào)改為桂衛(wèi)藥準(zhǔn)字（1996）第033025號(hào)，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《廣西藥品標(biāo)準(zhǔn)》1984年版。2001年2月，廣西東蘭制藥廠改制為廣西河豐藥業(yè)有限責(zé)任公司。2002年，巖黃連注射液由地方標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)整頓上升為國家標(biāo)準(zhǔn)，收載于《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分內(nèi)科肝膽分冊，標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)為WS-111499（ZD1149-20020），藥品批準(zhǔn)文號(hào)為國藥準(zhǔn)字Z20026725。巖黃連注射液有效成分是巖黃連總堿，目前臨床上主要用于治療急性黃疸性肝炎、慢性乙型中、重度肝炎，尤其是黃疸型肝炎，其清除肝細(xì)胞內(nèi)病毒，修復(fù)肝損傷細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞再生及促進(jìn)膽汁排泄之功效已為臨床所公認(rèn)?，F(xiàn)有技術(shù)中對巖黃連注射液的檢測大都是對其有效成分巖黃連堿的含量進(jìn)行測定，不能全面、客觀的檢測和評價(jià)巖黃連注射液的質(zhì)量。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，該檢測方法可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評價(jià)巖黃連注射液的質(zhì)量，對控制該巖黃連注射液的質(zhì)量與保證臨床療效具有重要意義。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
一種巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，所述的巖黃連注射液的制法為：取巖黃連提取物（以巖黃連堿計(jì)）0.35g、聚山梨酯80 10g、氯化鈉8.5g混合，加注射用水使溶解并稀釋至800mL , 調(diào)節(jié)pH值至3.0～4.5，攪勻，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液加注射用水至1000 mL，混勻，濾過，灌封，滅菌，制得巖黃連注射液；
所述的質(zhì)量檢測方法采用指紋圖譜檢測方法進(jìn)行檢測，參照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ D）,結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定，其操作步驟如下：
（1）色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用shim-pack CLC-ODS 6.0×150mm 5μm 色譜柱；乙腈-磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相按以下梯度運(yùn)行條件洗脫，流速為1mL/min，檢測波長為285nm，理論板數(shù)按巖黃連堿峰計(jì)算不低于20000；梯度運(yùn)行條件如下：
（2）參照物溶液的制備：精密稱取巖黃連堿對照品適量，加pH為3.8±0.5的水溶液（取水1000mL，用稀鹽酸調(diào)pH為3.8±0.5，即得），熱水浴加熱溶解并稀釋制成每1mL含巖黃連堿350μg/mL的溶液，即得；
（3）測定：精密吸取本品巖黃連注射液和參照物溶液各10μl,分別注入液相色譜儀，測定，記錄140分鐘的色譜圖；本品指紋圖譜與對照指紋圖譜經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相似度計(jì)算軟件計(jì)算，相似度大于0.9，符合要求。
上述的巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，所述的巖黃連提取物的提取方法步驟如下：
（1）取巖黃連干燥藥材，粉碎成粗粉, 加入粗粉重量4-6倍量、體積濃度為90%的乙醇浸漬22-26小時(shí)，濾過，得到浸漬液備用，得到的濾渣中，加入濾渣重量4-6倍量、體積濃度為90%的乙醇加熱回流提取3次，每次1-1.5小時(shí)，濾過，合并3次提取液及浸漬液，得混合液；
（2）將混合液進(jìn)行減壓濃縮回收乙醇，并濃縮至55-65℃下相對密度為1.16-1.20的稠膏，在稠膏中加入稠膏重量0.4-0.6倍量的注射用水?dāng)嚢杈鶆?，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2～3，邊加鹽酸邊攪拌，濾過，得到濾液；
（3）在濾液中加入碳酸鈉調(diào)節(jié)濾液的pH值至9～10，有棕褐色沉淀析出，靜置22-26小時(shí)后，過濾，取沉淀物，真空抽干；
（4）在沉淀物中加入沉淀物重量4.5-5.5倍量的三氯甲烷，加熱回流提取4次，每次25-35分鐘，濾過，合并三氯甲烷提取液，加入無水硫酸納脫水，過濾，減壓蒸餾回收三氯甲烷并濃縮至近干，然后置于55-65℃下真空干燥，得巖黃連提取物。
上述的巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，采用指紋圖譜檢測方法進(jìn)行檢測步驟（1）中所述的磷酸鹽緩沖液的配方為： 0.05mol/L庚烷磺酸鈉-0.05mol/L磷酸二氫鉀體積比為1:1，含 0.2%乙二胺，用磷酸調(diào)pH3.0；步驟（3）中所述的對照指紋圖譜如圖 1 所示。
上述的巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，還包括巖黃連注射液中巖黃連的薄層色譜鑒別，具體包括以下步驟：
（1） 取本品巖黃連注射液，作為供試品溶液，另取巖黃連對照藥材1g，加氯仿30mL，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，再取鹽酸小檗堿對照品和巖黃連堿對照品，分別加甲醇制成每1mL 含0.5mg和1mg的溶液，作為對照品溶液；
（2）吸取上述供試品溶液和對照藥材溶液各5uL、對照品溶液各2uL，分別點(diǎn)于同一含羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲醇-氨水（體積比為10：2：2：2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
上述的巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，還包括巖黃連注射液中乙醇和三氯甲烷含量的檢測，其檢測步驟如下：
（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：非極性毛細(xì)管柱（50m×0.53mm×5
μm）；柱溫為80℃，進(jìn)樣口溫度為200℃；檢測器為氫火焰離子化檢測器，溫度為250℃；頂空進(jìn)樣，頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時(shí)間為30分鐘；進(jìn)樣體積為1.0mL；理論板數(shù)按三氯甲烷峰計(jì)不低于5000，各組分之間的分離度應(yīng)大于2，與乙醇相對保留時(shí)間為0.82-0.86的峰系巖黃連堿分子中的甲氧基熱裂解生成的甲醇峰；
（2）對照品溶液的制備：精密稱取乙醇2g、三氯甲烷0.12g，分別置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取5mL、1mL，置同一20mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻（每mL含乙醇5mg，三氯甲烷60μg），精密量取2mL置頂空瓶中，加蓋密封，即得；
（3）供試品溶液的制備：精密量取本品巖黃連注射液2mL，置頂空瓶中，加蓋密封，即得。
（4）測定：精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算,乙醇、三氯甲烷的限度分別為0.5%和0.006%。
上述的巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，還包括巖黃連注射液中巖黃連堿含量的檢測，其檢測步驟如下：
（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水（體積比50：50），內(nèi)含0.34%磷酸二氫鉀和0.17%十二烷基硫酸鈉為流動(dòng)相；檢測波長為347nm，理論板數(shù)按巖黃連堿峰計(jì)算應(yīng)不低于6000；
（2）對照品溶液的制備:精密稱取巖黃連堿對照品適量，加流動(dòng)相制成每1mL含26ug的溶液，即得；
（3）供試品溶液的制備:精密量取裝量差異項(xiàng)下的本品2mL，置25mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得；
（4）測定:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20uL，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每支含巖黃連提取物以巖黃連堿（C21H20O4N）計(jì)，為0.56-0.84mg。
在對巖黃連注射液指紋圖譜進(jìn)行測定以后，加上薄層色譜鑒別、乙醇和三氯甲烷含量的檢測，巖黃連堿含量的檢測，就可以全方位對巖黃連注射液的質(zhì)量進(jìn)行控制，保證了產(chǎn)品的可靠性。
本發(fā)明的有益效果為：
1、本發(fā)明巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，通過采用指紋圖譜檢測對巖黃連注射液進(jìn)行檢測，可以同時(shí)檢測巖黃連注射液中極性差異較大的多種活性成分，從而可以全面、客觀、準(zhǔn)確的檢測和評價(jià)巖黃連注射液的質(zhì)量，為保證臨床療效具有重要意義。
2、本發(fā)明巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法，檢測的準(zhǔn)確度高，方法簡單、能夠更加準(zhǔn)確的測定和評價(jià)巖黃連注射液的質(zhì)量，提高巖黃連注射液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，保證了巖黃連注射液較高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平，有助于提高該巖黃連注射液使用的安全性和穩(wěn)定性。
附圖說明
圖1為本發(fā)明巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法采用指紋圖譜檢測方法進(jìn)行檢測時(shí)所用到的巖黃連注射液的對照指紋圖譜。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
【制法】取巖黃連提取物、聚山梨酯80、氯化鈉，加注射用水使溶解并稀釋至800mL，調(diào)節(jié)pH值至3.0-4.5，搖勻，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液加注射用水至規(guī)定量，混勻，濾過，灌封，滅菌，制得巖黃連注射液。
所述的巖黃連提取物的提取方法步驟如下：
（1）取巖黃連干燥藥材，粉碎成粗粉, 加入粗粉重量4-6倍量、體積濃度為90%的乙醇浸漬22-26小時(shí)，濾過，得到浸漬液備用，得到的濾渣中，加入濾渣重量4-6倍量、體積濃度為90%的乙醇加熱回流提取3次，每次1-1.5小時(shí)，濾過，合并3次提取液及浸漬液，得混合液；
（2）將混合液進(jìn)行減壓濃縮回收乙醇，并濃縮至55-65℃下相對密度為1.16-1.20的稠膏，在稠膏中加入稠膏重量0.4-0.6倍量的注射用水?dāng)嚢杈鶆?，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2～3，邊加鹽酸邊攪拌，濾過，得到濾液；
（3）在濾液中加入碳酸鈉調(diào)節(jié)濾液的PH值至9～10，有棕褐色沉淀析出，靜置22-26小時(shí)后，過濾，取沉淀物，真空抽干；
（4）在沉淀物中加入沉淀物重量4.5-5.5倍量的三氯甲烷，加熱回流提取4次，每次25-35分鐘，濾過，合并三氯甲烷提取液，加入無水硫酸納脫水，過濾，減壓蒸餾回收三氯甲烷并濃縮至近干，然后置于55-65℃下真空干燥，得巖黃連提取物。
【性狀】本品為棕黃色至棕褐色的澄明液體。
本發(fā)明巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法為：
一、【鑒別】巖黃連的薄層色譜鑒別：具體包括以下步驟：
（1） 取本品巖黃連注射液，作為供試品溶液，另取巖黃連對照藥材1g，加氯仿30mL，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，再取鹽酸小檗堿對照品和巖黃連堿對照品，分別加甲醇制成每1mL 含0.5mg和1mg的溶液，作為對照品溶液；
（2）照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對照藥材溶液各5uL、對照品溶液各2uL，分別點(diǎn)于同一含羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲醇-氨水（體積比為10：2：2：2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
二、【檢查】pH值：應(yīng)為3.0-4.5（中國藥典2010年版一部附錄Ⅶ G）。
有關(guān)物質(zhì)：除草酸鹽和鉀離子不檢查外，其余應(yīng)符合注射劑有關(guān)物質(zhì)檢查法項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2010年版一部附錄Ⅸ S)。
乙醇和三氯甲烷含量的檢測： 照殘留溶劑測定法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅷ P第一法）測定；其檢測步驟如下：
（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：非極性毛細(xì)管柱（50m×0.53mm×5μm）；柱溫為80℃，進(jìn)樣口溫度為200℃；檢測器為氫火焰離子化檢測器，溫度為250℃；頂空進(jìn)樣，頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時(shí)間為30分鐘；進(jìn)樣體積為1.0mL；理論板數(shù)按三氯甲烷峰計(jì)應(yīng)不低于5000，各組分之間的分離度應(yīng)大于2，與乙醇相對保留時(shí)間為0.82-0.86（約為0.84）的峰系巖黃連堿分子中的甲氧基熱裂解生成的甲醇峰；
（2）對照品溶液的制備：精密稱取乙醇2g、三氯甲烷0.12g，分別置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取5mL、1mL，置同一20mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻（每mL含乙醇5mg，三氯甲烷60μg），精密量取2mL置頂空瓶中，加蓋密封，即得；
（3）供試品溶液的制備：精密量取本品2mL，置頂空瓶中，加蓋密封，即得；
（4）測定： 精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。乙醇、三氯甲烷的限度分別為0.5%和0.006%。
重金屬及有害元素： 精密量取本品1mL，照鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(中國藥典2010年版一部附錄Ⅸ B )測定，鉛、鎘、砷、汞、銅均不得過千萬分之一。
異常毒性： 取本品，加氯化鈉注射液作1→8稀釋，依法檢查(中國藥典2010年版二部附錄Ⅺ C)，靜脈注射給藥，應(yīng)符合規(guī)定。
過敏反應(yīng)物質(zhì)：取本品，依法檢查(中國藥典2010年版二部附錄Ⅺ K)，應(yīng)符合規(guī)定。
三、【指紋圖譜】指紋圖譜檢測：參照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ D）,結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定；其操作步驟如下：
（1）色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：儀器：Waters515泵、Waters996二極管陣列檢測器、Waters M 32色譜工作站、717自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)；用shim-pack CLC-ODS 6.0×150mm 5μm 色譜柱；乙腈-磷酸鹽緩沖液[磷酸鹽緩沖液的配方：0.05mol/L 庚烷磺酸鈉-0.05mol/L磷酸二氫鉀（體積比1:1），含 0.2%乙二胺，用磷酸調(diào)pH3.0]為流動(dòng)相按以下梯度運(yùn)行條件洗脫，流速為1mL/min，檢測波長為285nm，理論板數(shù)按巖黃連堿峰計(jì)算應(yīng)不低于20000；梯度運(yùn)行條件如下：
（2）參照物溶液的制備：精密稱取巖黃連堿對照品適量，加pH為3.8±0.5的水溶液（取水1000mL，用稀鹽酸調(diào)pH為3.8±0.5，即得），熱水浴加熱溶解并稀釋制成每1mL含巖黃連堿350μg的溶液，即得；
（3）測定：精密吸取本品巖黃連注射液和參照物溶液各10μL,分別注入液相色譜儀，測定，記錄140分鐘的色譜圖；本品指紋圖譜與對照指紋圖譜（如圖 1所示）經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相似度計(jì)算軟件計(jì)算，相似度大于0.9，符合要求。
其他 應(yīng)符合注射劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（中國藥典2010年版一部附錄Ⅰ U）。
四、【含量測定】照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ D）測定。巖黃連注射液中巖黃連堿含量的檢測，其檢測步驟如下：
（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水（體積比50:50)，內(nèi)含質(zhì)量百分含量為0.34%的磷酸二氫鉀和0.17%的十二烷基硫酸鈉為流動(dòng)相；檢測波長為347nm；理論板數(shù)按巖黃連堿峰計(jì)算不低于6000；
（2）對照品溶液的制備:精密稱取巖黃連堿對照品適量，加流動(dòng)相制成每1mL含26ug的溶液，即得；
（3）供試品溶液的制備:精密量取裝量差異項(xiàng)下的本品2mL，置25mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得；
（4）測定:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20uL，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每支含巖黃連提取物以巖黃連堿（C21H20O4N）計(jì)，為0.56-0.84mg。
實(shí)施例2
【制法】取巖黃連提取物、聚山梨酯80、氯化鈉，加注射用水使溶解并稀釋至800mL，調(diào)節(jié)pH值至3.0-4.5，搖勻，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液加注射用水至規(guī)定量，混勻，濾過，灌封，滅菌，制得巖黃連注射液。
所述的巖黃連提取物的提取方法步驟如下：
（1）取巖黃連干燥藥材，粉碎成粗粉, 加入粗粉重量5倍量、體積濃度為90%的乙醇浸漬24小時(shí)，濾過，得到浸漬液備用，得到的濾渣中，加入濾渣重量5倍量、體積濃度為90%的乙醇加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，濾過，合并3次提取液及浸漬液，得混合液；
（2）將混合液進(jìn)行減壓濃縮回收乙醇，并濃縮至60℃下相對密度為1.16-1.20的稠膏，在稠膏中加入稠膏重量0.5倍量的注射用水?dāng)嚢杈鶆?，然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2～3，邊加鹽酸邊攪拌，濾過，得到濾液；
（3）在濾液中加入碳酸鈉調(diào)節(jié)濾液的PH值至9～10，有棕褐色沉淀析出，靜置24小時(shí)后，過濾，取沉淀物，真空抽干；
（4）在沉淀物中加入沉淀物重量5倍量的三氯甲烷，加熱回流提取4次，每次30分鐘，濾過，合并三氯甲烷提取液，加入無水硫酸納脫水，過濾，減壓蒸餾回收三氯甲烷并濃縮至近干，然后置于60℃下真空干燥，得巖黃連提取物。
【性狀】本品為棕黃色至棕褐色的澄明液體。
本發(fā)明巖黃連注射液的質(zhì)量檢測方法為：
一、【鑒別】巖黃連的薄層色譜鑒別：具體包括以下步驟：
（1） 取本品巖黃連注射液，作為供試品溶液，另取巖黃連對照藥材1g，加氯仿30mL，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，再取鹽酸小檗堿對照品和巖黃連堿對照品，分別加甲醇制成每1mL 含0.5mg和1mg的溶液，作為對照品溶液；
（2）照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液和對照藥材溶液各5uL、對照品溶液各2uL，分別點(diǎn)于同一含羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲醇-氨水（體積比為10：2：2：2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
二、【檢查】pH值：應(yīng)為3.0-4.5（中國藥典2010年版一部附錄Ⅶ G）。
有關(guān)物質(zhì)：除草酸鹽和鉀離子不檢查外，其余應(yīng)符合注射劑有關(guān)物質(zhì)檢查法項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2010年版一部附錄Ⅸ S)。
乙醇和三氯甲烷含量的檢測： 照殘留溶劑測定法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅷ P第一法）測定；其檢測步驟如下：
（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：非極性毛細(xì)管柱（50m×0.53mm×5μm）；柱溫為80℃，進(jìn)樣口溫度為200℃；檢測器為氫火焰離子化檢測器，溫度為250℃；頂空進(jìn)樣，頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時(shí)間為30分鐘；進(jìn)樣體積為1.0mL；理論板數(shù)按三氯甲烷峰計(jì)應(yīng)不低于5000，各組分之間的分離度應(yīng)大于2，與乙醇相對保留時(shí)間為0.82-0.86（約為0.84）的峰系巖黃連堿分子中的甲氧基熱裂解生成的甲醇峰；
（2）對照品溶液的制備：精密稱取乙醇2g、三氯甲烷0.12g，分別置100mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密量取5mL、1mL，置同一20mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻（每mL含乙醇5mg，三氯甲烷60μg），精密量取2mL置頂空瓶中，加蓋密封，即得；
（3）供試品溶液的制備：精密量取本品2mL，置頂空瓶中，加蓋密封，即得；
（4）測定： 精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。乙醇、三氯甲烷的限度分別為0.5%和0.006%。
重金屬及有害元素： 精密量取本品1mL，照鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(中國藥典2010年版一部附錄Ⅸ B )測定，鉛、鎘、砷、汞、銅均不得過千萬分之一。
異常毒性： 取本品，加氯化鈉注射液作1→8稀釋，依法檢查(中國藥典2010年版二部附錄Ⅺ C)，靜脈注射給藥，應(yīng)符合規(guī)定。
過敏反應(yīng)物質(zhì)：取本品，依法檢查(中國藥典2010年版二部附錄Ⅺ K)，應(yīng)符合規(guī)定。
三、【指紋圖譜】指紋圖譜檢測：參照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ D）,結(jié)合指紋圖譜的要求進(jìn)行測定；其操作步驟如下：
（1）色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：儀器：Waters515泵、Waters996二極管陣列檢測器、Waters M 32色譜工作站、717自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)；用shim-pack CLC-ODS 6.0×150mm 5μm 色譜柱；乙腈-磷酸鹽緩沖液[磷酸鹽緩沖液的配方：0.05mol/L 庚烷磺酸鈉-0.05mol/L磷酸二氫鉀（體積比1:1），含 0.2%乙二胺，用磷酸調(diào)pH3.0]為流動(dòng)相按以下梯度運(yùn)行條件洗脫，流速為1mL/min，檢測波長為285nm，理論板數(shù)按巖黃連堿峰計(jì)算應(yīng)不低于20000；梯度運(yùn)行條件如下：
（2）參照物溶液的制備：精密稱取巖黃連堿對照品適量，加pH為3.8±0.5的水溶液（取水1000mL，用稀鹽酸調(diào)pH為3.8±0.5，即得），熱水浴加熱溶解并稀釋制成每1mL含巖黃連堿350μg的溶液，即得；
（3）測定：精密吸取本品巖黃連注射液和參照物溶液各10μL,分別注入液相色譜儀，測定，記錄140分鐘的色譜圖；本品指紋圖譜與對照指紋圖譜（圖 1）經(jīng)計(jì)算機(jī)模擬相似度計(jì)算軟件計(jì)算，相似度大于0.9，符合要求。
其他 應(yīng)符合注射劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（中國藥典2010年版一部附錄Ⅰ U）。
四、【含量測定】照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ D）測定。巖黃連注射液中巖黃連堿含量的檢測，其檢測步驟如下：
（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水（體積比50:50)，內(nèi)含0.34%磷酸二氫鉀和0.17%十二烷基硫酸鈉為流動(dòng)相；檢測波長為347nm；理論板數(shù)按巖黃連堿峰計(jì)算不低于6000；
（2）對照品溶液的制備:精密稱取巖黃連堿對照品適量，加流動(dòng)相制成每1mL含26ug的溶液，即得；
（3）供試品溶液的制備:精密量取裝量差異項(xiàng)下的本品2mL，置25mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得；
（4）測定:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20uL，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每支含巖黃連提取物以巖黃連堿（C21H20O4N）計(jì)，應(yīng)為0.56-0.84mg。