本發(fā)明屬于藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體地說，涉及一種清腦片質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：頭痛病因多端，是由起居不慎，坐臥當(dāng)風(fēng)，感受風(fēng)寒濕熱所致。不外乎外感內(nèi)傷兩大類。治療宜活血通竅，清利頭目。腦震蕩后頭痛在臨床上非常多見?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為其發(fā)生與顱內(nèi)壓增高、血腦屏障破壞、微循環(huán)功能障礙等諸多因素有密切關(guān)系?！鹅`樞·海論》曰：“腦為髓之?！薄＠顣r珍曰：“腦為元神之府”。顱腦損傷后脈絡(luò)受損，氣血逆亂，經(jīng)絡(luò)不通，氣滯血瘀，再加上驚恐憂慮等導(dǎo)致肝氣郁結(jié)、疏泄失職等形成以氣滯血瘀為主的臨床表現(xiàn)。清腦片方中白芷，辛、溫，具有解表散風(fēng)、通竅止痛的作用，為君藥。當(dāng)歸，辛、溫，歸肝，心脾經(jīng)，具有補血、活血、止痛的作用。川芎，辛、溫，具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效。鉤藤，性味甘、微寒，具有息風(fēng)止痙、清熱平肝之功效。細(xì)辛，性味辛、溫，具有祛風(fēng)散寒、通竅止痛的功效。四藥合用為臣藥。龍骨，性味甘、澀、平，歸心、肝、腎經(jīng)，具有鎮(zhèn)驚安神、平肝潛陽，收斂固澀的作用，為佐藥。薄荷，性味辛、涼，具有疏散風(fēng)熱，清利頭目之功效，為使藥。以上七藥合用，具有活血、行氣、通竅止痛，清利頭目之作用。用于治療頭痛、頭暈、腦震蕩后遺癥。經(jīng)臨床觀察，清腦片在臨床實踐中療效優(yōu)于去痛片，值得推廣應(yīng)用。為保證制劑的穩(wěn)定性及療效，對清腦片制定了全面的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，川芎和當(dāng)歸為清腦片中主要藥味，本法采用高效液相法對方中川芎和當(dāng)歸以阿魏酸為指標(biāo)進(jìn)行含量測定，以薄層色譜分別對白芷和川芎定性鑒別。對制劑進(jìn)行了長期穩(wěn)定性試驗，結(jié)果表明在24個月內(nèi)制劑的質(zhì)量無明顯的變化，為制定制劑的有效期提供了有力的證據(jù)。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的之一是提供一種清腦片的質(zhì)量控制方法，該方法能夠快速、準(zhǔn)確的鑒別康腎口服液中的白芷和川芎，并通過高效液相色譜法測定清腦片中阿魏酸的含量。本發(fā)明公開了一種清腦片質(zhì)量控制方法，包括利用薄層色譜法進(jìn)行白芷鑒別和川芎鑒別；利用高效液相色譜法進(jìn)行阿魏酸含量測定。進(jìn)一步的，所述白芷鑒別方法為：取清腦片10片，除去包衣，研細(xì)成粉末，加乙醚20ml振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；取白芷對照藥材同法制成對照藥材溶液；取不含白芷的陰性樣品同法制成陰性對照溶液；取歐前胡素對照品，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述四種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚－乙醚(3：2)為展開劑，在25℃以下展開，取出，晾干；觀察硅膠G薄層板，紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。進(jìn)一步的，所述石油醚沸程為30-60℃。進(jìn)一步的，所述川芎鑒別方法為：取清腦片10片，除去包衣，研細(xì)成粉末，加乙醚50ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，作為供試品溶液；取川芎對照藥材1g，加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液；取不含川芎的陰性樣品同法制成陰性對照溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的正己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干；觀察硅膠G薄層板，紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。進(jìn)一步的，所述阿魏酸含量測定方法為：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比17:83為乙腈－0.085％磷酸溶液為流動相；檢測波長為320nm，理論板數(shù)按阿魏酸峰計算應(yīng)≥1500；對照品溶液的制備，精密稱取阿魏酸對照品，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含5μg的溶液，即得；供試品溶液的制備，取清腦片10片，除去包衣，研細(xì)成粉末，取所述粉末1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇15ml，密塞，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定方法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，計算即得，本品每片含當(dāng)歸、川芎以阿魏酸計，不得少于0.010mg。進(jìn)一步的，所述阿魏酸含量測定方法中，供試品溶液制備步驟的超聲處理功率為160W，超聲頻率為50kHz，超聲時間60分鐘。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明可以獲得包括以下技術(shù)效果：1)本發(fā)明的清腦片質(zhì)量控制方法，提供了鑒別藥物中白芷和川芎的方法，并采用高效液相法對方中主要藥味川芎和當(dāng)歸以阿魏酸為指標(biāo)進(jìn)行含量測定。2)本發(fā)明的質(zhì)量控制方法能更好地控制藥品的質(zhì)量，具有較強的專屬性和良好的重現(xiàn)性，真正體現(xiàn)藥品安全有效、質(zhì)量可控。當(dāng)然，實施本發(fā)明的任一產(chǎn)品必不一定需要同時達(dá)到以上所述的所有技術(shù)效果。附圖說明此處所說明的附圖用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，構(gòu)成本發(fā)明的一部分，本發(fā)明的示意性實施例及其說明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明的不當(dāng)限定。在附圖中：圖1所示為本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的白芷鑒別薄層色譜圖(紫外燈365nm)；圖2所示為本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的川芎鑒別薄層色譜圖(紫外燈365nm)；圖3所示為本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的阿魏酸含量測定對照品高效液相色譜圖；圖4所示為本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的阿魏酸含量測定供試品高效液相色譜圖；圖5所示為本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的阿魏酸含量測定陰性對照高效液相色譜圖。具體實施方式以下將配合附圖及實施例來詳細(xì)說明本發(fā)明的實施方式，藉此對本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段來解決技術(shù)問題并達(dá)成技術(shù)功效的實現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實施。實施例1，白芷的鑒別取清腦片10片，除去包衣，研細(xì)，加乙醚20ml振搖，放置1小時，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液。取白芷對照藥材同法制成對照藥材溶液。取不含白芷的陰性樣品同法制成陰性對照溶液。取歐前胡素對照品，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述四種溶液各4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-60℃)－乙醚(3:2)為展開劑，在25℃以下展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視。結(jié)果如圖1本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的白芷鑒別薄層色譜圖(紫外燈365nm)所示，圖中1為歐前胡素對照品，2為白芷對照藥材，3-5為供試品，6為陰性對照。圖中供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照樣品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，未見對應(yīng)的斑點。表明清腦片中含有白芷。實施例2，川芎的鑒別取清腦片10片，除去包衣，研細(xì)，加乙醚50ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加三氯甲烷1ml使溶解，作為供試品溶液。取川芎對照藥材1g，加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液。取不含川芎的陰性樣品同法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為9:1的正己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視。結(jié)果如圖2本發(fā)明清腦片質(zhì)量控制方法的川芎鑒別薄層色譜圖(紫外燈365nm)所示，圖中1為川芎對照藥材，2-4為供試品，5為陰性對照。圖中供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照樣品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上，未見對應(yīng)的斑點。表明清腦片中含有川芎。實施例3，阿魏酸的含量測定(1)含量測定的方法川芎和當(dāng)歸為清腦片中主要藥味，本法采用高效液相法對方中川芎和當(dāng)歸以阿魏酸為指標(biāo)進(jìn)行含量測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈－0.085％磷酸溶液＝17:83為流動相；檢測波長為320nm。理論板數(shù)按阿魏酸峰計算應(yīng)不低于1500。對照品溶液的制備：取阿魏酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含5μg的溶液，即得。供試品溶液的制備：取清腦片10片，除去包衣，研細(xì)，取1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇15ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率160W，頻率50kHz)60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。陰性對照溶液的制備：取不含川芎和當(dāng)歸的陰性樣品，依供試品溶液的制備方法，同法制得。測定法：精密量取供試品溶液和阿魏酸對照品各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計算出供試品中阿魏酸的含量，即得。(2)含量測定的方法學(xué)研究2.1檢測波長的確定以乙腈－0.085％磷酸溶液＝17:83為溶劑，在220-350nm范圍內(nèi)對阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行掃描，阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品在該溶劑中，在320nm處有最大吸收。2.2系統(tǒng)適用性試驗在上述色譜條件下，分別取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液，各進(jìn)樣體積20μl，記錄色譜圖。測定結(jié)果如圖3-5所示。樣品中阿魏酸理論塔板數(shù)計算：n＝5820(＞1500)；主峰與雜質(zhì)峰的分離度為0.98；陰性對照溶液在對照品吸收峰處無吸收，表明輔料及各種分解產(chǎn)物對主峰干擾較小，符合系統(tǒng)適用性試驗的要求。2.3線性關(guān)系試驗取阿魏酸對照品2.70mg，置50ml量瓶中，加流動相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1、2、4、5、10ml，置50ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。精密量取各20μl，分別注入液相色譜儀，測定峰面積。以峰面積(X)對進(jìn)樣濃度(C，μg/ml)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為y＝53551x+7970.7相關(guān)系數(shù)R2＝0.9991，結(jié)果表明，阿魏酸濃度在1.08～54μg/ml范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好，見表1。表1阿魏酸線性關(guān)系試驗結(jié)果序號123456濃度(X，μg/ml)1.082.164.325.4010.8054.00峰面積(Y)7281912173623851228853259063129556332.4最小檢出量取線性關(guān)系試驗項下的1號溶液，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl，分別注入液相色譜儀，測定，色譜圖中，信噪比＞10:1，所以最小檢出量<0.2μg/ml。2.5精密度試驗取2號對照品溶液，精密量取20μl，連續(xù)測定6次，結(jié)果見表2。平均值為123220，RSD為4.3％。本法精密度良好。表2精密度試驗結(jié)果序號123456峰面積1217361170851306381188551227811282252.6穩(wěn)定性試驗取清腦片10片，按含量測定項下方法制備得供試品溶液；精密吸取供試品溶液20μl，每隔一定時間進(jìn)樣測定一次，共測定8小時，結(jié)果見表3。RSD為3.4％，結(jié)果表明，供試品溶液在8小時內(nèi)基本穩(wěn)定。表3穩(wěn)定性試驗結(jié)果序號1234峰面積234334235623245698222489序號5678峰面積229638248612230237256864本發(fā)明的清腦片質(zhì)量控制方法，提供了鑒別藥物中白芷和川芎的方法，并采用高效液相法對方中主要藥味川芎和當(dāng)歸以阿魏酸為指標(biāo)進(jìn)行含量測定，該質(zhì)量控制方法能更好地控制藥品的質(zhì)量，具有較強的專屬性和良好的重現(xiàn)性，真正體現(xiàn)藥品安全有效、質(zhì)量可控。如在說明書及權(quán)利要求當(dāng)中使用了某些詞匯來指稱特定成分或方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)可理解，不同地區(qū)可能會用不同名詞來稱呼同一個成分。本說明書及權(quán)利要求并不以名稱的差異來作為區(qū)分成分的方式。如在通篇說明書及權(quán)利要求當(dāng)中所提及的“包含”為一開放式用語，故應(yīng)解釋成“包含但不限定于”。“大致”是指在可接收的誤差范圍內(nèi)，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠在一定誤差范圍內(nèi)解決所述技術(shù)問題，基本達(dá)到所述技術(shù)效果。說明書后續(xù)描述為實施本發(fā)明的較佳實施方式，然所述描述乃以說明本發(fā)明的一般原則為目的，并非用以限定本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的保護(hù)范圍當(dāng)視所附權(quán)利要求所界定者為準(zhǔn)。還需要說明的是，術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的商品或者系統(tǒng)不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種商品或者系統(tǒng)所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個......”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者系統(tǒng)中還存在另外的相同要素。上述說明示出并描述了本發(fā)明的若干優(yōu)選實施例，但如前所述，應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明并非局限于本文所披露的形式，不應(yīng)看作是對其他實施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環(huán)境，并能夠在本文所述發(fā)明構(gòu)想范圍內(nèi)，通過上述教導(dǎo)或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)或知識進(jìn)行改動。而本領(lǐng)域人員所進(jìn)行的改動和變化不脫離本發(fā)明的精神和范圍，則都應(yīng)在本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3