本發(fā)明涉及涼味劑含量的分析方法，特別涉及一種適用于食品和日化用品中多種涼味劑含量測定的方法。

背景技術：
涼味劑是指所有能產(chǎn)生清涼效果且藥性不強的化學物質(zhì)的總稱，具有很優(yōu)雅的涼香、薄荷香、醚香、辛香和按葉樣香氣及獨特的清新涼味，對人體有良好的藥效和生理作用的一類化學物質(zhì)，現(xiàn)作為添加劑已廣泛應用于食品、日化、煙草和醫(yī)藥等領域中，如牙膏、口香糖和漱口水中，是一類十分重要的添加劑。薄荷醇是最傳統(tǒng)的涼味劑，雖具有非常明顯薄荷的味道，但其帶苦味及刺激性氣味，用量低時清涼效果不明顯，揮發(fā)性強故作用短暫和幾乎不溶于水和對眼睛有較強的刺激性等缺點，使得薄荷醇在很多產(chǎn)品中的使用受到了限制。為解決上述難題，研究者以薄荷醇作母體，對其結構進行改造，合成出多種不同類型的新型凉味劑，按其結構可以分為薄荷氧基系列、縮羰基類系列、WS系列、其他類型涼味劑。由于各種凉味劑都存在一定的缺點，使得人們在產(chǎn)品的研發(fā)中加入多種凉味劑，以尋求更為長效清涼的產(chǎn)品,以滿足獲得涼感持續(xù)時間長、感覺較為均勻的加香產(chǎn)品的要求。凉味劑作為食品添加劑，其直接影響入口，對口腔的味覺存在一定的影響作用。目前，中國沒有正式的國家標準對食品和日化用品中的凉味劑進行檢測和對其用量進行限制，也無相關文獻對其含量測定進行報道，故建立合適方法測定食品中的凉味劑已成為目前研究凉味劑的最迫切的問題?，F(xiàn)采用氣質(zhì)聯(lián)用法對食品中各種凉味劑的含量，分析不同產(chǎn)品中各凉味劑的添加類型和添加量，為指導今后建立食品中凉味劑測定的國家標準奠下基礎，也并為企業(yè)提供添加凉味劑提供添加依據(jù)。

技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有分析方法的不足，專門設計了一種普遍適用于食品及日化用品中多種凉味劑含量測定的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法。本方法選取不同基質(zhì)的樣品，通過對前處理條件優(yōu)化，采用選擇離子模式和掃描模式同時對各凉味劑進行監(jiān)測，其具有抗干擾能力強，精密度高，重現(xiàn)性好，定性準確，檢出限低等特點。為達到上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案：一種適用于食品和日化用品中多種涼味劑含量測定的方法，包括以下步驟：(1)供試品溶液的制備：取樣品萃取、離心后過濾膜，即得供試品溶液；(2)混合對照品溶液的制備：分別稱取對照品薄荷腦、異胡薄荷醇、乙酸薄荷酯、N,2,3-三甲基-2-異丙基丁酰胺(WS-23)、乳酸薄荷酯、薄荷酮甘油縮酮、薄荷酰胺(WS-3)、薄荷氧基-1,2丙二醇、乙酸(N-乙基-對薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)，加入乙醇溶解后混合定容，即得混合對照品溶液；(3)測定：稱取1μL供試品溶液和混合對照品溶液，注入氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，采用選擇離子模式進行監(jiān)測，對供試品溶液中的多味涼味劑含量進行測定；氣相色譜質(zhì)譜分析條件：色譜柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；進樣口溫度：260℃，(MSD)傳輸線溫度：280℃，柱溫：80℃維持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流進樣，進樣量1μL；載氣為氦氣，柱流量：1.0mL/min；質(zhì)譜條件：離子源(EI)溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；溶劑延遲4min；掃描方式：SIM；涼味劑定量和定性選擇離子如下表：其中帶“*”的為定量離子。優(yōu)選地，所述樣品的性狀包括固態(tài)、膏狀和液態(tài)。進一步的，步驟(1)中所述固態(tài)供試品溶液的制備包括以下步驟：取固體樣品0.2～0.5g，碾碎后置于試劑瓶中，分兩次用20mL乙醇在40℃水浴中超聲30min，合并兩次的萃取液，氮吹濃縮到10-25mL，離心后過濾膜即得供試品溶液。進一步的，步驟(1)中所述膏狀供試品溶液的制備包括以下步驟：取膏狀樣品0.2～0.5g，置于試劑瓶中，加1mL蒸餾水將樣品分散后，分兩次用20mL乙醇在40℃水浴中超聲30min，合并兩次的萃取液，氮吹濃縮到10-25mL，離心后過濾膜即得供試品溶液。進一步的，步驟(1)中所述液態(tài)供試品溶液的制備包括以下步驟：取液體樣品0.1～0.2g，用乙醇定容10-25mL后，過濾膜即得供試品溶液。本發(fā)明的方法克服了現(xiàn)有技術樣品處理方法的不足，與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明有以下優(yōu)良效果：1、從食品及日化用品的安全質(zhì)量標準的技術要求方面，多成分的含量測定是一個較優(yōu)的方法，而選擇離子模式和掃描模式共同監(jiān)測能提高多成分含量的準確度和靈敏度；基于此，本發(fā)明所述食品及日化用品中9種凉味劑成分(薄荷腦、異胡薄荷醇、乙酸薄荷酯、N,2,3.三甲基-2-異丙基丁酰胺(WS-23)、乳酸薄荷酯、薄荷酮甘油縮酮、薄荷酰胺(WS-3)、薄荷氧基-1,2丙二醇、乙酸(N-乙基-對薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5))的含量測定方法，通過了大量的實驗對供試品溶液的制備以及氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用方法的測定條件進行研究，能夠更為全面反應食品及日化用品中凉味劑的組成；2、本發(fā)明方法測定食品及日化用品中凉味劑，其應用范圍廣，不僅可應用于固體樣品的檢測，也適用于膏體及液體樣品中凉味劑的測定，可應用于多種食品及日化用品中凉味劑的檢測。附圖說明圖1為本發(fā)明的操作流程圖；圖2為9種凉味劑標準品、樣品及空白的總離子流圖。具體實施方法本發(fā)明通過以下具體實施例作進一步描述，但不限制本發(fā)明。實驗儀器、試劑及儀器工作條件1)儀器Agilent7890B+5977A氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)；Sartorius電子天平(BSA224S)(廣州市深華實驗儀器設備有限公司)；微型渦旋混合儀XW-80A(上海瀘西分析儀器有限公司)；離心機TDZ5-WS(湖南賽特湘儀)；超聲波發(fā)器儀(昆山市超聲波清洗機有限公司)。2)試劑薄荷腦(中國食品藥品檢定研究所，純度≥99％)；薄荷酰胺(WS-3)(阿拉丁，純度≥98％)；N,2,3.三甲基-2-異丙基丁酰胺(WS-23)(北京百靈威科技有限公司，純度≥98％)；乙酸(N-乙基-對薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)(北京百靈威科技有限公司，純度≥98％；異胡薄荷醇(上海安譜實驗科技股份有限公司，純度≥98％)；乙酸薄荷酯(上海安譜實驗科技股份有限公司；純度≥99％)；乳酸薄荷酯(上海安譜實驗科技股份有限公司，純度≥98％)；薄荷氧基-1,2丙二醇(上海安譜實驗科技股份有限公司，純度≥98％)；薄荷酮甘油縮酮(上海安譜實驗科技股份有限公司，純度≥98％)；甲醇、乙醇、乙腈、正己烷均為(分析純，廣州化學試劑廠)；實驗室用水為二次蒸餾水。3)色譜條件色譜條件：色譜柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；進樣口溫度：260℃，(MSD)傳輸線溫度：280℃，柱溫：80℃維持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流進樣，進樣量1μL；載氣為氦氣，柱流量：1.0mL/min。質(zhì)譜條件：離子源(EI)溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；溶劑延遲4min；掃描方式：SIM(選擇離子詳見表1)。實施例11.一種適用于食品及日化用品中多種凉味劑含量測定的方法，按照以下步驟進行：1)供試品溶液的制備：固體樣品(口香糖、薄荷糖)：取0.2～0.5g樣品，碾碎后置于30mL帶塞三角瓶中，分兩次用20mL乙醇在40℃水浴中超聲30min，合并兩次的萃取液，氮吹濃縮到10-25mL，離心后過濾膜待測。膏狀樣品(牙膏)：取0.2～0.5g樣品，置于30mL帶塞三角瓶中，加1mL蒸餾水將樣品分散后，分兩次用20mL乙醇在40℃水浴中超聲30min，合并兩次的萃取液，氮吹濃縮到10-25mL，離心后過濾膜待測。液體樣品(漱口水)：取0.1～0.2g樣品，用乙醇定容10～25mL后，過濾膜待測。2)多種凉味劑混合標準品溶液的制備：分別精密稱取對照品薄荷腦29.29mg、異胡薄荷醇22.40mg、乙酸薄荷酯22.40mg、N,2,3-三甲基-2-異丙基丁酰胺(WS-23)25.16mg、乳酸薄荷酯19.18mg、薄荷酮甘油縮酮26.08mg、薄荷酰胺(WS-3)24.61mg、薄荷氧基-1,2丙二醇28.82mg、乙酸(N-乙基-對薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)25.48，加入乙醇溶解后混合定容至50mL，即得混合對照品溶液儲備液。分別取混合對照溶液儲備液25.0mL、10.0mL、5.00mL、1.00mL、0.250mL、0.025mL于100mL容量瓶中，配制濃度范圍為0.25～250μg.mL-1標準曲線溶液。3)測定：分別精密吸取1μL供試品溶液和混合對照品溶液，注入氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，采用選擇離子模式進行監(jiān)測。4)氣相色譜條件：色譜柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；進樣口溫度：260℃，(MSD)傳輸線溫度：280℃，柱溫：80℃維持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流進樣，進樣量1μL；載氣為氦氣，柱流量：1.0mL/min。質(zhì)譜條件：離子源(EI)溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；溶劑延遲4min；掃描方式：SIM，選擇離子詳見表1：表1凉味劑的選擇離子其中帶“*”的為定量離子。在本發(fā)明的實施例中，固體樣品為口香糖和薄荷糖，膏狀樣品為牙膏，液體樣品為漱口水，本發(fā)明對測定樣品的保護范圍不限于實施例中指出的這幾種樣品，本領域技術人員可以想到的樣品均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。2.線性關系考察將混合對照品溶液稀釋至一定濃度系列的線性溶液，分別進樣，取其峰面積(Y)為縱坐標，濃度(X)為橫坐標，進行回歸分析，所得回歸方程見表2，表2為9種涼味劑化合物的回歸方程、相關系數(shù)、線性范圍、檢出限及定量限。表29種化合物的回歸方程、相關系數(shù)、線性范圍、檢出限及定量限由表2可以得出：本發(fā)明方法的檢出限低：采用標準添加法進行測定，以定量離子信噪比(S/N)≥3確定樣品的檢出限(LOD)，9種涼味劑的LOD為0.0075～0.26μg/g。3.樣品的涼味劑測定結果按上述測定方法及測定條件進行涼味劑的測定實驗，不同樣品的檢測結果見表3：表3樣品樣品測定結果其中：“ND”代表該項目未檢出。實施例2重復性和加樣回收率實驗：向薄荷糖、牙膏、漱口水樣品中添加3個濃度水平的9種化合物混合標準溶液，按實施例1處理方法及測定條件進行回收率實驗，每個添加水平做3個平行，結果見表4，表4為加樣回收率試驗結果。表4加樣回收率試驗結果由表4可以得出：各化合物的平均回收率為82.8％～103.5％，相對標準偏差(RSD)為0.7％～3.7％，本發(fā)明方法的重復性好和加標回收率滿足分析測定的要求。上列詳細說明是針對本發(fā)明可行實施例的具體說明，該實施例并非用以限制本發(fā)明的專利范圍，凡未脫離本發(fā)明所為的等效實施或變更，均應包含于本案的專利保護范圍中。