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用于測(cè)定化學(xué)狀態(tài)的系統(tǒng)和方法與流程

文檔序號(hào):11734673閱讀:268來源:國(guó)知局
用于測(cè)定化學(xué)狀態(tài)的系統(tǒng)和方法與流程
用于測(cè)定化學(xué)狀態(tài)的系統(tǒng)和方法相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求2012年12月17日提交的Kasdan等人的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)61/737,854,2012年12月17日提交的Kasdan等人的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)61/737,856,以及2012年12月17日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)No.13/716,246的優(yōu)先權(quán),這些文獻(xiàn)的內(nèi)容以引用方式并入本文。技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明總體涉及檢測(cè)生物狀況的儀器和方法,更具體而言本發(fā)明涉及用于檢測(cè)少的流體樣品中的生物狀況的方法和儀器。

背景技術(shù):
存在著多種難以診斷的醫(yī)學(xué)狀況。通常,醫(yī)生的診斷是基于該醫(yī)生所觀察的患者癥狀的結(jié)合。這有時(shí)會(huì)導(dǎo)致誤診。此外,通?;颊邔?duì)治療(藥品或其他模式)產(chǎn)生應(yīng)答后,醫(yī)生才觀察到。許多實(shí)驗(yàn)室測(cè)試是在肌體樣本或流體上在診斷平臺(tái)中實(shí)施的,從而測(cè)定患者的生物狀況。然而,這些測(cè)試在診斷實(shí)驗(yàn)室中是離線實(shí)施的。通常,實(shí)驗(yàn)室服務(wù)僅在一天中單一的8小時(shí)轉(zhuǎn)換中提供,并往往是勞動(dòng)密集的。本領(lǐng)域中一些現(xiàn)有技術(shù)的公開尤其包括Davis等人的US8,116,984,其公開了定量白細(xì)胞中CD64和CD163表達(dá)的方法,具體而言,公開了與流式細(xì)胞儀一起使用的試劑盒,其包含定量熒光微珠標(biāo)準(zhǔn)品的懸液、定向于CD64和CD163的熒光標(biāo)記抗體、以及分析軟件。該軟件用于取得關(guān)于微珠懸液及得自流式細(xì)胞儀的熒光標(biāo)記抗體的信息;以及分析數(shù)據(jù),對(duì)曲線進(jìn)行平滑處理,計(jì)算新參數(shù),提供質(zhì)控測(cè)量和通知檢驗(yàn)系統(tǒng)的期限。在微流體領(lǐng)域中已經(jīng)公開了多個(gè)研發(fā),例如:US2006215155A,其描述了包含3個(gè)分層排布的平板(3-5)的流動(dòng)池,其中由撓性材料組成的中間平板(4)插在由更堅(jiān)硬的材料組成的平板(3,5)之間,并且至少一個(gè)平板包含用于接收流體的至少一個(gè)凹陷(15,17),該平板與分層排布的另一個(gè)平板(3,5)毗鄰。所述的凹陷主要為微通道和反應(yīng)室。根據(jù)該發(fā)明,所述的平板通過與該平板平面平行排布的、與所述的凹陷保持一定距離(壓緊中間的平板)的方式相互連接。WO12019599A描述了用于運(yùn)輸流體的微流體裝置,特別是微型泵或微型閥。根據(jù)該發(fā)明的裝置可表征為:膜(2,3),該膜以膜表面彼此面對(duì)的方式而彼此相靠,并且以如下方式彼此連接:在膜(2,3)之間形成的運(yùn)輸通道(19);以及傾斜儀器,其用于通過在垂直于膜表面的方向上共同傾斜彼此相靠的膜(2,3)而形成運(yùn)輸通道(19),其中在傾斜方向上,背膜(2)的傾斜表面區(qū)域(12)位于傾斜方向上前膜(3)的傾斜表面區(qū)域(14)內(nèi),其中所述的傾斜方向是由膜(2,3)之間的連接(15)來定義的。US2012187117A公開了流體貯液器,特別是整合至小型化流動(dòng)池內(nèi)的流體貯液器,其包含貯液器空間,其通過2個(gè)實(shí)體(6,7)封閉,該2個(gè)實(shí)體以流體密閉的方式彼此相靠。根據(jù)該發(fā)明,除去儲(chǔ)存的液體(9)以外,充滿剩余貯液器空間的固體填充體(12)排布于貯液器空間中。被儲(chǔ)存的液體充滿的一部分貯液器空間優(yōu)選地主要由2個(gè)實(shí)體(6,7)中的一者和固體填充體(12)來限定。用于現(xiàn)有技術(shù)的診斷檢驗(yàn)的典型周轉(zhuǎn)時(shí)間為30-120分鐘。通常,浪費(fèi)在等待實(shí)驗(yàn)室結(jié)果中的時(shí)間可以導(dǎo)致患者進(jìn)一步惡化,有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致死亡。在一些情況下,醫(yī)生必須在不具有實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的情況下行動(dòng)。這可以導(dǎo)致為患者提供了錯(cuò)誤的治療。因此需要提供快速的檢驗(yàn)以解救生命并為患者提供快速正確的治療。盡管存在上文所述的發(fā)明,但是提供用于檢測(cè)和診斷患者生物狀況的改進(jìn)的儀器和方法仍是未被滿足的需要。存在著許多其他的診斷測(cè)試(例如對(duì)水樣品)以檢測(cè)目前具有長(zhǎng)的周轉(zhuǎn)時(shí)間的毒素和污染物。提供能夠用于測(cè)定化學(xué)狀態(tài)的定量和/或定性測(cè)試的系統(tǒng)、試劑盒和方法仍是未被滿足的需要。發(fā)明概述本發(fā)明的一些方面的目的是提供了用于檢測(cè)樣品的化學(xué)狀態(tài)的改進(jìn)的儀器和方法。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中,提供了用于檢測(cè)和診斷患者的生物狀況的改進(jìn)的方法、系統(tǒng)、儀器和試劑盒。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中,描述了方法和系統(tǒng),其用于快速檢測(cè)由患者得到的樣品中的生物部分。在本發(fā)明的另一些實(shí)施方案中,公開了方法和試劑盒,其用于提供檢測(cè)由患者得到的少的流體樣品中的生物部分。本發(fā)明的一些方面的目的是提供了用于檢測(cè)少的流體樣品中的化學(xué)個(gè)體的改進(jìn)的儀器和方法。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中,提供了用于檢測(cè)化學(xué)個(gè)體的改進(jìn)的快速方法、儀器和試劑盒。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中,提供了用于檢測(cè)生物個(gè)體的改進(jìn)的快速方法、儀器和試劑盒。在本發(fā)明的其他的實(shí)施方案中,公開了方法和試劑盒,其用于提供檢測(cè)少的流體樣品中的生物和/或化學(xué)部分。在本發(fā)明的其他的實(shí)施方案中,公開了微流體方法、儀器和試劑盒,其用于提供檢測(cè)少的流體樣品中的生物和/或化學(xué)部分。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了一種自容系統(tǒng),其用于實(shí)施測(cè)定化學(xué)狀態(tài)的檢驗(yàn),所述的細(xì)胞包括:a)其中用于實(shí)施所述的檢驗(yàn)的固定盒;b)適用于與樣品反應(yīng)的至少一種試劑;以及c)至少一種報(bào)告功能,適用于報(bào)告所述的至少一種試劑與所述的樣品的反應(yīng),從而報(bào)告檢驗(yàn)的結(jié)果;其中所述的至少一種試劑、所述的樣品和所述的至少一種報(bào)告功能都包含在所述的盒中。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的檢驗(yàn)為流式細(xì)胞儀檢驗(yàn)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的化學(xué)狀態(tài)為生物化學(xué)狀態(tài)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物化學(xué)狀態(tài)表明了生物狀況。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的樣品為生物樣品。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物樣品為肌體樣品。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的肌體樣品選自血液,血清,血漿,尿,唾液,腦脊液(CSF),漿液,腹膜液和滑液血液,尿,血漿,血清和唾液。重要的是,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的盒是無閥的。注意,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的盒為一次性微流體盒。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種試劑包含以下至少一種:d)至少一種靶向抗體;e)至少一種陽(yáng)性對(duì)照識(shí)別抗體;以及f)至少一種陰性對(duì)照識(shí)別檢驗(yàn)部分。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種試劑包含至少一種參照組合物,其包含以下至少一種:g)靶向信號(hào)參照組合物;以及h)參照識(shí)別器組合物。因此,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,提供了一種方法,其用于實(shí)施測(cè)定自容固定盒中化學(xué)狀態(tài)的檢驗(yàn),所述的方法包括:i)將樣品引入至所述的盒中;j)使至少一種試劑與所述的樣品反應(yīng);以及k)檢測(cè)與至少一種報(bào)告功能有關(guān)的信號(hào),所述的至少一種報(bào)告功能適用于報(bào)告所述的至少一種試劑與所述的樣品的反應(yīng),由此測(cè)定化學(xué)狀態(tài)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的方法進(jìn)一步包括形成至少一種產(chǎn)物,并檢測(cè)監(jiān)測(cè)與該產(chǎn)物有關(guān)的信號(hào)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的檢驗(yàn)為流式細(xì)胞儀檢驗(yàn)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的化學(xué)狀態(tài)為生物化學(xué)狀態(tài)。注意,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物化學(xué)狀態(tài)表明生物狀況。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的樣品為生物樣品。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物樣品為肌體樣品。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的肌體樣品選自血液,血清,血漿,尿,唾液,腦脊液(CSF),漿液,腹膜液和滑液。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種試劑包含:l)細(xì)胞表面標(biāo)志物;m)細(xì)胞染色;n)與固體載體結(jié)合的試劑;o)化學(xué)指示劑;以及p)生物細(xì)胞指示劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的細(xì)胞表面標(biāo)志物選自CD64,CD4,CD8,干細(xì)胞指示劑,微小殘留病灶指示劑和淋巴細(xì)胞亞型指示劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的細(xì)胞染色選自白細(xì)胞分類指示劑、細(xì)胞凋亡指示劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,與固體載體結(jié)合的試劑選自固定化酶、固定化底物、血漿蛋白珠、抗體珠、抗原珠和ELISA檢驗(yàn)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的化學(xué)指示劑選自顏色指示劑,濁度指示劑,pH指示劑,吸附指示劑,放射指示劑和化學(xué)反應(yīng)指示劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物細(xì)胞指示劑選自細(xì)胞周期階段指示劑,細(xì)胞增殖指示劑,細(xì)胞因子指示劑,代謝指示劑和細(xì)胞凋亡指示劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種試劑包含至少2種試劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少2種試劑包含以下至少一種:q)細(xì)胞表面標(biāo)志物和細(xì)胞元素染色;r)細(xì)胞表面標(biāo)志物和血漿蛋白珠檢驗(yàn);s)細(xì)胞表面標(biāo)志物和溶液改變標(biāo)志物;t)細(xì)胞元素染色和血漿蛋白珠檢驗(yàn);以及u)細(xì)胞元素染色和溶液改變標(biāo)志物。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物狀況選自血液疾病,例如白血病,血小板減少癥免疫系統(tǒng)疾病,局部感染,泌尿系統(tǒng)紊亂,自身免疫病和膿毒病。因此,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,提供了一種方法,其用于在固定盒中形成化學(xué)反應(yīng),所述的方法包括:v)將至少一種組合物儲(chǔ)存在所述的盒中;以及w)啟動(dòng)至少一個(gè)可充氣的室,從而向所述的至少一種組合物提供至少一種壓力,由此誘導(dǎo)化學(xué)反應(yīng)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的盒為無閥盒。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種組合物包含至少2種組合物。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種壓力為正壓力。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種壓力為負(fù)壓力。重要的是,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種壓力包括至少一種正壓力和至少一種負(fù)壓力。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種正壓力和所述的至少一種負(fù)壓力包括交替的正壓力和負(fù)壓力。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種可充氣的室包括2個(gè)可充氣的室。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的化學(xué)反應(yīng)包含至少一種中間體。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種壓力繼續(xù)地提供至至少一種組合物的數(shù)種組合。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的方法進(jìn)一步包括在啟動(dòng)步驟之前將樣本引入至所述的盒中。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的樣本為肌體樣品。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的化學(xué)反應(yīng)提供了肌體樣品的流式細(xì)胞儀檢驗(yàn)結(jié)果。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的化學(xué)反應(yīng)用于測(cè)定哺乳動(dòng)物受試對(duì)象的生物狀況。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的方法進(jìn)一步包括:1.將由受試對(duì)象得到的樣本在所述的盒中溫育預(yù)定的時(shí)間段;以及2.接收對(duì)至少一種報(bào)告元件產(chǎn)生應(yīng)答的指示,由此提供受試對(duì)象中生物狀況的指示。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物狀況選自血液疾病,例如白血病,血小板減少癥免疫系統(tǒng)疾病,局部感染,泌尿系統(tǒng)紊亂,自身免疫病和膿毒病。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,設(shè)置于所述的盒中的至少一種組合物包含膿毒病生物標(biāo)志物。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物標(biāo)志物包括CD64和CD163的至少一種。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的指示是定量的。重要的是,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的樣品的體積小于200微升(μL)。此外注意,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的方法是在20分鐘內(nèi)完成的。在一些情況下,所述的方法是在15分鐘、10分鐘或5分鐘內(nèi)完成的。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了一種方法,其用于測(cè)定哺乳動(dòng)物受試對(duì)象的生物狀況,所述的方法包括:a)當(dāng)受試對(duì)象具有所述的生物狀況時(shí),將由受試對(duì)象得到的樣本與至少一種組合物在本文所述的固定盒中溫育預(yù)定的時(shí)間段,從而形成至少一種反應(yīng)產(chǎn)物;以及b)接收至少一種反應(yīng)產(chǎn)物的指示,由此提供受試對(duì)象中生物狀況的指示,其中所述的至少一種反應(yīng)產(chǎn)物是對(duì)所述的方法中的至少一種報(bào)告元件產(chǎn)生的應(yīng)答。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了一種用于檢測(cè)化學(xué)個(gè)體的微流體試劑盒,該試劑盒包含:a)用于接收樣品以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物,其中所述的檢測(cè)器部分適用于與所述的樣品反應(yīng);以及c)適用于提供反應(yīng)產(chǎn)物的指示的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體存在的指示。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的試劑盒進(jìn)一步包含:d)使用該試劑盒的說明書。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于評(píng)價(jià)患者的生物狀況的試劑盒,該試劑盒包含:a)用于接收生物樣品以及用于將所述的樣本與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)當(dāng)所述的患者具有所述的生物狀況時(shí),包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物,其中所述的檢測(cè)器部分適用于與所述的樣本反應(yīng);以及c)適用于提供反應(yīng)產(chǎn)物的指示的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的指示。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的試劑盒進(jìn)一步包含:使用該試劑盒的說明書。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性元件為一次性盒。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性盒為一次性微流體盒。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含以下元件的至少一種:a)貯液器;b)泵;c)導(dǎo)管;d)小型化流動(dòng)池;e)運(yùn)輸通道;f)微流體元件;g)壓縮氣體保持元件;h)壓縮氣體釋放元件;i)噴嘴元件;j)混合元件;k)風(fēng)箱元件;l)適用于根據(jù)特定的順序來啟動(dòng)所述的元件的軟件;以及m)根據(jù)特定的順序來啟動(dòng)所述的元件的硬件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少2種所述的元件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少3種所述的元件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少4種所述的元件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少5種所述的元件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少10種所述的元件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少20種所述的元件。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性微流體盒包含至少30種所述的元件。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在1個(gè)小時(shí)內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在30分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在15分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在10分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在5分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在1分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在30秒內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在10秒內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在1秒內(nèi)提供快速指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施快速生物檢驗(yàn)的微流體檢驗(yàn)試劑盒,該試劑盒包含:a)包含反應(yīng)物的一次性元件,該一次性元件適用于接收包含生物個(gè)體的樣品以及將所述的反應(yīng)物與所述的生物個(gè)體結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及b)適用于提供快速指示所述的反應(yīng)物消失的至少一種報(bào)告元件,由此提供生物個(gè)體的快速檢驗(yàn)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施生物個(gè)體的快速檢驗(yàn)的微流體檢驗(yàn)試劑盒,該試劑盒包含:a)包含反應(yīng)物的一次性元件,該一次性元件適用于接收包含生物個(gè)體的樣品以及將所述的反應(yīng)物與所述的生物個(gè)體結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及b)適用于提供快速指示所述的反應(yīng)物出現(xiàn)的至少一種報(bào)告元件,由此提供生物個(gè)體的快速檢驗(yàn)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于評(píng)價(jià)生物狀況的組合物,該組合物包含:x)包含以下至少一種的樣品組合物:a)包含靶向部分的肌體樣本;b)陽(yáng)性對(duì)照部分;以及c)陰性對(duì)照部分;y)包含以下至少一種的檢測(cè)組合物:a)至少一個(gè)靶向抗體;b)至少一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照識(shí)別抗體;以及c)至少一個(gè)陰性對(duì)照識(shí)別檢測(cè)部分或特征;以及z)包含以下至少一種的至少一種參照組合物;i.靶向信號(hào)參照組合物;以及ii.參照識(shí)別器組合物。因此,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,提供了用于評(píng)價(jià)生物狀況的組合物,該組合物包含:aa)包含以下至少一種的樣品組合物:i.包含靶向部分的肌體樣本;ii.陽(yáng)性對(duì)照部分;以及iii.陰性對(duì)照部分;ab)包含以下至少一種的抗體組合物:i.至少一種靶向抗體(CD64抗體);ii.至少一種陽(yáng)性對(duì)照識(shí)別抗體(CD163);以及iii.至少一種陰性對(duì)照識(shí)別抗體或特征;以及ac)包含以下至少一種的至少一種參照組合物:i.靶向信號(hào)參照組合物;以及ii.參照識(shí)別器組合物。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的組合物進(jìn)一步包含至少一種調(diào)節(jié)部分,其包含:a)至少一種溶解試劑;以及b)至少一種稀釋劑。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物狀況選自血液疾病,例如白血病,血小板減少癥免疫系統(tǒng)疾病,局部感染,泌尿系統(tǒng)紊亂,自身免疫病和膿毒病。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,肌體樣本選自血液,血清,血漿,尿,唾液,腦脊液(CSF),漿液,腹膜液和滑液。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,所述的靶向部分包括嗜中性粒細(xì)胞上的CD64表面抗原。此外,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,所述的陽(yáng)性對(duì)照部分包含單核細(xì)胞,所述的陰性對(duì)照包含淋巴細(xì)胞。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的靶向部分為嗜中性粒細(xì)胞上的CD64,所述的陽(yáng)性對(duì)照部分包含單核細(xì)胞上的CD64的表達(dá),所述的陰性對(duì)照部分包含不具有CD64表達(dá)的淋巴細(xì)胞。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的靶向指示劑與至少一個(gè)靶向抗體上的信號(hào)部分結(jié)合。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的至少一種參照組合物包含珠。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的珠包含聚苯乙烯微珠。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的靶向抗體參照組合物包含第一熒光信號(hào),所述的參照識(shí)別器組合物包含第二熒光信號(hào)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的第一熒光信號(hào)包含F(xiàn)ITC,所述的第二熒光信號(hào)包含StarfireRedfluor。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了識(shí)別樣品中生物標(biāo)志物的方法,該方法包括:ad)將所述的樣品與熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合所述的生物標(biāo)志物;ae)由至少一部分所述的標(biāo)記樣品中檢測(cè)第一熒光信號(hào);af)由熒光標(biāo)記的顆粒的群體中檢測(cè)第二熒光信號(hào),其中所述的群體包含經(jīng)過固定時(shí)間后的已知的熒光強(qiáng)度;以及ag)將第一熒光信號(hào)對(duì)第二熒光信號(hào)歸一化,由此定量生物標(biāo)志物,其中所述的歸一化包括使用包含軟件的裝置,其中所述的軟件能夠比較第一和第二熒光信號(hào)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物標(biāo)志物為膿毒病生物標(biāo)志物。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的生物標(biāo)志物為CD64或CD163。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的樣品為血液樣品。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,所述的結(jié)合部分的熒光標(biāo)記和所述的顆粒的熒光標(biāo)記是相同的熒光標(biāo)記。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的結(jié)合部分為抗體。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的軟件能夠識(shí)別特定的多種熒光標(biāo)記的顆粒。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的單獨(dú)的熒光信號(hào)包含至少一個(gè)第一熒光信號(hào)和至少一個(gè)第二熒光信號(hào)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的熒光標(biāo)記的結(jié)合部分靶向樣品中的第一細(xì)胞群體和第二細(xì)胞群體。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,檢測(cè)結(jié)合部分與第二細(xì)胞群體的結(jié)合為樣品提供了內(nèi)部陽(yáng)性對(duì)照。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的結(jié)合部分為抗CD64抗體,所述的第一細(xì)胞群體包含嗜中性粒細(xì)胞白細(xì)胞。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的第二細(xì)胞群體包含單核細(xì)胞。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的方法進(jìn)一步包括測(cè)定樣品中至少一個(gè)細(xì)胞群體存在情況的步驟,從而為樣品提供了內(nèi)部陰性對(duì)照,其中所述的樣品未與所述的結(jié)合部分結(jié)合。因此,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,提供了用于評(píng)價(jià)生物狀況的組合物,該組合物包含:ah)包含以下至少一種的樣品:i.包含靶向部分的肌體樣本;ii.陽(yáng)性對(duì)照部分;以及iii.陰性對(duì)照部分;ai)包含以下至少一種的抗體組合物:i.至少一種靶向抗體(CD64抗體);ii.至少一種陽(yáng)性對(duì)照識(shí)別抗體(CD163);以及iii.至少一種陰性對(duì)照識(shí)別抗體或特征(分散);以及aj)包含以下至少一種的至少一種參照組合物(珠):i.靶向抗體參照組合物;以及ii.參照識(shí)別器組合物。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,所述的組合物進(jìn)一步包含至少一個(gè)調(diào)節(jié)部分,其包含:i.至少一種溶解試劑;以及ii.至少一種稀釋劑。因此,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,提供了測(cè)定受試對(duì)象中膿毒病的存在或缺乏情況的方法,該方法包括:i.將由所述的受試對(duì)象得到的血液樣品與對(duì)膿毒病標(biāo)志物具有特異性的熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的血液樣品的體積為50μL或更少;以及ii.檢測(cè)所述的樣品中結(jié)合部分的存在、缺乏或水平,從而測(cè)定所述的受試對(duì)象中膿毒病的存在或缺乏情況。因此,根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,提供了定量樣品中生物標(biāo)志物的方法,該方法包括:a)將所述的樣品與熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合所述的生物標(biāo)志物;b)由至少一部分所述的標(biāo)記樣品中檢測(cè)第一熒光信號(hào);c)由熒光標(biāo)記的顆粒的群體中檢測(cè)第二熒光信號(hào),其中所述的群體包含經(jīng)過固定時(shí)間后的已知的熒光強(qiáng)度;以及d)將第一熒光信號(hào)對(duì)第二熒光信號(hào)歸一化,由此定量生物標(biāo)志物,其中所述的歸一化包括使用包含軟件的裝置,其中所述的軟件能夠比較第一和第二熒光信號(hào)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了定量樣品中第二生物標(biāo)志物的方法,該方法包括:ak)將所述的樣品與第一熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的第一熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合第一生物標(biāo)志物;al)將所述的樣品與第二熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的第二熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合第二生物標(biāo)志物;am)由至少一部分所述的標(biāo)記樣品中檢測(cè)第一熒光信號(hào);an)由熒光標(biāo)記的顆粒的群體中檢測(cè)第二熒光信號(hào),其中所述的群體包含經(jīng)過固定時(shí)間后的已知的熒光強(qiáng)度;以及ao)將第一熒光信號(hào)對(duì)第二熒光信號(hào)歸一化,由此定量第二生物標(biāo)志物,其中所述的歸一化包括使用包含軟件的裝置,其中所述的軟件能夠比較第一和第二熒光信號(hào)。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的樣品可以是液體,根據(jù)其他的實(shí)施方案,所述的樣品可以是膠體或懸液。根據(jù)其他的實(shí)施方案,所述的樣品可以是固體,例如粉末或晶體形式。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的微流體試劑盒,該試劑盒包含:a)用于接收樣品以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與所述的樣品反應(yīng)從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)適用于提供所述的反應(yīng)產(chǎn)物的指示的至少一種報(bào)告元件。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的微流體試劑盒,該試劑盒包含:a)用于接收樣品以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與所述的樣品反應(yīng)從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)適用于指示所述的樣品中反應(yīng)物的消失情況的至少一種報(bào)告元件,從而提供反應(yīng)產(chǎn)物存在情況的指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的微流體試劑盒,該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的第一反應(yīng)物與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng);以及c)適用于指示所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種報(bào)告元件,從而提供反應(yīng)產(chǎn)物存在情況的指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng);以及c)適用于快速指示所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物的一次性元件;b)適用于與反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng)的至少一個(gè)檢測(cè)器部分;以及c)適用于快速指示所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物的一次性元件;b)適用于快速指示所述的反應(yīng)產(chǎn)物的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物的一次性元件;以及b)適用于快速指示所述的化學(xué)個(gè)體的消失情況的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在1個(gè)小時(shí)內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在30分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在15分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在10分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在5分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在1分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在30秒內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在10秒內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體試劑盒被構(gòu)造成能夠在1秒內(nèi)提供快速指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物的一次性元件;以及b)適用于快速指示所述的反應(yīng)產(chǎn)物的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合從而形成反應(yīng)產(chǎn)物的一次性元件;以及b)適用于快速指示所述的化學(xué)個(gè)體的消失情況的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于檢驗(yàn)化學(xué)個(gè)體的微流體檢驗(yàn)試劑盒,其該試劑盒包含:a)用于接收第一反應(yīng)物以及用于將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合的一次性元件;b)包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與所述的樣品反應(yīng)從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)適用于提供反應(yīng)產(chǎn)物的指示的至少一種報(bào)告元件,從而提供化學(xué)個(gè)體的檢驗(yàn)。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的試劑盒進(jìn)一步包含:d)使用該試劑盒的說明書。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性元件為一次性盒。此外,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,所述的一次性盒為一次性微流體盒。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了定量樣品中生物標(biāo)志物的方法,該方法包括:a)將所述的樣品與熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合所述的生物標(biāo)志物;b)由至少一部分所述的標(biāo)記樣品中檢測(cè)第一熒光信號(hào);c)由熒光標(biāo)記的顆粒的群體中檢測(cè)第二熒光信號(hào),其中所述的群體包含經(jīng)過固定時(shí)間后的已知的熒光強(qiáng)度;以及d)將第一熒光信號(hào)對(duì)第二熒光信號(hào)歸一化,由此定量生物標(biāo)志物,其中所述的歸一化包括使用包含軟件的裝置,其中所述的軟件能夠比較第一和第二熒光信號(hào)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了定量樣品中第二生物標(biāo)志物的方法,該方法包括:ap)將所述的樣品與第一熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的第一熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合第一生物標(biāo)志物;aq)將所述的樣品與第二熒光標(biāo)記的結(jié)合部分相接觸,其中所述的第二熒光標(biāo)記的結(jié)合部分特異性地結(jié)合第二生物標(biāo)志物;ar)由至少一部分所述的標(biāo)記樣品中檢測(cè)第一熒光信號(hào);as)由熒光標(biāo)記的顆粒的群體中檢測(cè)第二熒光信號(hào),其中所述的群體包含經(jīng)過固定時(shí)間后的已知的熒光強(qiáng)度;以及at)將第一熒光信號(hào)對(duì)第二熒光信號(hào)歸一化,由此定量第二生物標(biāo)志物,其中所述的歸一化包括使用包含軟件的裝置,其中所述的軟件能夠比較第一和第二熒光信號(hào)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了在樣品上實(shí)施微流體化學(xué)反應(yīng)的方法,該方法包括:a)將所述的樣品與包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物結(jié)合,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與所述的樣品反應(yīng),從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及b)檢測(cè)所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分,從而提供所述的反應(yīng)產(chǎn)物的指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了在微流體規(guī)模上實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的方法,該方法包括:a)將樣品接收至微流體元件中;b)將所述的樣品與包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物結(jié)合,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分設(shè)置于所述的微流體元件中,以及c)檢測(cè)所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了在微流體規(guī)模上實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的方法,該方法包括:a)使樣品與設(shè)置于微流體元件中的至少一種組合物反應(yīng),從而在所述的微流體元件中形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及b)檢測(cè)至少一個(gè)檢測(cè)器部分,該檢測(cè)器部分適用于與所述的樣品反應(yīng)從而提供所述的反應(yīng)產(chǎn)物的出現(xiàn)情況的指示,由此提供化學(xué)反應(yīng)的指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的方法,該方法包括:a)將第一反應(yīng)物接收于微流體一次性元件中;b)將所述的第一反應(yīng)物與包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物結(jié)合,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物,所述的檢測(cè)器部分適用于與反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng);以及c)提供所述的化學(xué)反應(yīng)的指示,其中所述的化學(xué)反應(yīng)是對(duì)所述的檢測(cè)器部分產(chǎn)生的應(yīng)答。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了實(shí)施化學(xué)反應(yīng)的方法,該方法包括:a)將第一反應(yīng)物接收于微流體一次性元件中;b)將所述的第一反應(yīng)物與包含至少一個(gè)檢測(cè)器部分的至少一種組合物結(jié)合,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物,所述的檢測(cè)器部分適用于與第一反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng);以及c)提供所述的化學(xué)反應(yīng)的指示,其中所述的化學(xué)反應(yīng)是對(duì)所述的檢測(cè)器部分產(chǎn)生的應(yīng)答。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的方法,該方法包括:a)將包含第一反應(yīng)物的樣品接收于一次性元件中;b)將所述的樣品與設(shè)置于所述的一次性元件中的組合物反應(yīng),從而形成至少一種反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)所述的第一反應(yīng)物的所述的消失情況,從而提供所述的化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè),其中所述的第一反應(yīng)物是對(duì)設(shè)置于所述的一次性元件中的報(bào)告元件的啟動(dòng)產(chǎn)生的應(yīng)答。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的方法,該方法包括:a)將所述的包含化學(xué)個(gè)體的樣品接收于一次性元件中;b)將至少一部分所述的樣品與設(shè)置于所述的一次性元件中的至少一種組合物反應(yīng),從而形成至少一種反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)所述的至少一種組合物中的至少一個(gè)檢測(cè)器部分,從而檢測(cè)所述的化學(xué)個(gè)體,其中所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分是對(duì)所述的反應(yīng)步驟產(chǎn)生的應(yīng)答。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的方法,該方法包括:a)將包含第一反應(yīng)物的樣品接收于一次性元件中;b)將所述的樣品與設(shè)置于所述的一次性元件中的至少一種組合物反應(yīng),從而形成至少一種反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)設(shè)置于所述的一次性元件中的至少一個(gè)檢測(cè)器部分,所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分適用于與反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng),從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的方法,該方法包括:a)將樣品中的第一反應(yīng)物接收于一次性元件中;b)將至少一種組合物與至少一部分所述的樣品反應(yīng),從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)設(shè)置于所述的一次性元件中的至少一種報(bào)告元件,所述的至少一種報(bào)告元件適用于提供所述的反應(yīng)產(chǎn)物的快速指示,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的方法,該方法包括:a)將樣品中的第一反應(yīng)物接收于微流體元件中;b)將至少一部分所述的樣品與設(shè)置于所述的微流體元件中的至少一種組合物反應(yīng),從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)設(shè)置于所述的微流體元件中的至少一種報(bào)告元件,所述的至少一種報(bào)告元件適用于快速指示所述的化學(xué)個(gè)體的消失情況,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在1個(gè)小時(shí)內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在30分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在15分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在10分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在5分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在1分鐘內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在30秒內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在10秒內(nèi)提供快速指示。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案,微流體方法被構(gòu)造成能夠在1秒內(nèi)提供快速指示。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施生物個(gè)體的快速檢測(cè)的方法,該方法包括:a)將包含生物個(gè)體的樣品接收于包含反應(yīng)物的一次性元件中;b)將所述的樣品與所述的反應(yīng)物反應(yīng),從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)所述的一次性元件中的至少一種報(bào)告元件,以便快速指示所述的反應(yīng)物的消失情況,從而提供生物個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施生物個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體方法,該方法包括:a)將包含生物個(gè)體的樣品接收于包含反應(yīng)物的一次性元件中;b)將所述的樣品與所述的反應(yīng)物反應(yīng),從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)所述的一次性元件中的至少一種報(bào)告元件,以便快速指示所述的反應(yīng)物的消失情況,從而提供生物個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體方法,該方法包括:a)將包含第一反應(yīng)物的樣品接收于一次性元件中;b)將至少一部分所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合于所述的一次性元件中,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;c)將設(shè)置于所述的一次性元件中的至少一種檢測(cè)器部分與所述的反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng);以及d)檢測(cè)所述的至少一個(gè)檢測(cè)器部分,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體方法,該方法包括:a)將包含第一反應(yīng)物的樣品接收于一次性元件中;b)將所述的樣品與至少一種組合物結(jié)合,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)至少一種報(bào)告元件,所述的至少一種報(bào)告元件適用于所述的反應(yīng)產(chǎn)物的快速指示,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。因此,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,提供了用于實(shí)施化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)的微流體方法,該方法包括:a)將包含第一反應(yīng)物的樣品接收于一次性元件中;b)將所述的樣品與設(shè)置于所述的一次性元件中的至少一種組合物結(jié)合,從而形成反應(yīng)產(chǎn)物;以及c)檢測(cè)至少一種報(bào)告元件,所述的至少一種報(bào)告元件適用于快速指示所述的化學(xué)個(gè)體的消失情況,從而提供化學(xué)個(gè)體的快速檢測(cè)。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的樣品可以是液體,根據(jù)其他的實(shí)施方案,所述的樣品可以為膠體或懸液。根據(jù)其他的實(shí)施方案,所述的樣品可以為固體,例如粉末或晶體形式。通過以下本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述,連同附圖將會(huì)更全面地理解本發(fā)明。附圖簡(jiǎn)述現(xiàn)在,參照以下示例性附圖,連同某些優(yōu)選的實(shí)施方案來描述本發(fā)明,這樣可以更全面地理解本發(fā)明?,F(xiàn)在詳細(xì)地特定地參照附圖,強(qiáng)調(diào)所示的特點(diǎn)為舉例的方式并且僅是為了示例性地討論本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方案,并且是為了提供認(rèn)為哪些方面最有用且容易地理解本發(fā)明的原理和概念方面的描述而列出的。就此而言,并未試圖更詳細(xì)地顯示本發(fā)明的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié),只示出基礎(chǔ)理解本發(fā)明所必需的細(xì)節(jié),這些描述以及附圖對(duì)于本領(lǐng)域的那些技術(shù)人員而言顯而易見的是本發(fā)明的多種形式可以如何體現(xiàn)在實(shí)踐中。附圖中:圖1為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,顯示用于檢測(cè)生物狀況的儀器的簡(jiǎn)化示意圖;圖2為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的方法的簡(jiǎn)化流程圖;圖3為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)與CD64細(xì)胞表面抗原有關(guān)的生物狀況的方法;圖4為方法的簡(jiǎn)化流程圖,所述的方法用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,檢測(cè)與CD64細(xì)胞表面抗原有關(guān)的生物狀況;圖5A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,非活化嗜中性粒細(xì)胞特征的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān);圖5B為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,活化嗜中性粒細(xì)胞特征的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān);圖5C為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,單核細(xì)胞特征的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān);圖5D為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠特征的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān);圖6為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)與血漿蛋白質(zhì)有關(guān)的生物狀況的方法;圖7為方法的簡(jiǎn)化流程圖,所述的方法用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,檢測(cè)與血漿蛋白質(zhì)有關(guān)的生物狀況;圖8A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,血漿蛋白珠的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的血漿蛋白珠不具有靶向結(jié)合特征,并且所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān);圖8B為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,未結(jié)合的標(biāo)記抗體特征的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān);圖8C為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,血漿蛋白靶向珠的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的血漿蛋白靶向珠具有靶向結(jié)合,并且所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān);圖8D為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠特征的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān);圖9為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)化學(xué)個(gè)體的另一種微流體儀器;圖10為方法的另一個(gè)簡(jiǎn)化流程圖,所述的方法用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,檢測(cè)化學(xué)個(gè)體;圖11為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)和定量血清樣品中葡萄糖、蛋白質(zhì)和白蛋白的方法;圖12A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的讀取器組件和盒的簡(jiǎn)化三維正視圖;圖12B為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的讀取器組件的簡(jiǎn)化三維內(nèi)部正視圖;圖13A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒組件的外部側(cè)視圖;圖13B為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒組件的內(nèi)部側(cè)視圖;圖14A-14O顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒組件中處理事件的順序;圖15為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,微流體分光光度計(jì)讀數(shù)的示意圖;圖16為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的光學(xué)讀取器組件的簡(jiǎn)化拆分圖;圖17為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的光學(xué)讀取器組件的光電倍增管的另一個(gè)簡(jiǎn)化拆分圖;圖18A顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件、盒操作單元和前向散射檢測(cè)單元;圖18B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件的右視圖;圖18C顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件的左視圖;圖18D為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,前向散射檢測(cè)組件;圖18E為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,前向散射檢測(cè)組件的側(cè)視圖;圖19A顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器組件的剖視圖;圖19B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器組件的拆分右視圖;圖19C顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器組件的左視拆分圖;圖19D顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒操作單元(CHU)的后視圖;圖19E顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒操作單元(CHU)的正視圖;圖19F為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,圖12A系統(tǒng)的一次性盒的簡(jiǎn)化圖;圖20為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于醫(yī)學(xué)狀況快速測(cè)定的一次性盒的簡(jiǎn)化圖;圖21A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件的光學(xué)排布的簡(jiǎn)化示意圖;圖21B為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件的光學(xué)排布的簡(jiǎn)化示意圖;圖22A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,在圖21A或21B的光學(xué)單元中多波長(zhǎng)激發(fā)的一個(gè)實(shí)例的示意圖;圖22B其顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的傳輸?shù)膱D形輸出2220,其為用于圖21B的二向色濾光片2200的波長(zhǎng)的函數(shù),其中使用圖22A的多波長(zhǎng)激發(fā);圖22C為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,光學(xué)單元的部件的示意圖,其中使用了圖22A的多波長(zhǎng)激發(fā)以及圖21A的二向色濾光片;圖23A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,圖1系統(tǒng)的取樣盒的示意圖;圖23B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,在流式細(xì)胞儀裝置中一次性盒的示意圖;圖24為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于醫(yī)學(xué)狀況快速測(cè)定的方法的簡(jiǎn)化流程圖;圖25為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,顯示參照珠(RM)相對(duì)于由人類患者得到的樣品(PMN)而言,在經(jīng)過一定時(shí)間后光學(xué)輸出的三維圖;以及圖26A-26C顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠和由人類患者得到的樣品在經(jīng)過一定時(shí)間后光學(xué)輸出的圖。在所有的圖中,相同的參數(shù)識(shí)別為相同的部件。優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述在詳細(xì)描述中,列出了多種特定的細(xì)節(jié),從而提供了對(duì)本發(fā)明的完全理解。但是,本領(lǐng)域的那些技術(shù)人員應(yīng)該理解的是這些為具體的實(shí)施方案,并且本發(fā)明還可以以不同的方式的實(shí)施,這些方式體現(xiàn)了本文所述的和所要求的本發(fā)明的特征化的特性。Kasdan等人的國(guó)際專利申請(qǐng)公開No.WO2011/128893描述了醫(yī)學(xué)狀況快速測(cè)定的裝置、系統(tǒng)和方法,并以引用方式并入本文。本發(fā)明的微流體盒可以為附圖所示的任何合適的盒,或者為本文所述的或所引用的任何現(xiàn)有技術(shù)的盒,例如但不限于在USD669191S1,US20120266986A1,EP1846159A2,US2012275972,WO11094577A,US2007292941A和EP1263533B1中所述的那些?,F(xiàn)在參照?qǐng)D1,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,顯示用于檢測(cè)生物狀況的儀器100的簡(jiǎn)化示意圖。儀器100為試劑盒,其包含盒102和多種化學(xué)/生物化學(xué)反應(yīng)物,其在本文中稱為處理組合物。該處理組合物適用于(至少部分)與引入至儀器中的生物樣本(例如肌體樣本)反應(yīng)。肌體樣本可以為體液,例如但不限于血液,血清,血漿,尿,唾液,腦脊液(CSF),漿液,腹膜液和滑液。此外或備選地,肌體樣本可以為固體,例如頭發(fā)、牙齒的部分、骨骼的部分或一些軟骨。儀器100包含樣本接收元件118,其適用于將樣本轉(zhuǎn)移至樣品組合物室104中。樣品組合物室包含一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)移元件105,其適用于將樣本由樣品組合物室轉(zhuǎn)移至盒內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)其他的位置。在圖1所示的非限定性實(shí)例中,轉(zhuǎn)移元件105為導(dǎo)管,其與處理室112流體連通。在本發(fā)明中,這些導(dǎo)管可以在其他附圖中出現(xiàn),并且在一些情況下,這些導(dǎo)管為微流體通道。在一些實(shí)施方案中,微流體通道的橫截面可以為0.1至2mm2。此外,所述的盒包含多個(gè)處理組合物室106,108,110,其適用于分別容納相應(yīng)數(shù)量的處理組合物120,122,124。此外,在本發(fā)明中,這些室還稱為“泡”。這些處理組合物可以為液體、固體或它們的組合。儀器100通常作為試劑盒(其中設(shè)置有處理組合物)在市場(chǎng)上出售。在一些情況下,所述的試劑盒可以適用于一次性測(cè)試,并且可以為一次性試劑盒。在其他情況下,該試劑盒可以重復(fù)使用??芍貜?fù)使用的試劑盒可以適用于接收其他的外部組合物(未示出),或者可以具有多種處理組合物,其中對(duì)于每次測(cè)試僅使用一部分。所述的儀器可以構(gòu)造并配置,使得所述的處理組合物包含附著在表面(例如珠)上的蛋白質(zhì)。多個(gè)珠或者蛋白質(zhì)附著于其表面上的其他結(jié)構(gòu)元件是通過以下任意一種或多種方法來實(shí)施的:a)簡(jiǎn)單附著,例如通過靜電或疏水相互作用吸附在表面上,誘捕至固定化聚合物中等;b)所述的蛋白質(zhì)與珠表面共價(jià)結(jié)合;c)生物識(shí)別(例如生物素/鏈霉親和素);d)需要2個(gè)步驟:第一層是通過硅烷化學(xué)形成的,使得表面呈現(xiàn)反應(yīng)性基團(tuán)(例如環(huán)氧基,氨基,巰基等),以及第二層(例如待固定的蛋白質(zhì)或連接體分子)通過固定化的反應(yīng)性基團(tuán)而共價(jià)附著;e)與裝置內(nèi)表面上的官能化聚合物涂層共價(jià)附著,或者與金表面上的自組裝單層(SAM)的游離末端連接;反應(yīng)類型可以包括抗原-抗體結(jié)合、夾心(例如抗體-抗體-抗體)、物理誘捕、受體-配體、酶-底物、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、適體、共價(jià)結(jié)合或生物識(shí)別中的任意一種或多種。盒102進(jìn)一步包含至少一個(gè)轉(zhuǎn)移元件107,109,111,其與各自的處理組合物室是流體連通的,每個(gè)轉(zhuǎn)移元件還與處理室112是流體連通的??梢允褂猛ㄟ^轉(zhuǎn)移元件將處理組合物室和樣品組合物室的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至處理室的多種方法,其中的一些方法是微流體技術(shù)中已知的。這些方法包括鼓風(fēng)、抽吸、真空處理、機(jī)械轉(zhuǎn)移、泵送等。盒102進(jìn)一步包含至少一個(gè)轉(zhuǎn)移元件113,其與處理室112和評(píng)價(jià)室114是流體連通的??扇芜x地,評(píng)價(jià)室114與轉(zhuǎn)移元件115是進(jìn)一步流體連通的,所述的轉(zhuǎn)移元件115適用于將評(píng)價(jià)室的內(nèi)容物清理至盒的外部。備選地,評(píng)價(jià)室可以不具有外部清理手段。表1顯示本發(fā)明的儀器100和方法的一些代表性應(yīng)用。表1.本發(fā)明的儀器和方法的一些生物應(yīng)用現(xiàn)在參照?qǐng)D2,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的方法的簡(jiǎn)化流程圖200。應(yīng)該理解的是所述的方法的每一步驟都可以采取預(yù)定的時(shí)間段來實(shí)施,并且在這些步驟之間可以為溫育和/或等待步驟,為了簡(jiǎn)化,圖中未示出。在樣品轉(zhuǎn)移步驟202中,諸如肌體樣本之類的樣品通過接收元件118由外部?jī)x器100轉(zhuǎn)移至樣品組合物室104中。根據(jù)一些實(shí)施方案,樣本或樣品的體積為低于200μL,低于100μL,低于50μL,低于25μL或低于11μL。此后,在組合物轉(zhuǎn)移步驟204中,處理組合物120通過轉(zhuǎn)移元件107轉(zhuǎn)移至處理室中。在一些情況下,處理組合物或液體(未示出)可以設(shè)置于處理室中。根據(jù)處理組合物和樣品/樣品類型的本性,可能需要在可任選的混合步驟206中混合或攪拌處理室內(nèi)容物。這可以通過使用設(shè)置于所述的室中的小型攪拌棒(未示出)來實(shí)施。此外或備選地,這可以通過試劑盒的流體動(dòng)力學(xué)來實(shí)施。此外或備選地,攪拌棒可以設(shè)置于儀器中的任何其他的室中。多種處理組合物的轉(zhuǎn)移順序?qū)τ诜磻?yīng)順序而言是重要的,并且通常是預(yù)定的。例如可以對(duì)處理組合物室106、此后對(duì)處理組合物室108以及此后對(duì)處理組合物室110實(shí)施步驟204-206。在一些情況下,這些步驟的一些步驟可以同時(shí)實(shí)施。在檢查步驟208中,應(yīng)該查明樣品處理所需的所有組合物是否已經(jīng)轉(zhuǎn)移至處理室中。如果有任何組合物剩余,則對(duì)隨后的處理組合物室(多個(gè))實(shí)施步驟204-206。如果沒有其他的處理組合物需要轉(zhuǎn)移,則將樣品/樣本由室104轉(zhuǎn)移至處理室中。此后,在第二樣品轉(zhuǎn)移步驟210中,將樣品由樣品組合物室轉(zhuǎn)移至處理室中。根據(jù)一些實(shí)施方案,步驟210可以在步驟204-208之前實(shí)施。如果需要,可以對(duì)處理室中的內(nèi)容物實(shí)施可任選的混合步驟212。在轉(zhuǎn)移步驟214中,將處理室的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至評(píng)價(jià)室中。評(píng)價(jià)室114可以配置和構(gòu)造用于一個(gè)或多個(gè)評(píng)價(jià)步驟216中。這些步驟可以包括以下步驟的任意組合或排列:·其中通過的輻射的轉(zhuǎn)移;·隨即發(fā)生沖擊輻射;·檢測(cè)反射的和/或折射的輻射;·檢測(cè)發(fā)射的輻射;·捕獲其一個(gè)或多個(gè)圖像;·對(duì)捕獲的圖像實(shí)施圖像分析;·測(cè)量處理樣本的電學(xué)特征;·隨即發(fā)生沖擊聲能;·檢測(cè)其中的聲能;以及·分析上述任意一個(gè)或多個(gè)步驟的輸出。根據(jù)一些實(shí)施方案,將所述的盒引入至Kasdan等人的國(guó)際專利申請(qǐng)公開No.WO2011/128893中所述的系統(tǒng)中,其中所述的文獻(xiàn)以引用方式并入本文。然后,在結(jié)果輸出步驟218中,輸出評(píng)價(jià)步驟的結(jié)果。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的儀器可以具有用于顯示結(jié)果的機(jī)載手段,例如比色試紙(未示出)。此外或備選地,所述的結(jié)果在顯示單元中顯示,其與儀器100分開并遠(yuǎn)離。使用儀器100完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間根據(jù)多種因素改編,其非限定性實(shí)例包括本發(fā)明所述的那些。在一些實(shí)施方案中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約0.5至100分鐘。在其他的實(shí)施方案中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約1至20分鐘。在其他的實(shí)施方案中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約1至10分鐘。完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,15,20,25,30,35,40,50,60,80或100分鐘?,F(xiàn)在參照?qǐng)D3,其為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)與CD64細(xì)胞表面抗原有關(guān)的生物狀況的方法300。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的方法是在圖1所示的并且如本文所述的儀器中實(shí)施的。諸如血液樣品之類的生物樣本是通過樣本接收元件118而吸入至樣品組合物室104中,然后吸入至處理室112中。樣品的體積通常為10-200μL。血液樣品通常為由患者最新移出的全血。全血主要包含紅細(xì)胞(也稱為RBC或紅血球)、血小板和白血球(也稱為白細(xì)胞)(包括淋巴細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞)。嗜中性粒細(xì)胞(特別是活化的嗜中性粒細(xì)胞)的數(shù)量增加通常是在炎癥(特別是由于細(xì)菌感染、環(huán)境暴露和一些癌癥)開始(急性)階段的血流中發(fā)現(xiàn)。包含CD64的抗體和CD163的抗體的混合物304被引入至處理室中(參見Davisetal.(2006))。各種類型的抗體通常通過特異性熒光標(biāo)簽來標(biāo)記。在一些情況下,熒光標(biāo)簽被設(shè)計(jì)成當(dāng)抗體與其抗原結(jié)合時(shí)而被活化。在其他情況下,熒光標(biāo)簽總是有活性的。將所述的室的內(nèi)容物根據(jù)需要溫育和/或混合,從而使活化的血液嗜中性粒細(xì)胞與CD64標(biāo)記的抗體(也稱為標(biāo)志物)結(jié)合,從而形成具有CD64標(biāo)志物310的活化的嗜中性粒細(xì)胞和/或具有CD64標(biāo)記的抗體和CD163標(biāo)記的抗體的單核細(xì)胞。不具有標(biāo)志物314的淋巴細(xì)胞以及未受影響的RBC316存在于內(nèi)容物中。此后,將溶解試劑或稀釋劑306引入至處理室112中。在溶解試劑的情況下,適用于溶解紅細(xì)胞,從而形成溶解的紅細(xì)胞324。此外,將參照/校準(zhǔn)珠308加入至處理室中。這些用于校準(zhǔn)輸出,這可以參照下文中的圖5A-5D來說明。CD64(分化群64)為完整的膜糖蛋白類型,也稱為Fc受體,其以高的親和性與單體的IgG型抗體結(jié)合。與目前醫(yī)學(xué)實(shí)踐中使用的標(biāo)準(zhǔn)的診斷測(cè)試相比,嗜中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)的定量提供了感染/膿毒病的改進(jìn)的診斷檢測(cè)。CD163(分化群163)為CD163基因編碼的人類蛋白質(zhì)。此外,其已經(jīng)顯示標(biāo)記了單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞系的細(xì)胞?,F(xiàn)在參照?qǐng)D4,其為方法的簡(jiǎn)化流程圖400,所述的方法用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,檢測(cè)與CD64細(xì)胞表面抗原有關(guān)的生物狀況。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的方法是在圖1所示的并且如本文所述的儀器中實(shí)施的。在第一轉(zhuǎn)移步驟402中,諸如血液樣品之類的生物樣本是通過樣本接收元件118而吸入至樣品組合物室104中,然后吸入至處理室112中。樣品的體積通常為10-200μL。在另一個(gè)步驟404中,將CD64和CD163的標(biāo)記抗體的混合物加入至處理室112中,并與血液樣品混合和溫育。在該步驟的溫育階段,抗體與具有CD64標(biāo)志物310的活化的嗜中性粒細(xì)胞和/或使用CD64標(biāo)記的抗體和CD163標(biāo)記的抗體312而活化的單核細(xì)胞結(jié)合。在溶解試劑加入步驟406中,將溶解試劑加入至處理室中,從而溶解該室中至少一些RBC。在任何合適的時(shí)間,通常在溶解步驟406之后,在參照珠加入步驟408中將參照珠加入至處理室的內(nèi)容物中。在預(yù)定的時(shí)間段后,實(shí)施分析步驟410來分析內(nèi)容物的熒光放射特征。這可參照?qǐng)D5A-5D來進(jìn)一步詳細(xì)地描述。根據(jù)一些實(shí)例,評(píng)價(jià)室114可以構(gòu)造和配置,從而允許細(xì)胞通過讀數(shù)區(qū)130,這樣每個(gè)從其中通過的細(xì)胞都單獨(dú)地被分析。現(xiàn)在參照?qǐng)D5A,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,非活化嗜中性粒細(xì)胞特征500的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān)。非活化的標(biāo)記的嗜中性粒細(xì)胞在強(qiáng)度I1、波長(zhǎng)W1下均發(fā)射信號(hào)502。圖5B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,活化嗜中性粒細(xì)胞特征510的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān)。各種活化的標(biāo)記的嗜中性粒細(xì)胞在強(qiáng)度I2、波長(zhǎng)W1下均發(fā)射活化的嗜中性粒細(xì)胞特征512。通常I2大于I1。在一些情況下,特征512和510的差異可以通過圖像分析、熒光輻射計(jì)數(shù)或本領(lǐng)域已知的其他定性或定量方法來檢測(cè)。本實(shí)例并非是限定性的。轉(zhuǎn)向圖5C,可以見到根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,單核細(xì)胞特征520的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān)。單核細(xì)胞特征包含在強(qiáng)度I3、第一波長(zhǎng)W1下的第一信號(hào)522,以及在強(qiáng)度I4、第一波長(zhǎng)W2下的第二信號(hào)524。圖5D顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠特征530的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖3-4的方法有關(guān)。參照珠特征包含在強(qiáng)度I1(類似于或等于非活化的標(biāo)記的嗜中性粒細(xì)胞的信號(hào)502)、第一波長(zhǎng)W1下的第一信號(hào)532,以及在強(qiáng)度I5、第一波長(zhǎng)W3下的第二信號(hào)534。該方法能通過CD64標(biāo)簽的特征512的強(qiáng)度來識(shí)別和定量活化的嗜中性粒細(xì)胞。單核細(xì)胞是通過雙重信號(hào)特征522,524來識(shí)別的,其作為陽(yáng)性對(duì)照。參照珠是通過在波長(zhǎng)W3下獨(dú)特的信號(hào)534來識(shí)別的。在波長(zhǎng)W1下信號(hào)532的強(qiáng)度提供了用于與嗜中性粒細(xì)胞的512的強(qiáng)度相比較的CD64標(biāo)簽的參照水平。不具有標(biāo)志物330的淋巴細(xì)胞(圖3)作為陰性對(duì)照,并且應(yīng)該提供無熒光特征,而且可以通過它們的散射或其他特征來檢測(cè)。這種檢驗(yàn)過程的一些實(shí)施方案的其他細(xì)節(jié)在US8,116,984和Davis,BH等人(2006)中有所描述。現(xiàn)在參照?qǐng)D6,其為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)與血漿蛋白質(zhì)有關(guān)的生物狀況的方法600。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的方法是在圖1所示的并且如本文所述的儀器中實(shí)施的。諸如血液樣品602之類的生物樣本是通過樣本接收元件118而吸入至樣品組合物室104中,然后吸入至處理室112中。樣品的體積通常為10-200μL。血液樣品通常為由患者最新移出的全血。全血主要包含紅細(xì)胞(也稱為RBC或紅血球)、血小板和白血球(也稱為白細(xì)胞)(包括淋巴細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞)。血液樣品包含至少一種蛋白質(zhì)靶向抗原。例如根據(jù)Bangs實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品數(shù)據(jù)表854的過程(用于流式細(xì)胞儀蛋白質(zhì)G抗體結(jié)合珠編號(hào)554)來制備蛋白質(zhì)抗體604覆蓋的珠。將珠604引入至處理室112中,此外,還引入血液樣品602。因此在該處理階段,有一些已經(jīng)結(jié)合(血漿)蛋白質(zhì)靶物612的珠,一些保持不具有任何結(jié)合的蛋白質(zhì)靶向抗原610、未受影響的白細(xì)胞614、未受影響的血小板616和未受影響的RBC618的珠.各種類型的抗體通常由特異性的熒光標(biāo)簽來標(biāo)記。在一些情況下,熒光標(biāo)簽被設(shè)計(jì)成當(dāng)抗體與抗原結(jié)合時(shí)而被活化。將室的內(nèi)容物根據(jù)需要溫育和/或混合,從而誘導(dǎo)抗原-抗體的結(jié)合。此后,將血漿蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記的抗體組合物606加入至室中,并混合/溫育,由此形成在具有熒光標(biāo)志物620的抗體珠上捕獲的血漿蛋白質(zhì),以及未結(jié)合的珠619(與未結(jié)合的珠610相似或一致)。此外,未受影響的白細(xì)胞622與614相似或一致,未受影響的血細(xì)胞624與616相似或抑制,未受影響的RBC與618相似或一致。此外,將參照/校準(zhǔn)珠608加入至處理室中。這些用于校準(zhǔn)輸出,這可以參照下文中的圖8A-8D來說明。根據(jù)下文中進(jìn)一步詳細(xì)描述的圖7的方法,在具有Fluor標(biāo)志物628(與620相似或一致)的抗體珠上捕獲的血漿蛋白質(zhì)以及其他成分(未結(jié)合的珠629(與619相似或一致)、未受影響的血小板624(與624相似或一致)、以及參照珠636(與608相似或一致))現(xiàn)在準(zhǔn)備進(jìn)行評(píng)價(jià)。圖7顯示方法700的簡(jiǎn)化流程圖,所述的方法用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,檢測(cè)與血漿蛋白質(zhì)有關(guān)的生物狀況.根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的方法是在圖1所示的并且如本文所述的儀器中實(shí)施的。在第一轉(zhuǎn)移步驟702中,諸如血液樣品之類的生物樣本是通過樣本接收元件118而吸入至樣品組合物室104中,然后吸入至處理室112中。樣品的體積通常為10-200μL。在另一個(gè)步驟704中,將血漿蛋白質(zhì)抗體604覆蓋的珠加入至處理室112中,并與血液樣品溫育。在該步驟的溫育階段,珠上的抗體與一些或所有的蛋白質(zhì)靶向抗原結(jié)合,從而在抗體珠612上形成結(jié)合的血漿蛋白質(zhì)。在血漿蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記抗體的另一個(gè)步驟708中,將血漿蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記抗體606加入至處理室中。在任何合適的時(shí)間,通常在加入步驟706之后,在參照珠加入步驟708中將參照珠加入至處理室的內(nèi)容物中。在預(yù)定的時(shí)間段后,實(shí)施分析步驟710來分析內(nèi)容物的熒光放射特征。這可參照?qǐng)D8A-8D來進(jìn)一步詳細(xì)地描述。根據(jù)一些實(shí)例,評(píng)價(jià)室114可以構(gòu)造和配置,從而允許細(xì)胞通過讀數(shù)區(qū)130,這樣每個(gè)從其中通過的細(xì)胞都單獨(dú)地被分析。現(xiàn)在參照?qǐng)D8A,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,血漿蛋白珠的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的血漿蛋白珠不具有靶向結(jié)合特征800,并且所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān)。未結(jié)合靶向抗原604的血漿蛋白質(zhì)靶向珠在強(qiáng)度I1、第一波長(zhǎng)W1下均發(fā)射信號(hào)802?,F(xiàn)在參照?qǐng)D8B,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,未結(jié)合的標(biāo)記抗體特征810的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān)。每個(gè)未結(jié)合的標(biāo)記靶向抗體606在強(qiáng)度I2、第一波長(zhǎng)W2下均發(fā)射未結(jié)合的標(biāo)記靶向抗體特征810。圖8C為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,血漿蛋白靶向珠的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的血漿蛋白靶向珠具有靶向結(jié)合特征820,并且所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān)。特征820包含在強(qiáng)度I3、第一波長(zhǎng)W1下的第一信號(hào)822,以及在強(qiáng)度I4、第一波長(zhǎng)W2下的第二信號(hào)824。通常I4大于I2。在一些情況下,特征812和810的差異可以通過圖像分析、熒光輻射計(jì)數(shù)或本領(lǐng)域已知的其他定性或定量方法來檢測(cè)。本實(shí)例并非是限定性的。圖8D為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠特征830的熒光檢測(cè)檢驗(yàn)的圖形輸出,其中所述的檢驗(yàn)與圖6-7的方法有關(guān)。參照珠特征包含在強(qiáng)度I5(類似于或等于標(biāo)記的靶向抗體606,其在波長(zhǎng)W2下放射未結(jié)合的標(biāo)記的靶向抗體特征810)、第一波長(zhǎng)W2下的第一信號(hào)832,以及在強(qiáng)度I6、第一波長(zhǎng)W3下的第二信號(hào)834。在分析步驟710(圖7)的總結(jié)中,細(xì)胞可以單獨(dú)通過讀數(shù)區(qū)710。不具有結(jié)合的靶向蛋白質(zhì)的珠604是通過W1下靶向珠熒光信號(hào)802的存在來識(shí)別的。熒光的總體水平測(cè)定了樣品中蛋白質(zhì)的水平。具有結(jié)合的靶向蛋白質(zhì)的珠放射特征820(其為珠熒光信號(hào)W1,822(與802相似或一致)和夾心熒光標(biāo)簽W2,824),其如圖8C所示。參照珠608是通過獨(dú)特的熒光W3信號(hào)834來識(shí)別的。將具有靶物結(jié)合特征820的血漿蛋白質(zhì)靶向珠中W2的水平/強(qiáng)度與第一波長(zhǎng)W2、強(qiáng)度I5下參照珠的第一信號(hào)832的水平/強(qiáng)度相比,從而測(cè)定樣品中靶向蛋白質(zhì)濃度的總體水平。實(shí)施例實(shí)施例1應(yīng)用No.1–CD64感染與膿毒病制備用于接收血液樣品的盒102(圖1)。該盒包含多個(gè)處理組合物室106,108,110,其適用于分別容納相應(yīng)數(shù)量的處理組合物120,122,124。這些組合物在US8,116,984和Davis,BH等人(2006)中進(jìn)一步詳細(xì)的描述,該文獻(xiàn)以引用方式并入本文。簡(jiǎn)言之,試劑A包含鼠科單克隆抗體(包含緩沖的生理鹽水)、試劑B(10x濃縮的延齡草裂解液(包含氯化銨))和試劑C(使用StarfireRed和異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的5.2μm聚苯乙烯珠的懸液(包含0.1%疊氮化鈉和0.01%Tween20))的混合物。在樣品轉(zhuǎn)移步驟202(圖2)中,將10uL血液樣品通過接收元件118由外部?jī)x器100轉(zhuǎn)移至樣品組合物室104中,然后在轉(zhuǎn)移步驟214中,轉(zhuǎn)移至處理室112中。在組合物轉(zhuǎn)移步驟204中,將包含CD64抗體的抗體組合物(試劑A)120通過轉(zhuǎn)移元件107轉(zhuǎn)移至處理室中。使用本發(fā)明的盒102,這2步驟與混合步驟206結(jié)合花費(fèi)大約4分鐘。此外,還加入溶解緩沖劑(試劑B)122,并與所得的混合組合物混合。使用本發(fā)明的盒102,該步驟以及混合所有的組合物花費(fèi)大約3分鐘。將參照珠(試劑C)308加入至處理室中。評(píng)價(jià)室114可以配制并構(gòu)造用于一個(gè)或多個(gè)評(píng)價(jià)步驟216。根據(jù)一些實(shí)施方案,將所述的盒引入至Kasdan等人的國(guó)際專利申請(qǐng)公開No.WO2011/128893中所述的系統(tǒng)中,所述的文獻(xiàn)以引用方式并入本文。該系統(tǒng)具有隨之?dāng)y帶的用于計(jì)算白細(xì)胞上CD64和CD163指數(shù)的軟件。然后,在結(jié)果輸出步驟218中輸出評(píng)價(jià)步驟的結(jié)果。根據(jù)本實(shí)施例,由引入少的血液樣品至獲得膿毒病的指示所花費(fèi)的時(shí)間少于15分鐘,通常大約10分鐘(參見表2中現(xiàn)有技術(shù)與本發(fā)明的方法的比較)。就使用者的觀點(diǎn)來看,實(shí)施以下步驟:a)使用者將血滴加入至盒102中并將其密封(通過微流體測(cè)量為10μL)。b)擠壓BlisterA(106),釋放100μL試劑A。盒中的混合是通過盒操作單元(CHU)控制的,然后進(jìn)行4分鐘的溫育。c)擠壓BlisterB(108),釋放~250μL試劑B。盒中的混合是通過CHU控制的,然后進(jìn)行3-5分鐘的溫育。d)啟動(dòng)磁性攪拌棒,攪拌珠懸液(試劑C)。e)擠壓BlisterC(110),釋放100μL試劑C。盒中的混合是通過CHU控制的。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例,試劑A為鼠科單克隆抗體在緩沖的生理鹽水(以1:5稀釋)中的混合物(PBS+0.5%BSA);試劑B為延齡草裂解液(在工作濃度下);試劑C為使用StarfireRed和FITC標(biāo)記的5.2μm聚苯乙烯珠在PBS+0.01%Tween20(以1:100稀釋)中形成的懸液。f)通過光電子核心讀取樣品,并收集數(shù)據(jù)。g)自動(dòng)分析數(shù)據(jù)并呈現(xiàn)結(jié)果。h)該盒設(shè)置為生物危害的。表2.現(xiàn)有技術(shù)的方法與使用CD64和CD163抗體來檢測(cè)膿毒病的本發(fā)明方法的比較實(shí)施例2應(yīng)用No.2–胎兒血紅蛋白測(cè)試如Dziegiel等人所述(2006),使用包含組合物的盒來實(shí)施胎兒血紅蛋白測(cè)試。該測(cè)試是使用圖1-2以及6-8D中所述的方法來實(shí)施的。根據(jù)一些實(shí)施方案,將所述的盒引入至Kasdan等人的國(guó)際專利申請(qǐng)公開No.WO2011/128893所述的系統(tǒng)中,所述的文獻(xiàn)以引用方式并入本文。該系統(tǒng)使用LeukoDx軟件,從而分析所收集的并以與流式細(xì)胞儀列表模式的文件相似的格式儲(chǔ)存的數(shù)據(jù)。由引入樣品直至由該系統(tǒng)收到結(jié)果,該測(cè)試花費(fèi)了大約10-15分鐘。應(yīng)該理解的是,表1中所列的所有實(shí)例都可以使用本發(fā)明的盒并結(jié)合WO2011/128893的系統(tǒng)來實(shí)施。對(duì)于各應(yīng)用而言,如相關(guān)參照中所述(表1),使用用于檢驗(yàn)的組合物來預(yù)制不同的盒。體積及其稀釋都經(jīng)過優(yōu)化。通常,樣品總體積的范圍為10至1000μL,100至900μL,200至800μL,300至700μL,400至600μL,或者420to500μL。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理組合物室106,108,110(也稱為泡)的體積為大約1μL至1000μL。根據(jù)其他的實(shí)施方案,樣本的體積為大約10μL至200μL。根據(jù)其他的實(shí)施方案,樣本的體積為大約1,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,120,140,160,180,200,250,300,350,400,450或500μL。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理組合物120,122,124的體積最多為大約500μL。根據(jù)其他的實(shí)施方案,樣本的體積最多為大約200μL。根據(jù)其他的實(shí)施方案,樣本的體積最多為大約500,450,400,350,300,250,200,180,160,140,120,100,90,80,70,60,50,40,30,20,10或1μL。根據(jù)一些實(shí)施方案,反應(yīng)物的體積至少為大約1μL。根據(jù)其他的實(shí)施方案是,樣本的體積為大約10μL。根據(jù)其他的實(shí)施方案,樣本的體積至少為大約1,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,120,140,160,180,200,250,300,350,400,450或500μL。盒102可以構(gòu)造和配置,從而能夠在平行的微通道上運(yùn)行多個(gè)測(cè)試。本設(shè)計(jì)的一個(gè)實(shí)施方案時(shí)是適用于3個(gè)泡,代表了3種不同的處理。這些處理可以為例如:a)通過熒光抗體(或抗體片段,F(xiàn)ab)直接染色;b)RBC溶解;以及c)加入內(nèi)部對(duì)照。其他實(shí)施方案公開了通過一級(jí)抗體和二級(jí)抗體的二階段染色,從而得到更強(qiáng)的信號(hào);加入珠(例如磁性、金屬、聚合物以及抗原結(jié)合珠),用于選擇和檢測(cè)特定的細(xì)胞、蛋白質(zhì)、抗體、自身抗體和其他生物分子;組織樣品分解細(xì)胞滲透(從而允許檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì));DNA染色(能夠進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù));RNA染色(使用噻唑橙,由于網(wǎng)織紅細(xì)胞可以通過它們高含量的RNA而區(qū)別于紅血球,所以能夠進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù));通過適體熒光染色和/或標(biāo)記(可以與所選的靶物以高親和性結(jié)合的單鏈DNA或RNA分子,其中所述的靶物包括蛋白質(zhì)和肽);加入底物用于酶偶聯(lián)反應(yīng)(儲(chǔ)存在分開的泡中,并且加入試劑時(shí)混合,所述的試劑例如為用于化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的HRP綴合的抗體);以及加入用于洗滌的緩沖劑(注意洗滌步驟需要進(jìn)一步設(shè)計(jì)所述的盒)。此外,本發(fā)明包含盒本身的處理,例如但不限于可以使溶液在床上前后通過以增加捕獲的效率,從而可以使用固定化的選擇性的珠;用于細(xì)胞尺寸、分子尺寸的過濾器;以及配體結(jié)合的過濾器(可以進(jìn)行洗滌步驟和/或群體選擇)。此外,所述的樣品還包含生物組織,其需要機(jī)械分解組織樣品的另一個(gè)步驟。例如將皮膚活組織檢查樣品加入至專用的口中。將該口密封,并且一個(gè)泡加入液體緩沖劑。專用的風(fēng)箱推動(dòng)該混合物,并通過多次推拉循環(huán)或者通過網(wǎng)狀物壓制來分解所述的組織。此外,本發(fā)明的盒還可以用于食品/環(huán)境的安全評(píng)價(jià):食品/飲料樣品的細(xì)菌檢測(cè)(還可能進(jìn)行過敏原檢測(cè))以及在環(huán)境樣品中測(cè)量活細(xì)菌。根據(jù)一些實(shí)施方案,讀數(shù)可以包含光電子核心,其能夠識(shí)別和檢測(cè)熒光信號(hào)。此外,用于聚焦的核心中的CCD還可以用于讀取化學(xué)發(fā)光信號(hào)。此外,使用者讀值還可以指示所得結(jié)果相對(duì)于參照范圍所落入的區(qū)域。如本文的表中可見,本發(fā)明的系統(tǒng)、儀器、盒和方法有許多應(yīng)用,并且本文所述的實(shí)施例不應(yīng)該被看作是限定性的。現(xiàn)在參照?qǐng)D9,其為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)化學(xué)或生物化學(xué)個(gè)體的微流體儀器900。儀器900為試劑盒,其包含盒902和多種化學(xué)/生物化學(xué)反應(yīng)物,其在本文中稱為處理組合物。該處理組合物適用于(至少部分)與引入至儀器中的生物樣本970(例如肌體樣本)反應(yīng)。肌體樣本可以為體液,例如但不限于血液,血清,血漿,尿,唾液,腦脊液(CSF),漿液,腹膜液和滑液。此外或備選地,肌體樣本可以為固體,例如頭發(fā)、牙齒的部分、骨骼的部分或一些軟骨。化學(xué)樣本可以選自例如液體樣品、固體樣品、懸液、膠體、組合物、離子溶液或者本領(lǐng)域已知的任何其他合適的樣品。儀器900包含樣本接收元件918,其適用于將樣本轉(zhuǎn)移至樣品組合物室904中。樣品組合物室包含一個(gè)或多個(gè)轉(zhuǎn)移元件905,其適用于將樣本由樣品組合物室轉(zhuǎn)移至盒內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)其他的位置。在圖9所示的非限定性實(shí)例中,轉(zhuǎn)移元件905為導(dǎo)管,其在第一末端913處與處理室912流體連通。此外,所述的盒包含多個(gè)處理組合物室906,908,919,其適用于分別容納相應(yīng)數(shù)量的處理組合物920,922,924。這些處理組合物可以為液體、固體或它們的組合。儀器900通常作為試劑盒(其中設(shè)置有處理組合物)在市場(chǎng)上出售。在一些情況下,所述的試劑盒可以適用于一次性測(cè)試,并且可以為一次性試劑盒。在其他情況下,該試劑盒可以重復(fù)使用。可重復(fù)使用的試劑盒可以適用于接收其他的外部組合物(未示出),或者可以具有多種處理組合物,其中對(duì)于每次測(cè)試僅使用一部分。盒902進(jìn)一步包含氣體保持隔間901,其適用于包含空氣950和/或其他氣體。在一些情況下,該氣體可以為惰性的,例如氮?dú)狻C總€(gè)處理組合物室906,908和919具有至少一個(gè)各自的導(dǎo)管907,909,910,其與處理室912流體連通。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案,導(dǎo)管907,909和910與處理室以固定相等的間隔平行設(shè)置。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案,導(dǎo)管907,909和910與處理室以固定不等的間隔平行設(shè)置??梢允褂猛ㄟ^轉(zhuǎn)移元件將處理組合物室和樣品組合物室的內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至處理室的多種方法,其中的一些方法是微流體技術(shù)中已知的。這些方法包括鼓風(fēng)、抽吸、真空處理、機(jī)械轉(zhuǎn)移、泵送等。盒902進(jìn)一步包含至少一個(gè)轉(zhuǎn)移元件913,其與處理室912和評(píng)價(jià)室914是流體連通的??扇芜x地,評(píng)價(jià)室914與轉(zhuǎn)移元件915是進(jìn)一步流體連通的,所述的轉(zhuǎn)移元件915適用于將評(píng)價(jià)室的內(nèi)容物清理至盒的外部。備選地,評(píng)價(jià)室可以不具有外部清理手段。根據(jù)一些實(shí)例,評(píng)價(jià)室914可以構(gòu)造和配置,從而允許一些或所有的經(jīng)處理的樣品通過讀數(shù)區(qū)930。根據(jù)一些實(shí)施方案,流體轉(zhuǎn)移元件915與至少一個(gè)真空泵或風(fēng)箱940是流體連通的。儀器900可以構(gòu)造并配置,從而通常通過啟動(dòng)泵940將少量的氣體引入至處理室中。此后,將少體積的樣品966引入至處理室中??諝庖约傲硗獾纳倭康臉悠?64,962,960可以多次交替引入。根據(jù)一些實(shí)施方案,處理室可以構(gòu)造并配置用于接收特定的處理組合物以便僅用于少量的樣品。例如如附圖所示,組合物924引入至少量的樣品966中,組合物922引入至少量的樣品964中,以及組合物920引入至少量的樣品962中。少量的樣品960保持未處理的,并且可以作為對(duì)照。根據(jù)一些其他的實(shí)施方案,處理室可以構(gòu)造并配置,從而接收特定的處理組合物以便依次用于所有少量的樣品。例如少量樣品966進(jìn)入在第一末端913的處理室,并通過泵940拉至與導(dǎo)管907具有流體連通性的位置處,并且接收少量的處理組合物920。然后移動(dòng)至與導(dǎo)管909具有流體連通性的位置處,并且組合物922被引入至其中。此后,樣品966移動(dòng)至與導(dǎo)管910具有流體連通性的另一個(gè)位置處,并且組合物924被引入至少量樣品966中。此后,少量的樣品966通過導(dǎo)管913進(jìn)入至評(píng)價(jià)室的讀數(shù)區(qū)930。讀數(shù)區(qū)可以構(gòu)造并配置,從而使多種不同的檢測(cè)機(jī)制受到影響。檢測(cè)機(jī)制的一些非限定性實(shí)例包括:f)圖像捕獲g)圖像分析h)光學(xué)檢測(cè)i)動(dòng)力學(xué)研究檢測(cè)j)聲音檢測(cè)k)體積檢測(cè)l)氣體檢測(cè)m)色譜光學(xué)檢測(cè)可以為人類視覺檢測(cè),人類顯微鏡檢查或自動(dòng)化的機(jī)械光學(xué)檢測(cè)。光學(xué)檢測(cè)可以涉及檢測(cè)至少光學(xué)輸出信號(hào)的一種或多種。輸出信號(hào)可以選自傳輸信號(hào)、吸收信號(hào)、反射信號(hào)、折射信號(hào)或它們的組合。光學(xué)檢測(cè)可以使用位于盒外部的光學(xué)元件和系統(tǒng)。這些可以包括例如光學(xué)顯微鏡、圖像分析儀、電子顯微鏡或本領(lǐng)域已知的任何其他的系統(tǒng)。在實(shí)施評(píng)價(jià)后,少量樣品可以保留在所述的室中或者通過導(dǎo)管915清除?,F(xiàn)在參照?qǐng)D10,其為方法的另一個(gè)簡(jiǎn)化流程圖1000,所述的方法用于根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,檢測(cè)化學(xué)與生物化學(xué)個(gè)體。應(yīng)該理解的是該方法的每一步都可以花費(fèi)預(yù)定的時(shí)間段來實(shí)施,并且在這些步驟之間可以為溫育和/或等待步驟,為了簡(jiǎn)化,圖中未示出。在樣品轉(zhuǎn)移步驟1002中,諸如化學(xué)樣品樣本970之類的樣品通過接收元件918由外部?jī)x器900轉(zhuǎn)移至樣品組合物室904中。根據(jù)一些實(shí)施方案,樣本或樣品的體積為低于200μL,低于100μL,低于50μL,低于25μL或低于11μL。在泵啟動(dòng)步驟中,將泵940啟動(dòng)一段時(shí)間。在樣品引入步驟906中,將第一少量的樣品966引入至處理室中。樣品966的體積可以為例如低于50-100μL,25-50μL,10-25μL,或者0-10μL的范圍。儀器可以包含硬件和軟件元件(未示出),如本文領(lǐng)域已知,所述的元件能夠預(yù)先編制泵940的程序。例如所述的泵可以以規(guī)則的預(yù)定時(shí)間間隔打開和關(guān)閉,這樣在任何時(shí)間,僅少量的樣品970可以被引入至處理室中,例如少量960??梢赃M(jìn)一步驅(qū)動(dòng)所述的泵,將空氣380引入至所述室的少量樣品950中,從而在不同的少量樣品960,962,964和966之間之間進(jìn)行清潔和分離。在空氣引入步驟1008中,少量的空氣950通過空氣管線903由容器901轉(zhuǎn)移至處理室中。少量空氣樣品950的體積可以為例如低于50-100μL,25-50μL,10-25μL或0-10μL的范圍??諝夥蛛x了所處理的等分物并清潔了通道,從而防止滯留(carryover),如本領(lǐng)域已知的那樣(Skeggs,1964,1966)。步驟1006,1008可以重復(fù)多次??梢源嬖跊Q定步驟1010,以決定是否重復(fù)這些步驟。在處理組合物轉(zhuǎn)移步驟1012中,一種或多種處理組合物通過轉(zhuǎn)移元件/管線907,909,910而轉(zhuǎn)移至處理室的特定區(qū)域。引入至各少量樣品中的處理組合物的數(shù)量取決于所實(shí)施的檢驗(yàn)/測(cè)試的本性。如上文提及的那樣,可以依次使用一種特定的組合物或組合物的組合來處理少量的樣品。此外,各處理組合物920,922,924均可以包含多種不同的試劑、標(biāo)志物、輔助因子、催化劑、酶和它們的組合。在一些情況下,可以存在至少一種設(shè)置于處理室中的其他處理組合物或液體(未示出)。根據(jù)處理組合物的本性和樣品/樣本類型,可能需要在可任選的混合步驟413中混合或攪拌處理室中的內(nèi)容物(未示出)。在一些情況下,可以同時(shí)實(shí)施這些步驟1006,1008,1010,1012中的一些步驟。在第一轉(zhuǎn)移步驟1014中,第一較少的樣品966在使用組合物924處理后被轉(zhuǎn)移至評(píng)價(jià)室中。評(píng)價(jià)室914可以配制并構(gòu)造用于一個(gè)或多個(gè)評(píng)價(jià)步驟1016中。這些可以包含以下步驟的任意組合或排列:n)其中通過的輻射的轉(zhuǎn)移;o)隨即發(fā)生沖擊輻射;p)檢測(cè)反射的和/或折射的輻射;q)檢測(cè)發(fā)射的輻射;r)捕獲其一個(gè)或多個(gè)圖像;s)對(duì)捕獲的圖像實(shí)施圖像分析;t)測(cè)量處理樣本的電學(xué)特征;u)隨即發(fā)生沖擊聲能;v)檢測(cè)其中的聲能;以及w)分析上述任意一個(gè)或多個(gè)步驟的輸出。根據(jù)一些實(shí)施方案,將所述的盒引入至Kasdan等人的國(guó)際專利申請(qǐng)公開No.WO2011/128893所述的系統(tǒng)中,該文獻(xiàn)以引用方式并入本文。步驟1014,1016可以多次重復(fù)。可以存在決定步驟1018,以決定是否重復(fù)這些步驟。例如可以依次對(duì)各個(gè)少量的樣品966,964,962和960實(shí)施評(píng)價(jià)步驟1016。此外或備選地,可以對(duì)相同的樣品對(duì)此實(shí)施評(píng)價(jià)步驟,以便測(cè)定動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)等。此外或備選地,可以再讀數(shù)區(qū)的一個(gè)位置處實(shí)施評(píng)價(jià)步驟,或者可以在讀數(shù)區(qū)的多個(gè)連續(xù)的位置處實(shí)施評(píng)價(jià)步驟。然后,在結(jié)果輸出步驟1020中輸出評(píng)價(jià)步驟的結(jié)果。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的儀器可以具有用于顯示結(jié)果的機(jī)載手段,例如比色試紙(未示出)。此外或備選地,所述的結(jié)果在顯示單元中顯示,其與儀器900分開并遠(yuǎn)離。使用儀器100或儀器900完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間根據(jù)多種因素改編,其非限定性實(shí)例包括本發(fā)明所述的那些。在一些實(shí)施方案中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約0.5至100分鐘。在其他的實(shí)施方案中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約1至20分鐘。在其他的實(shí)施方案中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約1至10分鐘。在一些實(shí)例中,完成檢驗(yàn)所需的時(shí)間為大約1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,15,20,25,30,35,40,50,60,80或100分鐘。現(xiàn)在參照?qǐng)D11,其為簡(jiǎn)化示意圖,其顯示根據(jù)本方面的實(shí)施方案,用于檢測(cè)和定量血清樣品中葡萄糖、蛋白質(zhì)和白蛋白的方法。這些測(cè)試用于舉例說明,不應(yīng)該視為限定性的。這些測(cè)試的詳情可以在Schwartzetal.,1974中找到。根據(jù)一些實(shí)施方案,所述的方法是在圖9所述的并且在本文所述的儀器900中實(shí)施的。諸如血液樣品之類的樣本是通過樣本接收元件918而吸入至樣品組合物室904中,然后吸入至處理室912中。樣品的體積通常為10-200μL。血液樣品通常為由患者最新移出的全血來制備。此外,還將空氣901引入至處理室中。如圖9所示,第一少量的樣品(血清966)顯示位于處理室的第二末端917附近。在時(shí)間0(T0),處理組合物未與樣品966混合。在時(shí)間0(T0)之后的時(shí)間T1,第一組合物(產(chǎn)生葡萄糖顯色的試劑GCPR1124)在樣品1166(與其中的葡萄糖反應(yīng)(可能的話))中反應(yīng),從而形成與GCPR1166反應(yīng)的葡萄糖。任何蛋白質(zhì)1164、白蛋白1162和其他分析物1160保持未處理,因此未受影響。在T1后的時(shí)間,例如T2,產(chǎn)生蛋白質(zhì)顯色的試劑PCPR1122與另一種樣品1164(與其中的蛋白質(zhì)反應(yīng)(可能的話))反應(yīng),從而形成與PCPR1104反應(yīng)的蛋白質(zhì)。任何葡萄糖1102、白蛋白1106和其他分析物1108保持未處理,因此未受影響。在T2后的時(shí)間,例如T3,產(chǎn)生白蛋白顯色的試劑ACPR1120與另一種樣品1162(與其中的蛋白白反應(yīng)(可能的話))反應(yīng),從而形成與ACPR1116反應(yīng)的白蛋白。任何葡萄糖1112、蛋白質(zhì)1114和其他分析物1118保持未處理,因此未受影響。然后,使用Schwartz等人,1974所述的比色方法(例如在評(píng)價(jià)室914的檢測(cè)區(qū)930)來檢測(cè)在樣品1166中與GCPR1166反應(yīng)的葡萄糖,在樣品1164中與PCPR1104反應(yīng)的蛋白質(zhì),以及在樣品1162中與ACPR1116反應(yīng)的白蛋白。可以使用在Kasdan等人的國(guó)際專利申請(qǐng)公開No.WO2011/128893中所述的系統(tǒng)來實(shí)施檢測(cè)。表3示出了本發(fā)明的儀器100和方法的一些代表性化學(xué)應(yīng)用。表3.本發(fā)明的儀器和方法的化學(xué)應(yīng)用現(xiàn)在參照?qǐng)D12A,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的讀取器組件1200和盒1210的簡(jiǎn)化三維正視圖1201。圖12A中示出了讀取器組件1200和盒1210。如所示,所述的盒插入至讀取器組件中。一旦所述的盒被插入讀取器組件中,則將自動(dòng)地實(shí)施所有檢測(cè)的與分析處理和分析。分析的結(jié)果示于使用者界面觸摸屏1215上,其還用于控制讀數(shù)人的操作。圖12B為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于檢測(cè)生物狀況的讀取器組件1200的簡(jiǎn)化三維內(nèi)部正視圖1203。讀取器組件的內(nèi)部構(gòu)件示于圖12B中。可見左側(cè)側(cè)視圖1220,其顯示出ITX計(jì)算機(jī)1222,Galil電動(dòng)機(jī)控制器1224,電子電源1226,插入至盒操作單元(CHU)128中的盒110,以及向前散射檢測(cè)器1230。此外,可見右側(cè)側(cè)視圖1240,其顯示讀取器光學(xué)1242,數(shù)據(jù)獲取板1244,以及常規(guī)的電子印制電路板1246。圖13A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒組件1300的外部側(cè)視圖,以及圖13B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒組件1300的內(nèi)部側(cè)視圖1350。圖14A-14O顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒組件1400(在用于檢測(cè)生物狀況的儀器100的操作中(圖1))中處理事件的順序。在圖14A中,血液樣品1401進(jìn)入樣本接收元件1418,并充滿室1404。在圖14B中,包含處理組合物120(圖1)的泡1420被擠壓,并且抗體混合物與10微升(μL)的血液樣品混合。在圖14C中,混合風(fēng)箱1415被擠壓,這影響了抗體混合物與10微升血液樣品在第一混合室1412中的混合,從而形成第一混合物1403。在圖14D中,風(fēng)箱被釋放,混合物1403沿著扭曲的通道1413被虹吸,并進(jìn)入第二混合室1411中。在風(fēng)箱被釋放時(shí),第一混合物由第二混合室沿著扭曲的通道返回至第一混合室中。每次風(fēng)箱被擠壓時(shí),混合物都向第二室移動(dòng),并且每次風(fēng)箱被釋放,混合物都完全或部分返回至第一室中。這種混合可以多次實(shí)施。圖14E-14G中,第二組合物泡1422被擠壓,從而釋放第二組合物122(圖1)(例如溶解組合物),從而形成第二混合物1405。第二混合物通過加壓風(fēng)箱1415進(jìn)行混合,第二混合物沿著扭曲的通道1413由第二混合室返回至第一混合室。每次風(fēng)箱被擠壓,混合物都向第二室1411移動(dòng),并且每次風(fēng)箱被釋放,混合物都完全或部分返回至第一室1412中。這種混合可以多次實(shí)施。在圖14H-14J中,包含第三組合物124(圖1)(例如對(duì)照參照物)的第三泡1424被釋放至第二混合室中,由此形成第三組合物1407。第三混合物通過擠壓風(fēng)箱1415進(jìn)行混合,第三混合物沿著扭曲的通道1413由第二混合室返回至第一混合室中。每次風(fēng)箱被擠壓,混合物都向第二室1411移動(dòng),并且每次風(fēng)箱被釋放,混合物都完全或部分返回至第一室1412中。這種混合可以多次實(shí)施。在圖14J-14M中,擠壓讀取風(fēng)箱1417,其迫使第三組合的一部分趨于讀取小管1430。在圖14N-14O中,由第三組合物得到的顆粒1460沿著通道1452由所述的小管1430流向讀取區(qū)1450。細(xì)胞通過讀取趨于,并被一束或多束激光1462,1463激發(fā)。至少一個(gè)激發(fā)激光束1464沖擊在細(xì)胞1460上,并通過檢測(cè)器1470來檢測(cè)放射束1466。在一個(gè)實(shí)例中,這為細(xì)胞放射熒光,并且檢測(cè)器1470為分光光度計(jì)。圖15為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,微流體分光光度計(jì)讀數(shù)的示意圖。單個(gè)細(xì)胞1505在微流體通道(未示出)中流動(dòng)通過檢測(cè)區(qū)1510。此外,使用與多波長(zhǎng)熒光標(biāo)簽綴合的抗體而標(biāo)記的靶向細(xì)胞1520流動(dòng)通過檢測(cè)區(qū)。二極管激光器1530將光線/光束1510沖擊在細(xì)胞和靶向細(xì)胞上。細(xì)胞和靶向的細(xì)胞放射不同的發(fā)射光譜(未示出)。光柵1540通過柵格1540將發(fā)射光譜分散在其構(gòu)成波長(zhǎng)1550中。光電倍增管(PMT)陣列1560或雪崩二極管陣列在相當(dāng)于8個(gè)光譜區(qū)域的8個(gè)不同的空間位置處檢測(cè)熒光。圖16顯示讀取器光學(xué)組件的主要模塊構(gòu)件。除了頂視圖1622以外,可見光學(xué)組件的完整的側(cè)視圖1620。激光單元1603在其散熱組件中包含激光以及光束擴(kuò)展器。需要光電倍增器(PMT)組件1602.....1605-1611的其他詳情。圖17顯示光電倍增器(PMT)組件的細(xì)節(jié)。PMT組件的側(cè)面和底面分別顯示為側(cè)視圖1770和底視圖1772。PMT組件的主要元件包含PMT盒1751,PMT光柵組件1752,PMT橋接組件1755,PMT蓋組件,PMT單元1759,PMT透鏡組件1760,PMT針孔螺帽1761,針孔1762,針孔罩1763,以及調(diào)節(jié)桿1765。圖18A顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件1810、盒操作單元1812和前向散射檢測(cè)單元1814。圖18B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,完整的讀取器光學(xué)組件1842的右視圖。圖18C顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件的左視圖。圖18D為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,前向散射檢測(cè)組件1830。該組件包含:LED1852,用于在自動(dòng)聚焦過程中照明讀取通道(讀取區(qū)130,圖1);堵塞1858,用于阻擋低角散射;以及透鏡1856,用于收集檢測(cè)光電二極管(例如(PMT)陣列1560,圖15)的所需的前向散射。圖18E為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,前向散射檢測(cè)組件1830的側(cè)視圖。該圖中顯示照明透鏡1850、收集透鏡1856,1857和1858、以及檢測(cè)光電二極管1860。圖19A顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器組件1930的剖視圖。讀取器組件的這種剖視圖顯示其前面和左側(cè)上的構(gòu)件。這些構(gòu)件包含ITX板1922,盒操作單元1928,以及前向散射檢測(cè)組件1930。圖19B顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器組件1905的拆分右視圖。該圖中的3個(gè)主要的構(gòu)件為讀取器光學(xué)組件1942,盒操作單元1928以及前向散射檢測(cè)模塊1930。圖19C顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器組件的左視拆分圖。該圖顯示ITX計(jì)算機(jī)板1922,盒操作單元1928,前向散射檢測(cè)模塊1930,以及讀取器光學(xué)組件1942的另一側(cè)。圖19D顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒操作單元(CHU)1928的后視圖。在該圖中,可以看見插入盒1910的手柄1901。其中配置傳感器1912,從而檢測(cè)發(fā)動(dòng)機(jī)1910和執(zhí)行器1914的位置(其適用于壓制泡106,108,110(圖1)或420,1422,1424(圖14A-14L)),以及在發(fā)動(dòng)機(jī)的柄上可以看見用于操作風(fēng)箱(940,圖9,1415,1417,圖14A-L)執(zhí)行器1916。提供開口1918用于顯微鏡的物鏡2138(圖21A),從而觀察盒上的讀取通道。圖19E顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,盒操作單元(CHU)的正視圖。該圖顯示盒操作單元(CHU)1928的正視圖。在該圖中,可以看見盒1910上部的手柄。提供了用于觀察微流體路徑的部件1920。該部件通過照相機(jī)1930觀察,以便確保盒內(nèi)進(jìn)行正確操作。提供另一個(gè)開口1940用于前向散射離開盒操作單元,并可以通過前向散射檢測(cè)組件1930觀察。圖19F顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件1999的拆分圖。圖20為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于醫(yī)學(xué)狀況快速測(cè)定的一次性盒2050的簡(jiǎn)化圖。一次性盒2050適用于接收體積流體,例如但不限于血液,尿,血清或血漿。一次性盒可以構(gòu)造并配置,從而具有多個(gè)不同的部分2052,2054,2056和2058。部分2052為體液吸入部分,其適用于由患者(或動(dòng)物)直接或間接接收體液,并且這部分可以用作體液的貯液器。一次性盒2050在所述的多個(gè)部分之間包含流體傳輸手段,例如但不限于空氣壓力、液體壓力、機(jī)械手段和它們的組合。體液吸入部分2052適用于將預(yù)定量的體液(體液樣品2051)傳輸至預(yù)分析樣品處理部分2054。在預(yù)分析樣品處理部分2054中,在體液上實(shí)施至少一個(gè)預(yù)備步驟,例如但不限于:1)與至少一種抗體溫育;2)與至少一種抗原溫育;3)體液中至少一種類型的細(xì)胞的染色;4)體液的至少一種類型的細(xì)胞的酶溶解;5)體液的至少一種類型的細(xì)胞的滲透溶解;6)加熱或冷卻體液的至少一部分;7)將參照材料加入體液中;以及8)與體積流體的至少一種元素發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。然后,將體液的預(yù)處理樣品由預(yù)分析樣品處理部分2054傳輸至樣品激發(fā)/相互作用的區(qū)域或部分2056。這種預(yù)處理樣品可以以連續(xù)的或分批的模式傳輸至樣品激發(fā)/相互作用的部分2056。圖21A為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,讀取器光學(xué)組件2100的光學(xué)排布的簡(jiǎn)化示意圖。激光2140或其他合適的光源提供光束2142,其可以定向于多個(gè)光學(xué)元件,包括二向色濾光片2143,光束分裂器2144,聚焦透鏡2145,針孔2146,以及硅讀取器單元2147,用于記錄朝向樣品2150定向通過物鏡2138并返回至光學(xué)單元的光束2142得到的信號(hào)。其他的光學(xué)元件可以包括光學(xué)衰減器2148,高通濾光片2149,聚焦透鏡2151,狹縫2152,凹光柵2153,以及PMT陣列2154。元件的這種排布(代表了本發(fā)明的實(shí)施方案)可以用于激發(fā)光生成,將其聚焦在樣品上,收集樣品中由激發(fā)光與熒光團(tuán)的相互作用而得到的光信號(hào),并記錄所述的返回的光,以便測(cè)定樣品響應(yīng)于由激光2140得到的光照而產(chǎn)生的熒光。參照?qǐng)D21A,激光照明2142被二向色濾光片2143反射通過物鏡2138,并聚焦在包含流動(dòng)顆粒2158的通道上。該照明激發(fā)了附著在蛋白質(zhì)標(biāo)志物上的熒光團(tuán),其中所述的蛋白質(zhì)標(biāo)志物與所述的細(xì)胞結(jié)合。所得的熒光照片被物鏡2138收集,并且由于更長(zhǎng)波長(zhǎng)的這種輻射通過二向色濾光片2143,并被光束分裂器2144反射通過高通濾光片2149。高通濾光片阻擋了任何反射的激光照明。聚焦透鏡2151將多波長(zhǎng)輻射照明聚焦在狹縫2152上。凹光柵2153在多波長(zhǎng)下通過狹縫成像在PMT陣列2154的元件上。這完成了創(chuàng)建熒光輻射的多譜線檢測(cè)的過程。盡管物鏡收集的大部分照明被光束分裂器2144反射,但是允許一小部分通過,并通過聚焦透鏡2145通過針孔2146聚焦在硅讀取器元件2147上,其可以為單一光電二極管或焦平面陣列,例如CCD傳感器。在聚焦操作過程中,當(dāng)該讀取器單元2147上的信號(hào)最大時(shí),取得最佳焦點(diǎn)。當(dāng)該信號(hào)最大時(shí),PMT陣列2154上的信號(hào)強(qiáng)度也最大?,F(xiàn)在參照?qǐng)D22A,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,在圖21A或21B的光學(xué)單元中多波長(zhǎng)激發(fā)的一個(gè)實(shí)例的示意圖2200。圖22A-22C顯示圖21A和21B中光學(xué)構(gòu)造的擴(kuò)展,從而允許多激發(fā)的波長(zhǎng)。圖22A顯示用于結(jié)合不同波長(zhǎng)的多重激光從而產(chǎn)生包含所有波長(zhǎng)的單一同軸光束2214的構(gòu)造(參見附圖)??梢允褂枚蛏R2204結(jié)合2種不同的波長(zhǎng),例如綠色2202和紅色2206。光束之一,紅色2206被二向色鏡反射,而第二光束,綠色2202通過二向色鏡,從而產(chǎn)生包含2種波長(zhǎng)的單一光束2208,黃色。這種結(jié)合波長(zhǎng)的光束現(xiàn)在可以用作朝向第二二向色鏡2210的輸入之一,其中第三波長(zhǎng)2212被第二二向色鏡反射,從而產(chǎn)生包含所有3個(gè)波長(zhǎng)的單一同軸光束2216?,F(xiàn)在參照?qǐng)D22B,其顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案的傳輸?shù)膱D形輸出2220,其為用于圖7B的二向色濾光片2200的波長(zhǎng)的函數(shù),其中使用圖22A的多波長(zhǎng)激發(fā)。與圖22C的鏡子2252相似或抑制的多波段二向色鏡(未示出)用于通過物鏡2254照明樣品(圖8C),同時(shí)允許所得的輻射在所有波長(zhǎng)下都通過二向色鏡2252,除了多光束激發(fā)2214的那些(圖8A)。按照這種方式,使用單一波長(zhǎng)的相同的epi-構(gòu)型事實(shí)上可以對(duì)二向色鏡2252適當(dāng)?shù)馗淖?,并加入多重激?202,2206,2212,從而提供多波長(zhǎng)激發(fā),同時(shí)實(shí)際上保持單一激發(fā)系統(tǒng)的所有檢測(cè)波長(zhǎng)。轉(zhuǎn)向圖22C,可見根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,光學(xué)單元的部件2250的示意圖,其中使用了圖22A的多波長(zhǎng)激發(fā)以及圖21A的二向色濾光片。在一些情況下,部件2250可以替代亞系統(tǒng)2175(圖21B)。表4.用于本發(fā)明的代表性構(gòu)件的代表值盡管很多之前的討論集中于本發(fā)明一些實(shí)施方案的光學(xué)元件,但是本文所提出的診斷系統(tǒng)的重要構(gòu)件之一為一次性樣品盒?,F(xiàn)在參照?qǐng)D23A,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,圖19A的取樣盒110或102(圖1)的示意圖。盒2350包含預(yù)分析構(gòu)件2352,樣品(未示出)可以引入至其中。所述的樣品通常為全部或部分(血清等)的血液。另外或備選地可以使用其他液體樣品。在預(yù)分析構(gòu)件2352中,允許樣品與預(yù)包裝于構(gòu)件2352中的化學(xué)品相互作用。該相互作用可以是被動(dòng)的,或者包括主動(dòng)混合。在分析構(gòu)件2352中包含的化學(xué)品可以為濕態(tài)或干態(tài),并且通常包含與熒光探針結(jié)合的抗體??梢葬槍?duì)于預(yù)定的生物標(biāo)志物等的結(jié)合能力來預(yù)先選擇抗體。在典型的試驗(yàn)中,預(yù)定量(通常少于50微升)的血液被引入至一次性盒2350的預(yù)分析構(gòu)件2352中。將所述的樣品與預(yù)分析構(gòu)件2352中存在的化學(xué)試劑主動(dòng)混合預(yù)定的時(shí)間段,通常少于10分鐘。然后通過即將討論的手段使所述的樣品移動(dòng)通過毛細(xì)管區(qū)域2353,在此,其暴露于由物鏡2338傳遞的光束2342。在毛細(xì)管區(qū)域2352中,樣品流動(dòng)的方向通過箭頭顯示。毛細(xì)管區(qū)域2353被設(shè)計(jì)成可以使顆粒流以單行通過光束2342。這種排布可以計(jì)數(shù)顆粒的數(shù)量以及對(duì)顆粒的單獨(dú)查詢,從而測(cè)定各顆粒上生物標(biāo)志物的存在情況(通過它們相關(guān)的熒光標(biāo)簽)。此類物理排布允許檢測(cè)各顆粒上一種或多種生物標(biāo)志物(而與顆粒特定的性質(zhì)無關(guān),例如大小、形狀和數(shù)量)。最后,具有收集構(gòu)建2354,其接收暴露于光束2342后的樣品。這是廢物區(qū),并且可以是完全自容式的清除,以用于樣品制備、分析和廢物收集。注意一次性盒可以為任何相關(guān)的形狀,并且為了理解其構(gòu)件和功能,如圖20所示。如上文提及的那樣,在預(yù)分析處理從而允許熒光標(biāo)簽與細(xì)胞/顆粒結(jié)合后的樣品必需在光學(xué)單元產(chǎn)生的光束2342下流動(dòng)(未示出)。這種流動(dòng)通常為“單行的”,從而允許精確地測(cè)定各分析細(xì)胞上的細(xì)胞特異性標(biāo)志物。誘導(dǎo)流動(dòng)的方法包括但不限于電學(xué)刺激、化學(xué)誘導(dǎo)和真空拉動(dòng)。在電學(xué)刺激系統(tǒng)中,在跨越毛細(xì)管區(qū)域2353上施加電荷,從而誘導(dǎo)電荷顆粒由預(yù)分析構(gòu)件2352向收集構(gòu)件2354移動(dòng)??梢酝ㄟ^細(xì)胞計(jì)數(shù)器施加電荷,一次性盒2350可以放置于其中或者是外部來源的。備選地,毛細(xì)管區(qū)域可以包含促進(jìn)樣品由左側(cè)向右側(cè)移動(dòng)的化學(xué)特征(親水性/疏水性;正電荷/負(fù)電荷),如圖23A所示。備選地,可以對(duì)收集構(gòu)件2354施加真空,從而由預(yù)分析構(gòu)件2352將樣品拉動(dòng)通過毛細(xì)管區(qū)域2353。可以使用其他方法使液體樣品在光束2342之下移動(dòng),以用于分析。如本文所述,光學(xué)和樣品處理可以分別處理。此類排布并非是強(qiáng)制的,在一次性盒中可以包含適當(dāng)樣品分析所必需的一些光學(xué)特征。現(xiàn)在參照?qǐng)D23B,其顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,在流式細(xì)胞儀裝置中一次性盒2300(例如系統(tǒng)100)的示意圖?,F(xiàn)在注意力轉(zhuǎn)向圖23B,其顯示毛細(xì)管區(qū)域2353的放大圖。在毛細(xì)管區(qū)域2353中,顆粒2390沿著箭頭2380所示意的方向流動(dòng)。顆粒2390流動(dòng)通過物鏡2338,其發(fā)出光2342通過毛細(xì)管2353。流動(dòng)限制元件2394可以存在于毛細(xì)管區(qū)域2353中,從而促進(jìn)顆粒2390以幾乎單行的方式移動(dòng)通過光2342。多個(gè)顆粒一起通過可以通過處理軟件分辨。可以通過光2342照明顆粒2390上的分子標(biāo)志物2395,并且其熒光將被臨近的光電倍增管2399捕獲。光電倍增管2399可以區(qū)分熒光的波長(zhǎng),因此生物標(biāo)志物2395存在于顆粒2390上。因此,本發(fā)明的系統(tǒng)可以測(cè)定哪些生物標(biāo)志物存在于顆粒2390上,其可以在本發(fā)明的系統(tǒng)中檢測(cè)。光電倍增管2399可以具有用于區(qū)分精細(xì)波長(zhǎng)的多個(gè)管或元件的陣列,并且備選地,可以使用薄膜、CCD或其他合適的光接收讀取單元來替代該光電倍增管2399。應(yīng)該理解的是在傳輸構(gòu)造下,圖23B顯示系統(tǒng)1200的構(gòu)造(圖12)的一個(gè)實(shí)施方案,其中檢測(cè)器(光電倍增管2399)設(shè)置于盒2300的物鏡2338的對(duì)面。本發(fā)明的系統(tǒng)包含適用于運(yùn)行診斷過程的控制軟件。應(yīng)該理解的是控制軟件可以為流式細(xì)胞儀的整合部件,或者備選地,安裝于相關(guān)的計(jì)算裝置中(參見圖1和12A),其可以包括但不限于筆記本電腦、iPod、iPad、手機(jī)或大型計(jì)算機(jī)?,F(xiàn)在參照?qǐng)D24,其為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,用于醫(yī)學(xué)狀況快速測(cè)定的方法的簡(jiǎn)化流程圖2400。應(yīng)該理解的是,本發(fā)明所述的方法描繪了用于測(cè)定患者健康狀態(tài)的本發(fā)明的一個(gè)非限定性實(shí)施方案。此外,其他實(shí)施方案也可以解釋為本發(fā)明的一部分。在體液提供步驟2402中,諸如血液、尿、血清或血漿之類的體液由人類或動(dòng)物患者提供。通常,所述的樣品為新鮮的,但是也可以是儲(chǔ)存的、冷凍的或凍融的樣品。所述的流體通常為液體,并且在4-37℃的溫度下。在體液引入步驟2404中,部分或所有的體液樣品2051(圖20)被引入至一次性盒中(102,圖1)。在反應(yīng)步驟2406中,流體樣品在盒中與至少一種反應(yīng)物反應(yīng),從而形成處理的樣品。根據(jù)一些實(shí)施方案,該步驟是在預(yù)分析樣品處理部分2054(圖20)中實(shí)施的,如下文中詳細(xì)描述的那樣。在沖擊步驟2408中,輻射沖擊在處理的樣品上,例如但不限于樣品激發(fā)/相互作用部分2056,由此在光學(xué)單元1242的方向上形成多個(gè)光譜不同的信號(hào)(圖12C,參見上文所述)。在光譜輻射監(jiān)測(cè)步驟2410中,多個(gè)光譜不同的信號(hào)由多個(gè)輻射檢測(cè)器2154(圖21A)檢測(cè)。檢測(cè)劑輸出數(shù)據(jù)。此后,在數(shù)據(jù)處理步驟2412中,輸出數(shù)據(jù)由信號(hào)處理器2036(圖20)和/或計(jì)算機(jī)1222(圖12C)來處理,從而提供表示醫(yī)學(xué)狀況的輸出。圖25為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,顯示參照珠(RM)相對(duì)于由人類患者得到的樣品(PMN)而言,在經(jīng)過一定時(shí)間后光學(xué)輸出的三維圖。圖25顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,顯示參照珠(RM)相對(duì)于由人類患者得到的樣品(PMN)而言,在經(jīng)過一定時(shí)間后光學(xué)輸出的三維圖。在6個(gè)波段(500-525nm,525-550nm,550-575nm,575-600nm,600-625nm以及625至650nm)中,輻射的振幅示于適用于各樣品的時(shí)間的圖中。不同的熒光團(tuán)具有不同的輻射光譜。可以理解的是在各波長(zhǎng)下光譜含量或形狀、以及振幅都與使用吖啶橙(AO)染色的嗜中性粒細(xì)胞和包含明亮的光譜熒光團(tuán)的參照珠(RM)明顯不同。AO輻射的峰為525-550nm波段,而RM的峰為500-525nm波段,并且在任何波段中都比AO具有明顯更大的振幅。圖26A-26C顯示根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠和由人類患者得到的樣品在經(jīng)過一定時(shí)間后光學(xué)輸出的圖。轉(zhuǎn)向圖26A-26C,可見根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案,參照珠和由人類患者得到的樣品在經(jīng)過一定時(shí)間后光學(xué)輸出的圖。在這些二維附圖中,由各波段得到的蹤跡疊加在相同的圖上。圖26A顯示圖26B中由嗜中性粒細(xì)胞得到的額框中的脈沖。由這些圖可見,525-550nm通道中的振幅超出了500-525nm通道中的振幅,其為AO的特征。圖26C顯示AO染色嗜中性粒細(xì)胞發(fā)射光譜與RM發(fā)射光譜的比較。500-525nm波段中光譜的相對(duì)振幅與525-550nm波段中的相對(duì)振幅明顯區(qū)分為2個(gè)熒光團(tuán)。此外,RM發(fā)射的最大振幅顯著大于AO的最大振幅。本發(fā)明所述的并示出的本發(fā)明的系統(tǒng)提供了用途,例如但不限于4個(gè)以下設(shè)想的情況中的至少一種:a)當(dāng)為了作出精確的診斷測(cè)定而需要多重信息(例如生物標(biāo)志物和白細(xì)胞狀態(tài))時(shí);b)當(dāng)為了測(cè)定患者在疾病曲線上的位置時(shí)必須進(jìn)行多種相繼的測(cè)量時(shí);c)當(dāng)快速需要白細(xì)胞和相似數(shù)據(jù)并且處于POC環(huán)境下時(shí);以及d)當(dāng)在波長(zhǎng)中熒光信號(hào)重疊并且對(duì)于給定的波長(zhǎng)范圍需要測(cè)定各信號(hào)的相對(duì)貢獻(xiàn)時(shí)。本發(fā)明的系統(tǒng)、試劑盒、方法、儀器和盒以及優(yōu)先權(quán)文件為許多實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用提供了非常有用的平臺(tái)。下文的列舉是示例性的,并且不應(yīng)視為限定性的。本發(fā)明的系統(tǒng)、試劑盒、方法、儀器和盒可以用于細(xì)胞表面標(biāo)志物,例如CD64檢驗(yàn)(參見US8,116,984,和Davis,BruceH等人的"NeutrophilCD64isanimprovedindicatorofinfectionorsepsisinemergencydepartmentpatients."Archivesofpathology&laboratorymedicine130.5(2006):654-661;Hoffmann,JohannesJML."NeutrophilCD64asasepsisbiomarker."BiochemiaMedica21.3(2011):282-290)。本發(fā)明的系統(tǒng)、試劑盒、方法、儀器和盒可以用于細(xì)胞表面標(biāo)志物,例如CD64檢驗(yàn)細(xì)胞表面標(biāo)志物,例如CD4/CD8檢驗(yàn)(參見Crowe,Suzanne,etal."Monitoringofhumanimmunodeficiencyvirusinfectioninresource-constrainedcountries."Clinicalinfectiousdiseases37.Supplement1(2003):S25-S35)。本發(fā)明的系統(tǒng)、試劑盒、方法、儀器和盒可以用于干細(xì)胞識(shí)別(參見Nielsen,JulieS.,andKellyM.McNagny."NovelfunctionsoftheCD34family."JournalofCellScience121.22(2008):3683-3692)。本發(fā)明的系統(tǒng)、試劑盒、方法、儀器和盒可以用于微小殘留病灶檢驗(yàn)(參見Rawstron,A.C.,etal."Internationalstandardizedapproachforflowcytometricresidualdiseasemonitoringinchroniclymphocyticleukaemia."Leukemia21.5(2007):956-964;Rawstron,AndyC.,etal."ReportoftheEuropeanMyelomaNetworkonmultiparametricflowcytometryinmultiplemyelomaandrelateddisorders."haematologica93.3(2008):431-438.;Brüggemann,M.,etal."StandardizedMRDquantificationinEuropeanALLtrials:proceedingsoftheSecondInternationalSymposiumonMRDassessmentinKiel,Germany,18–20September2008."Leukemia24.3(2009):521-535.;Rawstron,A.C.,etal."Improvingefficiencyandsensitivity:EuropeanResearchInitiativeinCLL(ERIC)updateontheinternationalharmonisedapproachforflowcytometricresidualdiseasemonitoringinCLL."Leukemia27.1(2012):142-149.;Sebastian,MatthiasRitgen,andMichaelKneba."FlowcytometricMRDdetectioninselectedmatureB-cellmalignancies."Lymphoma.HumanaPress,2013.149-174.;Stehlíková,O.,etal."Detectingminimalresidualdiseaseinpatientswithchroniclymphocyticleukemiausing8‐colorflowcytometryprotocolinroutinehematologicalpractice."Internationaljournaloflaboratoryhematology(2013).;Mullier,andBernar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