本發(fā)明涉及一種用于分析抗體、抗原等生物物質(zhì)的分析裝置以及分析方法。

背景技術(shù)：

已知一種通過檢測(cè)出與疾病相關(guān)聯(lián)的特定的抗原或抗體來作為生物標(biāo)志物，對(duì)疾病的發(fā)現(xiàn)、治療效果等進(jìn)行定量分析的免疫測(cè)定方法(immunoassay)。檢測(cè)出通過酶標(biāo)識(shí)的抗原或抗體的elisa方法(enzyme-linkedimmunosorbentassay酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定)為免疫測(cè)定方法之一，因成本等優(yōu)勢(shì)而得到廣泛普及。在elisa方法中。對(duì)前處理、抗原抗體反應(yīng)、b/f(bond/free)分離、酶反應(yīng)等進(jìn)行合計(jì)后的時(shí)間為數(shù)小時(shí)至一天左右，需要較長(zhǎng)時(shí)間。

與此相對(duì)，提出了如下的技術(shù)：使固定在光盤的抗體與試樣中的抗原結(jié)合，并使抗原與具有抗體的粒子結(jié)合，通過光頭進(jìn)行掃描，在短時(shí)間內(nèi)對(duì)在光盤上捕捉到的粒子進(jìn)行計(jì)數(shù)(專利文獻(xiàn)1)。此外，提出了使生物試樣、粒子附著在光盤的形成有跟蹤構(gòu)造的面上，通過光拾取器檢測(cè)信號(hào)的變化的技術(shù)(專利文獻(xiàn)2)。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開平5-5741號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2：日本特表2002-530786號(hào)公報(bào)

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

在使用光盤的分析裝置中，在檢測(cè)作為檢測(cè)對(duì)象的生物標(biāo)志物時(shí)，光盤基板表面的細(xì)微的損傷成為噪聲成分。

此外，在使用光盤的分析裝置中，在光盤基板的表面上進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，因此產(chǎn)生由反應(yīng)引起的噪聲。具體地說，向基板表面固定抗體、通過脫脂牛奶或牛血清白蛋白等溶液進(jìn)行的封閉處理、以及使用含有鹽的緩沖液進(jìn)行的測(cè)定等工序中的殘?jiān)驓埩粑镌谙磧艉笕詺埩?，從而成為噪聲成分。由殘?jiān)驓埩粑镆鸬脑肼暤燃?jí)與基板表面的細(xì)微的損傷引起的噪聲等級(jí)相比，大1位數(shù)以上，成為使生物標(biāo)志物的檢測(cè)精度惡化的主因。

實(shí)施方式的目的在于提供一種抑制噪聲成分的影響，使基于微粒子的檢測(cè)對(duì)象的檢測(cè)精度提高的分析裝置以及分析方法。

根據(jù)實(shí)施方式的第1方式，提供一種分析裝置，該分析裝置具備：光掃描部，其對(duì)在表面上固定了與微粒子相結(jié)合的檢測(cè)對(duì)象的基板進(jìn)行光學(xué)掃描，從上述基板取得檢測(cè)信號(hào)；以及脈沖波形分析部，其對(duì)上述光掃描部取得的上述檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形進(jìn)行分析，上述脈沖波形分析部具有：振幅判定部，其判定上述脈沖波形的峰值是否存在于預(yù)定范圍內(nèi)；以及脈沖寬度判定部，其判定上述脈沖波形的脈沖寬度是否在預(yù)定范圍內(nèi)。

根據(jù)實(shí)施方式的第2方式，提供一種分析方法，其包括：檢測(cè)信號(hào)取得步驟，對(duì)在表面上固定了與微粒子相結(jié)合的檢測(cè)對(duì)象的基板進(jìn)行光學(xué)掃描，從上述基板取得檢測(cè)信號(hào)；振幅判定步驟，判定上述檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形的峰值是否存在于預(yù)定范圍內(nèi)；以及脈沖寬度判定步驟，判定上述脈沖波形的脈沖寬度是否在預(yù)定范圍內(nèi)。

根據(jù)實(shí)施方式的分析裝置以及分析方法，能夠抑制噪聲成分的影響，使基于微粒子的檢測(cè)對(duì)象的檢測(cè)精度提高。

附圖說明

圖1是表示實(shí)施方式的分析裝置的框圖。

圖2是用于說明通過抗原抗體反應(yīng)將作為生物標(biāo)志物的抗原用微球(bead)和基板進(jìn)行夾心捕獲來標(biāo)記，并對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)的方法的一例的示意圖。

圖3是檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形數(shù)據(jù)的一例。

圖4是表示實(shí)施方式的分析方法的流程圖。

圖5是表示脈沖波形與各參數(shù)的關(guān)系的示意圖。

圖6是用于說明各基準(zhǔn)值的設(shè)定方法的脈沖波形圖。

圖7是用于說明基準(zhǔn)值的設(shè)定方法的脈沖波形圖。

圖8是表示微球計(jì)數(shù)數(shù)量與生物標(biāo)志物量的關(guān)系的相關(guān)圖。

具體實(shí)施方式

使用圖1，對(duì)本實(shí)施方式的分析裝置進(jìn)行說明。

如圖1所示，分析裝置1具備基板2、由使基板2旋轉(zhuǎn)的電動(dòng)機(jī)等構(gòu)成的驅(qū)動(dòng)部3、對(duì)基板2的表面進(jìn)行光學(xué)掃描的光掃描部4、對(duì)驅(qū)動(dòng)部3和光掃描部4進(jìn)行控制并對(duì)通過光掃描部4檢測(cè)出的檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形進(jìn)行分析的控制部5。控制部5可以由微處理器或微型計(jì)算機(jī)構(gòu)成。

基板2例如是具有與壓縮光盤(cd)、dvd、藍(lán)光光盤(bd)等光盤相同尺寸的圓盤狀?；?例如一般由在光盤中使用的聚碳酸酯樹脂或環(huán)烯烴共聚物等具有疏水性的樹脂材料形成。

基板2在表面具有光掃描部4可掃描的軌道構(gòu)造。軌道構(gòu)造由槽(groove)、岸(land)、坑(pit)等構(gòu)成，從內(nèi)周側(cè)到外周側(cè)形成為螺旋狀。在基板2的表面上，可根據(jù)需要執(zhí)行薄膜形成、基于硅烷偶聯(lián)劑等進(jìn)行的表面處理。

如圖2所示，在基板2的表面上固定有與檢測(cè)對(duì)象的生物物質(zhì)即抗原12特異性結(jié)合的抗體11。如后所述，抗原12與在微粒子即微球16的表面上固定的抗體15以及基板2的抗體11特異性結(jié)合。在基板2上標(biāo)記通過微球16和基板2夾心捕獲的抗原12。抗原12通過與抗體11以及抗體15特異性結(jié)合，從而用作成為疾病等指標(biāo)的生物標(biāo)志物。

如圖2(a)所示，在基板2的表面上預(yù)先固定有抗體11。通過疏水結(jié)合或共價(jià)結(jié)合，在基板2的表面上結(jié)合抗體11?？梢越?jīng)由抗生物素蛋白等結(jié)合力強(qiáng)的物質(zhì)將抗體11固定在基板2的表面上。

如圖2(b)所示，將包含抗原12的試樣溶液13滴到基板2的表面上?？乖?2通過布朗運(yùn)動(dòng)在試樣溶液13中移動(dòng)而與抗體11接觸，通過抗原抗體反應(yīng)與抗體11特異性結(jié)合。

如圖2(c)所示，使用純水等洗凈滴到基板2上的試樣溶液13，由此從基板2除去包含不與抗體11結(jié)合的剩余抗原12的試樣溶液13。

如圖2(d)所示，將包含微球16的緩沖液14滴到基板2的表面上。也可以在殘留有試樣溶液13的狀態(tài)下，將緩沖液14滴到基板2上。

作為生物標(biāo)志物的抗原12通過抗原抗體反應(yīng)與微球16的抗體15特異性結(jié)合，并與基板2的抗體11特異性結(jié)合，由此通過微球16和基板2夾心捕獲抗原12，并在基板2上進(jìn)行標(biāo)記。

微球16例如通過內(nèi)含鐵氧體等磁性體的聚苯乙烯等合成樹脂形成為大致球形。微球16的直徑為數(shù)十納米～200納米程度。因?yàn)樵诨?的相反側(cè)配置有磁鐵，因此在滴下緩沖液14時(shí)，微球16能夠迅速集中到基板2的表面。由此，促進(jìn)微球16與抗原12的反應(yīng)。此外，通過同時(shí)投入抗原12和微球16，能夠?qū)⒅钡綐?biāo)記在基板2上固定的抗原12為止的時(shí)間縮短至數(shù)分鐘左右。

抗體11和抗體15只要是與抗原12特異性結(jié)合的特異性生物物質(zhì)即可，能夠選擇各自與其他部位相結(jié)合的組合。

例如，把在表面發(fā)現(xiàn)了多種抗原12的外泌體等膜囊泡設(shè)為檢測(cè)對(duì)象的情況下，通過使抗體11和抗體15為不同的種類，能夠分析具有2種抗原12的生物試樣。并不限于此，外泌體等與通常的抗原不同，在表面存在多個(gè)為同種蛋白質(zhì)的抗原，因此也可以使抗體11和抗體15為相同種類。

如圖2(e)所示，使用純水等洗凈滴到基板2上的緩沖液14，由此能夠去除包含不與抗原12結(jié)合的剩余微球16的緩沖液14。

如圖2(f)所示，通過光掃描部4對(duì)基板2進(jìn)行光學(xué)掃描，檢測(cè)微球16，由此能夠?qū)ξ⑶?6標(biāo)記的抗原12(生物標(biāo)志物)進(jìn)行分析。例如，能夠?qū)ι飿?biāo)志物的量(濃度)進(jìn)行定量。

返回到圖1，光掃描部4具備激光振蕩器21、準(zhǔn)直透鏡22、分束器23、致動(dòng)器24、物鏡25、聚光透鏡26、光檢測(cè)部27。光掃描部4是對(duì)基板2進(jìn)行光學(xué)掃描的光拾取器。

激光振蕩器21根據(jù)控制部5的控制，向準(zhǔn)直透鏡22射出激光。激光振蕩器21例如是射出波長(zhǎng)為與bd的再生用波長(zhǎng)相同的405nm，且輸出為1mw左右的激光的半導(dǎo)體激光振蕩器。

準(zhǔn)直透鏡22使從激光振蕩器21射出的激光平行。

分束器23向物鏡25反射通過準(zhǔn)直透鏡22平行后的激光。

物鏡25通過與控制部5的控制相對(duì)應(yīng)的致動(dòng)器24的驅(qū)動(dòng)，將經(jīng)由分束器23的激光會(huì)聚到固定了抗體11的基板2的表面來成像出點(diǎn)s。物鏡25的孔徑值例如為0.85。會(huì)聚的激光在基板2進(jìn)行反射，入射到分束器23中。

入射到分束器23的激光透射分束器23，經(jīng)由聚光透鏡26入射到光檢測(cè)部27。聚光透鏡26使在基板2反射的激光會(huì)聚到光檢測(cè)部27。光檢測(cè)部27例如由光電二極管構(gòu)成，向控制部5輸出與在基板2反射的激光的光量對(duì)應(yīng)的檢測(cè)信號(hào)。

控制部5具備：控制驅(qū)動(dòng)部3的驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)控制部28、分別控制激光振蕩器21和致動(dòng)器24的光學(xué)系統(tǒng)控制部29、對(duì)從光檢測(cè)部27輸出的檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形進(jìn)行分析的脈沖波形分析部30。

驅(qū)動(dòng)部3通過驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)控制部28的控制，以恒定線速度(clv)方式使基板2旋轉(zhuǎn)。

致動(dòng)器24通過光學(xué)系統(tǒng)控制部29的控制，使光掃描部4在基板2的半徑方向上移動(dòng)，以便螺旋狀地對(duì)旋轉(zhuǎn)的基板2的表面進(jìn)行掃描。光學(xué)系統(tǒng)控制部29根據(jù)從光檢測(cè)部27輸出的檢測(cè)信號(hào)，檢測(cè)聚焦誤差(fe)、跟蹤誤差(te)等誤差。光學(xué)系統(tǒng)控制部29根據(jù)檢測(cè)出的誤差，對(duì)致動(dòng)器24等進(jìn)行控制以便適當(dāng)?shù)貙?duì)基板2的表面進(jìn)行掃描。

脈沖波形分析部30具有脈沖檢測(cè)部31、振幅判定部32、脈沖寬度判定部33。振幅判定部32能夠由振幅濾波器構(gòu)成。

使用圖3～圖8，說明通過脈沖波形分析部30分析從光檢測(cè)部27輸出的檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形的方法。

通過操作員的操作，驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)控制部28對(duì)驅(qū)動(dòng)部3進(jìn)行控制，使基板2以預(yù)定的線速度，例如以4.92m/秒進(jìn)行旋轉(zhuǎn)。此外，光學(xué)系統(tǒng)控制部29對(duì)光掃描部4進(jìn)行控制，從而使激光會(huì)聚到基板2的表面成像出點(diǎn)s。

通過抗原抗體反應(yīng)將抗原12和微球16固定在表面的基板2，通過驅(qū)動(dòng)部3以恒定線速度旋轉(zhuǎn)，并通過光掃描部4被光學(xué)掃描。

在光掃描部4，通過光檢測(cè)部27檢測(cè)從激光振蕩器21射出并在基板2的表面反射的激光。光檢測(cè)部27向脈沖檢測(cè)部31輸出與檢測(cè)出的激光的光量對(duì)應(yīng)的檢測(cè)信號(hào)。

從光檢測(cè)部27例如檢測(cè)出圖3所示的脈沖波形(檢測(cè)信號(hào))。圖3的橫軸為時(shí)間，縱軸為電壓。在圖3中表示了在下側(cè)具有峰值的4個(gè)脈沖波形。

在圖4的步驟s1中，脈沖檢測(cè)部31取得從光檢測(cè)部27輸出的檢測(cè)信號(hào)，并檢測(cè)所取得的檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形的下降。脈沖檢測(cè)部31檢測(cè)低于預(yù)先設(shè)定的閾值等級(jí)(電壓)vth的時(shí)間點(diǎn)來作為脈沖波形的下降。

另外，事先計(jì)算出通過光檢測(cè)部27檢測(cè)出的微球16的脈沖波形的半寬的平均值，預(yù)先將與半寬的平均值對(duì)應(yīng)的電壓設(shè)定為閾值等級(jí)vth。

在步驟s2中，脈沖檢測(cè)部31在檢測(cè)出下降的情況下(“是”)使處理向步驟s3前進(jìn)，在沒有檢測(cè)出下降的情況下(“否”)結(jié)束處理。

在步驟s3中，脈沖檢測(cè)部31取得脈沖波形低于閾值等級(jí)vth的時(shí)間點(diǎn)的時(shí)刻t1，對(duì)計(jì)數(shù)器標(biāo)志c1、第1基準(zhǔn)等級(jí)(電壓)v1的標(biāo)志l1、以及第2基準(zhǔn)等級(jí)(電壓)v2的標(biāo)志l2進(jìn)行復(fù)位(低0)，使處理向步驟s4前進(jìn)。

在步驟s4中，振幅判定部32檢測(cè)脈沖波形的峰值(谷底電壓)vp，判定檢測(cè)出的峰值vp是否小于預(yù)先設(shè)定的第1基準(zhǔn)等級(jí)v1。

振幅判定部32在檢測(cè)出的峰值vp小于第1基準(zhǔn)等級(jí)v1的情況下(“是”)使處理向步驟s5前進(jìn)，在檢測(cè)出的峰值vp大于第1基準(zhǔn)等級(jí)v1的情況下(“否”)使處理向步驟s8前進(jìn)。

在步驟s5中，振幅判定部32將標(biāo)志l1設(shè)定為高1，使處理向步驟s6前進(jìn)。

在步驟s6中，振幅判定部32判定脈沖波形的峰值vp是否小于預(yù)先設(shè)定的第2基準(zhǔn)等級(jí)v2。

振幅判定部32在峰值vp小于第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的情況下(“是”)使處理向步驟s7前進(jìn)，在峰值vp大于第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的情況下(“否”)使處理向步驟s8前進(jìn)。

在步驟s7中，振幅判定部32將標(biāo)志l2設(shè)定為高1，使處理向步驟s8前進(jìn)。

在步驟s8中，振幅判定部32將標(biāo)志l1為高1，且標(biāo)志l2為低0的檢測(cè)信號(hào)判定為有效的檢測(cè)信號(hào)(“是”)，使處理向步驟s9前進(jìn)。此外，振幅判定部32在未判定為有效的檢測(cè)信號(hào)(“否”)時(shí)結(jié)束處理。

在步驟s9中，脈沖寬度判定部33檢測(cè)脈沖波形的上升。脈沖寬度判定部33檢測(cè)高于在下降檢測(cè)中使用的閾值等級(jí)vth的時(shí)間點(diǎn)來作為脈沖波形的上升。

在步驟s10中，脈沖寬度判定部33在檢測(cè)出上升的情況下(“是”)使處理向步驟s11前進(jìn)，在未檢測(cè)出的情況下(“否”)結(jié)束處理。

在步驟s11中，脈沖寬度判定部33取得脈沖波形高于閾值等級(jí)vth的時(shí)間點(diǎn)的時(shí)刻t2，根據(jù)取得的時(shí)刻t2和在步驟s3中取得的下降的時(shí)刻t1取得脈沖波形的脈沖寬度t(大致相當(dāng)于半寬)，使處理向步驟s12前進(jìn)。

在此，圖5表示了脈沖波形的峰值(谷底電壓)vp與第1基準(zhǔn)等級(jí)v1和第2基準(zhǔn)等級(jí)v2之間的關(guān)系、以及脈沖波形的脈沖寬度t與閾值等級(jí)vth、下降的時(shí)刻t1和上升的時(shí)刻t2之間關(guān)系。

如圖5所示，閾值等級(jí)vth、第1基準(zhǔn)等級(jí)v1及第2基準(zhǔn)等級(jí)v2具有vth＞v1＞v2的關(guān)系。

圖5所示的檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形的峰值vp存在于第1基準(zhǔn)等級(jí)v1至第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的范圍中。因此，圖5所示的檢測(cè)信號(hào)在步驟s8中被判定為是有效的檢測(cè)信號(hào)。

峰值vp不存在于第1基準(zhǔn)等級(jí)v1至第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的范圍內(nèi)的脈沖波形的檢測(cè)信號(hào)被判定為是用于抑制非特異性吸附的封閉劑等檢測(cè)對(duì)象以外的蛋白質(zhì)聚集引起的噪聲成分。

例如在圖3所示的4個(gè)檢測(cè)信號(hào)中，左側(cè)的3個(gè)檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形的峰值vp存在于第1基準(zhǔn)等級(jí)v1至第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的范圍內(nèi)，因此被判定為是有效的檢測(cè)信號(hào)。另一方面，右端的檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形的峰值vp不存在于第1基準(zhǔn)等級(jí)v1至第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的范圍內(nèi)，因此被判定為是噪聲成分。

在此，對(duì)第1基準(zhǔn)等級(jí)v1和第2基準(zhǔn)等級(jí)v2的設(shè)定方法進(jìn)行說明。

首先，準(zhǔn)備不進(jìn)行在圖2中說明的基板抗體形成、封閉處理以及含有鹽的緩沖液的滴下等處理，而使測(cè)定微球在光盤的底板上分散并干燥后的校正用盤。

接著，通過圖1所示的分析裝置1的光掃描部4對(duì)校正用盤進(jìn)行光學(xué)掃描，一邊用示波器等觀察檢測(cè)信號(hào)的脈沖波形，一邊測(cè)定脈沖波形的峰值(谷底電壓)。

針對(duì)測(cè)定出的峰值計(jì)算分散，例如以3σ為范圍設(shè)定第1基準(zhǔn)等級(jí)v1和第2基準(zhǔn)等級(jí)v2。

根據(jù)本設(shè)定方法，使用實(shí)際進(jìn)行分析的分析裝置1，根據(jù)實(shí)際使用的微球的檢測(cè)信號(hào)，設(shè)定第1基準(zhǔn)等級(jí)v1和第2基準(zhǔn)等級(jí)v2，因此能夠容易且適當(dāng)?shù)卦O(shè)定第1基準(zhǔn)等級(jí)v1和第2基準(zhǔn)等級(jí)v2。

[實(shí)驗(yàn)結(jié)果1]

針對(duì)具有信號(hào)強(qiáng)度(振幅調(diào)制度)的平均值為0.5的特性的微球的檢測(cè)信號(hào)，設(shè)定為vth＝0.75、v1＝0.6、v2＝0.3，通過振幅判定部32實(shí)施了檢測(cè)信號(hào)的濾波處理。結(jié)果，去除了大約2％的檢測(cè)信號(hào)。微球的檢測(cè)信號(hào)的信號(hào)強(qiáng)度的偏差為10％以下，即認(rèn)為是峰值(谷底電壓)且0.55～0.45的范圍。因此，通過振幅判定部32去除的檢測(cè)信號(hào)被認(rèn)為是噪聲成分。由此，能夠使生物標(biāo)志物檢測(cè)精度提高大約2％。

[實(shí)驗(yàn)結(jié)果2]

不滴下含有檢測(cè)對(duì)象的抗原(生物標(biāo)志物)的試樣溶液地進(jìn)行測(cè)定，準(zhǔn)備僅固定了噪聲成分的光盤。針對(duì)該光盤，設(shè)定為v1＝0.65、v2＝0.35，通過振幅判定部32實(shí)施了檢測(cè)信號(hào)的濾波處理。結(jié)果，相對(duì)于不使用振幅判定部32的情況，能夠去除大約50％的噪聲成分。

[實(shí)驗(yàn)結(jié)果3]

針對(duì)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果2中使用的光盤相同的光盤，設(shè)定為v1＝0.57、v2＝0.45，通過振幅判定部32實(shí)施了檢測(cè)信號(hào)的濾波處理。結(jié)果，相對(duì)于不使用振幅判定部32的情況，能夠去除大約80％的噪聲成分。然而，當(dāng)?shù)蜗潞袡z測(cè)對(duì)象的抗原(生物標(biāo)志物)的試樣溶液來進(jìn)行測(cè)定，并以相同的條件實(shí)施濾波處理時(shí)，本來應(yīng)被計(jì)數(shù)的檢測(cè)信號(hào)的一部分作為噪聲成分而被去除。

根據(jù)如實(shí)驗(yàn)結(jié)果1～3那樣改變?yōu)V波處理?xiàng)l件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)果，來設(shè)定第1基準(zhǔn)等級(jí)v1和第2基準(zhǔn)等級(jí)v2，從而能夠進(jìn)行恰當(dāng)?shù)臑V波處理。

返回到圖4，在步驟s12中，脈沖寬度判定部33判定所取得的脈沖寬度t是否大于預(yù)先設(shè)定的第1基準(zhǔn)寬度t1。

脈沖寬度判定部33在脈沖寬度t大于第1基準(zhǔn)寬度t1的情況下(“是”)使處理向步驟s13前進(jìn)，在脈沖寬度t小于第1基準(zhǔn)寬度t1的情況下(“否”)結(jié)束處理。

在步驟s13中，脈沖寬度判定部33判定脈沖寬度t是否小于預(yù)先設(shè)定的第2基準(zhǔn)寬度t2(t2＞t1)。

脈沖寬度判定部33在脈沖寬度t小于第2基準(zhǔn)寬度t2的情況下(“是”)輸出脈沖信號(hào)s(步驟s15)，在脈沖寬度t大于第2基準(zhǔn)寬度t2的情況下(“否”)使處理向步驟s14前進(jìn)。

在步驟s14中，脈沖寬度判定部33判定脈沖寬度t是否小于預(yù)先設(shè)定的第3基準(zhǔn)寬度t3(t3＞t2)。

脈沖寬度判定部33在脈沖寬度t小于第3基準(zhǔn)寬度t3的情況下(“是”)輸出脈沖信號(hào)l(步驟s16)，在脈沖寬度t大于第3基準(zhǔn)寬度t3的情況下(“否”)結(jié)束處理。

即，脈沖波形分析部30檢測(cè)峰值(谷底電壓)小于第1基準(zhǔn)等級(jí)且大于第2基準(zhǔn)等級(jí)，并且，脈沖寬度在預(yù)定范圍內(nèi)的脈沖波形，在檢測(cè)出這樣的脈沖波形的情況下輸出脈沖信號(hào)s或脈沖信號(hào)l。

通過未圖示的計(jì)數(shù)部對(duì)從脈沖寬度判定部33輸出的脈沖信號(hào)s和脈沖信號(hào)l進(jìn)行計(jì)數(shù)，由此能夠高精度地分析檢測(cè)對(duì)象的生物標(biāo)志物的量(濃度)。另外，計(jì)數(shù)部既可以構(gòu)成為控制部5的一部分，也可以在控制部5的后級(jí)構(gòu)成。

此外，分別對(duì)脈沖信號(hào)s和脈沖信號(hào)l進(jìn)行計(jì)數(shù)，并將它們進(jìn)行比較來獲知微球的聚集狀態(tài)。例如，若脈沖信號(hào)s相對(duì)于脈沖信號(hào)l的比率大，則可知微球?yàn)榫奂臓顟B(tài)，若脈沖信號(hào)s相對(duì)于脈沖信號(hào)l的比率小，則可知微球?yàn)榉稚⒌臓顟B(tài)。

在此，使用圖6和圖7，對(duì)第1基準(zhǔn)寬度t1、第2基準(zhǔn)寬度t2和第3基準(zhǔn)寬度t3的設(shè)定方法進(jìn)行說明。圖6和圖7的橫軸為點(diǎn)位置，縱軸為信號(hào)強(qiáng)度(振幅調(diào)制度)。在圖6中，用實(shí)線表示1個(gè)微球孤立的狀態(tài)下的脈沖波形d1，用一點(diǎn)劃線表示2個(gè)微球相鄰的狀態(tài)下的脈沖波形d2，用虛線表示3個(gè)微球相鄰的狀態(tài)下的脈沖波形d3。在圖7中，為了使說明便于理解，僅表示了圖6的脈沖波形d1。

如圖6所示，脈沖波形d2的半寬與脈沖波形d3的半寬大致相同，因此將多個(gè)微球相鄰狀態(tài)下的脈沖波形的半寬設(shè)為第1基準(zhǔn)寬度t1。將第2基準(zhǔn)寬度t2設(shè)定為第1基準(zhǔn)寬度t1加上α而得的值。參考分析裝置的抖動(dòng)值等來設(shè)定α。

如圖7所示，將第3基準(zhǔn)寬度t3設(shè)定為脈沖波形d1的半寬加上α而得的值。參考分析裝置的抖動(dòng)值等來設(shè)定α。

根據(jù)上述的分析裝置以及分析方法，通過振幅判定部32對(duì)檢測(cè)信號(hào)的峰值(谷底電壓)進(jìn)行分析從而去除噪聲成分，并且通過脈沖寬度判定部33對(duì)檢測(cè)信號(hào)的脈沖寬度進(jìn)行分析，由此能夠去除沒有被振幅判定部32去除完的噪聲成分。因此，能夠比以往更加抑制噪聲成分的影響，能夠使檢測(cè)對(duì)象即生物標(biāo)志物的檢測(cè)精度提高。

使用圖8，對(duì)使用上述分析裝置1的實(shí)施例進(jìn)行說明。圖8的橫軸為生物標(biāo)志物量(濃度)，縱軸為微球計(jì)數(shù)數(shù)量。另外，將不進(jìn)行振幅判定部的處理而僅進(jìn)行了脈沖寬度判定的情況作為比較例來表示。

圖8的虛線為背景，相當(dāng)于噪聲成分。如圖8所示，微球計(jì)數(shù)數(shù)量相對(duì)于生物標(biāo)志物量的斜率在實(shí)施例、比較例中大致相同。另一方面，與比較例相比，背景在實(shí)施例中大幅度下降。即，與比較例相比，實(shí)施例去除了噪聲成分。結(jié)果，檢測(cè)對(duì)象即生物標(biāo)志物的檢測(cè)精度上升，還能夠檢測(cè)微量的生物標(biāo)志物。

另外，本發(fā)明的實(shí)施方式并不限于上述結(jié)構(gòu)，可在不脫離本發(fā)明的宗旨的范圍內(nèi)進(jìn)行各種變更。在圖1中，關(guān)于控制部5內(nèi)的各部，可以至少部分地通過電路來構(gòu)成，硬件和軟件的分開使用是任意的。

產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用

在對(duì)抗體、抗原等生物物質(zhì)進(jìn)行分析時(shí)，能夠使用本發(fā)明。