同時測定煙草中黃曲霉毒素b1、b2、g1和g2的hplc-fld柱前衍生法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種同時測定煙草中黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2的HPLC-FLD柱前衍生法：煙末樣品用甲醇溶液水浴超聲萃取后過濾，將濾液稀釋后通過免疫親和柱，用純水分兩次淋洗免疫親和柱，再用甲醇將免疫親和柱上富集的四種黃曲霉毒素洗脫下來，將洗脫后的溶液經(jīng)氮氣吹干，然后加入三氟乙酸和正己烷在45℃恒溫衍生化40min，加入少量甲醇溶液，取下層溶液進(jìn)行HPLC-FLD分析。本發(fā)明可用于煙草及煙草制品中黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2的同時測定，在20min內(nèi)完成測定，四種目標(biāo)物能夠得到很好地分離，線性關(guān)系良好，檢出限低，具有較好的回收率和重現(xiàn)性，適用于煙草及煙草制品中黃曲霉素的檢測。
【專利說明】同時測定煙草中黃曲霉毒素 Bp B2、G,和G2的HPLC-FLD柱 前衍生法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及黃曲霉素的檢測方法，具體地指一種同時測定煙草中黃曲霉毒素&、 B2、Gi和G2的HPLC-FLD柱前衍生法。

【背景技術(shù)】
[0002] 黃曲霉毒素（Aflatoxin，簡稱AFT)是20世紀(jì)60年代初發(fā)現(xiàn)的一種劇毒的真菌代 謝產(chǎn)物，主要由黃曲霉菌（Aspergillus flaws)和寄生曲霉菌（Aspergillus parasiticus) 等侵染農(nóng)產(chǎn)品之后產(chǎn)生，是目前已知最強(qiáng)的致癌物之一，毒性極強(qiáng)。1993年黃曲霉毒素被世 界衛(wèi)生組織癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為一級致癌物。
[0003] 黃曲霉毒素主要有&，B2, Gp 62等，結(jié)構(gòu)式如下，其中黃曲霉毒素 BJAFBJ毒性最 強(qiáng)，也最為常見。
[0004]

【權(quán)利要求】
1. 一種同時測定煙草中黃曲霉毒素 Bl、B2、G1和G2的HPLC-FLD柱前衍生法，其特征 在于：稱取煙末樣品加入體積分?jǐn)?shù)80%為甲醇溶液，水浴超聲萃取lOmin，每隔兩分鐘震蕩 一次，萃取結(jié)束后過濾，將濾液稀釋后，以lmL/min的速度通過免疫親和柱，用純水分兩次 淋洗免疫親和柱，再用甲醇將免疫親和柱上富集的黃曲霉毒素 B1、B2、G1和G2洗脫下來，將 洗脫后的溶液經(jīng)氮氣吹干，然后加入三氟乙酸和正己烷在45°C恒溫衍生化40min，加入體 積分?jǐn)?shù)50%甲醇溶液，取下層溶液進(jìn)行HPLC-FLD分析；其中，分析檢測條件： 采用液相色譜柱 Agilent ZORBAX Bonus-RP C18，其規(guī)格為 250mmX4. 6mm i.d.，5μπι; 柱溫30°C ; 采用二元流動相乙腈-水按體積比25 :75等度洗脫分離，流速為1. OmL/min ;進(jìn)樣量 100μ L ； 突光檢測器檢測的激發(fā)波長為360nm，發(fā)射波長為440nm。
【文檔編號】G01N30/88GK104280503SQ201410591223
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年10月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月29日
【發(fā)明者】王康, 李韻, 肖少紅 申請人:中國煙草總公司湖北省公司