三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡的制作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種檢測三聚氰胺的試紙條，具體涉及一種三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡。試紙卡由PVC背襯和固定在PVC背襯上的不干膠層組成；固定在PVC背襯上的不干膠層上依次緊密粘貼著樣品墊、結(jié)合墊、反應膜和吸水墊；樣品墊和結(jié)合墊的疊壓部分為0.9-1.1mm,吸水墊和反應膜的疊壓部分為3.9-4.2mm。反應膜上分別包被有三聚氰胺-BSA偶聯(lián)物構(gòu)成的檢測線和羊抗鼠IgG構(gòu)成的質(zhì)控線；檢測線和質(zhì)控線之間的垂直距離為3.8-4.1mm。本實用新型的試紙條有靈敏度高、特異性強、操作簡單、檢測迅速等優(yōu)點。
【專利說明】三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡
【技術(shù)領域】
[0001]本實用新型涉及一種檢測三聚氰胺的試紙條，具體涉及一種三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡。
【背景技術(shù)】
[0002]三聚氰胺(Melamine)三聚氰胺簡稱三胺，是一種重要的氮雜環(huán)有機化工原料，白色結(jié)晶粉末，動物長期或反復大量攝入三聚氰胺可能對腎與膀胱產(chǎn)生影響，導致產(chǎn)生結(jié)石，亦在動物源食品中形成殘留，威脅人們的健康。目前三聚氰胺檢測方法有氣相色譜質(zhì)譜法(GC-MS)，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS-MS)，液相色譜法等。這些方法操作復雜、成本較高，推廣使用受到限制。另一種為免疫學方法，如酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。它的缺點是檢測時間長，費用較高，不利于在基層單位推廣使用。而且，這兩種方法都需要專業(yè)技術(shù)人員進行操作。
實用新型內(nèi)容
[0003]本實用新型的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種特異性強、靈敏度高、操作簡單、檢測快速、準確的專門用于三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡。
[0004]為實現(xiàn)上述目的，本實用新型采用如下的技術(shù)方案:
[0005]一種三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡，試紙卡由PVC背襯(8)和固定在PVC背襯(8)上的不干膠層( 7)組成；固定在PVC背襯(8)上的不干膠層(7)上依次緊密粘貼著樣品墊(I)、結(jié)合墊(2)、反應膜(3)和吸水墊(6);吸水墊和反應膜的疊壓部分為3.9-4.2mm,樣品墊和結(jié)合墊的疊壓部分為0.9-1.1mm,反應膜上分別包被有三聚氰胺-BSA偶聯(lián)物構(gòu)成的檢測線(4)和羊抗鼠IgG構(gòu)成的質(zhì)控線(5);所述檢測線(4)和質(zhì)控線(5)之間的垂直距離為 3.8-4.1mm。
[0006]所述的結(jié)合墊(2)上包被有三聚氰胺單克隆抗體-膠體金標記物。
[0007]所述反應膜(3)為硝酸纖維素膜。
[0008]所述吸水墊(6)為濾紙，樣品墊(I)和結(jié)合墊(2)由玻璃棉或聚酯膜制成。
[0009]所述樣品墊(I)、結(jié)合墊(2)、反應膜(3)上方覆蓋有膠膜。
[0010]所述檢測線(4)與反應膜(3)加樣端的垂直距離為9.8-10.1mm。
【專利附圖】

【附圖說明】:
[0011]圖1為本實用新型三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0012]其中8為背襯、I為樣品墊、2為結(jié)合墊、3為反應膜、4為檢測線、5為質(zhì)控線、6為吸水墊、7為不干膠層
[0013]圖2為本實用新型檢測試紙條使用示意圖；
[0014]圖3為本實用新型檢測試紙條結(jié)果判定示意圖；
[0015]其中，3-a:為陰性樣品結(jié)果，3-b:為陽性樣品結(jié)果，3_c:為試紙條失效。【具體實施方式】:
[0016]實施例1.[0017]參見圖1，試紙條由PVC背襯8和固定在PVC背襯8上的不干膠層組成，固定在PVC背襯8上的不干膠層7上依次緊密粘貼著樣品墊1、結(jié)合墊2、由硝酸纖維素膜構(gòu)成的反應膜3和吸水墊6 ;樣品墊I和結(jié)合墊2的疊壓部分為1mm，吸水墊6和由硝酸纖維素膜構(gòu)成的反應膜3的疊壓部分為4mm。
[0018]反應膜3上分別包被有三聚氰胺-BSA偶聯(lián)物構(gòu)成的檢測線(4)和羊抗鼠IgG構(gòu)成的質(zhì)控線(5);檢測線⑷和質(zhì)控線(5)距離為4_ ；
[0019]結(jié)合墊2上包被有三聚氰胺單克隆抗體-膠體金標記物。
[0020]其中，PVC背襯8 一面有不干膠層7。吸水墊6為采用濾紙，樣品墊I和結(jié)合墊2由玻璃棉或聚酯膜制成，并在樣品墊1、結(jié)合墊2、反應膜3上方覆蓋膠膜。
[0021]實施例2
[0022]三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡檢測操作方法
[0023]1、樣品制備:
[0024]成品飼料及飼料原料的樣品處理方法:
[0025]稱取代測樣品2.5 g放入50ml帶蓋離心管中，加入三聚氰胺專用PBST緩沖液
7.5ml蓋緊蓋子充分混均3min。室溫靜置30min，3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，去上清液待檢。
[0026]牛奶的樣品處理`方法:
[0027]取400ml三聚氰胺裝用PBST緩沖液加入潔凈的1.5ml離心管中:用滴管吸取3滴(約100ml)牛奶加入離心管中，混合均勻。吸取混合溶液待檢。
[0028]當檢測樣本為奶粉時，稱取少量奶粉，按照奶粉冰(lg:8ml)的比例溶解到水中，取3滴(約100ml)溶解好的樣本，后續(xù)步驟同奶牛樣品處理方法。
[0029]2、檢測步驟:
[0030]從包裝袋中去除試劑板，用滴管吸取待檢溶液，在加樣孔中滴入3滴(100ml)，加樣后開始計時，結(jié)果應在3-5min讀取,其他時間判讀無效。
[0031]3、結(jié)果判讀
[0032]讀取結(jié)果時，將試劑板水平置于觀察者正面，如圖2右側(cè)所示。
[0033]陰性㈠:T顯現(xiàn)色比C線深，表明樣品中三聚氰胺濃度低于2mg/kg或無三取氰胺殘留。如圖3.a所示。
[0034]陽性(+):T線顯色比C線淺無顯色，表明樣品中三聚氰胺濃度高于2mg/kg;
[0035]T線比C線越淺,表明樣品中三聚氰胺濃度越高。如圖3.b所示。
[0036]無效:未出現(xiàn)C線，可能操作不當或試劑板已失效。應再次閱讀說明書，并用新試劑板重新測試。如圖3.c所示。
【權(quán)利要求】
1.一種三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡，其特征在于:試紙卡由PVC背襯(8)和固定在PVC背襯(8)上的不干膠層(7)組成；固定在PVC背襯(8)上的不干膠層(7)上依次緊密粘貼著樣品墊(I )、結(jié)合墊(2)、反應膜(3)和吸水墊(6);吸水墊和反應膜的疊壓部分為3.9-4.2mm,樣品墊和結(jié)合墊的疊壓部分為0.9-1.1mm,反應膜上分別包被有三聚氰胺-BSA偶聯(lián)物構(gòu)成的檢測線(4)和羊抗鼠IgG構(gòu)成的質(zhì)控線(5);所述檢測線(4)和質(zhì)控線(5)之間的垂直距離為3.8-4.1mm; 所述檢測線(4)與反應膜(3)加樣端的垂直距離為9.8-10.1mm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡，其特征在于:所述的結(jié)合墊(2)上包被有三聚氰胺單克隆抗體-膠體金標記物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡，其特征在于:所述反應膜(3)為硝酸纖維素膜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡，其特征在于:所述吸水墊(6)為濾紙，樣品墊(I)和結(jié)合墊(2)由玻璃棉或聚酯膜制成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺免疫膠體金檢測試紙卡，其特征在于:所述樣品墊(I)、結(jié)合墊(2 )、反應膜(3 )上方覆蓋有膠膜。
【文檔編號】G01N33/577GK203535051SQ201320347165
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年6月18日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月18日
【發(fā)明者】劉敬先, 劉笑, 苗翠, 李廷, 韓春曉, 張榮迅, 劉冰 申請人:吉林吉和迅生物技術(shù)有限公司, 劉敬先