電泳用預(yù)制膠基片、基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠及其使用方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種電泳用預(yù)制膠基片、基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠及其使用方法,其技術(shù)方案是包括基片主體和梳齒,所述的基片主體包括前面板和后面板,該前面板和后面板之間相互可拆卸拼合構(gòu)成帶有灌注口且厚度一致的凝膠灌注腔,所述的梳齒包括有梳齒基體以及并排間隔設(shè)置在梳齒基體前端的多個(gè)成型凸條,所述成型凸條的厚度不大于凝膠灌注腔的厚度,所述的基片主體上相對(duì)凝膠灌注腔的底部設(shè)置有與凝膠灌注腔相連通的電泳導(dǎo)電口,該電泳導(dǎo)電口上可拆卸密封設(shè)置有封片,所述的梳齒的成型凸條插入于灌注口內(nèi)側(cè)的凝膠灌注腔內(nèi),且該梳齒的梳齒基體與灌注口封閉配合。本發(fā)明具有凝膠保存時(shí)間長(zhǎng),分離效果好等優(yōu)點(diǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】電泳用預(yù)制膠基片、基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠及其使用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種電泳用預(yù)制膠基片以及基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠及其使用方法。
【背景技術(shù)】
[0002]聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱(chēng)Acr)單體和少量交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱(chēng)Bis)通過(guò)化學(xué)催化劑(過(guò)硫酸銨),四甲基乙二胺(TEMED)作為加速劑或光催化聚合作用形成的三維空間的高聚物。聚合后的聚丙烯酰胺凝膠形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),具有濃縮效應(yīng)、電荷效應(yīng)、分子篩效應(yīng),因此適用于不同相對(duì)分子質(zhì)量物質(zhì)的分離。
[0003]蛋白質(zhì)在十二烷基硫酸納(SDS)和疏基乙醇的作用下,分子中的二硫鍵還原,氧鍵等打開(kāi),形成按1.4gSDS/lg蛋白質(zhì)比例的SDS-蛋白質(zhì)多肽復(fù)合物,該復(fù)合物帶負(fù)電,故可在聚丙烯酰胺凝膠電泳中向正極遷移,且主要由于凝膠的分子篩作用,遷移速率與蛋白質(zhì)的分子量大小有關(guān),因此可以濃縮和分離蛋白質(zhì)多肽。
[0004]聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)多數(shù)采用一種不連續(xù)的緩沖系統(tǒng),主要分為較低濃度的成層膠和較高濃度的分離膠,配制凝膠的緩沖液,其PH值和離子強(qiáng)度也相應(yīng)不同,故電泳時(shí),樣品中的SDS-多肽復(fù)合物沿移動(dòng)的界面移動(dòng),在分離膠表面形成了一個(gè)極薄的層面,大大濃縮了樣品的體積,即SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的濃縮效應(yīng)。
[0005]目前,現(xiàn)有技術(shù)中,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是在實(shí)驗(yàn)時(shí)配制自己的聚丙烯酰胺凝膠,這樣的凝膠保存時(shí)間短,一般只有3-4天,可重復(fù)性差,分離效率不高,并消耗了大量的時(shí)間和人力物力。
【發(fā)明內(nèi)容】
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[0006]本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)和不足,而提供一種有助于提高凝膠保存時(shí)間,并使用方便靈活的電泳用預(yù)制膠基片。
[0007]本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種利用上述電泳用預(yù)制膠基片而制備的基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠,該基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠保存時(shí)間長(zhǎng),使用方便靈活。
[0008]本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠的使用方法。
[0009]為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的第一個(gè)目的,本發(fā)明的技術(shù)方案是電泳用預(yù)制膠基片,包括基片主體和梳齒,所述的基片主體包括前面板和后面板,該前面板和后面板之間相互可拆卸拼合構(gòu)成帶有灌注口且厚度一致的凝膠灌注腔,所述的梳齒包括有梳齒基體以及并排間隔設(shè)置在梳齒基體前端的多個(gè)成型凸條,所述成型凸條的厚度不大于凝膠灌注腔的厚度,所述的基片主體上相對(duì)凝膠灌注腔的底部設(shè)置有與凝膠灌注腔相連通的電泳導(dǎo)電口,該電泳導(dǎo)電口上可拆卸密封設(shè)置有封片,所述的梳齒的成型凸條插入于灌注口內(nèi)側(cè)的凝膠灌注腔內(nèi),且該梳齒的梳齒基體與灌注口封閉配合。[0010]通過(guò)本設(shè)置,為聚丙烯酰胺凝膠的成型提供一種封閉的承載體,避免了聚丙烯酰胺凝膠與外界直接接觸,從而解決了現(xiàn)有技術(shù)中凝膠保存時(shí)間短的缺陷,通過(guò)本申請(qǐng)的基片保存聚丙烯酰胺能夠使其保存時(shí)間提高到至少3個(gè)月。另外,聚丙烯酰胺凝膠在成型時(shí),能夠形成樣品裝填孔,電泳時(shí),聚丙烯酰胺凝膠直接在基片的前面板和后面板中進(jìn)行電泳,使用方便靈活。另外,本申請(qǐng)基片的凝膠灌注腔還為聚丙烯酰胺凝膠的成型提供模具的作用,因此,可以保障凝固的聚丙烯酰胺凝膠的厚度一致,進(jìn)而提高了電泳的分離能力,而且通過(guò)本申請(qǐng)的基片,使得所加工出來(lái)的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠的一致性好,便于批量生產(chǎn),從而降低實(shí)驗(yàn)成本。
[0011]進(jìn)一步設(shè)置是所述的前面板和后面板之間的可拆卸拼合的部位通過(guò)超聲鍵合方式構(gòu)成可拆卸拼合。通過(guò)本設(shè)置,超聲鍵合方式能夠較好地控制前面板和后面板拼接融合的強(qiáng)度,不僅保障了前面板和后面板拼合的密封性,而且在預(yù)制膠電泳完成后,拆開(kāi)前面板和后面板取出凝膠,進(jìn)行電泳后續(xù)的染色等步驟時(shí),拆卸的力度可能較為準(zhǔn)確的把握,換言之,通過(guò)本設(shè)置,能夠使得本申請(qǐng)的基片在加工時(shí)一致性好。
[0012]進(jìn)一步設(shè)置是所述的后面板內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊以及底邊上設(shè)置有相互連貫的第一凸邊,所述的前面板內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊以及底邊上設(shè)置有相互連貫的第二凸邊,該第二凸邊的外廓與第一凸邊的內(nèi)廓相適配,且第二凸邊嵌配設(shè)置于第一凸邊的內(nèi)側(cè)。通過(guò)本設(shè)置,第一凸邊和第二凸邊的設(shè)置,提高了拼合后的基片兩側(cè)邊以及底邊的封閉性,而且該設(shè)置,也方便超聲鍵合工藝進(jìn)行拼合。
[0013]進(jìn)一步設(shè)置是所述后面板相對(duì)第一凸邊的外側(cè)設(shè)置有多個(gè)拆卸受力槽。通過(guò)本設(shè)置,在需要拆開(kāi)前面板和后面板取出凝膠時(shí),借助撬板等工具插入到拆卸受力槽中能夠方便地將前面板和后面板拆開(kāi)。
[0014]進(jìn)一步設(shè)置是所述的前面板對(duì)應(yīng)灌注口的位置設(shè)置有開(kāi)孔槽,所述的梳齒基體對(duì)應(yīng)前面板這一側(cè)的端面上凸起設(shè)置有與開(kāi)孔槽的底壁限位配合的定位凸塊。通過(guò)本設(shè)置,為梳齒在基片中的插入深度得到準(zhǔn)確定位,保障了梳齒插入所加工出的樣品裝填孔的一致性,進(jìn)而提高了預(yù)制膠加工的一致性,并保障了電泳分離的效果。
[0015]進(jìn)一步設(shè)置是所述第二凸邊對(duì)應(yīng)前面板內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊的頭端設(shè)置有斜導(dǎo)向壁,所述的梳齒基體的兩側(cè)壁與第二凸邊的斜導(dǎo)向壁導(dǎo)向密封適配設(shè)置。通過(guò)本設(shè)置,不僅方便的梳齒的插入,而且也有助于提高梳齒對(duì)灌注口的封閉效果,進(jìn)而提高了聚丙烯酰胺凝膠的保存時(shí)間。
[0016]進(jìn)一步設(shè)置是所述的梳齒基體的兩側(cè)壁上設(shè)置有凸筋,所述的第二凸邊的斜導(dǎo)向壁上設(shè)置有與凸筋定位嵌配的定位凹槽。通過(guò)本設(shè)置,使得插入后的梳齒的位置得到固定,保障了梳齒對(duì)灌注口的封閉的穩(wěn)定性。
[0017]為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的第二個(gè)目的,本發(fā)明的技術(shù)方案是在基片的凝膠灌注腔內(nèi)灌注設(shè)置位于底層的聚丙烯酰胺分離膠和位于上層的聚丙烯酰胺成層膠,所述的梳齒的成型凸條插入到聚丙烯酰胺成層膠的外端面內(nèi),并在聚丙烯酰胺成層膠的外端面內(nèi)形成樣品裝填孔。一般來(lái)講,聚丙烯酰胺分離膠與聚丙烯酰胺成層膠的比例是4:1或5:1,但是不嚴(yán)格。本發(fā)明基本上是IOml分尚膠,2 — 4暈升成層膠。
[0018]進(jìn)一步設(shè)置是所述的聚丙烯酰胺分離膠由分離膠混合溶液凝固成凝膠而成,該分離膠混合溶液包括有以下組分:丙烯酰胺混合液質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為6%-15%,丙烯酰胺混合液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺質(zhì)量比為36 — 39:1 ;
1.5M pH為8.8的Tris-HCl緩沖液體積分?jǐn)?shù)23 — 25% ;,
十二烷基硫酸鈉質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)I 一 2% ;
過(guò)硫酸銨質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.5 — 1% ;
四甲基乙二胺或β -二甲基氨基丙腈體積分?jǐn)?shù)0.04%-0.08% ;
余量為水。
[0019]所述的聚丙烯酰胺成層膠由成層膠混合溶液凝固成凝膠而成,該成層膠混合溶液包括有以下組分:
丙烯酰胺混合液質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為5%,丙烯酰胺混合液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺質(zhì)量比為 36 - 39:1 ;
IM pH為6.8的Tris-HCl緩沖液體積分?jǐn)?shù)11 — 13% ;,
十二烷基硫酸鈉質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.05 - 0.1% ;
過(guò)硫酸銨質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.05 - 0.1% ;
四甲基乙二胺或β - 二甲基氨基 丙腈體積分?jǐn)?shù)0.05 - 0.1% ;
余量為水。
[0020]通過(guò)本設(shè)置,該聚丙烯酰胺分離膠和聚丙烯酰胺成層膠的組分和參數(shù)的優(yōu)化,能夠提高聚丙烯酰胺凝膠的濃縮效應(yīng),進(jìn)而提高電泳分離效果,另外,該配方的凝膠穩(wěn)定性好,也有助于提高凝膠的保存期。
[0021]為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的第三個(gè)目的,本發(fā)明的技術(shù)方案是包括有以下步驟:
(O拔下梳齒,并取下封片,露出電泳導(dǎo)電口,在樣品裝填孔中裝入電泳樣品和Tris-甘氨酸電泳緩沖液,然后將其裝入電泳裝置中,在Tris-甘氨酸電泳緩沖液中電泳;
(2)電泳完成后,拆開(kāi)基片的前面板和后面板,并將凝膠灌注腔中的凝膠取出,進(jìn)行凝膠染色和成像。
[0022]進(jìn)一步設(shè)置是所述的Tris-甘氨酸電泳緩沖液通過(guò)以下工藝配置:Tris 6g、甘氨酸28.8g,加蒸懼水850ml,調(diào)pH至8.3,加蒸懼水到1000ml。
[0023]通過(guò)本設(shè)置,提高了一種本申請(qǐng)適用于電泳的方便靈活的使用方便,該方法通過(guò)上述參數(shù)配置,還提高了電泳分離的效果。
[0024]本申請(qǐng)的具體的使用效果:可用于蛋白質(zhì)相對(duì)分子量的測(cè)定。根據(jù)比較標(biāo)準(zhǔn)分子量的蛋白質(zhì)與待測(cè)蛋白質(zhì)在同一塊凝膠上電泳條帶的相對(duì)距離,可以大致確定蛋白質(zhì)的分子量大小。本預(yù)制膠中丙烯酰胺的濃度分別為15%,12%,10%和7.5%,相對(duì)應(yīng)的可分離的蛋白質(zhì)的分子量參見(jiàn)下表:
SDS聚丙烯酰胺凝膠的有效分離范圍
丙烯酰胺濃度(%)j蛋白質(zhì)分子量線(xiàn)性分離范圍(kDa)
15_IXlO4 - 5 X IO4_
12~ 1.2X IO4 -6X104
10~1.5X104 - 7.5X104
7.5!3X IO4-1XlO5
本發(fā)明中的凝膠(左圖)和其他凝膠(中圖、右圖)的對(duì)比。參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)附圖1,。
[0025]SDS-PAGE 10%凝膠,相同的分離時(shí)間,三種凝膠對(duì)相同的蛋白質(zhì)樣品的分離效果。分離的蛋白質(zhì)分子量分別為:
114 kDa
22IkDa
33IkDa
440 kDa
565 kDa
698 kDa
7100 kDa
8200 kDa
9250 kDa
從附圖1可以清楚看到其他的凝膠對(duì)于小分子和超大分子的蛋白質(zhì)的分離效果不好,而本發(fā)明中的凝膠對(duì)于14 - 250 kDa的蛋白質(zhì)具有很好的分離效果,比其他的凝膠具有更大的分離范圍。
[0026]下面結(jié)合說(shuō)明書(shū)附圖和【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步介紹。
【專(zhuān)利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0027]圖1本申請(qǐng)的預(yù)制膠實(shí)驗(yàn)效果對(duì)比圖;
圖2基片立體圖;
圖3基片正視圖;
圖4為圖3的A-A劑視圖;
圖5為圖4的I部放大圖;
圖6為基片的各組件分離狀態(tài)圖;
圖7為基片的梳齒分離狀態(tài)圖;
圖8為后面板隱藏后基片狀態(tài)圖;
圖9為圖8的II部放大圖。
[0028]
【具體實(shí)施方式】
[0029]下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體的描述,只用于對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明,不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限定,該領(lǐng)域的技術(shù)工程師可根據(jù)上述發(fā)明的內(nèi)容對(duì)本發(fā)明作出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整。
[0030]如圖2-8所示的本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】,包括基片主體和梳齒3,所述的基片主體包括前面板I和后面板2,該前面板I和后面板2之間相互可拆卸拼合構(gòu)成帶有灌注口 22且厚度一致的凝膠灌注腔21,本實(shí)施例所述的前面板I和后面板2之間的可拆卸拼合的部位通過(guò)超聲鍵合方式構(gòu)成可拆卸拼合,所述的梳齒3包括有梳齒基體31以及并排間隔設(shè)置在梳齒基體前端的多個(gè)成型凸條32,所述成型凸條32的厚度不大于凝膠灌注腔21的厚度,以保障成型凸條32能夠從灌注口 22中插入到凝膠灌注腔21內(nèi),進(jìn)而形成樣品裝填孔,所述的基片主體上相對(duì)凝膠灌注腔的底部設(shè)置有與凝膠灌注腔相連通的電泳導(dǎo)電口 23,本實(shí)施例該電泳導(dǎo)電口 23設(shè)置在后面板2的底部,該電泳導(dǎo)電口 23上可拆卸密封設(shè)置有封片(圖中未示出),該封片優(yōu)選采用膠帶,當(dāng)然本發(fā)明還有可以其他形式的封片,如硅膠片等,所述的梳齒3的成型凸條32插入于灌注口內(nèi)側(cè)的凝膠灌注腔21內(nèi),且該梳齒的梳齒基體31與灌注口 22封閉配合。
[0031]此外,本實(shí)施例所述的后面板2內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊以及底邊上設(shè)置有相互連貫的第一凸邊24,所述的前面板I內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊以及底邊上設(shè)置有相互連貫的第二凸邊11,該第二凸邊11的外廓與第一凸邊24的內(nèi)廓相適配,且第二凸邊11嵌配設(shè)置于第一凸邊24的內(nèi)側(cè)。另外,所述后面板2相對(duì)第一凸邊的外側(cè)設(shè)置有多個(gè)拆卸受力槽25。
[0032]本實(shí)施例所述的前面板I對(duì)應(yīng)灌注口的位置設(shè)置有開(kāi)孔槽12,所述的梳齒基體31對(duì)應(yīng)前面板I這一側(cè)的端面上凸起設(shè)置有與開(kāi)孔槽12的底壁121限位配合的定位凸塊311,在實(shí)際設(shè)置上該定位凸塊311還可以貼上標(biāo)簽,便于識(shí)別。所述第二凸邊11對(duì)應(yīng)前面板I內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊的頭端設(shè)置有斜導(dǎo)向壁111,所述的梳齒基體31的兩側(cè)壁312與第二凸邊的斜導(dǎo)向壁111導(dǎo)向密封適配設(shè)置。此外,所述的梳齒基體31的兩側(cè)壁上設(shè)置有凸筋313,所述的第二凸邊11的斜導(dǎo)向壁111上設(shè)置有與凸筋313定位嵌配的定位凹槽112。
[0033]本實(shí)施例,所述的聚丙烯酰胺分離膠由分離膠混合溶液凝固成凝膠而成,該分離膠混合溶液包括有以下組分:
【權(quán)利要求】
1.一種電泳用預(yù)制膠基片,其特征在于:包括基片主體和梳齒,所述的基片主體包括前面板和后面板,該前面板和后面板之間相互可拆卸拼合構(gòu)成帶有灌注口且厚度一致的凝膠灌注腔,所述的梳齒包括有梳齒基體以及并排間隔設(shè)置在梳齒基體前端的多個(gè)成型凸條,所述成型凸條的厚度不大于凝膠灌注腔的厚度,所述的基片主體上相對(duì)凝膠灌注腔的底部設(shè)置有與凝膠灌注腔相連通的電泳導(dǎo)電口,該電泳導(dǎo)電口上可拆卸密封設(shè)置有封片,所述的梳齒的成型凸條插入于灌注口內(nèi)側(cè)的凝膠灌注腔內(nèi),且該梳齒的梳齒基體與灌注口封閉配合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種電泳用預(yù)制膠基片,其特征在于:所述的前面板和后面板之間的可拆卸拼合的部位通過(guò)超聲鍵合方式構(gòu)成可拆卸拼合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種電泳用預(yù)制膠基片,其特征在于:所述的后面板內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊以及底邊上設(shè)置有相互連貫的第一凸邊,所述的前面板內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊以及底邊上設(shè)置有相互連貫的第二凸邊,該第二凸邊的外廓與第一凸邊的內(nèi)廓相適配,且第二凸邊嵌配設(shè)置于第一凸邊的內(nèi)側(cè)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種電泳用預(yù)制膠基片,其特征在于:所述后面板相對(duì)第一凸邊的外側(cè)設(shè)置有多個(gè)拆卸受力槽。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種電泳用預(yù)制膠基片,其特征在于:所述的前面板對(duì)應(yīng)灌注口的位置設(shè)置有開(kāi)孔槽,所述的梳齒基體對(duì)應(yīng)前面板這一側(cè)的端面上凸起設(shè)置有與開(kāi)孔槽的底壁限位配合的定位凸塊。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種電泳用預(yù)制膠基片,其特征在于:所述第二凸邊對(duì)應(yīng)前面板內(nèi)側(cè)面的兩側(cè)邊的頭端設(shè)置有斜導(dǎo)向壁,所述的梳齒基體的兩側(cè)壁與第二凸邊的斜導(dǎo)向壁導(dǎo)向密封適配設(shè)置。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種電泳 用預(yù)制膠基片,其特征在于:所述的梳齒基體的兩側(cè)壁上設(shè)置有凸筋,所述的第二凸邊的斜導(dǎo)向壁上設(shè)置有與凸筋定位嵌配的定位凹槽。
8.一種基于權(quán)利要求1所述的基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠,其特征在于:在基片的凝膠灌注腔內(nèi)灌注設(shè)置位于底層的聚丙烯酰胺分離膠和位于上層的聚丙烯酰胺成層膠,所述的梳齒的成型凸條插入到聚丙烯酰胺成層膠的外端面內(nèi),并在聚丙烯酰胺成層膠的外端面內(nèi)形成樣品裝填孔。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠,其特征在于:所述的聚丙烯酰胺分離膠由分離膠混合溶液凝固成凝膠而成,該分離膠混合溶液包括有以下組分: 丙烯酰胺混合液質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為6%-15%,丙烯酰胺混合液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺質(zhì)量比為36 — 39:1 ; 1.5M pH為8.8的Tris-HCl緩沖液體積分?jǐn)?shù)23 — 25% ;, 十二烷基硫酸鈉質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)I 一 2% ; 過(guò)硫酸銨質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.5 — 1% ; 四甲基乙二胺或β - 二甲基氨基丙腈體積分?jǐn)?shù)0.04%-0.08% ; 余量為水。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠,其特征在于:所述的聚丙烯酰胺成層膠由成層膠混合溶液凝固成凝膠而成,該成層膠混合溶液包括有以下組分: 丙烯酰胺混合液質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為5%,丙烯酰胺混合液中丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺質(zhì)量比為 36 - 39:1 ; IM pH為6.8的Tris-HCl緩沖液體積分?jǐn)?shù)11 — 13% ;, 十二烷基硫酸鈉質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.05 - 0.15% ; 過(guò)硫酸銨質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.05 - 0.15% ; 四甲基乙二胺或β - 二甲基氨基丙腈體積分?jǐn)?shù)0.05 - 0.15% ; 余量為水。
11.一種如權(quán)利要求8所述的基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠的使用方法,其特征在于包括以下步驟: (O拔下梳齒,并取下封片,露出電泳導(dǎo)電口,在樣品裝填孔中裝入電泳樣品和Tris-甘氨酸電泳緩沖液,然后將其裝入電泳裝置中,在Tris-甘氨酸電泳緩沖液中電泳; (2)電泳完成后,拆開(kāi)基片的前面板和后面板,并將凝膠灌注腔中的凝膠取出,進(jìn)行凝膠染色和成像。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的一種基于基片的聚丙烯酰胺凝膠預(yù)制膠的使用方法,其特征在于:所述的Tris-甘氨 酸電泳緩沖液通過(guò)以下工藝配置:Tris 6g、甘氨酸28.Sg,加蒸懼水850ml,調(diào)pH至8.3,加蒸懼水到1000ml。
【文檔編號(hào)】G01N27/447GK103698381SQ201310615864
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月27日
【發(fā)明者】杰弗瑞·陳 申請(qǐng)人:杰弗瑞·陳