一種利用hplc-uv鑒別川芎藥材貯存年限的方法
【專利摘要】一種利用HPLC-UV鑒別川芎藥材貯存年限的方法，它屬于中藥材品質(zhì)評價研究領(lǐng)域。該方法包括不同貯存年限川芎藥材HPLC-UV方法的建立和對所得的HPLC-UV圖譜進(jìn)行差異分析兩部分內(nèi)容；根據(jù)HPLC-UV圖譜中的特征峰峰型差異來分辨川芎藥材的貯存年限。
【專利說明】—種利用HPLC-UV鑒別川芎藥材貯存年限的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥材品質(zhì)評價研究領(lǐng)域，是一種用于川芎藥材的貯存年限鑒別方法。
【背景技術(shù)】
[0002]川彎(Ligusticum chuanxiong Hort.)為傘形科藁本屬多年生草本植物，以根莖入藥，主要藥效成分包括揮發(fā)油、生物堿、阿魏酸等化合物。J11芎具有增加冠狀動脈血流量、舒張血管、改善微循環(huán)、抑制血小板聚集、拮抗動脈粥樣硬化的形成等作用，常用于心腦血管疾病的治療，如心肌梗塞、冠心病。以川芎為重要組成成分的藥品有速效救心丸、冠心寧等，所以川芎藥材的品質(zhì)監(jiān)測與控制非常重要。
[0003]目前川芎藥材的品質(zhì)評價主要以《中華人民共和國藥典》(簡稱《中國藥典》)2010版一部記載的方法為主，該方法明確指出阿魏酸的含量不得少于0.1 %，但是起藥效作用的不僅是阿魏酸一種藥效成分，還有洋川芎內(nèi)酯A、洋川芎內(nèi)酯B、洋川芎內(nèi)酯C、洋川芎內(nèi)酯D、洋川芎內(nèi)酯E、洋川芎內(nèi)酯F、洋川芎內(nèi)酯G、洋川芎內(nèi)酯H、洋川芎內(nèi)酯1、洋川芎內(nèi)酯J、洋川芎內(nèi)酯K、洋川芎內(nèi)酯L、洋川芎內(nèi)酯M、洋川芎內(nèi)酯N、洋川芎內(nèi)酯Q、洋川芎內(nèi)酯R、洋川芎內(nèi)酯S、藁本內(nèi)酯、歐當(dāng)歸內(nèi)酯A、川芎嗪等等多種成分，學(xué)者們一致認(rèn)為以某一種或某幾種藥效成分的含量不足以評價川芎藥材的品質(zhì)，因此有人通過建立HPLC指紋圖譜來鑒定川芎藥材的綜合質(zhì)量。有研究指出)11芎藥材中的揮發(fā)油類和生物堿類物質(zhì)會隨著貯存時間的增加而大幅降低，所以貯存時間是影響川芎藥材品質(zhì)的重要因素。自2001年12月I日頒布的《藥品管理法》規(guī)定:上市銷售的藥品必須標(biāo)明有效期，但是對中藥材及中藥飲片沒有有效期的規(guī)定。由于川芎藥材的藥效成分會隨著貯存時間延長而造成大量損失，直接影響藥材自身的質(zhì)量和臨床療效，所以川芎藥材應(yīng)該有合理的有效期(貯存期)。因此，為了更好的監(jiān)控其品質(zhì)，嚴(yán)格鑒別川芎藥材的貯存年限就顯得非常重要。本發(fā)明技術(shù)可以把粉碎后貯存I年及I年以上的川芎藥材與貯存O年的川芎藥材鑒別開來，還可以把完整根狀莖貯存2年及2年以上的川芎藥材與貯存I年及O年的川芎藥材鑒別開來，為川芎藥材的貯存年限鑒別提供了新的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的主要目的是提供一種鑒別川芎藥材貯存年限的方法，將完整根狀莖貯存2年及2年以上與貯存I年及I年以內(nèi)的川芎藥材鑒別出來，還可以將粉碎后貯存I年及I年以上與貯存O年的川芎藥材鑒別出來。
[0005]本發(fā)明所提供的利用HPLC-UV鑒別川芎藥材貯存年限的方法，主要包括不同貯存年限川芎藥材HPLC-UV方法的建立和對所得的HPLC-UV圖譜進(jìn)行對比分析兩部分內(nèi)容。首先是川芎藥材HPLC-UV方法的建立，將不同貯存年限的川芎藥材粉碎后過篩，精密稱取藥材粉末，加乙醇加熱回流提取或超聲提取，提取液用微孔濾膜過濾，濾液作為供試溶液；在以下條件分析供試溶液，得到川芎藥材的HPLC-UV圖譜，并對所得到的不同貯存年限的川芎藥材樣品圖譜進(jìn)行比較分析，根據(jù)特征峰的峰型差異來辨別其貯存年限；分析條件為:流動相 0-5min20:40:40 (v / v / v,乙腈:甲醇:1% 乙酸)、5.l_30min 從 60:0:40 到 100:
O:0 (v / V / V,乙腈:甲醇:1%乙酸)，梯度洗脫,色譜分離柱為C18(250_X4.6mm, 5 μ m),檢測波長 0-19min275nm、19.1_30min260nm，柱溫 25°C，流速為 0.6ml / min。
[0006]本發(fā)明的優(yōu)點:
[0007]本發(fā)明通過提供一種利用HPLC-UV鑒別川芎藥材貯存年限的方法能夠鑒別出貯存時間超過2年(完整根狀莖貯存)或I年(粉碎貯存)的川芎藥材。
[0008]1.本發(fā)明提供的鑒別方法利用HPLC-UV特征峰的峰型差異來判斷其貯存的年限。
[0009]2.本發(fā)明提供的鑒別方法簡便可行、直觀、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好、易于操作，是一種特征性較強的鑒別方法。
[0010]3.本發(fā)明提供的鑒別方法設(shè)計合理，成本低廉。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1為本發(fā)明的不同貯存年限川芎藥材的HPLC-UV圖譜，其中，I為粉碎后貯存3年時的)11芎藥材圖譜，2為粉碎后貯存2年時的川芎藥材圖譜，3為粉碎后貯存I年時的川芎藥材圖譜，4為粉碎后貯存O年或完整貯存O年時的川芎藥材圖譜，5為完整根狀莖貯存3年時的川芎藥材圖譜，6為完整根狀莖貯存2年時的川芎藥材圖譜，7為完整根狀莖貯存I年時的川芎藥材圖譜，橢圓標(biāo)記的峰為特征峰；圖2為川芎藥材HPLC-UV圖譜中的特征峰的示意圖。
【具體實施方式】
[0012]下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0013]一種利用HPLC-UV鑒別川芎藥材貯存年限的方法，儀器為AgilentllOO高效液相色譜儀，配有VWD檢測器，不同貯存年限的川芎藥材樣品。首先精密稱取粉碎后待測(鑒另O)樣品的粉末Ig置于燒瓶中，加入40%乙醇100ml，記錄其重量，加熱回流提取30min或超聲提取30min，冷卻至室溫時用40%乙醇補充損失的重量，隨后提取液經(jīng)0.45 μ m的微孔濾膜過濾，濾液為供試溶液；在流動相為乙腈、甲醇和I %冰乙酸，洗脫方式為0-5min20:40:40 (V / V / v,乙腈:甲醇:1% 乙酸),5.l-30min60:0:40 (v / v / v,乙腈:甲醇:1% 乙酸)—100:0:0 (v / V / V,乙腈:甲醇:1%乙酸)，色譜柱為Diamonsil C18 (250mm X 4.6mm,5 4 111)，檢測波長0-19111丨1127511111、19.l_30min260nm，色譜柱溫度 25°C，流速為 0.6ml / min的條件下分析供試溶液，得到待測川芎藥材樣品的HPLC-UV圖譜；對所得到圖譜的特征峰進(jìn)行對比，粉碎后貯存3年、2年和I年的川芎藥材樣品HPLC-UV圖譜中的特征峰(出峰時間為21.20min)出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象，即一大峰帶一小峰的現(xiàn)象，而粉碎后貯存O年(粉碎后立即測定)的川芎藥材樣品HPLC-UV圖譜中的特征峰沒有出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象且均勻?qū)ΨQ，與貯存I年及I年以上的川芎藥材樣品區(qū)別明顯；完整根狀莖貯存3年和2年的川芎藥材HPLC-UV圖譜中的特征峰同樣出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象，而完整根狀莖貯存I年和O年的川芎藥材HPLC-UV圖譜中的特征峰沒有出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象且均勻?qū)ΨQ，與貯存2年及2年以上的川芎藥材樣品區(qū)別明顯。
[0014]基于上述特征峰的峰型差異來分辨川芎藥材的貯存年限。
【權(quán)利要求】
1.一種利用HPLC-UV鑒別川芎藥材貯存年限的方法，其特征在于，該方法的流動相為0_5min20:40:40 (v / v / V,乙臆:甲醇:I % 乙酸)、5.l_30min60:0:40 — 100:0:0 (v /V / V,乙腈:甲醇:1 %乙酸)，色譜柱為Diamonsil C18(250mmX4.6mm, 5 μ m),檢測波長0-19min275nm、19.1_30min260nm，色譜柱溫度為 25°C，流速為 0.6mlm/in。
【文檔編號】G01N30/02GK103558308SQ201310567135
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】袁繼超, 劉金亮, 鄭順林, 范巧佳, 孔凡磊, 楊世民, 譚杰, 馮冬菊 申請人:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)