專利名稱：一種沙丁胺醇檢測試劑條的制作方法
技術領域：
本實用新型屬于免疫檢測技術領域，涉及一種檢測試劑條，尤其涉及一種沙丁胺醇檢測試劑條。
背景技術：
目前對沙丁胺醇殘留檢測方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、氣-質(zhì)聯(lián)用法(GC/MS )、放射免疫分析法(RIA )、氣相色譜法(GC )、高效薄層色譜法(HPTLC )、液-質(zhì)聯(lián)用分析法(LC/MS)、酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)等。由于各種檢測方法的不同(包括方法學原理，使用的生物制劑的質(zhì)量，操作人員的素質(zhì)及使用設備的好壞等)，所得結(jié)果并不能說明某種檢測方法的優(yōu)劣。這些方法準確，靈敏度較高，出現(xiàn)假陽性、假陰性的機率較低，其中RIA、ELISA、TLC等方法可以大批量檢測，樣品不需要經(jīng)過處理，但需要特定的設備，操作人員需要技術培訓；GC/MS、HPLC等方法的設備更加昂貴，操作人員技術要求更高，且檢測量少。上述檢測方法都要求在實驗室中通過儀器完成，幾個小時之后才能給出鑒定結(jié)果，不適合現(xiàn)場初篩。沙丁胺醇快速檢測試劑具有攜帶方便，不需要設備，操作人員無需技術培訓，可現(xiàn)場操作，3 5分鐘即可給出結(jié)果等優(yōu)點，非常適合對大批量樣本進行現(xiàn)場篩查的工作。沙丁胺醇為選擇性3 2受體激動劑，能有效地抑制組胺等致過敏性物質(zhì)的釋放，防止支氣管痙攣。適用于支氣管哮喘、喘息性支氣管炎、支氣管痙攣、肺氣腫等癥。在現(xiàn)代豬肉養(yǎng)殖中被用作瘦肉精，來提高生豬的瘦肉產(chǎn)量。瘦肉精屬于腎上腺類神經(jīng)興奮劑。如果把瘦肉精添加到飼料中，的確可以增加動物的瘦肉量。但國內(nèi)外的相關科學研究表明，食用含有瘦肉精的肉對人體會產(chǎn)生危害，常有惡心、頭暈、四肢乏力、手顫等中毒癥狀，特別是對冠心病、高血壓患者危害更大。長期食用可能導致染色體畸變，會導致惡性腫瘤。因此，沙丁胺醇快速檢測試劑的開發(fā)對動物性食品檢測以及人類健康具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本實用新型的目的是提供一種沙丁胺醇檢測試劑條，操作簡單、反應快速、敏感性高、特異性強和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點。為了解決上述技術問題，本實用新型通過下述技術方案得以解決一種沙丁胺醇檢測試劑條，包括支持物、樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，硝酸纖維素膜上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。作為優(yōu)選，沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(SAL-BSA)。是按以下方法自制得到根據(jù)沙丁胺醇SAL三個羥基的活潑性不同，在無水條件下，沙丁胺醇SAL酚羥基鄰位的羥甲基可與丁二酸酐發(fā)生醇解反應，生成SAL的琥珀酸衍生物。在三乙胺為催化劑，低溫無水條件下，該SAL琥珀酸衍生物可與氯甲酸異丁酯發(fā)生取代反應，所的的產(chǎn)物與載體蛋白BSA上氨基偶聯(lián)，生成SAL與載體蛋白偶聯(lián)物SAL-BSA。將合成產(chǎn)物置入pH 7. 4 IOmM磷酸鹽緩沖液4°C攪拌透析2天，每天換液2次，以去除未結(jié)合的沙丁胺醇或其它小分子物質(zhì)，透析后-20°C密閉保存。本實用新型的一種沙丁胺醇檢測試劑條，操作簡單、反應快速、敏感性高、特異性強和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點。在免疫檢測技術領域具有良好的應用前景。

圖I為本實用新型所述一種沙丁胺醇檢測試劑條的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式

以下結(jié)合附圖I與實施例對本實用新型作進一步詳細描述。
實施例一種沙丁胺醇檢測試劑條，如圖I所示,包括支持物2、樣品墊5、膠體金紙片4、硝酸纖維素膜3和吸水墊1，支持物上從加樣端6開始依次粘貼有樣品墊5、膠體金紙片4、硝酸纖維素膜3和吸水墊I。硝酸纖維素膜3上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(SAL-BSA)。利用膠體金免疫層析的原理，在硝酸纖維素膜3上的檢測區(qū)包被SAL-BSA，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。當待測物中有被測的抗原物質(zhì)(即沙丁胺醇)時，待測物中的抗原物質(zhì)就會與標記膠體金的抗沙丁胺醇抗體形成Ag-Ab-Au復合物，該復合物中抗體的活性位點將因被樣品溶液中的藥物占據(jù)而無法與T線上藥物抗原結(jié)合；所以當樣品中的沙丁胺醇含量達5 yg/L以上時，檢測試劑條上的T線不顯色，可以判定為陽性。反之，當樣品中沙丁胺醇含量在5 yg/L以下或無殘留時，檢測試劑條上的T線顯色，判定為陰性。操作簡單、反應快速、敏感性高、特異性強和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點。在免疫檢測技術領域具有良好的應用前景?？傊陨纤鰞H為本實用新型的較佳實施例，凡依本實用新型申請專利范圍所作的均等變化與修飾，皆應屬本實用新型專利的涵蓋范圍。
權(quán)利要求1.ー種沙丁胺醇檢測試劑條，包括支持物(2)、樣品墊(5)、膠體金紙片(4)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(1)，支持物上從加樣端(6)開始依次粘貼有樣品墊(5)、膠體金紙片(4)、硝酸纖維素膜(3)和吸水墊(1)，其特征在于硝酸纖維素膜(3)上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種沙丁胺醇檢測試劑條，其特征在于沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物。
專利摘要本實用新型屬于免疫檢測技術領域，涉及一種檢測試劑條，尤其涉及一種沙丁胺醇檢測試劑條，包括支持物、樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，支持物上從加樣端開始依次粘貼有樣品墊、膠體金紙片、硝酸纖維素膜和吸水墊，硝酸纖維素膜上有檢測區(qū)和對照區(qū)，檢測區(qū)包被沙丁胺醇人工免疫抗原，對照區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體。沙丁胺醇人工免疫抗原為沙丁胺醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物(SAL-BSA)，操作簡單、反應快速、敏感性高、特異性強和適合現(xiàn)場檢測，而且還具有生產(chǎn)周期短、產(chǎn)量高、成本低等優(yōu)點。在免疫檢測技術領域具有良好的應用前景。
文檔編號G01N33/531GK202471714SQ201220092739
公開日2012年10月3日 申請日期2012年3月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月13日
發(fā)明者周文良, 應旭霞, 陳國琴 申請人:杭州隆基生物技術有限公司