專利名稱：治療肝炎的中藥復(fù)方制劑以及質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑，還涉及該中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
急慢性肝炎之肝功能損害癥自古以來就一直困擾著人類，其發(fā)病率高，目前，全世界有兩億以上的人群感染了肝炎病毒(HBV)，每年都有幾十萬人死于各型肝炎及相關(guān)的肝硬變和原發(fā)性肝癌。為了防治各種肝炎病，全世界每天需要支付高達100萬美元的代價。我國是肝炎高發(fā)區(qū)，據(jù)有關(guān)資料報道，我國肝炎病毒(HBV)感染率達50-60%，有一億多HBV攜帶者，每年有乙肝患者270萬人，80多萬新生兒受到HBV感染，并有相當(dāng)部分成為HBV終身攜帶者。而廣西的情況更為嚴(yán)重，因此開展研制保肝和治療肝炎藥物就顯得十分迫切。引起肝炎的原因是多種多樣的，常見的有①病毒性肝炎是由各種嗜肝性病毒引起的肝炎?，F(xiàn)發(fā)現(xiàn)至少有7種，分別用甲、乙、丙、丁、戊、己、庚表示。②酒精性肝炎是因為長期大量飲酒引起的肝炎。③藥物性肝炎是因?qū)Ω闻K有損害的藥物引起的肝炎。④自身免疫反應(yīng)性肝炎是由于機體免疫功能紊亂引起的肝炎。用中醫(yī)理論闡述急、慢性肝炎常見的臨床表現(xiàn)有黃疸或無黃疸，肝區(qū)疼痛或肝脾腫大，神疲乏力，食欲減退，小便黃短等癥狀及肝功能異常。在中醫(yī)文獻中雖無“肝炎”的病名，但根據(jù)急、慢性肝炎的臨床表現(xiàn)，屬中醫(yī)學(xué)中的“黃疸”、“脅痛”、“積聚”等病癥的范疇。急、慢性肝炎的病因病機常見者為感受濕熱病邪，阻滯肝膽、氣機受阻、疏泄失常所致。正如《素問.六元正紀(jì)大論》中指出“濕熱相搏……，民病發(fā)瘴“。《傷寒論》云”傷寒瘀熱在里，身必發(fā)黃“。若濕熱瘀阻，偏于血脈，損及肝膽，迫膽液外溢，浸潰于肌膚，即成“黃疸”;若濕熱瘀阻偏于氣分，膽汁尚能循其道而泄，未至發(fā)生膽汁外溢，故未成黃疸。然濕熱邪毒蘊結(jié)于肝，使肝失疏泄，肝氣郁結(jié)，以致胸脅脹痛；肝郁氣滯，可致血瘀，可有兩脅刺痛或痛有定處，脅下痞塊，舌質(zhì)紫暗，瘀斑；濕熱阻滯中焦，使脾失健運，胃失和降，故有神疲乏力，納呆腹脹等癥。因此，濕熱邪毒所致急、慢性肝炎這肝功損害及有上述見癥者，當(dāng)以清熱得濕，解毒止痛，保肝護肝為法而治之。目前用于治療肝損害藥物品種繁多，西藥主要有干擾素(普通干擾素，長效干擾素);核苷(酸)類似物，即拉米夫定，阿德福韋酯，替比夫定，恩替卡韋，替諾福韋酯，克拉夫定等。這些西藥毒副作用較大，干擾素治療副作用主要有流感樣、精神抑制及脫發(fā)，用藥三個月后有80%以上的人會出現(xiàn)脫發(fā)現(xiàn)象；而核苷(酸)類似物副作用主要是在使用拉米夫定半年至一年左右產(chǎn)生耐藥，病性復(fù)發(fā)甚至惡化，且要求不能中斷服藥。在中藥治療中，長期服用某些中藥會出現(xiàn)頭暈、食欲減退、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉，嚴(yán)重者可出現(xiàn)煩躁不安、血壓升高、黃疸、肝功能損害等。由于肝病屬于慢性病，往往需要較長的服藥周期，所以，降低治療藥物的毒副作用是本領(lǐng)域亟待解決的技術(shù)問題
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種服用方便、作用平穩(wěn)、療效確切、毒副作用低的治療肝炎的中藥復(fù)方制劑。本發(fā)明的另一目的在于提供這種中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明所述的治療肝炎的中藥復(fù)方制劑由以下重量配比的原料藥制成地耳草555份，黃花倒水蓮555份，虎杖444份，白花蛇舌草333份，蒲公英333份，垂盆草333份，半邊蓮333份，重樓333份，徐長卿333份，姜黃333份，丹參333份，白首烏444份，盤龍參333份，甘草50份。本發(fā)明是在壯族民間驗方基礎(chǔ)上，根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論，經(jīng)科學(xué)配伍研制而成。通過將地耳草，黃花倒水蓮，虎杖，白花蛇舌草，蒲公英，垂盆草，半邊蓮，重樓，徐長卿，姜黃 ，丹參，白首烏，盤龍參，甘草結(jié)合組方，制備成功一種用于治療急慢性肝炎之肝功能損害的藥物，克服了現(xiàn)有西藥的缺陷，取得了意想不到的效果。本發(fā)明是為濕熱邪毒所致急、慢性肝炎之肝功能損害而設(shè)，以清熱利濕，解毒止痛、保肝護肝為法。方中以地耳草、黃花倒水蓮為君藥；臣以虎杖、白花蛇舌草、蒲公英、半邊蓮；佐以重樓、徐長卿、姜黃、丹參、白首烏、盤龍參；以甘草為使藥。本發(fā)明的藥物制劑為口服制劑，劑型可以是丸劑、顆粒劑、片劑(分散片、口崩片、腸溶片、異形片、泡騰片、緩釋片、雙層片等)、散劑、膠囊劑、滴丸、微囊等藥劑學(xué)上可以接受的劑型。本發(fā)明的藥物制劑是經(jīng)過如下方法制備的(I)取地耳草，黃花倒水蓮，虎杖，白花蛇舌草，蒲公英，垂盆草，半邊蓮，徐長卿，丹參，白首烏，盤龍參，甘草，十四味藥材，破碎，加飲用水煎煮三次(第一次加水9-12倍量，第二、第三次每次加水6-9倍量)，每次2小時，合并煎液，100目篩濾過，濾液吸入真空濃縮罐內(nèi)，在負壓O. 06-0. 08MPa下濃縮至相對密度為1.09-1.12 (70°C)的清膏。(2)取上述清膏置醇沉罐內(nèi)，加入乙醇使含醇量達60%，攪勻，靜置24小時，取上清液,濾過,加熱回收乙醇至流出液含乙醇< 10%時，停止回收乙醇，將罐內(nèi)藥液吸入真空濃縮罐內(nèi)減壓(O. 06-0. 08MPa)濃縮至相對密度為1.25-1.30 (70°C)的清膏，備用；(3)取重樓，姜黃粉碎成細粉，備用；(4)將上述(2)項下的濃縮膏加入藥用輔料及上述(3)項下的細粉混均，干燥，粉碎，制成膠囊劑、丸劑、顆粒劑等。本發(fā)明所述的藥用輔料為淀粉等。本發(fā)明所述的中藥復(fù)方制劑主要用于治療急慢性肝炎，服用方便、作用平穩(wěn)、療效確切、劑型穩(wěn)定、質(zhì)量可控且毒副作用低。本發(fā)明所述的治療肝炎的中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制方法包括一、姜黃照高效液相色譜法測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-4%冰乙酸(48 52)為流動相；檢測波長為430nm。理論板數(shù)按姜黃素峰計算應(yīng)不低于5000。對照品溶液的制備精密稱取姜黃素對照品適量，加甲醇制成每Iml含20μ g的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品5g，，研細，過三號篩，精密稱取O. 2g，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇10ml，，密塞，稱定重量，加熱回流40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每克含姜黃以姜黃素(C21H2tlO6)計，不得少于O. 40mg。二、檢查應(yīng)符合膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定；本發(fā)明藥效學(xué)試驗本發(fā)明對四氯化碳急性肝損傷的保護作用試驗的實驗研究摘要以本發(fā)明制劑內(nèi)容物，給小鼠灌胃，對D-半乳糖胺急性肝損傷有一定的保護作用。對四氯化碳引起的肝損傷有保護作用，降低肝組織發(fā)生變性和灶性、碎悄狀或帶狀壞死。 I、實驗材料I. I實驗藥物本發(fā)明實施例2，每克丸含5g總藥材，由廣西梧州三鶴藥業(yè)有限公司提供，實驗時用蒸餾水配制成所需濃度的藥液供動物灌胃用。聯(lián)苯雙酯滴丸，每丸I. 5mg，北京協(xié)和藥廠生產(chǎn)。環(huán)磷酰胺，每瓶IOOmg，上海第十二制藥廠生產(chǎn)。I. 2實驗動物Wistar大鼠，體重200_240g，雌雄兼用，由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。Balb/c系小鼠，體重20-22g，雌雄兼用，由廣西區(qū)防疫站動物室提供。豚鼠，體重300_350g，雌雄兼用，由文本醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。I. 3 試制乙型肝炎兩對半診斷試劑(酶聯(lián)免疫吸附實驗，ELISA)，由上?？迫A生化試劑實驗所提供。綿羊紅血球溶血素，溶血效價1:4000，衛(wèi)生部上海生物制品研空所產(chǎn)品。人乙型肝炎病毒感染血清=HbsAg和HbeAg陽性血清(滴度I :64)，由乙型肝炎患者提供。2、試驗方法選擇2. I選擇抗四氯化碳和D-半乳糖胺急性肝損傷、抗四氯化碳慢性肝纖維化、抗乙肝病毒、利膽和對免疫功能影響的實驗來觀察本發(fā)明的藥理作用。2. 2動物給藥后反應(yīng)在本試驗的劑量范圍內(nèi)，受試動物活動、食欲和二便正常,未見消瘦、脫毛等毒副反應(yīng)。2. 3劑量設(shè)置本發(fā)明參考人臨床用量設(shè)大、中、小三個劑量組，小鼠分別為60、30、15g總藥材、kg，相當(dāng)于臨床日用量(1. 5g/kg )的40、20、IO倍，或設(shè)大、小兩個劑量組，小鼠為 60、30g/kg,大鼠為 30、15g/kg。2. 4給藥方法采用與臨床用藥途一致的灌胃給藥。2. 5試驗對照設(shè)生理鹽水為正常對照，聯(lián)苯雙酯或環(huán)磷胺酰胺為陽性對照。2. 6統(tǒng)計方法試驗結(jié)果采用華西醫(yī)科大學(xué)統(tǒng)計學(xué)考研室提供的《中國醫(yī)學(xué)百科全書-醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)》統(tǒng)計軟件包(第二版)進行統(tǒng)計學(xué)處理，用t檢驗或校正t’檢驗或秩和檢驗比較組間差異的顯著性。試驗方法與結(jié)果I.本發(fā)明對四氯化碳急性肝損傷的保護作用將小鼠隨機分為正常對照、四氯化碳、聯(lián)苯雙酯(200mg/kg)、本發(fā)明大、中、小劑量(劑量分別為60、30、15g/kg)組。正常對照組和四氯化碳組給予生理鹽水。動物灌胃(i.g.)給藥，每天給藥一次，連續(xù)給藥4天，給藥第三天下午除正常對照組外，每組均腹腔注射(i. p. )0. 2%四氯化碳花生油溶液(20mg/kg)，16小時后取血分離血清，測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)，并取肝組織按常規(guī)固定、染色和組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明，注射四氯化碳16小時后肝功能明顯受損，GPT和GOT顯著升高。本發(fā)明中劑量和小劑量能顯減輕肝組織受損程度，降低GPT和GOT水平。肝組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，給予四氯化碳后，肝組織發(fā)生變性和灶性、碎屑狀或帶狀壞死，本發(fā)明中劑量和小劑量組的肝組織變性壞死程度均較對照組為輕(見表1，表2)。表I本發(fā)明對四氯化碳急性肝損傷GPT和GOT的影響(X 土 SD U/1)
權(quán)利要求
1.一種治療肝炎的中藥復(fù)方制劑，其特征在于是由以下重量配比的原料藥制成地耳草555份，黃花倒水蓮555份，虎杖444份，白花蛇舌草333份，蒲公英333份，垂盆草333份，半邊蓮333份，重樓333份，徐長卿333份，姜黃333份，丹參333份，白首烏444份，盤龍參333份，甘草50份。
2.如權(quán)利要求I所述的治療肝炎的中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于由以下步驟組成 一、姜黃照高效液相色譜法測定 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-4%冰乙酸48 52為流動相；檢測波長為430nm ;理論板數(shù)按姜黃素峰計算應(yīng)不低于5000 ； 對照品溶液的制備精密稱取姜黃素對照品適量，加甲醇制成每Iml含20 μ g的溶液，即得; 供試品溶液的制備取本品5g，，研細，過三號篩，精密稱取O. 2g，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇10ml，，密塞，稱定重量，加熱回流40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，用微孔濾膜濾過，即得； 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各IOy 1，注入液相色譜儀，測定，SP得; 本品每克含姜黃以姜黃素C21H2tlO6計，不得少于O. 40mg ； 二、檢查應(yīng)符合膠囊劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療急慢性肝炎的中藥復(fù)方制劑，還涉及該中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明所述的治療急慢性肝炎之肝功能損害的藥物組合物由以下重量配比的原料藥制成地耳草555份，黃花倒水蓮555份，虎杖444份，白花蛇舌草333份，蒲公英333份，垂盆草333份，半邊蓮333份，重樓333份，徐長卿333份，姜黃333份，丹參333份，白首烏444份，盤龍參333份，甘草50份。本發(fā)明所述的中藥復(fù)方制劑主要用于治療急慢性肝炎，服用方便、作用平穩(wěn)、療效確切、劑型穩(wěn)定、質(zhì)量可控且毒副作用低。
文檔編號G01N30/02GK102908586SQ20121043766
公開日2013年2月6日 申請日期2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月6日
發(fā)明者陳敏斐 申請人:廣西梧州三鶴藥業(yè)有限公司