專利名稱：飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法
技術領域：
本發(fā)明涉及吡啶甲酸鉻的分析檢測方法，具體地指一種飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法。
背景技術：
吡啶甲酸鉻，紫紅色結晶性細小粉末，流動性良好，常溫下穩(wěn)定，微溶于水，不溶于乙醇，其中的鉻為三價鉻。吡啶甲酸是人和哺乳動物肝臟、腎臟內產生的氨基酸代謝產物，并大量存在于牛奶等食物中，其與Cr3+緊密結合成穩(wěn)定化合物吡啶甲酸鉻，可以被人體和動物很好地吸收。吡啶甲酸鉻作為飼料添加劑具有以下作用I、增加畜禽肉、蛋、奶、仔的產出率和幼仔成活率；·2、促進畜禽降糖抑脂快速生長，提高飼料回報率；3、調節(jié)內分泌，增強畜禽繁殖性能；4、改善畜禽胴體品質，提高瘦肉率；5、降低畜禽應激，增強畜禽抗應激能力；6、增進畜禽免疫機能，降低畜禽養(yǎng)殖風險。自然界中的鉻以Cr到Cr6+的各種價態(tài)存在，其中主要存在兩種鉻的形態(tài)，維持生命的必需元素三價鉻和具有高毒性、強致癌性的六價鉻。因此，僅測定產品中鉻的總量已不能滿足需要，還需對吡啶甲酸鉻分子進行合理準確的分析。目前，飼料添加劑吡啶甲酸鉻的測定采用的是行業(yè)標準NY/T916-2004。在采用該方法測定中觀察到，吡啶甲酸鉻在中性條件下有離解的現(xiàn)象發(fā)生，據有關文獻報導吡啶甲酸鉻在中性或酸性水環(huán)境中可分解為吡啶甲酸和吡啶酸鉻二聚體。在用高效液相色譜分析，所得的譜圖中有重疊峰出現(xiàn)，不易分離，不便于定量分析。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的就是針對現(xiàn)有技術的缺陷，提供一種飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法，它能準確地分析測定吡啶甲酸鉻的含量?？紤]到吡啶甲酸鉻在中性條件下有離解的現(xiàn)象發(fā)生，而很多金屬離子的絡合物需在堿性條件下才能穩(wěn)定。經過試驗發(fā)現(xiàn)，在高PH值條件下樣品不再發(fā)生變化。本發(fā)明的技術方案是這樣實現(xiàn)的采用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充柱，該方法采用的流動相為乙腈和磷酸鹽緩沖溶液，所述乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為10:90 20:80，所述磷酸鹽緩沖溶液的ΡΗ=8. (T9. 5，所述磷酸鹽緩沖溶液濃度為O. 05、. lmol/L，檢測波長為254 428臟。優(yōu)選的，所述乙腈與水的體積比為10:90。優(yōu)選的,所述磷酸鹽緩沖溶液的PH=8. 5。經試驗選定流動相在PH=8. 5時得到最滿意的色譜分析方法。
優(yōu)選的，所述磷酸鹽緩沖溶液濃度為O. lmol/L。所述磷酸鹽緩沖溶液為磷酸二氫鈉的水溶液，PH值用NaOH調節(jié)。本發(fā)明的有益效果在于采用本發(fā)明的分析方法，吡啶甲酸鉻沒有發(fā)生離解的現(xiàn)象，峰形良好，沒有重疊峰出現(xiàn)，定量分析準確。加標回收率試驗得到平均回收率為98. 28%，精密度試驗得到RSD%=0. 69，可以滿足飼料級吡啶甲酸鉻的含量分析。
具體實施例方式以下結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的詳細描述。實施例I采用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充柱,如，Waters XbridgeTMC 18 5 Mm 4. 6 X 250mm Column。流動相為乙腈和磷酸鹽緩沖溶 液，乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為10:90，磷酸鹽緩沖溶液的PH=8. 5，磷酸鹽緩沖溶液濃度為O. lmol/L，檢測波長為254 428臟。精密稱取標準樣品吡啶甲酸鉻O. 035g (稱準至O. 0002g)，置于25mL容量瓶中，力口流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取該溶液3mL移入25mL容量瓶中，加流動相定容，搖勻，作為標準溶液。精密稱取試樣I. 25g (稱準至O. 0002g)，加流動相充分溶解并定容到25mL容量瓶中，超聲波提取5min，用孔徑為O. 45Mm膜過濾，吸取該溶液ImL至25mL容量瓶中，加流動相稀釋到刻度，搖勻，作為供試溶液。精密量取標準溶液和供試溶液，分別進樣ΙΟμ ，記錄色譜圖，按外標法計算試樣中吡啶甲酸鉻的含量。實施例2采用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充柱,如，Waters XbridgeTMC 18 5 Mm 4. 6 X 250mm Column。流動相為乙腈和磷酸鹽緩沖溶液，乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為15:85，磷酸鹽緩沖溶液的PH=9. 5，磷酸鹽緩沖溶液濃度為0. 05mol/L，檢測波長為254 428mm。精密稱取標準樣品吡啶甲酸鉻0. 035g (稱準至0. 0002g)，置于25mL容量瓶中，力口流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取該溶液3mL移入25mL容量瓶中，加流動相定容，搖勻，作為標準溶液。精密稱取試樣I. 25g (稱準至0. 0002g)，加流動相充分溶解并定容到25mL容量瓶中，超聲波提取5min，用孔徑為0. 45Mm膜過濾，吸取該溶液ImL至25mL容量瓶中，加流動相稀釋到刻度，搖勻，作為供試溶液。精密量取標準溶液和供試溶液，分別進樣10μ ，記錄色譜圖，按外標法計算試樣中吡啶甲酸鉻的含量。實施例3采用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充柱,如，Waters XbridgeTMC 18 5 Mm 4. 6 X 250mm Column。流動相為乙腈和磷酸鹽緩沖溶液，乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為20:80，磷酸鹽緩沖溶液的PH=9. 0，磷酸鹽緩沖溶液濃度為0. 05mol/L，檢測波長為254 428臟。精密稱取標準樣品吡啶甲酸鉻0. 035g (稱準至0. 0002g)，置于25mL容量瓶中，力口流動相超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取該溶液3mL移入25mL容量瓶中，加流動相定容，搖勻，作為標準溶液。精密稱取試樣I. 25g (稱準至O. 0002g)，加流動相充分溶解并定容到25mL容量瓶中，超聲波提取5min，用孔徑為O. 45Mm膜過濾，吸取該溶液ImL至25mL容量瓶中，加流動相稀釋到刻度，搖勻，作為供試溶液。精密量取標準溶液和供試溶液，分別進樣ΙΟμ ，記錄色譜圖，按外標法計算試樣中吡啶甲酸鉻的含量。方法可行性試驗采用實施例I的測定方法，準確稱取試樣5份進樣，進行精密度試驗，計算得到RSD%=0. 69。根據試樣的測定步驟，作5個濃度加樣回收率實驗，每個濃度做3個平行樣，計算平均回收率，以驗證方法的準確性。結果如表I所示。表I 加標回收率試驗結果
權利要求
1.一種飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法，采用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充柱，其特征在于該方法采用的流動相為乙腈和磷酸鹽緩沖溶液，所述乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為10:90 20:80，所述磷酸鹽緩沖溶液的ΡΗ=8. (T9. 5，所述磷酸鹽緩沖溶液濃度為O. 05、. lmol/L,檢測波長為254 428mm。
2 .根據權利要求I所述的飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為10 :90。
3.根據權利要求I所述的飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述磷酸鹽緩沖溶液的PH=8. 5，所述磷酸鹽緩沖溶液濃度為O. lmol/L。
4 根據權利要求I或3所述的飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法，其特征在于所述磷酸鹽緩沖溶液為磷酸二氫鈉的水溶液，PH值用NaOH調節(jié)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種飼料中吡啶甲酸鉻的高效液相色譜分析方法，采用配有紫外檢測器的高效液相色譜儀進行測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充柱，流動相為乙腈和磷酸鹽緩沖溶液，所述乙腈與磷酸鹽緩沖溶液的體積比為10:90 ~ 20:80，磷酸鹽緩沖溶液的PH=8.0~9.5，磷酸鹽緩沖溶液濃度為0.05~0.1mo1/L，檢測波長為254~428mm。采用本發(fā)明的分析方法，吡啶甲酸鉻沒有發(fā)生離解的現(xiàn)象，峰形良好，沒有重疊峰出現(xiàn)，定量分析準確。加標回收率試驗得到平均回收率為98.28%，精密度試驗得到RSD%=0.69，可以滿足飼料級吡啶甲酸鉻的含量分析。
文檔編號G01N30/02GK102928534SQ20121041781
公開日2013年2月13日 申請日期2012年10月26日 優(yōu)先權日2012年10月26日
發(fā)明者黃劍雄, 閔江華 申請人:湖北神舟化工有限公司