專利名稱:毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置及其制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置及其制作方法,適用于生物樣品、食品和環(huán)境樣品分析。
背景技術(shù):
毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)具有高效、快速、進(jìn)樣體積小、分離范圍廣、運(yùn)行成本低、溶劑消耗少、操作簡單和抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn),尤其適合于復(fù)雜樣品分析,是分析科學(xué)最具活力的前沿研究領(lǐng)域之一。但商品化的CE儀器多選用紫外檢測器 (UV),最低檢出限一般在10_5 10_6mol/L,難以滿足復(fù)雜樣品中極低含量成分分析的要求,限制了 CE在復(fù)雜樣品分析研究領(lǐng)域中的應(yīng)用。化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence, CL)檢測無需外加光源,背景噪聲小,具有靈敏度高(可以得到和激光誘導(dǎo)熒光相媲美的高靈敏度)、線性范圍廣、分析速度快、儀器設(shè)備簡單等優(yōu)點(diǎn),是ー種有效的痕量分析技木。但CL法固有的選擇性差的缺點(diǎn)限制了它在實(shí)際分析中的應(yīng)用。CL和高分離效率的CE結(jié)合,直接用于復(fù)雜樣品中痕量成分的分離與測定,可同時(shí)解決選擇性差和靈敏度低的問題,給CL研究和CE技術(shù)提供了發(fā)展機(jī)會。CE-CL聯(lián)用技術(shù)已被應(yīng)用于生物樣品、食品和環(huán)境樣品分析中,分析對象已涉及蛋白質(zhì)、氨基酸、生物堿、糖類和金屬離子等。但到目前為止CL在CE的檢測方式中運(yùn)用的相對較少,主要是因?yàn)閷ⅴ苏呗?lián)用仍然存在著ー些困難,因此CE-CL檢測接ロ的研制仍是CE-CL分析領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。在CE-CL聯(lián)用技術(shù)中,需要向該檢測體系引入ー種或兩種反應(yīng)試劑來引發(fā)CL反應(yīng),為了取得良好的分離效率和靈敏度,涉及分析物和化學(xué)發(fā)光試劑混合模式的接ロ設(shè)計(jì)是ー個(gè)非常關(guān)鍵的因素。依據(jù)柱后流體混合的模式和檢測位置,通??煞譃殡x柱合并流型、在柱同軸流型、離柱同軸流型和柱端液池型。(I)離柱合并流型電泳高壓區(qū)和發(fā)光檢測區(qū)隔離開來,可消除化學(xué)發(fā)光試劑的電分解,但分析物和發(fā)光試劑混合時(shí)被稀釋,并產(chǎn)生渦流擴(kuò)散,導(dǎo)致峰展寬,降低了靈敏度和分離效率。(2)在柱同軸流型接ロ結(jié)構(gòu)簡單,在CE-CL系統(tǒng)中應(yīng)用較廣泛。但因CL試劑在引入過程中受CE高壓電場的作用,化學(xué)發(fā)光反應(yīng)發(fā)生在高壓電場區(qū),這樣會導(dǎo)致化學(xué)發(fā)光試劑的電分解,在電場存在下還有可能遷移進(jìn)入分離毛細(xì)管;分析物與發(fā)光試劑的混合不夠均勻穩(wěn)定,會影響分析的準(zhǔn)確性與重現(xiàn)性,同時(shí)也容易引起渦流擴(kuò)散,而導(dǎo)致電泳峰的展寬,降低柱效。(3)離柱同軸流型把接地電極從反應(yīng)毛細(xì)管的末端移至前端,占據(jù)四通接口中一個(gè)接ロ位置,浸入化學(xué)發(fā)光反應(yīng)液中。這樣既提高了電流的穩(wěn)定性,還可使電泳分離條件與化學(xué)發(fā)光條件相匹配。雖然這種檢測接口裝置可以有效的防止發(fā)光試劑的電化學(xué)分解,但仍有可能在電場作用下遷移進(jìn)入分離毛細(xì)管,試劑流動與電滲之間也可能存在的不匹配性,從而在某些應(yīng)用中產(chǎn)生額外的麻煩。(4)柱端液池型直接將分離毛細(xì)管的末端插入ー個(gè)含有化學(xué)發(fā)光反應(yīng)試劑的蓄液池中,接地電極直接固定在末端的液池里。結(jié)構(gòu)簡単、穩(wěn)定且易安裝,消除了試劑流動與電滲之間存在的不匹配性。但化學(xué)發(fā)光試劑有可能電分解,在電場存在下還有可能遷移進(jìn)入分離毛細(xì)管,柱后液池內(nèi)的溶液必須要不斷更新,另外由于液池內(nèi)較大的檢測死體積會導(dǎo)致分離效率和靈敏度的降低。近年來,國內(nèi)外研究者也不斷設(shè)計(jì)出ー些新型CE-CL接ロ。Zhike He等開發(fā)了一種在柱狹縫/柱后反應(yīng)接ロ(On-column Fracture/End-column Reaction Interface)。該接ロ可同時(shí)引入兩種以上發(fā)光試劑,解決了 CE分離和發(fā)光條件的兼容性問題,且發(fā)光反應(yīng)與電場隔離,有效防止發(fā)光試劑的電化學(xué)分解和遷移,具有離柱和在柱接ロ的優(yōu)點(diǎn)。JiekeCheng等對柱端液池型進(jìn)行改迸,設(shè)計(jì)了旋轉(zhuǎn)池型的CE-CL接ロ,通過旋轉(zhuǎn)檢測池,分離毛細(xì)管出口端的化學(xué)發(fā)光試劑得到及時(shí)更新,解決了常規(guī)同軸流接口中因氣泡形成而使電泳中斷的問題。Dumke等通過把魯米諾和辣根過氧化物酶固定在毛細(xì)管內(nèi),將廣泛使用的商品化CE儀器進(jìn)行改造用于CL在線檢測,雖然提高了 CE-CL檢測的可操作性,但是靈敏度比大多數(shù)CE-CL檢測低了 2-3個(gè)數(shù)量級,且毛細(xì)管內(nèi)固定CL試劑也較困難,重現(xiàn)性也不夠好。盡管研究者已開發(fā)出各種不同的CE-CL聯(lián)用接ロ,但這些接ロ裝置仍處于實(shí)驗(yàn)室自行加工階段,有各自的優(yōu)缺點(diǎn),都不能同時(shí)解決由于CL試劑的引入而造成分離效率、靈敏度和穩(wěn)定性降低等問題;且氫氟酸刻蝕后毛細(xì)管容易碎,不易操作;因此在還沒有十分成熟的CE-CL聯(lián)用儀器出現(xiàn)之前,開發(fā)高靈敏和高穩(wěn)定的CE-CL檢測接ロ,擴(kuò)大CE-CL技術(shù)的應(yīng)用范圍,對生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展具有重要意義。此外,加速研制CE-CL檢測接ロ使儀器商品化意味著先占得商機(jī)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置及其制作方法,該接口裝置制造成本低、接ロ小巧,操作簡便,較好解決了由于CL試劑的引入而造成分離效率、靈敏度和穩(wěn)定性降低等問題,具有CE的高分離效率和CL檢測的高靈敏度。本發(fā)明的技術(shù)方案在于ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置,包括一有機(jī)玻璃、反應(yīng)毛細(xì)管和分離毛細(xì)管,所述有機(jī)玻璃中部設(shè)置有橫向貫穿通道和與橫向貫穿通道垂直相交的縱向發(fā)光檢測窗ロ,所述反應(yīng)毛細(xì)管設(shè)置在橫向貫穿通道內(nèi),所述反應(yīng)毛細(xì)管外壁與橫向貫穿通道內(nèi)壁之間設(shè)置有至少兩個(gè)的定位墊圈,所述分離毛細(xì)管的一端部插入反應(yīng)毛細(xì)管的進(jìn)料端,所述分離毛細(xì)管的另一端部穿出安裝在橫向貫穿通道相應(yīng)端口上的橡皮塞,所述分離毛細(xì)管的徑向兩旁側(cè)還設(shè)置有發(fā)光試劑通道和電極安裝通道。上述有機(jī)玻璃上還開設(shè)有通向定位墊圈的注膠孔,所述注膠孔用于注入膠水,以利固定定位墊圈。上述反應(yīng)毛細(xì)管的廢液排出端連接有廢液排出導(dǎo)管,所述廢液排出導(dǎo)管的孔徑大于反應(yīng)毛細(xì)管的孔徑,以利廢液的及時(shí)排出。上述有機(jī)玻璃的表面平整,其長度為3. 5cm,寬度為2. 0cm,厚度為O. 8 L 2cm ;所述橫向貫穿通道的孔徑為O. 2^0. 4cm ;所述縱向發(fā)光檢測窗ロ為直徑為O. 8^1. 2cm的圓形通孔,所述發(fā)光試劑通道和電極安裝通道的孔徑為O. 05、. 20 cm。
本發(fā)明的另ー技術(shù)方案在干ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置的制作方法,按以下步驟進(jìn)行(1)有機(jī)玻璃的處理取一塊有機(jī)玻璃;從左側(cè)面沿水平方向往右鉆取橫向貫穿通道,作為接ロ設(shè)計(jì)的主通道;在有機(jī)玻璃前后端面中間部位打通ー個(gè)縱向圓孔,作為檢測窗,并在檢測窗的兩旁側(cè)鉆出用于向定位墊圈注入膠水的注膠孔;最后,在靠近有機(jī)玻璃左側(cè)的上下兩表面各鉆ー個(gè)孔道,作為發(fā)光試劑通道和電極安裝通道;
(2)反應(yīng)毛細(xì)管的安裝采用點(diǎn)樣毛細(xì)管作為發(fā)光反應(yīng)池,在點(diǎn)樣毛細(xì)管上套入若干個(gè)定位墊圈(橡皮圏)后,將其插入橫向貫穿通道中。因?yàn)閷?shí)驗(yàn)所用的鉆孔器孔徑比反應(yīng)毛細(xì)管大,為了固定反應(yīng)毛細(xì)管,防止因抖動影響檢測效果,在定位墊圈位置上注入膠水(AB膠),并在橫向貫穿通道的相應(yīng)端口上安裝橡皮塞,起固定和密封的作用;
(3)分離毛細(xì)管的處理采用明火去除聚亞酰胺涂層,并用蘸有無水こ醇的棉花擦拭燒過的痕跡,作為檢測管段,將分離毛細(xì)管插入反應(yīng)毛細(xì)管中,調(diào)整分離毛細(xì)管插入的長度,并在橫向貫穿通道的相應(yīng)端口上安裝橡皮塞,起固定和密封的作用。上述有機(jī)玻璃的表面平整,其長度為3. 5cm,寬度為2. 0cm,厚度為O. 8 L 2cm ;所 述橫向貫穿通道的孔徑為O. 2^0. 4cm ;所述檢測窗為直徑為O. 8^1. 2cm的圓形通孔,所述發(fā)光試劑通道和電極安裝通道的孔徑為O. 05、. 20 cm。上述反應(yīng)毛細(xì)管的廢液排出端連接有廢液排出導(dǎo)管,所述廢液排出導(dǎo)管的孔徑大于反應(yīng)毛細(xì)管的孔徑,以利廢液的及時(shí)排出。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于
(I)采用有機(jī)玻璃制作接ロ,成本低、接ロ小巧,操作簡便,易于商品化。(2)用直徑約為O. 9mm的點(diǎn)樣毛細(xì)管作為反應(yīng)毛細(xì)管,分離毛細(xì)管可通過固定的橡皮塞直接插入反應(yīng)毛細(xì)管,易于更換分離毛細(xì)管,且死體積和稀釋效應(yīng)較小,由于反應(yīng)管徑大于分離毛細(xì)管徑,PH值環(huán)境取決于柱后CL試劑的pH值,更容易解決CE分離體系和CL檢測體系的兼容性問題。同時(shí)對快速發(fā)光反應(yīng)而言,內(nèi)徑大發(fā)光面也大,提高了發(fā)光強(qiáng)度。(3)發(fā)光試劑由醫(yī)用雙道微量注射泵注入,只要選擇合適管徑的試劑引入導(dǎo)管,就可較精確控制發(fā)光試劑的流速,使試劑流動與電泳速度相匹配。(4)電泳過程中分離毛細(xì)管進(jìn)樣端比出ロ端高約10cm,可較有效防止發(fā)光試劑的電遷移。(5)廢液出口的設(shè)計(jì)使廢液能及時(shí)導(dǎo)出反應(yīng)毛細(xì)管,提高檢測準(zhǔn)確度。綜上所述,本發(fā)明設(shè)計(jì)了ー種新型的離柱同軸流型接口裝置,設(shè)計(jì)成本低、接ロ小巧,操作簡便,較好解決了由于CL試劑的引入而造成分離效率、靈敏度和穩(wěn)定性降低等問題,具有CE的高分離效率和CL檢測的高靈敏度,可望用于生物樣品、食品和環(huán)境樣品分析。
圖I是實(shí)施例中的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置結(jié)構(gòu)剖視圖。圖2是圖I的俯視結(jié)構(gòu)剖視圖。圖3是實(shí)施例中的枳實(shí)提取液和辛弗林標(biāo)準(zhǔn)品電泳圖。圖中1有機(jī)玻璃 2反應(yīng)毛細(xì)管 3分離毛細(xì)管 4橫向貫穿通道 5縱向發(fā)光檢測窗ロ 6定位墊圈 7橡皮塞 8發(fā)光試劑通道 9電極安裝通道 10注膠孔 11廢液排出導(dǎo)管。
具體實(shí)施例方式為讓本發(fā)明的上述特征和優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂,下文特舉實(shí)施例,并配合附圖,作詳細(xì)說明如下。參閱圖I和圖2,重點(diǎn)參閱圖1,本發(fā)明的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置,包括一有機(jī)玻璃I、反應(yīng)毛細(xì)管2和分離毛細(xì)管3,所述有機(jī)玻璃I中部設(shè)置有橫向貫穿通道 4和與橫向貫穿通道4垂直相交的縱向發(fā)光檢測窗ロ 5,所述反應(yīng)毛細(xì)管2設(shè)置在橫向貫穿通道4內(nèi),所述反應(yīng)毛細(xì)管2外壁與橫向貫穿通道4內(nèi)壁之間設(shè)置有至少兩個(gè)的定位墊圈6,所述分離毛細(xì)管3的一端部插入反應(yīng)毛細(xì)管2的進(jìn)料端,所述分離毛細(xì)管3的另一端部穿出安裝在橫向貫穿通道4相應(yīng)端口上的橡皮塞7,所述分離毛細(xì)管3的徑向兩旁側(cè)還設(shè)置有發(fā)光試劑通道8和電極安裝通道9。重點(diǎn)參閱圖2,在本實(shí)施例中,所述有機(jī)玻璃I上還開設(shè)有通向定位墊圈6的注膠孔10,所說注膠孔10用于注入膠水,以利固定定位墊圈6。在本實(shí)施例中,所述反應(yīng)毛細(xì)管2的廢液排出端連接有廢液排出導(dǎo)管11,所述廢液排出導(dǎo)管11的孔徑大于反應(yīng)毛細(xì)管2的孔徑,以利廢液的及時(shí)排出。在本實(shí)施例中,所述有機(jī)玻璃的表面平整,其長度為3. 5cm,寬度為2. 0cm,厚度為O. 8^1. 2cm ;所述橫向貫穿通道的孔徑為O. 2^0. 4cm ;所述縱向發(fā)光檢測窗ロ為直徑為
0.8^1. 2cm的圓形通孔,所述發(fā)光試劑通道和電極安裝通道的孔徑為O. 05、. 20 cm。上述毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置的制作方法,按以下步驟進(jìn)行
(1)有機(jī)玻璃的處理取一塊橫截面平整的長3.5cm,寬2. Ocm,厚約Icm的有機(jī)玻璃I ;從左側(cè)面沿水平方向往右鉆取橫向貫穿通道4,孔長3. 5cm,直徑約O. 3cm,作為接ロ設(shè)計(jì)的主通道;在有機(jī)玻璃I前后端面中間部位打通一個(gè)縱向直徑約Icm的圓孔,作為縱向發(fā)光檢測窗ロ 5,并在縱向發(fā)光檢測窗ロ 5的兩旁側(cè)鉆出用于向定位墊圈6注入膠水的注膠孔10 ;最后,在靠近有機(jī)玻璃I左側(cè)的上下兩表面各鉆ー個(gè)直徑約O. 15cm,深約O. 6cm的孔道,作為發(fā)光試劑通道8和電極安裝通道9 ;
(2)反應(yīng)毛細(xì)管的安裝采用內(nèi)徑約O.9mm,長2cm的點(diǎn)樣毛細(xì)管作為發(fā)光反應(yīng)池,在點(diǎn)樣毛細(xì)管上套入若干個(gè)定位墊圈6 (橡皮圈)后,將其插入橫向貫穿通道中。如圖I所示,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)所用的鉆孔器孔徑比反應(yīng)毛細(xì)管大,為了固定反應(yīng)毛細(xì)管,防止因抖動影響檢測效果,在定位墊圈6位置上注入膠水(AB膠),并在橫向貫穿通道的相應(yīng)端口上安裝橡皮塞7,起固定和密封的作用;
(3)分離毛細(xì)管的處理采用明火去除聚亞酰胺涂層,并用蘸有無水こ醇的棉花擦拭燒過的痕跡,作為檢測管段,將分離毛細(xì)管插3入反應(yīng)毛細(xì)管2中,調(diào)整分離毛細(xì)管插入的長度,并在橫向貫穿通道的相應(yīng)端口上安裝橡皮塞7,起固定和密封的作用。上述反應(yīng)毛細(xì)管2的廢液排出端連接有廢液排出導(dǎo)管11,所述廢液排出導(dǎo)管11的孔徑大于反應(yīng)毛細(xì)管的孔徑,以利廢液的及時(shí)排出。采用上述接口裝置的ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測儀器,包括毛細(xì)管電泳高壓電源(±30kV,0. 3mA)、雙道微量注射泵、超微弱發(fā)光分析儀、弾性石英毛細(xì)管(60cmX75Pm
1.d.)、點(diǎn)樣毛細(xì)管(約O. 9mm i. d.)、有機(jī)玻璃、上述的接口裝置與外部連接的導(dǎo)管若干、固定橡皮圈若干、橡皮塞兩個(gè)、AB膠、鉆孔設(shè)備、暗箱、色譜工作站、計(jì)算機(jī)。將分離毛細(xì)管插入反應(yīng)毛細(xì)管中,調(diào)整分離毛細(xì)管插入的長度,使檢測窗ロ恰好置于光電倍増管檢測中心位置。發(fā)光試劑是通過固定在微量注射泵上的IOmL注射器由外接的導(dǎo)管引入檢測系統(tǒng)中,發(fā)光反應(yīng)在分離毛細(xì)管檢測窗ロ出口處發(fā)生。分離和檢測都是在暗箱中進(jìn)行,防止噪音和外界光源的干擾。發(fā)光信號由超微弱發(fā)光分析儀檢測,并通過色譜工作站采集記錄。毛細(xì)管電泳高壓源提供高壓電泳驅(qū)動使毛細(xì)管中的樣品溶液運(yùn)行根據(jù)查閱的文獻(xiàn)可知,酸性高錳酸鉀是最常用的發(fā)光試劑之一,能跟許多生物堿發(fā)生快速的氧化還原反應(yīng),產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。同吋,甲醇能對高錳酸鉀的發(fā)光反應(yīng)起良好的增敏作用?;诖嗽?,我們設(shè)計(jì)了生物堿辛弗林-甲醇-酸性高錳酸鉀化學(xué)發(fā)光體系對檢測接ロ性能進(jìn)行檢驗(yàn)。在初步優(yōu)化分離條件和發(fā)光條件后,確定以60mM Na2B407-60mMNaH2P04緩沖液(pH=8. 30)含30%甲醇為運(yùn)行緩沖液,辛弗林在7分鐘內(nèi)出峰,理論塔板數(shù)為7282。遷移時(shí)間和峰高的日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為I. 5%和2. 2%,線性范圍為5. 00-30. OPg/mL,檢出限(S/N=3)為I. 16Pg/mL。該方法成功應(yīng)用于 中藥枳實(shí)和模擬尿樣中辛弗林的測定,測得中藥枳實(shí)中的辛弗林平均含量為O. 574mg/g,與藥典中的記錄一致。枳實(shí)提取液與辛弗林標(biāo)準(zhǔn)品的對照譜圖如圖3所示。檢測條件60mM Na2B407-60mMNaH2P04緩沖液(pH=8. 30)含30%甲醇,分離電壓18kV,進(jìn)樣條件18kVX8s,高錳酸鉀濃度2. 5X 10_4M,硫酸濃度4. 0M,泵速6mL/h。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例,凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾,皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
權(quán)利要求
1.ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置,包括一有機(jī)玻璃、反應(yīng)毛細(xì)管和分離毛細(xì)管,其特征在干所述有機(jī)玻璃中部設(shè)置有橫向貫穿通道和與橫向貫穿通道垂直相交的縱向發(fā)光檢測窗ロ,所述反應(yīng)毛細(xì)管設(shè)置在橫向貫穿通道內(nèi),所述反應(yīng)毛細(xì)管外壁與橫向貫穿通道內(nèi)壁之間設(shè)置有至少兩個(gè)的定位墊圈,所述分離毛細(xì)管的一端部插入反應(yīng)毛細(xì)管的進(jìn)料端,所述分離毛細(xì)管的另一端部穿出安裝在橫向貫穿通道相應(yīng)端口上的橡皮塞,所述分離毛細(xì)管的徑向兩旁側(cè)還設(shè)置有發(fā)光試劑通道和電極安裝通道。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置,其特征在于所述有機(jī)玻璃上還開設(shè)有通向定位墊圈的注膠孔,所述注膠孔用于注入膠水,以利固定定位墊圈。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置,其特征在于所述反應(yīng)毛細(xì)管的廢液排出端連接有廢液排出導(dǎo)管,所述廢液排出導(dǎo)管的孔徑大于反應(yīng)毛細(xì)管的孔徑,以利廢液的及時(shí)排出。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置,其特征在于所述有機(jī)玻璃的表面平整,其長度為3. 5cm,寬度為2. Ocm,厚度為O. 8^1. 2cm ;所述橫向貫穿通道的孔徑為O. 2^0. 4cm ;所述縱向發(fā)光檢測窗ロ為直徑為O. 8^1. 2cm的圓形通孔,所述發(fā)光試劑通道和電極安裝通道的孔徑為O. 05、. 20 cm。
5.ー種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置的制作方法,其特征在于,按以下步驟進(jìn)行 (1)有機(jī)玻璃的處理取一塊有機(jī)玻璃;從左側(cè)面沿水平方向往右鉆取橫向貫穿通道,作為接ロ設(shè)計(jì)的主通道;在有機(jī)玻璃前后端面中間部位打通ー個(gè)縱向圓孔,作為檢測窗,并在檢測窗的兩旁側(cè)鉆出用于向定位墊圈注入膠水的注膠孔;最后,在靠近有機(jī)玻璃左側(cè)的上下兩表面各鉆ー個(gè)孔道,作為發(fā)光試劑通道和電極安裝通道; (2)反應(yīng)毛細(xì)管的安裝采用點(diǎn)樣毛細(xì)管作為發(fā)光反應(yīng)池,在點(diǎn)樣毛細(xì)管上套入若干個(gè)定位墊圈,然后將其插入橫向貫穿通道中,再在定位墊圈位置上注入膠水,并在橫向貫穿通道的相應(yīng)端口上安裝橡皮塞,起固定和密封的作用; (3)分離毛細(xì)管的處理采用明火去除聚亞酰胺涂層,并用蘸有無水こ醇的棉花擦拭燒過的痕跡,作為檢測管段,將分離毛細(xì)管插入反應(yīng)毛細(xì)管中,調(diào)整分離毛細(xì)管插入的長度,并在橫向貫穿通道的相應(yīng)端口上安裝橡皮塞,起固定和密封的作用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置的制作方法,其特征在干所述反應(yīng)毛細(xì)管的廢液排出端連接有廢液排出導(dǎo)管,所述廢液排出導(dǎo)管的孔徑大于反應(yīng)毛細(xì)管的孔徑,以利廢液的及時(shí)排出。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置的制作方法,其特征在于所述有機(jī)玻璃的表面平整,其長度為3. 5cm,寬度為2. Ocm,厚度為O. 8^1. 2cm ;所述橫向貫穿通道的孔徑為O. 2^0. 4cm ;所述檢測窗為直徑為O. 8^1. 2cm的圓形通孔,所述發(fā)光試劑通道和電極安裝通道的孔徑為O. 05、. 20 cm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種毛細(xì)管電泳-化學(xué)發(fā)光檢測接口裝置及其制作方法,該接口裝置包括一有機(jī)玻璃、反應(yīng)毛細(xì)管和分離毛細(xì)管,該有機(jī)玻璃中部設(shè)置有橫向貫穿通道和縱向發(fā)光檢測窗口,該橫向貫穿通道內(nèi)設(shè)有反應(yīng)毛細(xì)管,該反應(yīng)毛細(xì)管外壁與橫向貫穿通道內(nèi)壁之間設(shè)置有至少兩個(gè)的定位墊圈,該分離毛細(xì)管的一端部插入反應(yīng)毛細(xì)管的進(jìn)料端,其另一端部穿出安裝在橫向貫穿通道相應(yīng)端口上的橡皮塞,該分離毛細(xì)管的徑向兩旁側(cè)還設(shè)置有發(fā)光試劑通道和電極安裝通道。本發(fā)明制作成本低、接口小巧,操作簡便,較好解決了由于CL試劑的引入而造成分離效率、靈敏度和穩(wěn)定性降低等問題,具有CE的高分離效率和CL檢測的高靈敏度,可用于生物樣品、食品和環(huán)境樣品分析。
文檔編號G01N21/76GK102661948SQ20121016851
公開日2012年9月12日 申請日期2012年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月28日
發(fā)明者施桂英, 殷迎春, 王敬鵬, 許雪琴 申請人:福州大學(xué)