專利名稱：一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，本系統(tǒng)可以自動(dòng)的完成黃曲霉毒素分析的樣品前處理以及分離分析。
背景技術(shù)：
黃曲霉毒素(Aflatoxins)是黃曲霉(Aspergillus Flavus)和寄生曲霉 (A. parasiticus)等的代謝產(chǎn)物,主要存在于霉變的花生、谷物、果仁和大米等食品中。1993 年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WTO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為天然存在的一類致癌物質(zhì)，是一種毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì)，對(duì)人體具有嚴(yán)重的威脅。黃曲霉毒素是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似、致毒基團(tuán)相同的化合物，目前已經(jīng)鑒定出I 8種，主要是黃曲霉毒素BI、B2、GU G2以及由BI、 B2在體內(nèi)經(jīng)過羥基化而衍生成的代謝產(chǎn)物Ml、M2。世界各國及地區(qū)都對(duì)黃曲霉毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)做出格的規(guī)定，且限量要求日益嚴(yán)格。目前檢測(cè)黃曲霉毒素的方法主要有薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)、酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫測(cè)定法、免疫親和層析柱-高效液相色譜法、免疫層析柱-熒光光度法等。薄層色譜法，耗時(shí)且需要大量接觸標(biāo)準(zhǔn)品，不利于操作者的健康以及環(huán)保、并且靈敏度較低。放射免疫測(cè)定法，存在放射線輻射和污染問題。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法重現(xiàn)性差、試劑壽命短。免疫親和層析凈化-高效液相色譜法，通過免疫親和凈化柱進(jìn)行凈化，采用高效液相色譜極性分離，在進(jìn)行柱后衍生后采用熒光檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，此方法分析時(shí)間短，靈敏度高，重現(xiàn)性好，已經(jīng)被GB/T18979-2003、GB/ T23212-2008采用。但是采用此方法進(jìn)行黃曲霉毒素分析的過程中，仍然需要進(jìn)行較為復(fù)雜的樣品前處理操作，仍然會(huì)接觸到標(biāo)準(zhǔn)品。雖然現(xiàn)在已經(jīng)有自動(dòng)的固相萃取設(shè)備可以自動(dòng)的對(duì)樣品進(jìn)行凈化，但凈化后仍然需要人工進(jìn)行定容以及后續(xù)分析儀器的進(jìn)樣工作。從而影響了整個(gè)分析過程的效率，并且增加了黃曲霉毒素對(duì)分析工作者危害的機(jī)會(huì)。最近也有報(bào)道采用在線免疫親和固相萃取-高效液相色譜聯(lián)機(jī)方法進(jìn)行黃曲霉毒素。但是使用的免疫親和固相萃取柱是特殊定制的，不能和現(xiàn)在廣泛使用的針筒式固相萃取柱方法進(jìn)行直接的方法嫁接；并且由于免疫親和固相萃取柱壽命有限，在反復(fù)使用后萃取效果會(huì)明顯下降， 影響分析。并且在進(jìn)行此類在線免疫親和固相萃取-高效液相色譜聯(lián)機(jī)分析時(shí)，還需要綜合考慮固相萃取部分流速與高效液相色譜的適應(yīng)性，從而使條件的選擇受到很大的限制。因此，如何將上述問題加以解決，而提供一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，即為本領(lǐng)域技術(shù)人員的研究方向所在。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的是提供一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其通過采用切換閥和捕集柱把一個(gè)全自動(dòng)固相萃取裝置和一個(gè)配備自動(dòng)柱后衍生裝置和熒光檢測(cè)器的高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行聯(lián)機(jī)，通過控制軟件實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的自動(dòng)化分析運(yùn)行，數(shù)據(jù)采集，數(shù)據(jù)處理等一系列的操作。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其包括
—全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)，其用于進(jìn)行固相萃取；—兩位六通閥，其內(nèi)設(shè)有一捕集柱，所述的兩位六通閥具有六個(gè)口，所述的捕集柱連接在第三口及第六口之間，第四口連接一廢液瓶，第五口連接所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)的輸出；以及一高效液相色譜系統(tǒng)，其包括一液相色譜柱、一柱后衍生裝置、一第一輸液泵及一熒光檢測(cè)器，所述的液相色譜柱與所述的兩位六通閥的第一口相連，所述的第一輸液泵與所述的兩位六通閥的第二口相連，所述的柱后衍生裝置與所述的液相色譜柱相連，用于對(duì)色譜流出物進(jìn)行柱后衍生，所述的熒光檢測(cè)器與所述的柱后衍生裝置相連，用于進(jìn)行熒光檢測(cè)。較佳的實(shí)施方式中，所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)包括一注射泵、一多位選擇閥、一萃取裝置，所述的注射泵與所述的多位選擇閥相連，用于控制流速及進(jìn)行正壓的固相萃取， 所述萃取裝置與所述的多位選擇閥相連，用于實(shí)現(xiàn)多個(gè)固相萃取柱的自動(dòng)切換。較佳的實(shí)施方式中，所述的萃取裝置使用針筒式固相萃取柱。較佳的實(shí)施方式中，所述的萃取裝置使用在線式免疫親和固相萃取柱。較佳的實(shí)施方式中，所述的捕集柱為一色譜柱。較佳的實(shí)施方式中，所述的捕集柱為一個(gè)4. 6mmX 10mm,內(nèi)裝10微米粒徑C18填料的色譜柱。較佳的實(shí)施方式中，所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)還包括一第二輸液泵，其與所述的柱后衍生裝置相連，用于輸送衍生液。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于實(shí)現(xiàn)了系統(tǒng)的自動(dòng)化分析運(yùn)行，數(shù)據(jù)采集，數(shù)據(jù)處理等一些列的操作，可以完全在無人值守的條件下完成批量黃曲霉毒素的自動(dòng)化分析。


為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。圖I為本發(fā)明一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)組成示意圖。附圖標(biāo)記說明11_全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)；111-注射泵；112-多位選擇閥；113_萃取裝置；12_兩位六通閥；121_捕集柱；13_高效液相色譜系統(tǒng)；131-液相色譜柱；132_柱后衍生裝置；133_熒光檢測(cè)器；134-第一輸出泵；135-第二輸出泵。
具體實(shí)施例方式下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有付出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。如圖I所示，為本發(fā)明的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)組成示意圖，本發(fā)明的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，包括一全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)11、一兩位六通閥12,及一高效液相色譜系統(tǒng)13，其中，所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)11主要包括一注射泵111、一多位選擇閥112及一萃取裝置113，固相萃取采用正壓操作，通過所述注射泵111進(jìn)行精確的樣品及各種溶劑和氣體的計(jì)量和輸送等操作，所述的的注射泵111連接多位選擇閥112，多位選擇閥112用于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)溶劑選擇以及樣品加載。萃取裝置113部分可以使用常規(guī)lml、3ml以及6ml等針筒式或者在線式免疫親和固相萃取柱，并且此部分可以自動(dòng)的實(shí)現(xiàn)多個(gè)固相萃取柱的自動(dòng)切換。 所述的兩位六通閥12，其內(nèi)設(shè)有一捕集柱121，所述的兩位六通閥12具有六個(gè)口， 所述的捕集柱121連接在第三口及第六口之間，第五口與所述的萃取裝置113部分的輸出口相連，第四口連接一廢液瓶，第一口及第二口均與所述的高效液相色譜系統(tǒng)13相連；所述的高效液相色譜系統(tǒng)13包括一液相色譜柱131、一柱后衍生裝置132、熒光檢測(cè)器133、一第一輸出泵134及一第二輸出泵135，所述的液相色譜柱131與所述的兩位六通閥12的第一口相連，所述的第一輸液泵134與所述的兩位六通閥的第二口相連，所述的柱后衍生裝置132與所述的液相色譜柱131及所述的第二輸液瓶135相連，用于對(duì)色譜流出物進(jìn)行柱后衍生，并將衍生液通過所述第二輸液瓶135排出，所述的熒光檢測(cè)器133與所述的柱后衍生裝置132相連，用于進(jìn)行熒光檢測(cè)。本發(fā)明的高效液相色譜系統(tǒng)是采用一套常規(guī)的具有柱后衍生系統(tǒng)和熒光檢測(cè)器的系統(tǒng)，最高耐壓、流量精度、色譜柱、柱后衍生裝置控制精度，熒光檢測(cè)器精度等能滿足黃曲霉毒素的分析要求即可。柱后衍生裝置132采用過溴化鈉為衍生試劑，在一定流速和溫度下對(duì)色譜流出物進(jìn)行柱后衍生。上述的捕集柱可采用一個(gè)4. 6mmX 10mm,內(nèi)裝10微米粒徑C18填料的色譜柱,也可以采用其它尺寸或者填料，只要能保證能在一定條件下能將固相萃取洗脫液從免疫親和柱上洗脫下來的黃曲霉毒素捕集??；并且還能保證黃曲霉毒素被色譜流動(dòng)相洗脫下來并且不影響色譜分離效果，亦或可以被另外一種溶劑洗脫下來并富集在液相色譜分離柱的柱頭， 并能進(jìn)行有效的色譜分離。本發(fā)明的全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)的詳細(xì)工作過程如下I、通過全自動(dòng)固相萃取裝置11的自動(dòng)固相萃取柱切換裝置將固相萃取柱切入全自動(dòng)固相萃取的流路系統(tǒng)，同時(shí)高效液相色譜系統(tǒng)開始對(duì)分離柱進(jìn)行平衡；2、全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)11的注射泵111吸取一定量的活化液并按照一定流速對(duì)免疫親和固相萃取柱進(jìn)行活化；3、全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)11的注射泵111吸取一定量的提取好的黃曲霉毒素待分析樣品，按照一定流速加載到免疫親和固相萃取柱上。4、全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)11的注射泵111吸取一定量的淋洗液，并按照一定的速度將雜質(zhì)洗去。5、全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)11的注射泵111吸取一定量的洗脫液，并按照一定的流速將黃曲霉毒素洗脫到捕集柱131上，捕集柱131同時(shí)將黃曲霉毒素捕集住。6、兩位六通閥12切換，將捕集柱131切入高效液相色譜分離流路，對(duì)黃曲霉毒素進(jìn)行分離。7、經(jīng)分離的黃曲霉毒素在柱后衍生裝置132中與衍生液進(jìn)行反應(yīng),并進(jìn)入熒光檢測(cè)器133進(jìn)行檢測(cè)。8、計(jì)算機(jī)記錄數(shù)據(jù)，并進(jìn)行計(jì)算。9、全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)1 1將下一免疫親和固相萃取柱切入全自動(dòng)固相萃取的流路系統(tǒng)，進(jìn)行下一個(gè)樣品的自動(dòng)分析。綜上所述，本發(fā)明采用切換閥和捕集柱把一個(gè)全自動(dòng)固相萃取裝置和一個(gè)配備自動(dòng)柱后衍生裝置和熒光檢測(cè)器的高效液相色譜系統(tǒng)進(jìn)行聯(lián)機(jī)，實(shí)現(xiàn)了系統(tǒng)的自動(dòng)化分析運(yùn)行，數(shù)據(jù)采集，數(shù)據(jù)處理等一些列的操作，可以完全在無人值守的條件下完成批量黃曲霉毒素的自動(dòng)化分析。最后應(yīng)說明的是以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制；盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解其依然可以對(duì)前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換； 而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實(shí)施例技術(shù)方案的精神和范圍。
權(quán)利要求
1.一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，其包括一全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)，其用于進(jìn)行固相萃??；一兩位六通閥，其內(nèi)設(shè)有一捕集柱，所述的兩位六通閥具有六個(gè)口，所述的捕集柱連接在第三口及第六口之間，第四口連接一廢液瓶，第五口連接所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)的輸出；以及一高效液相色譜系統(tǒng)，其包括一液相色譜柱、一柱后衍生裝置、一第一輸液泵及一熒光檢測(cè)器，所述的液相色譜柱與所述的兩位六通閥的第一口相連，所述的第一輸液泵與所述的兩位六通閥的第二口相連，所述的柱后衍生裝置與所述的液相色譜柱相連，用于對(duì)色譜柱流出物進(jìn)行柱后衍生，所述的熒光檢測(cè)器與所述的柱后衍生裝置相連，用于進(jìn)行熒光檢測(cè)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)包括一注射泵、一多位選擇閥、一萃取裝置，所述的注射泵與所述的多位選擇閥相連，用于控制流速及進(jìn)行正壓的固相萃取，所述萃取裝置與所述的多位選擇閥相連， 用于實(shí)現(xiàn)多個(gè)固相萃取柱的自動(dòng)切換。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，所述的萃取裝置使用針筒式固相萃取柱。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，所述的萃取裝置使用在線式免疫親和固相萃取柱。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至4任一項(xiàng)所述的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，所述的捕集柱為一色譜柱。
6.根據(jù)權(quán)利要求I至4任一項(xiàng)所述的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，所述的捕集柱為一個(gè)4. 6mmX IOmm,內(nèi)裝10微米粒徑C18填料的色譜柱。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其特征在于，所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)還包括一第二輸液泵，其與所述的柱后衍生裝置相連，用于輸送衍生液。
全文摘要
本發(fā)明提供一種全自動(dòng)黃曲霉毒素分析系統(tǒng)，其包括一全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)，其用于進(jìn)行固相萃?。灰粌晌涣ㄩy，其內(nèi)設(shè)有一捕集柱，兩位六通閥具有六個(gè)口，捕集柱連接在第三口及第六口之間，第五口連接所述的全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)的輸出，第四口連接一廢液瓶；一高效液相色譜系統(tǒng)，其包括一液相色譜柱、一柱后衍生裝置、一第一輸液泵及一熒光檢測(cè)器，液相色譜柱與兩位六通閥的第一口相連，第一輸液泵與所述的兩位六通閥的第二口相連，所述的柱后衍生裝置與所述的液相色譜柱相連，用于對(duì)色譜柱流出物進(jìn)行柱后衍生，所述的熒光檢測(cè)器與所述的柱后衍生裝置相連，用于進(jìn)行熒光檢測(cè)。本發(fā)明可以完全在無人值守的條件下完成批量黃曲霉毒素的自動(dòng)化分析。
文檔編號(hào)G01N35/00GK102621340SQ201210112420
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月16日
發(fā)明者張曉輝, 田春明, 胡克, 鄧宛梅, 馬忠強(qiáng) 申請(qǐng)人:北京萊伯泰科儀器有限公司