專利名稱：用于妊娠的高血壓疾病的生物標志物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物標志物(生物標志)，特別是基于蛋白和/或肽的生物標志物，其可 用于受試者(主體，對象)的疾病和病癥的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測，尤其是妊娠的高血壓 疾病(高血壓性障礙)，更特別是先兆子癇；以及涉及相關(guān)的方法、用途、試劑盒和裝置。
背景技術(shù)：
在許多疾病和病癥中，預(yù)防性和/或治療性治療的有利的結(jié)果強烈地與疾病或病 癥的早期和/或準確預(yù)測、診斷、預(yù)后和/或監(jiān)測相關(guān)。因此，持續(xù)需要用于疾病和病癥的 早期和/或準確預(yù)測、診斷、預(yù)后和/或監(jiān)測的另外的和優(yōu)選改善的方式來指導(dǎo)治療方法的 選擇。
在妊娠期間發(fā)生的高血壓疾病是全世界產(chǎn)婦的發(fā)病率和死亡率的主要原因，并且 還伴隨增加的圍產(chǎn)期死亡率。
在妊娠的高血壓疾病中的顯著位置屬于先兆子癇(PE)，其在約5%至10%的 懷孕女性中會發(fā)生(Solomon & Seely 2006, Endocrinol Metab Clin North Am 35 (I) :157-71, vii)。
PE可以被描述為在以前血壓正常懷孕女性中在20周妊娠以后的新發(fā)作高血壓和 蛋白尿，其可以是輕度或嚴重的?；加休p度疾病的患者顯示>140/90的血壓和具有>300mg 蛋白的蛋白尿(在20周妊娠以后的24小時尿中注意到)，并且通常近期助產(chǎn)而沒有顯著的 復(fù)合病變。然而，約25%的PE傾向于是嚴重的，涉及中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙的癥狀和體征、 肝細胞損傷、減少的尿輸出和顯著升高的血壓(收縮壓>160mmHg或舒張壓>110mmHg)。嚴重 的PE通常發(fā)生在最后第二個和早期第三個三個月并且伴隨增加的產(chǎn)婦和圍產(chǎn)期發(fā)病率和 死亡率。
PE的嚴重并發(fā)癥包括DHELLP綜合征，其特征在于溶血、升高的肝酶和低血小板， 和2)子癇，其特征在于癲癇發(fā)作的發(fā)展。鑒于上述兩種病癥均是罕見的，它們與較差的預(yù) 后相關(guān)(Solomon & Seely 2006,在上文中)。
先兆子癇還與胎兒并發(fā)癥如宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR)和小孕齡(SGA)相關(guān)。
用于PE的僅有的療法是嬰兒和胎盤的分娩。超過37周的妊娠，可以保證分娩。在 小于34周的孕齡，高血壓的治療和嚴密的胎兒監(jiān)視可以防止腦血管意外和延長妊娠，而沒 有治愈潛在的疾病過程。還保證分娩，以發(fā)展嚴重的PE或子癇(Sibai & Barton 2007, Am J Obstet Gynecol 196 (6) :514. el_9)。
PE的病因?qū)W和病理生理學(xué)仍然很大程度上未解決并且它的診斷目前完全是基于 在疾病展開以后的臨床標準(Roberts et al. 2003, Hypertension41 (3):37_45)。然而， 最近的數(shù)據(jù)表明，導(dǎo)致PE的事件可以早在第一三個月就潛在地開始和進展。
因而，對于妊娠的高血壓疾病(尤其包括PE)的成功的治療干預(yù)，可靠和早期預(yù)測 和/或診斷是關(guān)鍵的。因此，仍然是最重要的是，提供用于妊娠的高血壓疾病的診斷、預(yù)測、 預(yù)后和/或監(jiān)測的另外的、可替換的和優(yōu)選改善的標記和工具。
用來預(yù)測PE的發(fā)展的臨床上有用的篩選試驗是稀少的(Conde-Agudelo et al. 2004, Obstet Gynecol 104:1367-91)。依賴于危險因子也是不夠標準的，因為(雖然已 確定了 PE的許多危險因子)50%以上的病例以其他方式發(fā)生于年輕的、低風(fēng)險的、未經(jīng)產(chǎn)女 性。因此，妊娠的高血壓疾病并且尤其是PE在它們的發(fā)作和疾病進展方面很大程度上仍是 不可預(yù)測的。
最近的報告表明，血管活性胎盤肽的不平衡，更具體地說可溶性fms樣酪氨酸激 酶-1 (sFlt-l,sVEGFR-l) (Maynard et al. 2003, J Clin Invest 111 (5):649_58)、內(nèi)皮 糖蛋白(Levine et al. 2006, N Engl J Med 355:992-1005)、胎盤生長因子(PIGF)和血管 內(nèi)皮生長因子(VEGF) (Polliotti et al. 2003;Obstet Gynecol 101:1266-74)，可以用于 先兆子癇的早期預(yù)測。尤其是，sFlt-1和內(nèi)皮糖蛋白是在發(fā)展PE以前約2-3個月過量產(chǎn) 生的抗血管生成肽。PIGF和VEGF是促血管生成肽，其顯示在隨后發(fā)展嚴重PE的女性的第 二三個月產(chǎn)婦血清中被減少。
授權(quán)給Proteogenix Inc.的 W02009/097584A1 和授權(quán)給 Auckland Uniservices Ltd的W02009/108073A1還披露了 PE生物標志物。
通過確定用于妊娠的高血壓疾病(尤其用于先兆子癇)的生物標志物,本發(fā)明解決 了本領(lǐng)域中的上述需要，并提供了其應(yīng)用。發(fā)明內(nèi)容
通過進行大量的實驗和測試，本發(fā)明的發(fā)明人確定了 33種生物標志物，其水平可 以密切預(yù)測和/或指示妊娠的高血壓疾病，更具體地說，先兆子癇。為了簡明起見，在整個 本說明書中，妊娠的一種或多種高血壓疾病和先兆子癇此后分別縮寫為HDP和PE。
尤其是，利用I)在妊娠的22周和26周獲自10位孕婦(病例)(其將發(fā)展臨床上 明顯的PE，如自妊娠的28周或以后)的樣品，和2)在妊娠的22周和26周獲自孕婦(對 照)(其將在她們的妊娠期間不會發(fā)展PE)的樣品，本發(fā)明的發(fā)明人認識到，在所述樣品中 以下基于蛋白和/或肽的標記(標志物，標志)的量顯示PE的行為預(yù)測和/或指示胰島 素樣生長因子-結(jié)合蛋白復(fù)合物酸不穩(wěn)定鏈(ALS)、包含分解素和金屬蛋白酶域的蛋白12 (ADA12)、血管生成素(ANG1)、鈣蛋白酶-1催化亞單位(CAN1)、巨噬細胞集落刺激因子I受 體(CSF1R)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、絨毛膜生長催乳激素(CSH)、營養(yǎng)不良蛋白聚糖(DAG1)、二 肽酶2 (DPEP2)、橋粒芯蛋白-2 (DSG2)、細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)I (ECM1)、內(nèi)皮糖蛋白(EGLN)、 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員2 (ENPP2)、扣針蛋白-1 (FBLN1)、原纖蛋白-2 (FBN2)、疑似G蛋白偶聯(lián)受體126 (GP126)、肝細胞生長因子樣蛋白(HGFL)、細胞間粘附分 子3 (ICAM3)、轉(zhuǎn)移抑制基因KiSS-1 (KISS1 )、亮氨酰-胱氨酰氨基肽酶(亮氨酰-半胱氨 酰氨基肽酶)(LCAP)、磷脂酰膽堿-留醇酰基轉(zhuǎn)移酶(LCAT)、基底膜-特異性硫酸乙酰肝素 蛋白聚糖核心蛋白(基底膜-特異性硫酸類肝素蛋白多糖核心蛋白)(PGBM)、N-乙酰胞壁 酰-L-丙氨酸酰胺酶(PGRP2)、磷脂酰肌醇-聚糖-特異性磷脂酶D (PHLD)、過氧化物還原 酶(過氧化物酶，過氧化還原酶)I (PRDXl )、過氧化物還原酶2 (PRDX2)、受體型酪氨酸蛋白 磷酸酶S (PTPRS)、回旋同系物(環(huán)形交叉同系物)4 (R0B04)、蛋白S100-A9 (S10A9)、血清 淀粉樣A-4蛋白(SAA4)、腱生蛋白-X (TENX)、三葉因子3 (TFF3)、血管內(nèi)皮生長因子受體3 (VGFR3)。這些蛋白可以分別由 IGFALS、ADAMl2、ANG、CAPNl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENG、ENPP2、FBLNl、FBN2、GPR126、MSTl、ICAM3、KISSl、LNPEP, LCAT, HSPG2、 PGLYRP2、GPLDl、PRDXI/2、PTPRS, R0B04、S100A9、SAA4、TNXB, TFF3 和 FLT4 基因來編碼。
因此，提供了ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3的任何一種或多種作為生物標志物的 用途，更特別地作為用于HDP的生物標志物，甚至更特別地作為用于所述HDP的診斷、預(yù)測、 預(yù)后和/或監(jiān)測的生物標志物。優(yōu)選地，所述HDP疾病(障礙)是PE。
還提供了ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、 FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、PRDX2、 PTPRS、R0B04、S 10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3中的任何一種或多種用于HDP的診斷、預(yù)測、 預(yù)后和/或監(jiān)測的用途。優(yōu)選地，所述HDP障礙是PE。
另外提供了用于在受試者中診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測HDP的方法，該方法包括 在來自所述受試者的樣品中測量 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、 DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、 PRDXl、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 的任何一種或多種的水平。優(yōu) 選地，所述HDP疾病(障礙)是PE。
如在整個本說明書中所使用的，在來自受試者的樣品中測量任何一種或多種生物 標志物的水平尤其可以表示，方法的檢查階段包括在來自受試者的樣品中測量所述一種或 多種生物標志物的量。應(yīng)當理解，用于診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測疾病和病癥的方法通常 包括檢查階段，其中數(shù)據(jù)收集自和/或關(guān)于受試者。
在一種實施方式中，用于在受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后HDP如優(yōu)選PE的方法 包括以下步驟(i )在來自受試者的樣品中測量任何一種或多種標記(標志物)的量，上述標 記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、 FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組；(ii)比較在(i)中測得的一種或多種標 記的量與所述一種或多種標記的量的參比值(參考值)，所述參比值表示HDP的已知的診斷、 預(yù)測和/或預(yù)后；(iii)發(fā)現(xiàn)在(i)中測得的一種或多種標記的量與參比值的偏差或沒有 偏差；以及(iv)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在受試者中HDP的特定的診斷、預(yù)測 和/或預(yù)后。
用于診斷、預(yù)測和/或預(yù)后HDP如優(yōu)選PE的方法，以及尤其是在前面段落中闡述 的包括步驟(i)至(iv)的方法，可以在兩個或更多連續(xù)時間點用于受試者并可以比較在所 述連續(xù)時間點的各自的結(jié)果，借此可以確定在所述連續(xù)時間點處在HDP的診斷、預(yù)測和/或 預(yù)后之間是否發(fā)生變化。因而該方法便于隨著時間的推移在受試者中監(jiān)測HDP的診斷、預(yù) 測和/或預(yù)后的變化。
在妊娠和/或產(chǎn)后期間，如本文教導(dǎo)的生物標志物的量可以變化。因此，為了改 善本文教導(dǎo)的應(yīng)用和方法的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的可靠性，使在檢查的受試者中在妊娠 或產(chǎn)后的給定年齡測得的給定標記的量優(yōu)選與在妊娠或產(chǎn)后的基本上相同的年齡下建立 的所述標記的量的參比值進行比較(例如，在+/_約3周內(nèi)，優(yōu)選在+/_約2周內(nèi)，更優(yōu)選在 +/_約I周內(nèi)，還更優(yōu)選在+/_約O. 5周內(nèi)。)
也應(yīng)理解，當在妊娠或產(chǎn)后期間在一個或多于一個時間點加以評估時，給定標記可以顯示其診斷、預(yù)測和/或預(yù)后值。例如，當基本上遍及妊娠和/或產(chǎn)后加以評估時，或僅當在部分妊娠期內(nèi)(例如，在第一、第二和/或第三三個月內(nèi))或產(chǎn)后加以評估時，或僅當在妊娠的一個或多個可比短時間內(nèi)或產(chǎn)后(例如，在約10、8、6、4或2周內(nèi))加以評估時，標記可以是有用的信息。在本文中，所有這樣的標記是有用的和合適的。
因而，與參比值(其表示沒有HDP如優(yōu)選沒有PE (即，健康狀態(tài))的預(yù)測或診斷或表示HDP如優(yōu)選PE的良好預(yù)后)相比，在來自受試者的樣品中，選自由ALS、ADA12、ANG1、 CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、 KISSULCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、 VGFR3組成的組中的任何一種或多種標記的提高量或減少量(即,偏差)可以分別表示,受試者具有或可能有具有HDP的危險或表示在受試者中HDP的較差預(yù)后(如,例如,PE將惡化或進展到HELLP綜合征或子癇的預(yù)后)。
通過僅實例而非限制性的方式，與參比值(其表示沒有HDP如優(yōu)選沒有PE (B卩，健康狀態(tài))的預(yù)測或診斷或表示HDP如優(yōu)選PE的良好預(yù)后)相比，在來自受試者的樣品中，(a) 選自由 ALS、ADA12、CRP、CSH、DAGl、ENPP2、GP126、ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PHLD, PRDXl 和/或PRDX2、S10A9、SAA4和TFF3組成的組中的任何一種或多種標記的提高量(即，偏差) 和 / 或(b)選自由 ADA12、ANG1`、CANl、CSF1R、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、FBLNl、FBN2、 HGFL, ICAM3、LCAP, PGBM、PGRP2、PTPRS, R0B04、TENX 和 VGFR3 組成的組中的任何一種或多種標記的減少量(即，偏差)可以分別表示受試者具有或可能有具有HDP的危險或表示在受試者中HDP的較差預(yù)后(如，例如，PE將惡化或進展到HELLP綜合征或子癇的預(yù)后)。
如實驗所表示的，和在以下實施方式中反映的，通過僅實例而非限制性的方式，優(yōu)選地在懷孕人類女性中
-相對于參比值，選自由ALS、CRP、ENPP2、GP126、KISS1、LCAT、PHLD、PRDXl 和 / 或 PRDX2、S10A9、SAA4和TFF3組成的組中的標記的量的提高可以在妊娠的約15到約23或24 周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠的約18到約23或24周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約20到約23或24周之間，以及最優(yōu)選在妊娠的約22周；和/或
-相對于參比值，選自由ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、 FBLNl、FBN2、HGFL、ICAM3、LCAP、PGBM、PGRP2、PTPRS、R0B04、TENX 和 VGFR3 組成的組中的標記的量的減少可以在妊娠的約15到約23或24周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠的約18到約23或24周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約20到約23或24周之間，以及最優(yōu)選在妊娠的約22周；和/或
-相對于參比值，選自由ALS、ADA12、CRP、CSH、DAG1、ENPP2、GP126、ICAM3、KISS1、 LCAP、LCAT、PHLD、PRDXUP /或PRDX2、S10A9、SAA4和TFF3組成的組中的標記的量的提高可以在妊娠的約24或25到約37周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約34周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約30周之間，還更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約 28周之間，以及最優(yōu)選在妊娠的約26周；和/或
-相對于參比值，選自由 ANG1、CANl、CSF1R、DPEP2、DSG2、ECMl、FBLNl、FBN2、HGFL, PGBM、PGRP2、PTPRS, R0B04、TENX和VGFR3組成的組中的標記的量的減少可以在妊娠的約 24或25到約37周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約34周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約30周之間，還更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約28周之間，以及最 優(yōu)選在妊娠的約26周。
本發(fā)明的用于HDP和優(yōu)選PE的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測的方法還可以評估在 受試者中的如本文教導(dǎo)的兩種或更多種生物標志物?？梢苑珠_和獨立地評估每種如此測量 的生物標志物，或可以按照所述兩種或更多種生物標志物的量來產(chǎn)生生物標志物分布。
因此，還披露了用于在受試者中HDP如優(yōu)選PE的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的方法，該 方法包括以下步驟(i)在來自受試者的樣品中，測量任何兩種或更多種標記的量，上述標 記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、 FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組；(ii)利用(i)的測量結(jié)果來建立兩種或更 多種標記的量的受試者分布；(iii)比較(ii)的所述受試者分布與所述兩種或更多種標記 的量的參比分布(參考分布)，所述參比分布表示HDP的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(iv) 發(fā)現(xiàn)(ii)的受試者分布與參比分布的偏差或沒有偏差；(V)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn) 歸因于HDP的特定的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
在兩個或更多連續(xù)時間點應(yīng)用上述方法可以便于監(jiān)測HDP。
在妊娠和/或產(chǎn)后期間，如本文教導(dǎo)的生物標志物的量可以變化。因而，為了改善 本文教導(dǎo)的應(yīng)用和方法的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的可靠性，在檢查的受試者中，將在妊娠或 產(chǎn)后的給定年齡建立的兩種或更多種標記的量的受試者分布優(yōu)選與在妊娠或產(chǎn)后的基本 上相同的年齡建立的所述兩種或更多種標記的量的參比分布進行比較(例如，在+/_約3周 內(nèi)，優(yōu)選在+/_約2周內(nèi)，更優(yōu)選在+/_約I周內(nèi)，還更優(yōu)選在+/_約O. 5周內(nèi))。
也應(yīng)理解，當在妊娠或產(chǎn)后期間在一個或多于一個時間點加以評估時，給定標記 分布可以顯示它的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后價值。例如，當基本上遍及妊娠和/或產(chǎn)后加以評 估時，或僅當在部分妊娠期內(nèi)(例如，在第一、第二和/或第三三個月內(nèi))或產(chǎn)后加以評估時， 或僅當在妊娠的一個或多個可比短時間內(nèi)或產(chǎn)后(例如，在約IO、8、6、4或2周內(nèi))加以評估 時，標記分布可以是有用的信息。在本文中，所有這樣的標記分布和構(gòu)成標記是有用的和合 適的。
因此，相比于參比分布，其表示沒有HDP如優(yōu)選沒有PE (即，健康狀態(tài))的預(yù)測或 診斷或表示HDP如優(yōu)選PE的良好預(yù)后，利用在來自受試者的樣品中如本文教導(dǎo)的兩種或 更多種標記的測量的量建立的并且包括任何一種或多種標記(其選自由ALS、ADA12、ANGI, CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、 KISSULCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、 VGFR3組成的組)的提高量或減少量(即，偏差)的生物標志物分布可以分別表示受試者具有 或可能有具有HDP的危險或表示在受試者中HDP的較差預(yù)后(如,例如,PE將惡化或進展到 HELLP綜合征或子癇的預(yù)后)。
通過僅實例而非限制性的方式，相比于參比分布，其表示沒有HDP如優(yōu)選沒有PE (即，健康狀態(tài))的預(yù)測或診斷或表示HDP如優(yōu)選PE的良好預(yù)后，利用在來自受試者的樣品 中如本文教導(dǎo)的兩種或更多種標記的測量量建立的并且包括(a)任何一種或多種標記(其 選自由 ALS、ADA12、CRP、CSH、DAG1、ENPP2、GP126、ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PHLD, PRDXl 和/或PRDX2、S10A9、SAA4和組成的組)的提高量(即，偏差)和/或(b)任何一種或多種標記(其選自由 ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、FBLNl、FBN2、HGFL, ICAM3、LCAP, PGBM、PGRP2、PTPRS, R0B04、TENX 和 VGFR3 組成的組)的減少量(即，偏差)的 生物標志物分布可以分別表示受試者具有或可能有具有HDP的危險或表示在受試者中HDP 的較差預(yù)后(如，例如，PE將惡化或進展到HELLP綜合征或子癇的預(yù)后)。
如實驗所表示的、以及在以下實施方式中反映的，通過僅實例而非限制性的方式， 優(yōu)選地在懷孕人類女性中
-相對于參比分布，包括選自由ALS、CRP、ENPP2、GP126、KISS1、LCAT、PHLD, PRDXl 和/或PRDX2、S10A9、SAA4和TFF3組成的組中的標記的量的提高的生物標志物分布可以在 妊娠的約15到約23或24周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠的約18到約23或24周之間，甚 至更優(yōu)選在妊娠的約20到約23或24周之間，以及最優(yōu)選在妊娠的約22周；和/或
-相對于參比分布，包括選自由ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、FBLNl、FBN2、HGFL、ICAM3、LCAP、PGBM、PGRP2、PTPRS、R0B04、TENX 和 VGFR3 組成的組 中的標記的量的減少的生物標志物分布可以在妊娠的約15到約23或24周之間加以評估， 更優(yōu)選在妊娠的約18到約23或24周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約20到約23或24周之 間，以及最優(yōu)選在妊娠的約22周；和/或
-相對于參比分布，包括選自由ALS、ADA12、CRP、CSH、DAG1、ENPP2、GP126、ICAM3、 KISS1、LCAP、LCAT、PHLD、PRDX1、和 / 或 PRDX2、S10A9、SAA4 和 TFF3 組成的組中的標記的量 的提高的生物標志物分布可以在妊娠的約24或25到約37周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠 的約24或25到約34周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約30周之間，還更優(yōu)選在 妊娠的約24或25到約28周之間，以及最優(yōu)選在妊娠的約26周；和/或
-相對于參比分布，包括選自由ANGI, CANU CSF1R、DPEP2、DSG2、ECMU FBLNU FBN2、HGFL, PGBM、PGRP2、PTPRS, R0B04、TENX和VGFR3組成的組中的標記的量的減少的生 物標志物分布可以在妊娠的約24或25到約37周之間加以評估，更優(yōu)選在妊娠的約24或 25到約34周之間，甚至更優(yōu)選在妊娠的約24或25到約30周之間，還更優(yōu)選在妊娠的約 24或25到約28周之間，以及最優(yōu)選在妊娠的約26周。
在一種實施方式中，用于監(jiān)測HDP如優(yōu)選PE(或用于監(jiān)測發(fā)展HDP如優(yōu)選PE的可 能性)的方法包括以下步驟(i)在來自受試者的樣品中從兩個或更多連續(xù)時間點測量任 何一種或多種標記的量，上述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、 DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、 PHLD, PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3 組成的組；(ii)在如在(i)中測量的樣品之間比較一種或多種標記的量；(iii)在如在(ii)中比較的樣品之間發(fā) 現(xiàn)(確定)一種或多種標記的量的偏差或沒有偏差；以及(iv)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn) 歸因于在受試者中在兩個或更多連續(xù)時間點之間HDP的變化(或歸因于發(fā)展HDP的可能性 的變化)。因而上述方法便于在受試者中隨著時間的推移監(jiān)測HDP或發(fā)展HDP的風(fēng)險。
在另一種實施方式中，用于監(jiān)測HDP如優(yōu)選PE (或用于監(jiān)測發(fā)展HDP如優(yōu)選PE 的可能性)的方法包括以下步驟(i)在來自受試者的樣品中從兩個或更多連續(xù)時間點測 量任何兩種或更多種標記的量，上述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、 DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、 PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(ii)利用(i)的測量結(jié)果來建立在兩個或更多連續(xù)時間點處兩種或更多種標記的量的受試者分 布；(iii)比較如在(ii)中建立的受試者分布；(iv)發(fā)現(xiàn)在如在(iii)中比較的受試者分 布之間的偏差或沒有偏差；以及(V)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在受試者中在兩 個或更多連續(xù)時間點之間HDP的變化(或歸因于發(fā)展HDP的可能性的變化)。因此上述方法 便于在受試者中隨著時間的推移監(jiān)測HDP或發(fā)展HDP的風(fēng)險。
非限制性地，這樣的連續(xù)時間點可以相隔約2周以上，優(yōu)選相隔約4周以上，例如， 相隔約6或8周，或還優(yōu)選相隔約10周以上，例如，相隔約12周或15周。
在整個本披露內(nèi)容中，用于監(jiān)測如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的方法特別可 以便于預(yù)測疾病或病癥的發(fā)生，或監(jiān)測疾病或病癥的進展、加重、緩解或復(fù)發(fā)、或?qū)χ委熁?對其它外部或內(nèi)部因素、情況或應(yīng)激物的反應(yīng)等。有利地，如本文教導(dǎo)的監(jiān)測方法可以應(yīng)用 于受試者的醫(yī)療過程，優(yōu)選旨在減輕如此監(jiān)測的疾病或病癥的醫(yī)療。例如，在患者是否可以 出院、需要治療的變化或需要進一步住院治療的決策中，可以包括這樣的監(jiān)測。如本文中使 用的，提及疾病或病癥的監(jiān)測還特別包括受試者發(fā)展疾病或病癥的可能性、風(fēng)險或機會的 監(jiān)測，即，隨著時間的推移監(jiān)測所述可能性、風(fēng)險或機會的變化。
類似地，在整個本披露內(nèi)容中，用于如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的預(yù)測或 預(yù)后的方法特別可以便于預(yù)測或預(yù)后疾病或病癥的發(fā)生，或預(yù)測或預(yù)后疾病或病癥的進 展、加重、緩解或復(fù)發(fā)，或?qū)χ委熁驅(qū)ζ渌獠炕騼?nèi)部因素、情況或應(yīng)激物的反應(yīng)等。
本發(fā)明的發(fā)明人進一步認識到，在妊娠或產(chǎn)后期間，在連續(xù)時間點處如本文教導(dǎo) 的生物標志物的評估還可以便于HDP并且優(yōu)選PE的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。例如，在所述連 續(xù)時間點處標記的量之間的差異偏離在相應(yīng)時間點處在將不發(fā)展HDP或PE的婦女中測得 的所述標記的量之間的差異的情況下，這樣的偏差可以表示受試者具有或可能有發(fā)展HDP 或PE的危險。
因此，還提供了用于在受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后HDP如優(yōu)選PE的方法，該方 法包括以下步驟(i )在來自受試者并來自第一時間點的樣品中測量任何一種或多種標記 的量，上述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(ii )在來自受試者并來自 連續(xù)的第二時間點的樣品中測量所述一種或多種標記的量；(iii)計算在如在(i)和(ii) 中測得的所述一種或多種標記的量之間的差異；(iv)比較如在(iii)中計算的差異與在 所述第一和第二時間點處所述一種或多種標記的量之間的差異的參比值，所述參比值表示 HDP的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(V)發(fā)現(xiàn)如在(iii)中計算的差異與參比值的偏差或 沒有偏差；以及(iv)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在受試者中HDP的特定的診斷、 預(yù)測和/或預(yù)后。
還披露了用于在受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后HDP如優(yōu)選PE的方法，該方法包 括以下步驟(i )在來自受試者并來自第一時間點的樣品中測量任何兩種或更多種標記的 量，上述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組;(ii)利用(i)的測量結(jié) 果來建立在所述第一時間點處兩種或更多種標記的量的受試者分布；(iii)在來自受試者并來自連續(xù)的第二時間點的樣品中測量所述兩種或更多種標記的量；(iv)利用的(iii)的 測量結(jié)果來建立在所述第二時間點處兩種或更多種標記的量的受試者分布；(V)計算如在(ii)和(iv)中建立的受試者分布之間的差異；(vi)比較如在(V)中計算的差異與在所述 第一和第二時間點處所述兩種或更多種標記的量之間的差異的參比分布，所述參比分布表 示HDP的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(vii)發(fā)現(xiàn)如在(V)中計算的差異與參比分布的偏 差或沒有偏差；以及(viii)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在受試者中HDP的特定的 診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
例如，在所述第一和第二時間點處在受試者中測得的給定標記的量之間計算的差 異(Ds)偏離如在正常妊娠中觀測到的相應(yīng)差異(Dn)的情況下，上述偏差可以表明，受試者 具有或可能有具有HDP如PE的危險。非限制性地，偏差可以是明顯的，其中DS>DN或其中 Ds〈Dn或其中Ds>0而Dn〈0，或其中Ds〈0而Dn>0。上述差異可以適當表示為算術(shù)運算，如，例 如，減法或除法(例如，斜率、比率)。
非限制性地，這樣的連續(xù)時間點可以是相隔約2周以上，優(yōu)選相隔約4周以上，例 如，相隔約6或8周，或還優(yōu)選相隔約10周以上，例如，相隔約12周或15周。
同樣非限制性地，第一時間點可以是在妊娠的約15到約23或24周之間，優(yōu)選在 妊娠的約18到約23或24周之間，更優(yōu)選在妊娠的約20到約23或24周之間，甚至更優(yōu)選 在妊娠的約22周。第二時間點可以是在妊娠的約24或25到約37周之間，優(yōu)選在妊娠的 約24或25到約34周之間，更優(yōu)選在妊娠約24或25到約30周的之間，還更優(yōu)選在妊娠的 約24或25到約28周之間，以及甚至更優(yōu)選在妊娠的約26周。
還披露了用來確定受試者是否(如，例如，仍然、或不再)需要HDP如優(yōu)選PE的治療 性或預(yù)防性治療的方法，該方法包括(i)在來自受試者的樣品中測量任何一種或多種標 記的量，所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S 10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(ii)比較在(i)中測得的 一種或多種標記的量與所述一種或多種標記的量的參比值，所述參比值表示HDP的已知的 診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(iii)發(fā)現(xiàn)在(i)中測得的一種或多種標記的量與所述參比值的偏 差或沒有偏差；(iv)根據(jù)所述發(fā)現(xiàn)，推斷是否需要HDP如優(yōu)選PE的治療性或預(yù)防性治療。
還披露了用來確定受試者是否(如，例如，仍然、或不再)需要HDP如優(yōu)選PE的治 療性或預(yù)防性治療的方法，該方法包括(i)在來自受試者的樣品中測量任何兩種或更多 種標記的量，所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(ii )利用(i )的測量結(jié)果 來建立兩種或更多種標記的量的受試者分布；(iii)比較(ii)的所述受試者分布與所述兩 種或更多種標記的量的參比分布，所述參比分布表示HDP的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后； (iv)發(fā)現(xiàn)(ii)的受試者分布與參比分布的偏差或沒有偏差；(V)根據(jù)所述發(fā)現(xiàn)，推斷是否 需要HDP如優(yōu)選PE的治療性或預(yù)防性治療。
在上述方法便于得出結(jié)論受試者具有或可能有具有HDP的危險或具有HDP的較 差預(yù)后的情況下，可以特別指定一種治療。非限制性地，可以測試(如本文教導(dǎo)的)入院以后 或在留在醫(yī)療保健中心期間的具有HDP的患者繼續(xù)所述HDP的治療的必要性，并且當不再需要或僅在有限程度上需要這樣的治療時，則可以出院。HDP如PE的示例性的治療和預(yù)防性治療包括但不限于抗高血壓治療(特別使用β -阻斷劑、鈣通道阻斷劑、血管舒張劑和/ 或DOPA脫羧酶抑制劑，如，例如，甲基多巴、拉貝洛爾、醋丁洛爾、美托洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾、硝苯地平、伊拉地平和/或肼屈嗪、和/或MgSO4治療)、流產(chǎn)、和分娩如通過引產(chǎn)或剖腹產(chǎn)手術(shù)。
涉及如本文教導(dǎo)的一種或多種生物標志物的評估的應(yīng)用和方法可以主要用于妊娠或產(chǎn)后胎生動物女性受試者。優(yōu)選地，所述受試者是哺乳動物，更優(yōu)選人。
涉及如本文教導(dǎo)的一種或多種生物標志物的評估的應(yīng)用和方法可以優(yōu)選用于妊娠或產(chǎn)后人類女性受試者，如從妊娠的任何年齡并可達約產(chǎn)后12周，如但不限于
-其中，妊娠的人類女性受試者是妊娠約5或更多周，或妊娠約10或更多周，或優(yōu)選妊娠約15或更多周，或更優(yōu)選妊娠約20或更多周，例如，妊娠約21、22、23或24周，或甚至更優(yōu)選妊娠約25或更多周，例如，妊娠約26、27、28或29周；和/或
-其中，妊娠的人類女性受試者是妊娠約40或更少周，例如，妊娠約39或38周，或妊娠約37或更少周，例如，妊娠約36或35周，或妊娠約34或更少周，例如，妊娠約33、32、 31或30周;和/或
-其中，妊娠的人類女性受試者是妊娠約10周至約40周，優(yōu)選妊娠約15周至約 37周，或還優(yōu)選妊娠約20周至34周；或-其中，產(chǎn)后人類女性受試者是產(chǎn)后約12周或更少周，例如，產(chǎn)后約11或10周， 或產(chǎn)后約9周或更少周，例如,產(chǎn)后約8或7周，或產(chǎn)后約6周或更少周，例如,產(chǎn)后約5或 4周，或產(chǎn)后約3周或更少周，例如，產(chǎn)后約2或I周。
另外，本發(fā)明的實施例表明，如本文教導(dǎo)的生物標志物便于在懷孕女性(當評估生物標志物時，其尚未患有臨床上明顯的HDP或PE)中預(yù)測HDP和優(yōu)選PE的潛在(即，未來或即將)發(fā)生。
因而，涉及如本文教導(dǎo)的一種或多種生物標志物的評估的應(yīng)用和方法可以在受試者中，尤其是在沒有臨床上明顯的(即，有效的)HDP或PE的受試者中優(yōu)選用來預(yù)測HDP和優(yōu)選ΡΕ。這樣的預(yù)測可以優(yōu)選指明被測受試者將發(fā)展臨床上明顯的HDP或PE的可能性、機會或風(fēng)險，例如在一定的時間段內(nèi)或在妊娠或產(chǎn)后的給定年齡。
例如，涉及如本文教導(dǎo)的一種或多種生物標志物的評估的應(yīng)用和方法，以及尤其是用來預(yù)測HDP和優(yōu)選PE的應(yīng)用和方法，可以用于妊娠的人類女性受試者，其中妊娠的人類女性受試者優(yōu)選為
-妊娠約37或更少周，例如，妊娠約36或35周，或妊娠約34或更少周，例如，妊娠約33、32或31周，或妊娠約30或更少周，例如，妊娠約29、28或27周，或優(yōu)選妊娠約26或更少周，例如，妊娠約25、24或23周，或更優(yōu)選妊娠約22或更少周，例如，妊娠約21周，或還優(yōu)選妊娠約20或更少周，例如，妊娠約19、18、17或16周，或還優(yōu)選妊娠約15或更少周， 例如，妊娠約14、13、12、11或10周；和/或
-妊娠約10周至約37周，優(yōu)選妊娠約15周至約34周，更優(yōu)選妊娠約20至約30 周，甚至更優(yōu)選妊娠約22至約26周；以及
其中，妊娠的人類女性受試者優(yōu)選并不具有有效的HDP或ΡΕ，例如受試者并不表現(xiàn)便于診斷HDP或PE的臨床癥狀和體征。
另外披露了如本文教導(dǎo)的應(yīng)用和方法，借此，可以預(yù)測發(fā)作的孕齡或產(chǎn)后年齡和/ 或到HDP如優(yōu)選PE的發(fā)作的剩余時間。這樣的應(yīng)用和方法可以有利地比較生物標志物量或分布與參比值或參比分布，其表示HDP的發(fā)作的已知的孕齡或產(chǎn)后年齡和/或到HDP的發(fā)作的已知的剩余時間。在這方面，選自HGFL、PTPRS、R0B04和VGFR3的任何一種或多種標記可以是特別有用的。
另外披露了如本文教導(dǎo)的應(yīng)用和方法，借此，上述方法便于區(qū)別具有或具有患有早期發(fā)作先兆子癇的風(fēng)險(即，妊娠〈34周的臨床表現(xiàn))、早產(chǎn)PE (S卩，妊娠>34并〈37周的臨床表現(xiàn))、以及足月PE (即，妊娠彡37周的臨床表現(xiàn))的受試者。
因而，還披露了，本發(fā)明的應(yīng)用和方法用于HDP的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測，其中HDP是早期發(fā)作PE或早產(chǎn)PE或足月PE。
在已知或預(yù)期具有發(fā)展HDP或PE的風(fēng)險的受試者中，利用本文披露的標記用于 HDP和優(yōu)選PE可以是特別有用的。非限制性地，與HDP和優(yōu)選PE有關(guān)的危險因子包括未經(jīng)產(chǎn)、多次妊娠、在妊娠之間延長的時間間隔、在先前妊娠中HDP或PE的歷史或HDP或PE的家族史、極端的年齡(〈20歲和>40歲)、肥胖、慢性高血壓、慢性腎病、偏頭痛、頭痛、(妊娠) 糖尿病、多囊卵巢綜合征、自身免疫病如狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)節(jié)病或MS、血管或結(jié)締組織疾病、維生素D缺乏、抗磷脂抗體綜合征或遺傳性易栓癥、以前的伙伴具有HDP或PE的男性伴侶、胎兒水腫和不明原因的胎兒宮內(nèi)生長受限。
因而，本發(fā)明的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測方法可以優(yōu)選用于具有一種或多種上述危險因子的受試者和受試者群體。在一種實施方式中，本發(fā)明的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測方法可以優(yōu)選進一步包括在受試者中確定HDP如優(yōu)選PE的一種或多種危險因子的存在或不存在和/或水平。
如本文教導(dǎo)的任何一種預(yù)測、診斷、預(yù)后和/或監(jiān)測應(yīng)用或方法可以優(yōu)選便于至少50%的敏感性和/或特異性(優(yōu)選地，敏感性和特異性)，至少60%，至少70%或至少80%， 例如，彡85%或彡90%或彡95%,例如，約80%至100%或約85%至95%。
在整個本說明書中提及“疾病和/或病癥”涵蓋如本文披露的任何這樣的疾病和病癥，只要符合特定詳述的上下文，更具體但非限制性地包括妊娠的高血壓疾病(HDP)并優(yōu)選先兆子癇(PE)。
本文教導(dǎo)的用于疾病和病癥的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測的應(yīng)用和方法可以用于還沒有被診斷為患有上述疾病和病癥(例如，預(yù)防性篩查)的受試者，或已被診斷為患有上述疾病和病癥的受試者，或被懷疑患有上述疾病和病癥(例如，顯示一種或多種特征性體征和/或癥狀)的受試者，或具有發(fā)展上述疾病和病癥的風(fēng)險(例如，遺傳易感性；一種或多種發(fā)展、環(huán)境或行為危險因子的存在)的受試者。上述應(yīng)用和方法還可以用來檢測疾病和病癥的進展的不同階段或嚴重性。上述應(yīng)用和方法還可以用來檢測疾病和病癥對預(yù)防性或治療性治療或其它干預(yù)措施的反應(yīng)。上述應(yīng)用和方法可以另外用來幫助醫(yī)生基于受試者的疾病和病癥的惡化、維持現(xiàn)狀、部分恢復(fù)、或完全恢復(fù)，來決定進一步治療或觀察或患者從醫(yī)療保健中心出院。
此外，本文教導(dǎo)的用于疾病和病癥的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測的應(yīng)用和方法可以用于群體篩查，如，例如，一般群體的篩查或基于一個或多個標準劃分的群體的篩查，例如，年齡、血統(tǒng)、職業(yè)、相應(yīng)疾病和病癥的危險因子的存在或不存在，等。
在本文教導(dǎo)的用于疾病和病癥(尤其是HDP和優(yōu)選PE)的預(yù)測、診斷、預(yù)后和/或 監(jiān)測的應(yīng)用和方法中，選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組中的任何一種或多種標記的 測量結(jié)果可以結(jié)合于與相應(yīng)疾病和病癥有關(guān)的一種或多種另外生物標志物或臨床參數(shù)的 評估。
因而，還提供了如上文教導(dǎo)的在受試者中用于HDP如優(yōu)選PE的診斷、預(yù)測、預(yù)后和 /或監(jiān)測的方法，其進一步包括在來自受試者的樣品中測量一種或多種上述其它標記的存 在或不存在和/或水平。特別提供了這樣的方法，其中方法的檢查階段進一步包括在來自 受試者的樣品中測量一種或多種上述其它標記的存在或不存在和/或量?？梢允褂萌魏我?知或未知的適宜標記。
在整個本說明書中，〃其它(生物)標記〃通常是指包括這樣的其它標記，其可用 于如本文披露的疾病和病癥的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測。通過實施而不是限制性的方 式，可用于評估HDP和優(yōu)選PE的生物標志物包括可溶性fms樣酪氨酸激酶-1 (sFlt-1, sVEGFR-1) (Maynard et al. 2003,上文)、內(nèi)皮糖蛋白(Levine et al. 2006,上文)、胎盤生 長因子(PIGF)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)(Polliotti et &1.2003，上文)。另外的生物標 志物可以包括那些生物標志物，它們披露在授權(quán)給Proteogenix Inc.的W02009/097584A1 和授權(quán)給Auckland Uniservices Ltd.的W02009/108073A1中，其以引用方式結(jié)合于本文。
應(yīng)當理解，可以各自分開和獨立地評估上述其它生物標志物的存在或不存在和/ 或量，或可以將上述其它生物標志物的存在或不存在和/或量包括在用本文披露的方法建 立的受試者分布或參比分布內(nèi)。
可以按照先前用于其它生物標志物的已知程序來建立如本文采用的參比值?？梢?在如本文教導(dǎo)的方法以內(nèi)(即，構(gòu)成一步驟)或以外(即，不構(gòu)成一步驟)來建立上述參比值。 因此，本文教導(dǎo)的任何一種方法可以包括建立如本文教導(dǎo)的一種或多種標記的量的參比值 的步驟，所述參比值表示(a)如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的不存在或其良好預(yù)后的預(yù)測或診 斷，或(b )如本文教導(dǎo)的疾病或病癥或其較差預(yù)后的預(yù)測或診斷。
另一方面提供了用于建立用于任何一種或多種標記的量的參比值的方法，所述標 記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、 FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3 組成的組，所述參比值表示
(a)如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的不存在或其良好預(yù)后的預(yù)測或診斷，或
(b)如本文教導(dǎo)的疾病或病癥或其較差預(yù)后的預(yù)測或診斷，
所述方法包括
(i)在以下樣品中測量所述一種或多種標記的量
(ia)來自不患有相應(yīng)疾病或病癥或不具有患有相應(yīng)疾病或病癥的風(fēng)險或具有相 應(yīng)疾病或病癥的良好預(yù)后的一個或多個受試者的一個或多個樣品，或
(ib)來自患有相應(yīng)疾病或病癥或具有患有上述相應(yīng)疾病或病癥的風(fēng)險或具有上 述相應(yīng)疾病或病癥的較差預(yù)后的一個或多個受試者的一個或多個樣品，以及
(ii)存儲所述一種或多種標記的量
(iia)如在(ia)中測得的作為參比值，其表示不存在相應(yīng)疾病或病癥的預(yù)測或診 斷，或表示其良好預(yù)后，或
(iib)如在(ib)中測得的作為參比值,其表示相應(yīng)疾病或病癥的預(yù)測或診斷,或表示其較差預(yù)后。
本發(fā)明的方法可以以其他方式采用任何一種、兩種或更多種標記的量的參比分 布，所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3 組成的組，以及可選地一種或多種其 它生物標志物的存在或不存在和/或量，其可以按照先前用于其它生物標志物的已知程序 來建立。可以在本發(fā)明的方法以內(nèi)(即，構(gòu)成一步驟)或以外(即，不構(gòu)成一步驟)來建立上 述參比分布。因此，本文教導(dǎo)的方法可以包括以下步驟建立如本文教導(dǎo)的任何一種、任何 兩種或更多種標記的量的參比分布，以及可選地一種或多種其它生物標志物的存在或不存 在和/或量，所述參比分布表示(a)因此不存在如本文教導(dǎo)的疾病或病癥或其良好預(yù)后的 預(yù)測或診斷，或因此(b)如本文教導(dǎo)的疾病或病癥或其較差預(yù)后的預(yù)測或診斷。
另一方面提供了一種用于建立用于任何一種、兩種或更多種標記的量的參比分布 的方法,所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組，以及可選地可用于如本文 教導(dǎo)的疾病或病癥的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測的一種或多種其它生物標志物的存在或 不存在和/或量，所述參比分布表示
(a)相應(yīng)疾病或病癥的不存在或因此其良好預(yù)后的預(yù)測或診斷，或
(b)相應(yīng)疾病或病癥或因此其較差預(yù)后的預(yù)測或診斷，
所述方法包括
(i)在以下樣品中，測量如本文教導(dǎo)的所述一種、兩種或更多種標記的量以及所述 一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量
(ia)來自不患有相應(yīng)疾病或病癥或不具有患有上述相應(yīng)疾病或病癥的風(fēng)險或具 有上述相應(yīng)疾病或病癥的良好預(yù)后的一個或多個受試者的一個或多個樣品；或
(ib)來自患有相應(yīng)疾病或病癥或具有患有上述相應(yīng)疾病或病癥的風(fēng)險或具有上 述相應(yīng)疾病或病癥的較差預(yù)后的一個或多個受試者的一個或多個樣品；
(ii)
(iia)利用(ia)的測量結(jié)果來產(chǎn)生如本文教導(dǎo)的所述一種、兩種或更多種標記的 量的分布以及所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量；或
(iib)利用(ib)的測量結(jié)果來產(chǎn)生如本文教導(dǎo)的所述一種、兩種或更多種標記的 量的分布，以及所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量；
(iii)
(iiia)將(iia)的分布存儲為參比分布，其表示不存在相應(yīng)疾病或病癥的預(yù)測或 診斷或因此表示其良好預(yù)后；或
(iiib)將(iib)的分布存儲為參比分布，其表示相應(yīng)疾病或病癥的預(yù)測或診斷或 因此表示其較差預(yù)后。
另外提供了用于在受試者中建立基線或參比值的方法，該方法包括(i)在來自 受試者并來自不同時間點的樣品中測量任何一種或多種標記的量，所述標記選自由ALS、 ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、 HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、 SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組，其中受試者并不患有如本文教導(dǎo)的疾病或病癥，以及 (ii)計算受試者的范圍或平均值，其是用于所述受試者的基線或參比值?？梢酝ㄟ^任何適 宜的技術(shù)如可以是本領(lǐng)域已知的技術(shù)來測量任何一種或多種標記的量和/或一種或多種 其它生物標志物的存在或不存在和/或量，所述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、 CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、 LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成 的組。
例如，可以采用能夠特異性地結(jié)合于各自的生物標志物和/或其片段的結(jié)合劑 (binding agents)。結(jié)合劑特別可以是抗體、適體、光適體、蛋白質(zhì)、肽、肽模擬物或小分子。 例如，可以采用免疫檢測技術(shù)或質(zhì)譜分析法或色譜法、或所述方法的組合。
另外披露了用于在受試者中診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測如本文教導(dǎo)的疾病或病 癥的試劑盒，該試劑盒包括(i)裝置，該裝置用于在來自受試者的樣品中測量任何一種或多 種標記的量，上述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組，以及可選地和優(yōu)選地(ii ) 所述一種或多種標記的量的參比值或用于建立所述參比值的裝置，其中所述參比值表示相 應(yīng)疾病或病癥的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。該試劑盒因而便于通過裝置(i )，在來自受 試者的樣品中測量所述一種或多種標記的量；比較通過裝置(i )測得的所述一種或多種標 記的量與(ii )的或通過裝置(ii )建立的參比值；發(fā)現(xiàn)通過裝置(i )測得的所述一種或多種 標記的量與(ii)的參比值的偏差或沒有偏差；因此將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于 在受試者中相應(yīng)疾病或病癥的特定的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
另一種實施方式提供了用于在受試者中診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測如本文教導(dǎo) 的疾病或病癥的試劑盒，該試劑盒包括(i)裝置，該裝置用于在來自受試者的樣品中測量任 何一種、兩種或更多種標記的量，所述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、 DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、 PGRP 2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組，和(i i ) 可選地，用于在來自受試者的樣品中測量一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/ 或量的裝置，和可選地并優(yōu)選地(iii)裝置，該裝置用于建立如本文教導(dǎo)的所述一種、兩種 或更多種生物標志物的量的受試者分布和可選地所述一種或多種其它生物標志物的存在 或不存在和/或量，以及可選地并優(yōu)選地(iv)如本文教導(dǎo)的所述一種、兩種或更多種生物 標志物的量的參比分布和可選地所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或 量，或用于建立所述參比分布的裝置，所述參比分布表示相應(yīng)疾病或病癥的已知的診斷、預(yù) 測和/或預(yù)后。因而這樣的試劑盒便于在來自受試者的樣品中，分別通過裝置(i)和(ii) 來測量任何一種、兩種或更多種標記的量，和可選地一種或多種其它生物標志物的存在或 不存在和 / 或量，所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、 PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3 組成的組；基于所述測量結(jié) 果，建立(例如，利用包括在試劑盒中的裝置或利用適宜的外部裝置)如本文教導(dǎo)的所述一 種、兩種或更多種標記的量的受試者分布和所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存 在和/或量；比較受試者分布與(iv)的或通過裝置(iv)建立的參比分布；發(fā)現(xiàn)所述受試者 分布與所述參比分布的偏差或沒有偏差；以及因此將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在 受試者中的相應(yīng)疾病或病癥的特定的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
在本發(fā)明的試劑盒中的用于測量任何一種或多種標記(其選自由ALS、ADA12、 ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、 ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、 TENX、TFF3、VGFR3組成的組)的量和/或一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/ 或量的裝置可以分別包括能夠特異性地結(jié)合于如本文教導(dǎo)的所述一種或多種標記和/或 其片段的一種或多種結(jié)合劑，和能夠特異性地結(jié)合于所述一種或多種其它生物標志物的一 種或多種結(jié)合劑。結(jié)合劑特別可以是抗體、適體、光適體、蛋白質(zhì)、肽、肽模擬物或小分子?？?以有利地將結(jié)合劑固定在固相或載體上。本發(fā)明的試劑盒可以采用免疫檢測技術(shù)或質(zhì)譜分 析技術(shù)或色譜技術(shù)、或所述技術(shù)的組合。
因此還披露了用于診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的試劑 盒，該試劑盒包括Ca)能夠特異性地結(jié)合于任何一種或多種標記和/或其片段的一種或 多種結(jié)合劑，所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(b)優(yōu)選地，已知量或濃 度的任何一種或多種選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組的標記和 / 或其片段(例如， 用作對照、標準和/或校準物)；(c)優(yōu)選地，所述一種或多種標記的量的參比值，或用于建 立所述參比值的裝置。如在本說明書中其它地方教導(dǎo)的，可以適當?shù)貥擞浽?a)和/或(c) 中的所述成分。
還披露了用于診斷、預(yù)測和/或預(yù)后如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的試劑盒,該試劑 盒包括(a)能夠特異性地結(jié)合于任何一種、兩種或更多種標記和/或其片段的一種或多種 結(jié)合劑，所述標記選自由 ALS、ADAl2、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(b)可選地，能夠特異性 地結(jié)合于一種或多種其它生物標志物的一種或多種結(jié)合劑；(c)優(yōu)選地，已知量或濃度的 任何一種或多種標記和/或其片段，以及可選地，已知量或濃度的所述一種或多種其它生 物標志物(例如，用作對照、標準和/或校準物)，所述標記選自由ALS、ADA12、ANGI, CANU CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、 LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；(d)優(yōu)選地，如本文教導(dǎo)的所述一種、兩種或更多種標記的量的參比分布，和可 選地，所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量，或用于建立所述參比分布的裝置。如在本說明書中其它地方教導(dǎo)的，可以適當?shù)貥擞浽?(a)、(b)和/或(C)下的所述成分。
另外披露了如在本文中描述的試劑盒用于診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的應(yīng)用。
還披露了可用于測量任何一種或多種標記和可選地本文關(guān)注的一種或多種其它生物標志物的試劑和工具，上述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、 DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、 PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組。
因此，披露了蛋白、多肽或肽陣列或微陣列，其包括(a)任何一種或多種標記和/ 或其片段，上述標記選自由 ALS, ADA12、ANGI, CANU CSF1R、CRP、CSH、DAGU DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組，優(yōu)選已知量或濃度的所述一種或多種標記和/或其片段；以及(b)可選地并優(yōu)選地，一種或多種其它生物標志物，優(yōu)選已知量或濃度的所述一種或多種其它生物標志物。
還披露了結(jié)合劑陣列(binding agent array)或微陣列，其包括(a)能夠特異性地結(jié)合于任何一種或多種標記和/或其片段的一種或多種結(jié)合劑，上述標記選自由ALS、 ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、 HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、 SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組，優(yōu)選已知量或濃度的所述結(jié)合劑；以及(b)可選地并優(yōu)選地，能夠特異性地結(jié)合于一種或多種其它生物標志物的一種或多種結(jié)合劑，優(yōu)選已知量或濃度的所述結(jié)合劑。
還披露了如上文教導(dǎo)的試劑盒，其被構(gòu)造為便攜式裝置，如，例如，床側(cè)裝置，用于家里或臨床設(shè)置。
因而一個相關(guān)方面提供了能夠在來自受試者的樣品中測量任何一種或多種選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、 GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、PRDX2、PTPRS、R0B04、 S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組的標記和/或其片段的量的便攜式測試裝置，該便攜式測試裝置包括(i)用于從受試者獲得樣品的裝置，( )用于在所述樣品中測量所述一種或多種標記和/或片段的量的裝置，以及(iii)用于可視化在樣品中測得的所述一種或多種標記和/或片段的量的裝置。
在一種實施方式中，部分(ii)和(iii)的裝置可以是相同的，從而提供了能夠在來自受試者的樣品中測量所述一種或多種標記和/或其片段的量的便攜式測試裝置，該便攜式測試裝置包括(i )用于從受試者獲得樣品的裝置；以及(i i )這樣的裝置，其用于在所述樣品中測量所述一種或多種標記和/或其片段的量以及用于可視化在樣品中測得的所述一種或多種標記和/或片段的量。
在一種實施方式中，所述可視化裝置能夠指示在樣品中所述一種或多種標記和/ 或片段的量是高于或低于一定的閾值水平，和/或在樣品中所述一種或多種標記和/或片段的量是否偏離所述一種或多種標記和/或片段的量的參比值，所述參比值表示如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。因此，便攜式測試裝置還可以適當?shù)匕ㄋ鰠⒈戎祷蛴糜诮⒈戎档难b置。
在一種實施方式中，選擇閾值水平，使得在樣品中高于或低于(取決于標記和疾病 或病癥)所述閾值水平的所述一種或多種標記和/或片段的量表明，受試者具有或可能有具 有相應(yīng)疾病或病癥的危險，或表明，在受試者中上述相應(yīng)疾病或病癥的較差預(yù)后，并且在樣 品中低于或高于(取決于標記和疾病或病癥)所述閾值水平的所述一種或多種標記和/或片 段的量表明，受試者并不具有或并不具有患有如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的風(fēng)險，或表明在 受試者中上述疾病或病癥的良好預(yù)后。
在一種實施方式中，便攜式測試裝置包括參比值(參考值)，該參比值表示不存在 如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的預(yù)測或診斷或表示上述疾病或病癥的良好預(yù)后，或包括用于建 立所述參比值的裝置，以及與所述參比值相比，在來自受試者的樣品中，任何一種或多種選 自由 ALS、ADAl2、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、 GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、 S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組的標記和/或其片段的升高或降低(取決于標記 和疾病或病癥)的量表明受試者具有或可能有患有相應(yīng)疾病或病癥的危險或表明在受試者 中對于上述相應(yīng)疾病或病癥的較差預(yù)后。在另一種實施方式中，便攜式測試裝置包括參比 值，該參比值表示如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的預(yù)測或診斷或表示對于上述疾病或病癥的較 差預(yù)后，或包括用于建立所述參比值的裝置，以及與所述參比值相比，在來自受試者的樣品 中，如本文教導(dǎo)的所述一種或多種標記和/或片段的可比量表明受試者具有或可能有患有 相應(yīng)疾病或病癥的危險或表明在受試者中對于上述相應(yīng)疾病或病癥的較差預(yù)后。
在另一種實施方式中，便攜式測試裝置的測量(和可選地可視化)裝置可以包括具 有近端和遠端的載體(實心載體，solid support),包括在近端附近的樣品施加區(qū)；在樣品 施加區(qū)的遠側(cè)的反應(yīng)區(qū)；和在反應(yīng)區(qū)的遠側(cè)的檢測區(qū)；可選的對照標準，該對照標準包括 任何一種或多種選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、 PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3 組成的組中的標記和 / 或其片段,借 此所述載體具有毛細管性能，其引導(dǎo)在施加區(qū)中施加的流體樣品在從近端到遠端的方向上 流動；以及可選地包括流體源，以改善更粘稠樣品的毛細管流動。
反應(yīng)區(qū)可以包括特異性結(jié)合分子的一個或多個帶(bands)，用于結(jié)合于檢測劑的 任何一種或多種標記(其選自由 ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、 ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組)和 / 或其片段,將上述特 異性結(jié)合分子結(jié)合物(conjugate)設(shè)置在載體上,使得它可以連同流體的毛細管流動一起 遷移；并且其中檢測區(qū)包括一個或多個捕捉帶(capture bands),該捕捉帶包括固定在載體 上的標記特異性分子的群體。
反應(yīng)區(qū)可以另外包括足夠量的捕捉特異性結(jié)合分子的一個或多個帶，用于任何一 種或多種標記(其選自由 ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、 ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、 PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組)和 / 或其片段，以防止閾 值量的標記特異性結(jié)合分子結(jié)合物遷移到檢測區(qū)。可替換地，所述裝置另外包括用于比較捕獲的標記特異性結(jié)合分子結(jié)合物的量與閾值的裝置。
其它方面涉及以下認識在如本文教導(dǎo)的疾病和病癥，尤其是但非限制性地包括 HDP和優(yōu)選PE中，本文披露的標記可以是用于治療性和/或預(yù)防性干預(yù)的有價值的靶。
因此，本文還披露了以下任何之一和全部
(I) 一種藥劑(試劑，agent),該藥劑能夠調(diào)節(jié)選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、 CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、 LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的任何一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或活性，其用作藥物，優(yōu)選用于如 本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的治療；
(2) 一種藥劑在制造用于治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的藥物中的應(yīng) 用，所述藥劑能夠調(diào)節(jié)如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或 活性；或一種制劑在用于治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥中的應(yīng)用，所述藥劑能夠 調(diào)節(jié)如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或活性；
(3)用于在需要治療的受試者中治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的方法， 該方法包括將治療或預(yù)防有效量的藥劑給予所述受試者，所述藥劑能夠調(diào)節(jié)如上文在(I) 中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或活性；
(4)如在上文(I)至(3)的任何之一中闡述的主題，其中所述藥劑能夠降低或增加 如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或活性；
(5)如在上文(I)至(4)的任何之一中闡述的主題，其中所述藥劑能夠特異性地結(jié) 合于如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)；
(6)如在上文(I)至(5)的任何之一中闡述的主題，其中所述藥劑是抗體或其片段 或衍生物；多肽；肽；肽模擬物；適體；光適體；或化學(xué)物質(zhì)，優(yōu)選有機分子，更優(yōu)選小有機 分子;
(7)如在上文(I)至(4)的任何之一中闡述的主題，其中所述藥劑能夠減少或抑制 如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的表達，優(yōu)選其中所述藥劑是反義藥 劑、核酶、或能夠引起RNA干擾的藥劑；
(8)如在上文(I)至(4)的任何之一中闡述的主題，其中所述藥劑能夠減少或抑制 如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或活性，優(yōu)選地其中所述 藥劑是如上文在(I)中定義的所述一種或多種蛋白質(zhì)的重組或分離的缺失構(gòu)造物、相對于 如上文在(I)中定義的一種或多種天然蛋白質(zhì)具有顯性負活性的多肽；
(9) —種測定(分析，assay),用來從一組測試藥劑選擇潛在地可用于治療如本文 教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的候選藥劑，所述測定包括確定測試藥劑是否可以調(diào)節(jié)，如增 加或減少并且優(yōu)選減少如上文在(I)中定義的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的水平和/或 活性；
(10)如在上文(9)中闡述的測定，進一步包括使用所選的候選藥劑來制備用于給 予的組合物，以及在非人類動物模型，優(yōu)選非人類哺乳動物模型中，監(jiān)測其對于如本文教導(dǎo) 的任何一種疾病或病癥的預(yù)防和/或治療效果；
(11)通過如在上文(10)中闡述的測定加以分離的藥劑；
(12)—種藥物組合物或配方，其包含預(yù)防和/或治療有效量的如在上文(I)至(8)或(10)的任何之一中闡述的一種或多種藥劑、或其藥用N-氧化物形式、加成鹽、前藥或溶劑化物，并且進一步包含一種或多種藥用載體；
(13) —種用于生產(chǎn)如在上文(12)中闡述的藥物組合物或配方的方法，該方法包括混合所述一種或多種藥劑與所述一種或多種藥用載體。
如在上文(I)至(13)的任何之一中闡述的所述病癥或疾病可以尤其選自HDP且優(yōu)選PE。
因此還設(shè)想了一種方法(篩選測定)，用于選擇能夠特異性地結(jié)合于選自由ALS、 ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、 HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、 SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組中的任何一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的藥劑(例如，核酸如基因、或蛋白質(zhì))，所述方法包括(a)提供一種或多種，優(yōu)選多種，測試結(jié)合劑；(b)從(a)的測試結(jié)合劑中選擇那些結(jié)合于所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的測試結(jié)合劑；以及(c)從在 (b)中選擇的測試結(jié)合劑反選擇(S卩，除去)那些結(jié)合于任何一種或多種其它的、意外或不希望的靶的測試結(jié)合劑。
可以通過在通常有利于這樣的結(jié)合的條件下使所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)與測試結(jié)合劑接觸(即，結(jié)合、暴露或溫育)來有利地測試在測試結(jié)合劑和所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)之間的結(jié)合。例如并且非限制性地，可以適當?shù)伢w外測試在測試結(jié)合劑和所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)之間的結(jié)合；或可以在包含所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的宿主細胞或宿主生物體中進行測試并暴露于或配置成表達測試結(jié)合劑。
非限制性地，結(jié)合或調(diào)節(jié)劑能夠體外、在細胞中、在器官中和/或在生物體中結(jié)合所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)或調(diào)節(jié)所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的活性和/或水平。
在如在上文(9)和(10)的任何之一中闡述的篩選測定中，由測試調(diào)節(jié)劑對所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的活性和/或水平的調(diào)節(jié)可以有利地通過在通常有利于上述調(diào)節(jié)的條件下使所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)(例如，基因或蛋白質(zhì))與測試調(diào)節(jié)劑接觸(即，結(jié)合、暴露或溫育)來測試。通過實施而不是限制性的方式，在所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的活性和/或水平的調(diào)節(jié)來自測試調(diào)節(jié)劑與所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的結(jié)合的情況下，所述條件可以通常有利于這樣的結(jié)合。例如和非限制性地，由測試調(diào)節(jié)劑對所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)的活性和/或水平的調(diào)節(jié)可以適當?shù)卦隗w外測試，或可以在包含所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)并暴露于或被配置成表達測試調(diào)節(jié)劑的宿主細胞或宿主生物體中加以測試。
還設(shè)想
-ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、 FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3中的任何一種或多種(例如，核酸如基因、或多肽或蛋白質(zhì))用作藥物，優(yōu)選用于治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥；
-所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)在制造用于治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的藥物中的應(yīng)用；
-所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)用于治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的應(yīng)用；
-用于在需要上述治療的受試者中治療如本文教導(dǎo)的任何一種疾病或病癥的方法，該方法包括給予所述受試者治療或預(yù)防有效量的所述一種或多種核酸或蛋白質(zhì)；
特別地，其中所述病癥或疾病可以選自HDP且優(yōu)選PE。
在本文披露的方面和實施方式中，如應(yīng)用、方法、試劑盒、裝置、試劑等，任何一種或多種標記、核酸或蛋白質(zhì)可以以進一步優(yōu)選的替換方式選自由ALS、ADA12、ANGI, CANU CSF1R、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、ICAM3、KISSl、LCAT, PGBM、 PGRP2、PHLD、PRDXl、PTPRS、R0B04、S10A9、TENX、TFF3 組成的組。
在又一進一步優(yōu)選的替換方式中，尤其是在方面和實施方式涉及先兆子癇(PE)的情況下，任何一種或多種標記、核酸或蛋白質(zhì)可以選自由ALS、ADA12、ANGI, CANU CSF1R、 CRP、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLN1、FBN2、GP126、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、PGBM、 PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、TENX、TFF3 組成的組。本發(fā)明的上述和另外的方面和優(yōu)選實施方式描述在以下部分和所附權(quán)利要求中。所附權(quán)利要求1至26的主題由此具體地結(jié)合在本說明書。


圖1至11示出了在22周和26周孕齡時在病例(即，在妊娠期間以后將發(fā)展PE的婦女)與對照(即，在妊娠期間以后將不發(fā)展PE的婦女)中各自標記的量的箱須圖。
圖12和13 示出了在病例中各自標記的量(Y軸)和到PE的發(fā)作(顯示/診斷)的時間(X軸)之間的相關(guān)性。
圖14是根據(jù)本發(fā)明的測試條的平面圖(A)和側(cè)面圖(B)。
圖15是根據(jù)本發(fā)明的測試盒的平面圖。
圖16A-B分別示出了與許多測試墊相比，根據(jù)本發(fā)明的試劑條的側(cè)面圖和頂視圖。
圖17示出了病例和對照的群體。 妊娠22周獲得第一血漿樣品；
■妊娠26周獲得第二血漿樣品； 在病例中臨床診斷PE的妊娠時間；0當出生時的妊娠時間。
具體實施方式
如本文中所使用的，除非上下文另外明確指出，否則“一個”、“一種”、和“該”的單數(shù)形式包括單數(shù)和復(fù)數(shù)指稱。
如本文中所使用的，術(shù)語“包含”、“包括”和“由.....組成”與“包括”、或“含有”是同義的，并且是包容性的或開放式的并且并不排除另外的、非列舉成員、要素或方法步驟。 該術(shù)語還涵蓋“由.....組成”和“基本上由.....組成”。
通過端點的數(shù)值范圍的列舉包括歸入相應(yīng)范圍的所有數(shù)目和分數(shù)、以及列舉的端
如本文中所使用的，當提及可測量值如參數(shù)、量、持續(xù)時間等時，術(shù)語“約”是指包括與指定值的變化，尤其是+/-10%或更小的變化，優(yōu)選+/-5%或更小，更優(yōu)選+/-1%或更小，以及還更優(yōu)選+/-0. 1%或更小，只要在所披露的發(fā)明中這樣的變化適合于進行。可以理解的是，還具體和優(yōu)選地披露了修飾語“約”涉及的數(shù)值本身。
而術(shù)語“一個或多個(一種或多種)”，如成員組的一個或多個成員，是本身明確的， 通過進一步列舉，該術(shù)語特別包括提及所述成員的任何一個，或所述成員的任何兩個或更多個，如，例如，任何彡3、彡4、彡5、彡6或彡7等的所述成員，并且可達所有所述成員。
在本說明書中引用的所有文獻的全部內(nèi)容以引用方式結(jié)合于本文。
除非另有規(guī)定，否則在披露本發(fā)明時所使用的所有術(shù)語(包括技術(shù)和科學(xué)術(shù)語)具有如由本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員通常理解的含義。通過進一步的指導(dǎo)，可以包括術(shù)語定義以更好地理解本發(fā)明的教導(dǎo)。
本發(fā)明的發(fā)明人認識到，ALS、ADA12、ANGI,CANU CSF1R、CRP、CSH、DAGU DPEP2、 DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、 PRDXl、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 中的任何一種或多種是尤其用于妊娠的高血壓疾病(HDP)如優(yōu)選先兆子癇(PE)的有價值的生物標志物。
術(shù)語“生物標志物”在本領(lǐng)域中是普遍的并且可以廣泛地表示生物分子和/或其可檢測部分，相對于受試者的表型和/或基因型的一個或多個方面，在受試者中它的定性和/或定量評估是預(yù)測或信息性的(例如，預(yù)測、診斷和/或預(yù)后性的)，如，例如，相對于受試者的關(guān)于給定疾病或病癥的狀態(tài)。優(yōu)選地，如本文中使用的，生物標志物是基于肽、多肽和/或蛋白質(zhì)的。本文中可互換使用術(shù)語〃生物標志物〃和〃標記〃。
本文中提及“如本文教導(dǎo)的疾病和/或病癥”或類似提及涵蓋如本文披露的任何這樣的疾病和病癥，只要符合這樣的列舉的上下文，尤其是但非限制性地包括妊娠的高血壓疾病且優(yōu)選先兆子癇。
妊娠的高血壓疾病(HDP)包括與在妊娠期間和/或產(chǎn)后(例如，可達產(chǎn)后12周)高血壓有關(guān)的疾病和病癥的異類集合。
HDP可以方便地分類如下
1.由妊娠誘導(dǎo)的高血壓
a.沒有蛋白尿或(普遍的)水腫
b.具有蛋白尿或(普遍的)水腫(即，先兆子癇)
1.輕度
i1.嚴重
c.子癇
I1.同步高血壓(慢性高血壓)
II1.妊娠惡 化的高血壓(妊娠加重高血壓)
a.疊加先兆子癇
b.疊加子癇
最近的研究可以不再將PE分類為輕度或嚴重的，而是可以基于妊娠時間來確定 PE組，優(yōu)選地a.早期發(fā)作(即，〈妊娠34周的臨床表現(xiàn))；b.早產(chǎn)(即，〉妊娠34并〈37周的臨床表現(xiàn))；c.足月(即，>妊娠37周的臨床表現(xiàn))。
可以用其它方式將HH)歸類為預(yù)先存在的或妊娠的，可選地對任何類型添加“具有先兆子癇”(如果產(chǎn)婦或胎兒癥狀、體征或測試結(jié)果有必要如此)。
可以方便地將妊娠的非蛋白尿高血壓定義為收縮壓BP彡HOmmHg和/或舒張壓 BP ^ 90mmHg的血壓，其是在兩個分開的場合并相隔4小時以上測得，例如，相隔約4小時至約168小時。當以妊娠以前或在妊娠20周以前測得高血壓時，可以通常表示這樣的高血壓為慢性高血壓。當在先前血壓正常的婦女中并在妊娠20周以后測得高血壓時，可以表示這樣的高血壓為妊娠引起的高血壓。通常，妊娠引起的高血壓將在產(chǎn)后12周內(nèi)消退。當測得至少140/90mmHg的血壓但并不持續(xù)6小時以上時，可以表示這樣的高血壓為短暫性高血壓。
妊娠的蛋白尿高血壓可以如在前面段落中加以定義，進一步伴隨在24小時尿收集中彡300mg的總蛋白。
HDP還涵蓋這樣的疾病和病癥，其在本領(lǐng)域中通常表示為妊娠高血壓、輕度先兆子癇、妊娠弓I起的高血壓、妊娠的特異性高血壓、妊娠的毒血癥等。
術(shù)語“孕齡”、“妊娠的年齡”和類似術(shù)語在本領(lǐng)域中是普遍的并且通常表示時間， 如自女性的末次月經(jīng)期的第一天起以周為單位測得的。正常妊娠的人妊娠為約38至42周， 優(yōu)選約40周。
“先兆子癇”(PE或先兆子癇)通常表示妊娠相關(guān)的疾病或病癥，其特征在于具有蛋白尿或水腫或兩者的高血壓。PE還可以伴隨腎小球機能失調(diào)、腦水腫、肝水腫、凝血功能異常和/或其它并發(fā)癥。
PE可以方便地定義為以下體征和癥狀的一些組合
(I)在妊娠20周以后，收縮血壓(BP) > 140mmHg和/或舒張壓BP > 90mmHg (通常在兩個場合并相隔4小時以上測得，例如，相隔約4至約168小時)，
(2)在妊娠20周以后，新發(fā)作蛋白尿(I+,通過纖維素試紙并使用尿分析法，在24 小時尿收集中彡300mg的蛋白，或單隨機尿樣品具有彡O. 3的蛋白/肌酐比值)，以及
(3)到產(chǎn)后12周，高血壓和蛋白尿的消退，
如尤其是高血壓和蛋白尿的組合。
嚴重PE可以方便地定義為
(I)收縮壓BP≥160mmHg或舒張壓BP≥110mmHg (通常在兩個場合并相隔4小時以上測得，例如，相隔約4至約168小時)或
(2)蛋白尿，其特征在于，在24小時尿收集中測得> 3. 5g蛋白或兩個隨機尿樣品具有至少3+蛋白(通過纖維素試紙)。
在PE中，高血壓和蛋白尿通常在彼此7天內(nèi)發(fā)生。在嚴重PE中，嚴重高血壓、嚴重蛋白尿或HELLP綜合征(溶血、升高的肝酶、低血小板)或子癇可以同時發(fā)生或每次僅一種癥狀。
偶爾，嚴重PE可以導(dǎo)致癲癇發(fā)作的發(fā)展，S卩，導(dǎo)致子癇。子癇還可以包括對許多器官或組織如肝(例如，肝細胞損害、門靜脈周性壞死)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(例如，腦水腫和腦出血)的功能障礙或損壞。
因此，HDP還涵蓋這樣的疾病和病癥，其在本領(lǐng)域中通常表示為PE，特別包括輕度 PE,嚴重PE和具有另外的并發(fā)癥的PE，子癇和HELLP綜合征。
在醫(yī)療和臨床實踐中，術(shù)語“正在預(yù)測”或“預(yù)測”、“正在診斷”或“診斷”和“正在預(yù)后”或“預(yù)后”是普通的和很好理解的。應(yīng)當理解的是，短語“用于診斷、預(yù)測和/或預(yù)后” 給定疾病或病癥的方法還可以互換與短語如用于所述疾病或病癥的“診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的方法”或?qū)λ黾膊』虿“Y“進行(或確定或建立)診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的方法”等。
通過進一步的解釋并且非限制性地，“正在預(yù)測”或“預(yù)測”通常是指在還未患有 所述疾病或病癥的受試者中疾病或病癥的提前表明、指示或預(yù)言。例如，在受試者中疾病 或病癥的預(yù)測可以表明受試者將發(fā)展所述疾病或病癥的可能性、機會或風(fēng)險，例如在一定 的時間段內(nèi)或到一定年齡。所述可能性、機會或風(fēng)險可以特別表示為絕對值、范圍或統(tǒng)計數(shù) 據(jù)，或可以相對于適宜的對照受試者或受試者群體(如，例如，相對于一般的、正常的或健康 的受試者或受試者群體)來表示。因此，受試者將發(fā)展疾病或病癥的可能性、機會或風(fēng)險可 以有利地表示為相對于適宜的對照受試者或受試者群體的增加或減少、或成倍增加或成倍 減少。如本文中所使用的，術(shù)語在受試者中如本文教導(dǎo)的病癥或疾病的“預(yù)測”還可以特別 指受試者具有上述病癥或疾病的’陽性’預(yù)測，即，受試者具有具有患有上述病癥或疾病的 風(fēng)險(例如，相對于對照受試者或受試者群體，風(fēng)險顯著增加)。如在本文中描述的，術(shù)語在 受試者中沒有如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的“預(yù)測”可以特別指，受試者具有上述疾病或病癥 的’陰性’預(yù)測，即，相對于對照受試者或受試者群體，受試者患有上述疾病或病癥的風(fēng)險 并沒有顯著增加。
術(shù)語“診斷”通常是指基于癥狀和體征和/或根據(jù)各種診斷程序的結(jié)果(如，例如， 根據(jù)已知診斷的疾病或病癥的特征性的一種或多種生物標志物的存在、不存在和/或量)以 對受試者的疾病或病癥得到認識、決定或作出結(jié)論的過程或行為。如本文中所使用的，在受 試者中，如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的“診斷”可以特別指，受試者具有這樣的疾病或病癥，因 此，被診斷為患有上述疾病或病癥。在受試者中，沒有如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的“診斷”可 以特別指，受試者并不患有上述疾病或病癥，因此，被診斷為并不患有上述疾病或病癥。盡 管顯示暗示上述疾病或病癥的一種或多種常規(guī)癥狀或體征，受試者也可以被診斷為并不患 有上述疾病或病癥。
術(shù)語“預(yù)示”或“預(yù)后”通常是指對疾病或病癥的進展和恢復(fù)前景(例如，可能性、 持續(xù)時間、和/或程度)的預(yù)期。本文教導(dǎo)的疾病或病癥的良好預(yù)后可以通常涵蓋自疾病或 病癥的滿意的部分或完全恢復(fù)的預(yù)期，優(yōu)選在可接受的時間段內(nèi)。上述疾病或病癥的良好 預(yù)后可以更加通常地涵蓋上述疾病或病癥的不進一步惡化或加重的預(yù)期，優(yōu)選在給定時間 段內(nèi)。如本文教導(dǎo)的疾病或病癥的較差預(yù)后可以通常涵蓋的上述疾病或病癥的不夠標準的 恢復(fù)和/或不滿意的緩慢恢復(fù)、或基本上沒有恢復(fù)或甚至進一步惡化的預(yù)期。
如本文中所使用的，術(shù)語“受試者”或“患者”通常指人類，但還可以涵蓋是指非人 類動物，優(yōu)選溫血動物，更優(yōu)選胎生動物，甚至更優(yōu)選哺乳動物，如，例如，非人類靈長類動 物、嚙齒動物、犬科動物、貓科動物、馬科動物、綿羊、豬等。特別是女性受試者，更尤其是妊 娠的或產(chǎn)后女性受試者。
如本文中所使用的，術(shù)語“樣品”或“生物樣品”包括獲自受試者的任何生物樣品。 樣品可以包括但不限于全血、血漿、血清、紅細胞、白細胞(例如，外周血單核細胞)、唾液、 尿、大便(即，糞便)、眼淚、汗液、皮脂、乳頭抽吸物、導(dǎo)管灌洗物、腫瘤滲出物、滑液、腦脊液、 淋巴樣液、細針抽吸物、羊水、任何其它體液、細胞裂解液、細胞的分泌產(chǎn)物、炎癥液、精液和 陰道分泌物。優(yōu)選的樣品可以包括這樣的樣品，其包含可檢測量的任何一種或多種標記如 本文教導(dǎo)的蛋白。在優(yōu)選的實施方式中，樣品可以是全血或其部分成分如，例如，血漿、血 清、或細胞沉淀物。優(yōu)選地，樣品可容易通過微創(chuàng)方法來獲得，從而便于從受試者去除或分 離出所述樣品。樣品還可以包括組織樣品和活檢、組織勻漿液等。優(yōu)選地，用來檢測如本文教導(dǎo)的任何一種或多種標記的水平的樣品是血漿。術(shù)語“血漿”通常指血液的基本上無色 的水樣液體，其不包含細胞，但其中通常懸浮有血細胞(紅細胞、白細胞、凝血細胞等)，并且 包含營養(yǎng)物、糖、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、酶等。此外優(yōu)選地，所述樣品是尿。
當在樣品中檢測或確定所述分子或分析物或分子或分析物的所述組的存在或不 存在和/或量時，在樣品中，“測量”分子或分析物如蛋白、多肽或肽、或兩種或更多種分子或 分析物如兩種或更多種蛋白質(zhì)、多肽或肽的組，優(yōu)選基本上排除其它分子和分析物。
術(shù)語“量”和“水平”在本領(lǐng)域中是同義的并且通常是很好理解的。如本文中所使用 的，上述術(shù)語可以特別指樣品中分子或分析物的絕對量，或樣品中分子或分析物的相對量， 即，相對于另一個值如相對于如本文教導(dǎo)的參比值，或相對于數(shù)值范圍，其指出生物標志物 的基線表達。這些值或范圍可以獲自單個患者或獲自患者組。
樣品中分子或分析物的絕對量可以有利地表示為重量或摩爾量，或更通常表示為 濃度，例如，重量/體積或摩爾/體積。
在樣品中分子或分析物的相對量可以有利地表示為相對于所述另一個值，如相對 于如本文教導(dǎo)的參比值，的增加或減少、或倍數(shù)增加或倍數(shù)減少。在第一和第二參數(shù)(例如， 第一和第二量)之間進行相對比較可以但不需要首先確定所述第一和第二參數(shù)的絕對值。 例如，測量方法可以產(chǎn)生用于所述第一和第二參數(shù)的可量化讀數(shù)(如，例如，信號強度)，其 中所述讀數(shù)是所述參數(shù)的數(shù)值的函數(shù)，并且其中可以直接比較所述讀數(shù)以產(chǎn)生第一參數(shù)與 第二參數(shù)的相對值，而實際上不需要首先將讀數(shù)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)參數(shù)的絕對值。
如本文中所使用的，提及任何一種標記(生物標志物)、核酸、肽、多肽或蛋白對應(yīng) 于在本領(lǐng)域中在各自指定下通常已知的標記、核酸、肽、多肽或蛋白。上述術(shù)語涵蓋任何生 物體尤其在動物中發(fā)現(xiàn)的標記、核酸、蛋白和多肽，優(yōu)選溫血動物，更優(yōu)選脊椎動物，更優(yōu)選 哺乳動物，包括人類和非人類哺乳動物，還更優(yōu)選人類。上述術(shù)語尤其涵蓋具有天然序列的 這樣的標記、核酸、蛋白和多肽，即，其主要序列相同于存在于或源于自然的標記、核酸、蛋 白和多肽的序列。技術(shù)人員明了，由于在物種之間的遺傳趨異，所以在不同物種之間天然序 列可以不同。另外，由于在給定物種內(nèi)的正常的遺傳多樣性(變異)，所以在相同物種的不同 個體之間或內(nèi)，天然序列可以不同。此外，由于轉(zhuǎn)錄后或翻譯后修飾，在相同物種的不同個 體之間或甚至在相同物種的不同個體內(nèi)，天然序列可以不同。本文包括標記、核酸、蛋白和 多肽的任何上述變體或變異體。因此，存在于或源于自然的標記、核酸、蛋白和多肽的所有 序列被認為是“天然的”。上述術(shù)語涵蓋這樣的標記、核酸、蛋白和多肽，其形成活生物體、器 官、組織或細胞的一部分，其形成生物樣品的一部分，以及其至少部分地分離自上述來源。 上述術(shù)語還涵蓋通過重組或合成方式產(chǎn)生的蛋白和多肽。
如本文教導(dǎo)的示例性的人標記、核酸、蛋白或多肽可以是如在NCBI Genbank (http://www.ncb1.nlm.nih.gov/)或 Swissprot/Uniprot (http://www.uniprot.org/) 以下給出的登錄號下所注解的。技術(shù)人員還可以理解，在一些情況下，所述序列可以是如本 文教導(dǎo)的標記、核酸、蛋白或多肽的前體(例如，前體蛋白)并且可以包括處理自成熟分子的 部分。技術(shù)人員可以進一步明了，雖然以下可以列出僅一種或多種變異體，但包括所有變異 體。除非另有規(guī)定，否則以以下形式來提供下述條目名稱(代碼；用于一種或多種代表性 氨基酸序列(例如，變異體)的Genbank登錄號，Genbank序列版本“V.，，)
胰島素樣生長因子-結(jié)合蛋白復(fù)合物酸不穩(wěn)定鏈(ALS ;NP_004961，v.1)。以下再現(xiàn)在NP_004961下注解的序列
MALRKGGLALALLLLSWVALGPRSLEGADPGTPGEAEGPACPAACVCSYDDDADELSVF
CSSRNLTRLPDGVPGGTQALWLDGNNLSSVPPAAFQNLSSLGFLNLQGGQLGSLEPQA
LLGLENLCHLHLERNQLRSLALGTFAHTPALASLGLSNNRLSRLEDGLFEGLGSLWDLNL
GWNSLAVLPDAAFRGLGSLRELVLAGNRLAYLQPALFSGLAELRELDLSRNALRAIKANV
FVQLPRLQKLYLDRNLIAAVAPGAFLGLKALRWLDLSHNRVAGLLEDTFPGLLGLRVLRLS
HNAIASLRPRTFKDLHFLEELQLGHNRIRQLAERSFEGLGQLEVLTLDHNQLQEVKAGAF
LGLTNVAVMNLSGNCLRNLPEQVFRGLGKLHSLHLEGSCLGRIRPHTFTGLSGLRRLFLK
DNGLVGIEEQSLWGLAELLELDLTSNQLTHLPHRLFQGLGKLEYLLLSRNRLAELPADAL
GPLQRAFWLDVSHNRLEALPNSLLAPLGRLRYLSLRNNSLRTFTPQPPGLERLWLEGNP
WDCGCPLKALRDFALQN PSAVPRFVQAICE⑶DCQPPAYTYNN ITCASPPEVVGLDLRD
LSEAHFAPC(SEQ ID NO 33)
包含分解素和金屬蛋白酶域的蛋白12 (ADA12 ；NP_003465, v. 3 ；NP_067673, v. 2)
血管生成素(ANGI；NP_001091046, v.1 ；NP_001136, v.1)
鈣蛋白酶-1催化亞單位(CAN1 ；NP_005177, v. 2)
巨噬細胞集落刺激因子I受體(CSF1R ；NP_005202, V. 2)C-反應(yīng)蛋白(CRP ;NP_000558，V. 2)
絨毛膜生長催乳激素(CSH；NP_001308, V.1 ；NP_066271, v.1 ；NP_072166, v.1 ； NP_072167, v.1)
營養(yǎng)不良蛋白聚糖(DAG1;ΝΡ_001159400，v.1 ；NP_004384, v. 3)
二肽酶 2 (DPEP2 ；NP_071750, v.1)
橋粒芯蛋白-2(DSG2 ；NP_001934, v. 2)
細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)I (ECM1 ；NP_004416, v. 2 ；NP_073155, v. 2)
外核苷酸焦磷酸酶磷酸二酯酶家族成員2 (ENPP2 ；NP_001035181, V.1 ； ΝΡ_001124335, v.1 ；NP_006200, v. 3)
扣針蛋白-1(FBLNl ；NP_001987, v. 2 ；NP_006476, v. 2 ；NP_006477, v. 2 ； NP_006478, v. 2)
原纖蛋白-2(FBN2 ；NP_001990, v. 2)
疑似G 蛋白偶聯(lián)受體 126 (GP126 ；NP_001027566, v.1 ；NP_001027567, v.1 ； NP_065188, v. 4 ；NP_940971, v.1)
肝細胞生長因子樣蛋白(HGFL ；NP_066278, v. 3.)
細胞間粘附分子3 (ICAM3 ；NP_002153, v. 2)
轉(zhuǎn)移抑制因子KiSS-1 (KISS1 ；NP_002247, v. 3)
亮氨酰-胱氨酰氨基肽酶(LCAP；NP_005566, v. 2 ；NP_787116, v. 2)
磷脂酰膽堿-甾醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT ；NP_000220, V.1)
基底膜-特異性硫酸乙酰肝素蛋白聚糖核心蛋白(PGBM ；NP_005520, V. 4)
N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶(PGRP2 ；NP_443122, V. 3)
磷脂酰肌醇-聚糖-特異性磷脂酶D (PHLD ；NP_001494, v. 2 ；NP_803436, v.1)
過氧化物還原酶I (PRDXI ；NP_002565, v.1 ；NP_859047, v.1 ；NP_859048, v.1)
過氧化物還原酶2 (PRDX2 ；NP_005800, V. 3)
受體型酪氨酸蛋白磷酸酶S(PTPRS ；NP_002841,v. 3 ；NP_570924, v. 2 ；NP_570925, v. 2)
回轉(zhuǎn)同系物4 (R0B04 ；NP_061928, v. 4)
蛋白S100-A9 (S10A9 ；NP_002956, v.1)
血清淀粉樣A-4 蛋白(SAA4 ；NP_006503, v.1)
腱生蛋白-X(TENX ；NP_061978, v. 6 ；NP_115859, v. 2)
三葉因子3(TFF3 ；Swissprot/Uniprot (http://www.uniprot.org/)登錄號 Q07654，序列版本I)
血管內(nèi)皮生長因子受體3 (VGFR3 ；NP_002011, v. 2 ；NP_891555, v. 2)
如本文教導(dǎo)的示例性的人的其它標記可以是如在以下給出的登錄號下所注解的。 技術(shù)人員還可以理解，在一些情況下，所述序列可以是標記的前體(例如，前體蛋白)并且可以包括處理自成熟分子的部分。除非另有規(guī)定，否則以以下形式來提供下述條目名稱(代碼；用于一種或多種代表性的氨基酸序列(例如，變異體)的Swissprot/Uniprot登錄號， Swissprot/Uniprot 序列版本 〃ν·")
可溶性fms 樣酪氨酸激酶-1 (sFlt-1, sVEGFR-1 ;P17948，v. 2，變異體 P17948-2)
內(nèi)皮糖蛋白(ENG ；Genbank 登錄號 NP_000109, v.1 ;ΝΡ_001108225，v.1)
胎盤生長因子(PLGF；P49763, v. 2 ；Genbank 登錄號 NP_002623，v. 2)
血管內(nèi)皮生長因子(VEGFA;Ρ15692，ν· 2 ;例如，Genbank 登錄號 ΝΡ_001020537，ν· 2 (VEGFA 變異體 a))。
本文提及任何生物分子，如標記(生物標志物)、肽、多肽或蛋白還可以涵蓋其片段。因此，本文提及測量(或測量的量)任何一種標記或生物分子可以涵蓋測量標記或生物分子，如，例如，測量標記或生物分子的成熟和/或經(jīng)處理的可溶性/分泌形式(例如，血漿循環(huán)形式)，和/或測量其一種或多種片段。
例如，可以共同測量任何標記或生物分子和/或其一種或多種片段，使得測得的量對應(yīng)于共同測得的物種的總量。在另一個實例中，可以各自獨立地測量任何標記或生物分子和/或其一種或多種片段。優(yōu)選地，所述片段可以是血漿循環(huán)(即，非細胞或膜結(jié)合的) 形式。不希望受限于任何理論，這樣的循環(huán)形式可以通過自然處理源自全長標記或生物分子，或可以來自在樣品中發(fā)生的已知的降解過程。在某些情況下，循環(huán)形式還可以是全長標記或生物分子，發(fā)現(xiàn)其在血漿中循環(huán)。因此，所述〃循環(huán)形式〃可以是任何標記或生物分子或任何一種的任何經(jīng)處理的可溶性形式或片段，其在樣品中循環(huán)，即，其并不結(jié)合于所述樣品的細胞或膜部分。
除非根據(jù)上下文另有指明，否則本文提及任何生物分子如標記、肽、多肽或蛋白涵蓋這樣的生物分子，其來自存在于其中的任何生物體，并且特別優(yōu)選來自動物，優(yōu)選溫血動物，更優(yōu)選脊椎動物，甚至優(yōu)選哺乳動物，包括人類和非人類哺乳動物，還更優(yōu)選來自人類。
另外，除非根據(jù)上下文另有指明，否則本文提及任何標記、肽、多肽或蛋白以及其片段還可以通常涵蓋所述標記、肽、多肽或蛋白和片段的修飾形式如承載表達后修飾，其包括，例如，磷酸化、糖基化、脂化、甲基化、半胱氨?；⒒腔?、谷胱苷肽基化、乙酰化、甲硫氨酸氧化成甲硫氨酸亞砜或甲硫氨酸砜等。
在一種實施方式中，任何標記、肽、多肽或片段和其片段，或如本文采用的其它生物標志物和其片段，可以是人源的，即，它們的主要序列可以相同于天然存在的人標記、肽、 多肽或蛋白的相應(yīng)主要序列。因此，在這方面，修飾語〃人〃涉及各自的標記、肽、多肽、蛋白質(zhì)或片段的主要序列，而不涉及它們的起源或來源。例如，這樣的標記、肽、多肽、蛋白質(zhì)或片段可以存在于人受試者的樣品中或分離自人受試者的樣品，或可以通過其它方式(例如， 通過重組表達、無細胞翻譯或非生物肽合成)來獲得。
術(shù)語蛋白、多肽或肽的“片段”通常是指所述蛋白、多肽或肽的N端和/或C端缺失或截短形式。所述術(shù)語涵蓋通過任何機制產(chǎn)生的片段，如但不限于，通過所述肽、多肽或蛋白的可變翻譯、外和/或內(nèi)切蛋白酶解和/或降解，如，例如，體內(nèi)或體外，如，例如，通過通過物理、化學(xué)和/或酶蛋白水解。非限制性地，蛋白、多肽或肽的片段可以是所述蛋白、多肽或肽的氨基酸序列的至少約5%、或至少約10%，例如，彡20%、彡30%或彡40%,如彡50%,例如彡60%、彡70%或彡80%,或甚至彡90%或彡95%。
例如，片段可以包括相應(yīng)全長蛋白的> 5個連續(xù)氨基酸的序列，或> 10個連續(xù)氨基酸，或> 20個連續(xù)氨基酸，或> 30個連續(xù)氨基酸，例如，^ 40個連續(xù)氨基酸，如例如> 50 個連續(xù)氨基酸，例如，彡60、彡70、彡80、彡90、彡100、彡200、彡300、彡400、彡500或彡600個連續(xù)氨基酸。
在一種實施方式中，與相應(yīng)的成熟、全長蛋白或它的可溶性或血漿循環(huán)形式相比， 片段可以是N端和/或C端截短I至約20個氨基酸，如，例如，I至約15個氨基酸，或I至約10個氨基酸，或I至約5個氨基酸。
在一種實施方式中，可以通過所述蛋白、多肽或肽的體外蛋白水解來獲得給定蛋白、多肽或肽的片段，以從樣品有利地獲得可檢測的一種或多種肽。例如，可以通過適宜的物理、化學(xué)和/或酶劑來實現(xiàn)這樣的蛋白水解，例如，蛋白酶，優(yōu)選內(nèi)蛋白酶，即，在蛋白、多肽或肽鏈內(nèi)內(nèi)部剪切的蛋白酶。適宜的內(nèi)蛋白酶的非限制性清單包括絲氨酸蛋白酶(EC 3.4. 21)、蘇氨酸蛋白酶(EC 3.4. 25)、半胱氨酸蛋白酶(EC 3. 4. 22)、天冬氨酸蛋白酶(EC 3. 4. 23)、金屬蛋白酶(EC 3. 4. 24)和谷氨酸蛋白酶。示例性的非限制性的內(nèi)蛋白酶包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、彈性蛋白酶、產(chǎn)酶溶桿菌內(nèi)蛋白酶Lys-C、金黃色葡萄球菌內(nèi)蛋白酶 Glu-C (內(nèi)肽酶V8)或溶組織梭菌內(nèi)蛋白酶Arg-C (梭菌蛋白酶)?？梢允褂昧硗庖阎幕蛏形幢蛔R別的酶；技術(shù)人員可以基于它們的剪切特異性和頻率來選擇適宜的一種或多種蛋白酶以獲得所期望的肽形式。優(yōu)選地，可以通過胰蛋白酶類型(EC 3. 4. 21. 4)的內(nèi)肽酶來實現(xiàn)蛋白水解，優(yōu)選胰蛋白酶，如但不限于來自牛胰腺、人胰腺、豬胰腺、重組胰蛋白酶、Lys-乙?；鹊鞍酌?、溶液中的胰蛋白酶、固定于載體的胰蛋白酶等的胰蛋白酶的制劑。胰蛋白酶是特別有用的，特別是由于剪切的高特異性和效率。本發(fā)明還設(shè)想使用任何胰蛋白酶樣蛋白酶，即，具有和胰蛋白酶類似的特異性。另外，化學(xué)試劑可以用于蛋白水解。例如，CNBr可以在Met處剪切；BNPS-糞臭素可以在Trp處剪切。基于所采用的酶或化學(xué)試劑，技術(shù)人員可以確定用于處理的條件，例如，蛋白濃度、酶或化學(xué)試劑濃度、pH、緩沖劑、溫度、時間。
因此還提供了任何一種選自由如上文定義的ALS、ADAl2、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、 CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLN1、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、 PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的標記、肽、多肽或蛋白的分離片段。這樣的片段可以給出關(guān)于在生物樣品中所述標記、肽、多肽或蛋白的存在和量的有用信息，借此，所述片段的檢測是有益的。因此，本文披露的所述標記、肽、多肽或蛋白的片段是有用的生物標志物。
優(yōu)選的片段可以包含、基本上由或由如在表I列出的SEQ ID NO:1至32中闡述的序列組成，其在實施例中用來提供關(guān)于各自標記的信息。
表I
權(quán)利要求
1.胰島素樣生長因子-結(jié)合蛋白復(fù)合物酸不穩(wěn)定鏈(ALS)、包含分解素和金屬蛋白酶域的蛋白12(ADA12)、血管生成素(ANGI)、鈣蛋白酶-1催化亞單位(CAN1)、巨噬細胞集落刺激因子I受體(CSF1R)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、絨毛膜生長催乳激素(CSH)、營養(yǎng)不良蛋白聚糖(DAG1)、二肽酶2(DPEP2)、橋粒芯蛋白_2 (DSG2)、細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)I (ECM1)、外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員2 (ENPP2)、扣針蛋白-1 (FBLNl )、原纖蛋白-2 (FBN2)、疑似G蛋白偶聯(lián)受體126 (GP126)、肝細胞生長因子樣蛋白(HGFL)、細胞間粘附分子3 (ICAM3)、轉(zhuǎn)移抑制基因KiSS-1 (KISS1)、亮氨酰-胱氨酰氨基肽酶(LCAP)、磷脂酰膽堿-留醇?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)、基底膜-特異性硫酸乙酰肝素蛋白聚糖核心蛋白(PGBM)、N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶(PGRP2)、磷脂酰肌醇-聚糖-特異性磷脂酶D (PHLD)、過氧化物還原酶I (PRDXl)、過氧化物還原酶2 (PRDX2)、受體型酪氨酸蛋白磷酸酶S (PTPRS)、回旋同系物 4 (R0B04)、蛋白 S100-A9 (S10A9)、血清淀粉樣 A-4 蛋白(SAA4)、腱生蛋白-X (TENX)、三葉因子3 (TFF3)、血管內(nèi)皮生長因子受體3 (VGFR3)中的任何一種或多種作為生物標志物，優(yōu)選作為用于妊娠的高血壓疾病的生物標志物的應(yīng)用。
2.ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS,R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3中的任何一種或多種用于妊娠的高血壓疾病的診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測的應(yīng)用。
3.一種用于在受試者中診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測妊娠的高血壓疾病的方法，其中，所述方法的檢查階段包括在來自所述受試者的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSFIR、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLN1、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組中的任何一種或多種標記的量。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，用于在所述受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后妊娠的高血壓疾病，所述方法包括(i)在來自所述受試者的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的任何一種或多種標記的量；(ii )使在(i )中測得的一種或多種標記的量與所述一種或多種標記的量的參比值進行比較，所述參比值表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(iii)發(fā)現(xiàn)在(i)中測得的一種或多種標記的量與所述參比值的偏差或沒有偏差；以及(iv)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在所述受試者中妊娠的高血壓疾病的特定的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，用于在所述受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后妊娠的高血壓疾病，所述方法包括(i)在來自所述受試者的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的任何兩種或更多種標記的量；(ii)利用(i)的測量結(jié)果來建立所述兩種或更多種標記的量的受試者分布；(iii)比較(ii)的所述受試者分布與所述兩種或更多種標記的量的參比分布，所述參比分布表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(iv)發(fā)現(xiàn)(ii)的所述受試者分布與所述參比分布的偏差或沒有偏差；以及(v)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于妊娠的高血壓疾病的特定診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，用于監(jiān)測妊娠的高血壓疾病，所述方法包括(i)在來自受試者的來自兩個或更多個連續(xù)時間點的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組中的任何一種或多種標記的量；(ii)在如在(i)中測得的樣品之間比較所述一種或多種標記的量；(iii)在如在(ii)中比較的樣品之間發(fā)現(xiàn)所述一種或多種標記的量的偏差或沒有偏差；以及(iv)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于妊娠的高血壓疾病的變化或歸因于在所述兩個或更多個連續(xù)時間點之間在所述受試者中發(fā)展妊娠的高血壓疾病的可能性的變化。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，用于監(jiān)測妊娠的高血壓疾病，所述方法包括(i)在來自受試者的來自兩個或更多個連續(xù)時間點的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組中的任何兩種或更多種標記的量；(ii)利用(i)的測量結(jié)果來建立在所述兩個或更多個連續(xù)時間點處所述兩種或更多種標記的量的受試者分布；(iii)比較如在(ii)中建立的所述受試者分布；(iv)在如在(iii)中比較的所述受試者分布之間發(fā)現(xiàn)偏差或沒有偏差；以及(V)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于妊娠的高血壓疾病的變化或歸因于在所述兩個或更多個連續(xù)時間點之間在所述受試者中發(fā)展妊娠的高血壓疾病的可能性的變化。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，用于在所述受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后妊娠的高血壓疾病，所述方法包括(i )在來自所述受試者并來自第一時間點的樣品中測量選自由ALS、ADA 12、ANG1、CANl、CSFIR、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLN1、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組中的任何一種或多種標記的量；(ii)在來自所述受試者并來自連續(xù)的第二時間點的樣品中測量所述一種或多種標記的量；(iii)計算如在(i)和(ii)中測得的所述一種或多種標記的量之間的差異；(iv)比較如在(iii)中計算的所述差異與在所述第一時間點和第二時間點的所述一種或多種標記的量之間的差異的參比值，所述參比值表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(v)發(fā)現(xiàn)如在(iii)中計算的所述差異與所述參比值的偏差或沒有偏差；以及(iv)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在所述受試者中妊娠的高血壓疾病的特定診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，用于在所述受試者中診斷、預(yù)測和/或預(yù)后妊娠的高血壓疾病，所述方法包括(i )在來自所述受試者并來自第一時間點的樣品中測量選自由ALS、ADA 12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組中的任何兩種或更多種標記的量；(ii)利用(i)的測量結(jié)果來建立在所述第一時間點處所述兩種或更多種標記的量的受試者分布；(iii)在來自所述受試者并來自連續(xù)的第二時間點的樣品中測量所述兩種或更多種標記的量；(iv)利用(iii)的測量結(jié)果來建立在所述第二時間點處所述兩種或更多種標記的量的受試者分布；(V)計算如在(ii)和(iv)中建立的所述受試者分布之間的差異；(Vi)比較如在(V)中計算的所述差異與在所述第一時間點和第二時間點處的所述兩種或更多種標記的量之間的差異的參比分布，所述參比分布表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(Vii)發(fā)現(xiàn)如在(V)中計算的所述差異與所述參比分布的偏差或沒有偏差；以及(Viii)將偏差或沒有偏差的所述發(fā)現(xiàn)歸因于在所述受試者中妊娠的高血壓疾病的特定診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
10.一種用來確定受試者是否(例如，仍然、或不再)需要妊娠的高血壓疾病的治療性或預(yù)防性治療的方法，所述方法包括(i)在來自所述受試者的樣品中測量選自由ALS、ADAl2、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的任何一種或多種標記的量；(ii )將在(i )中測得的所述一種或多種標記的量與所述一種或多種標記的量的參比值進行比較，所述參比值表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(iii)發(fā)現(xiàn)在(i)中測得的所述一種或多種標記的量與所述參比值的偏差或沒有偏差；以及(iv)根據(jù)所述發(fā)現(xiàn)，推斷是否需要妊娠的高血壓疾病的治療性或預(yù)防性治療。
11.一種用來確定受試者是否(例如，仍然、或不再)需要妊娠的高血壓疾病的治療性或預(yù)防性治療的方法，所述方法包括(i)在來自所述受試者的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的任何兩種或更多種標記的量；(ii)利用(i)的測量結(jié)果來建立所述兩種或更多種標記的量的受試者分布；(iii)比較(ii)的所述受試者分布與所述兩種或更多種標記的量的參比分布，所述參比分布表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后；(iv)發(fā)現(xiàn)(ii)的所述受試者分布與所述參比分布的偏差或沒有偏差；以及(V)根據(jù)所述發(fā)現(xiàn)，推斷是否需要妊娠的高血壓疾病的治療性或預(yù)防性治療。
12.根據(jù)權(quán)利要求10或11中任一項所述的方法，其中，用于妊娠的高血壓疾病的療法選自抗高血壓治療、流產(chǎn)和分娩。
13.根據(jù)權(quán)利要求3至12中任一項所述的方法，其中，所述受試者尚未遭受臨床上明顯的妊娠的高血壓疾病，并且由此預(yù)測所述受試者將發(fā)展臨床上明顯的妊娠的高血壓疾病的可能性、機會或風(fēng)險。
14.根據(jù)權(quán)利要求3至13中任一項所述的方法，由此預(yù)測發(fā)作的孕齡或產(chǎn)后年齡和/或到妊娠的高血壓疾病的發(fā)作的剩余時間。
15.根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項所述的主題，其中，所述妊娠的高血壓疾病是先兆子癇(PE)。
16.根據(jù)權(quán)利要求3至15中任一項所述的方法，其中，所述檢查階段還包括測量可用于妊娠的高血壓疾病的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中，所述其它生物標志物選自由可溶性fms樣酪氨酸激酶-1 (sFlt-1，sVEGFR-1)、內(nèi)皮糖蛋白、胎盤生長因子和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)組成的組。
18.根據(jù)權(quán)利要求3至17中任一項所述的方法，還包括在所述受試者中確定HDP的一種或多種危險因子的存在或不存在和/或水平，優(yōu)選地其中所述危險因子選自未經(jīng)產(chǎn)、多次妊娠、在妊娠之間延長的時間間隔、在以前的妊娠中HDP或PE的歷史或者HDP或PE的家族史、極端的年齡(〈20歲和>40歲)、肥胖、慢性高血壓、慢性腎病、偏頭痛、頭痛、(妊娠)糖尿病、多囊卵巢綜合征、自身免疫病如狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)節(jié)病或MS、血管或結(jié)締組織疾病、維生素D缺乏、抗磷脂抗體綜合征或遺傳性易栓癥、以前的伴侶患有HDP或PE的男性伴侶、胎兒水腫和不明原因的胎兒宮內(nèi)生長受限。
19.根據(jù)權(quán)利要求3至18中任一項所述的方法，其中，利用能夠特異性地結(jié)合于各自的生物標志物和/或其片段的結(jié)合劑來測量任何一種或多種標記的量和/或所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量，所述一種或多種標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSULCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組。
20.根據(jù)權(quán)利要求3至19中任一項所述的方法，其中，利用免疫測定技術(shù)、或利用質(zhì)譜分析法、或利用色譜法、或使用所述方法的組合，來測量任何一種或多種標記的量和/或所述一種或多種其它生物標志物的存在或不存在和/或量，所述一種或多種標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組。
21.—種試劑盒，包括(i)用于在來自所述受試者的樣品中測量任何一種或多種標記的量的裝置，所述標記選自由 ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL,ICAM3、KISS1、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組；以及可選地和優(yōu)選地(ii )所述一種或多種標記的量的參比值或用于建立所述參比值的裝置，其中所述參比值表示妊娠的高血壓疾病的已知的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后。
22.—種蛋白、多肽或肽陣列或微陣列，包括(a)選自由ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSU LCAP,LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3 組成的組中的任何一種或多種標記和/或其片段，優(yōu)選已知量或濃度的所述一種或多種標記和/或其片段；以及(b)可選地和優(yōu)選地，可用于妊娠的高血壓疾病的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的一種或多種其它生物標志物，優(yōu)選已知量或濃度的一種或多種其它生物標志物。
23.—種結(jié)合劑陣列或微陣列，包括(a)能夠特異性地結(jié)合于任何一種或多種標記和/或其片段的一種或多種結(jié)合劑，優(yōu)選已知量或濃度的所述結(jié)合劑，所述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CANl、CSF1R、CRP、CSH、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL, ICAM3、KISSl、LCAP, LCAT, PGBM、PGRP2、PHLD, PRDXl、PRDX2、PTPRS, R0B04、S10A9、SAA4、TENX, TFF3、VGFR3組成的組；以及(b)可選地和優(yōu)選地，能夠特異性地結(jié)合于一種或多種可用于妊娠的高血壓疾病的診斷、預(yù)測和/或預(yù)后的其它生物標志物的一種或多種結(jié)合劑，優(yōu)選已知量或濃度的所述結(jié)合劑。
24.一種測試裝置，能夠在來自受試者的樣品中測量選自由ALS、ADA12、ANGI, CANUCSF1R、CRP、CSH、DAGl、DPEP2、DSG2、ECMl、ENPP2、FBLNl、FBN2、GP126、HGFL、ICAM3、KISSl、LCAP、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、SAA4、TENX、TFF3、VGFR3組成的組中的任何一種或多種標記和/或其片段的量，所述測試裝置包括(i)用于從所述受試者獲得樣品的裝置，(ii)用于在所述樣品中測量所述一種或多種標記和/或片段的量的裝置，以及(iii)用于可視化在所述樣品中測得的所述一種或多種標記和/或片段的量的裝置。
25.根據(jù)權(quán)利要求1至24中任一項所述的主題，其中，所述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLN1、FBN2、GP126、ICAM3、KISS1、LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDXl、PTPRS、R0B04、S10A9、TENX、TFF3 組成的組。
26.根據(jù)權(quán)利要求1至24中任一項所述的主題，其中，所述標記選自由ALS、ADA12、ANG1、CAN1、CSF1R、CRP、DAG1、DPEP2、DSG2、ECM1、ENPP2、FBLN1、FBN2、GP126、ICAM3、KISS1、LCAP, LCAT、PGBM、PGRP2、PHLD、PRDX1、PRDX2、PTPRS、R0B04、S10A9、TENX、TFF3 組成的組。
全文摘要
本申請披露了用于妊娠的高血壓疾病、尤其是先兆子癇的新的生物標志物；基于測量所述生物標志物來診斷、預(yù)測、預(yù)后和/或監(jiān)測所述疾病的方法；以及用于測量所述生物標志物和/或進行所述方法的試劑盒和裝置。
文檔編號G01N33/68GK103038645SQ201180019135
公開日2013年4月10日 申請日期2011年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月13日
發(fā)明者科恩·卡斯 申請人:普羅諾塔股份有限公司