專利名稱：：一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于生物燃料領(lǐng)域，涉及一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法。
背景技術(shù)：
：隨著科技的發(fā)展，人類對能源的依賴程度越來越高，這與日益枯竭的化石能源儲(chǔ)備形成了尖銳的矛盾。此外，能源的快速消耗也造成了環(huán)境的破壞，大量溫室氣體，如二氧化碳的排放使得溫室效應(yīng)日趨嚴(yán)重。開發(fā)可持續(xù)發(fā)展的綠色新能源為這一系列的問題提供了解決之道，并引起了廣泛關(guān)注。其中以富油生物質(zhì)為原料，提取脂肪酸甲酯混合物，即生物柴油為能源的開發(fā)提供了廣闊的前景。尤其是微藻，因?yàn)榫哂胁徽加酶?，生長快速，容易培養(yǎng)，含有量高，品種豐富等特點(diǎn)，在生物柴油領(lǐng)域受到了越來越多的關(guān)注。國際發(fā)明專利公開號W02008/151373公開了一種優(yōu)質(zhì)供應(yīng)藻類養(yǎng)殖及生物柴油的方法和裝置。中國專利公開號CN101368193A公開了一種微藻培養(yǎng)聯(lián)合生物柴油制備的生產(chǎn)方法，獲得了熱值高達(dá)42MJ·Kg—1生物柴油。中國專利公開號CN101649332A公開了一種以藻類為原料，通過萃取，酯交換，靜置分層及蒸餾手段獲得生物柴油的方法。但是，以上專利對藻類在不同裝置不同培養(yǎng)條件下產(chǎn)油能力的評價(jià)不清晰，也不一致，難以進(jìn)行橫向比較。十六烷值作為表征生物柴油自燃性的指標(biāo)，是國際上公認(rèn)的生物柴油質(zhì)量的重要評估指標(biāo)，但是十六烷值的檢測實(shí)際操作復(fù)雜，且相關(guān)設(shè)備造價(jià)昂貴，普及性不強(qiáng)。KrisnangkuraK在1986年提出柴油的十六烷值與皂化值及碘值有線性相關(guān)性，并給出相關(guān)公式(KrisnangkuraK.1986.Asimplemethodforestimationofcetaneindexofvegetableoilmethylesters.JournaloftheAmericanOilChemists'Society63(4):552-553.)。而且大量研究表明生物柴油的十六烷值，皂化值及碘值與其中各個(gè)不同脂肪酸甲酯的含量及組成密切相關(guān)(AzamMM,WarisA，NaharNM.2005.Prospectsandpotentialoffattyacidmethylestersofsomenon-traditionalseedoilsforuseasbiodieselinIndia.Biomass&Bioenergy29(4):293_302·)，并建立了相應(yīng)的經(jīng)驗(yàn)公式。本發(fā)明將其引入評定指標(biāo)中，從而可以輕易實(shí)現(xiàn)不同培養(yǎng)條件下不同藻種的產(chǎn)油能力的比較，從而為最優(yōu)藻種的選擇和培養(yǎng)方法的優(yōu)化提供依據(jù)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，包括如下步驟(1)細(xì)胞收集及淬滅取出已培養(yǎng)好的藻液樣品3-5份，每份100-150mL，4°C下3000-5000rpm，離心3-4min,收集下層的細(xì)胞，用3_5mL代謝終止液在-40°C下淬滅5_10分鐘，終止代謝反應(yīng)，在-80°C下冷凍干燥4-6h獲得凍干細(xì)胞；所述代謝終止液為含有1500mg·L4NaNO3Jemg·I^1CaCl2·2H20，75mg·L-1MgSO4·7H20和40mg·L^K2HPO4·3H20的甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇和水的體積比為12;(2)提取細(xì)胞內(nèi)脂肪酸取步驟(1)獲得的凍干細(xì)胞15-25mg分別置于離心管中，每管加入0.75-1.5mL氯仿及0.3-0.6mL超純水，IOOrpm震蕩Ih；再加入2_4mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；向殘?jiān)屑尤?-4mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；反復(fù)提取3次，將氯仿相合并，再加入0.5-lmLIMKCl水溶液，震蕩，3000-4000rpm，離心3-5min,棄水相，再加入l_2mL超純水，震蕩，3000-4000rpm，離心3_5min，棄水相，30-35°C真空干燥得干物質(zhì)；所述脂肪提取液為體積百分含量為66.7%的氯仿甲醇溶液，所述氯仿甲醇溶液含有質(zhì)量百分比為0.的二丁基羥基甲苯；(3)脂肪酸甲酯化將所述干物質(zhì)溶于600-1000μL質(zhì)量百分比為14%的三氟化硼-甲醇溶液中，加入IOIOyg十七烷酸做為內(nèi)標(biāo)，置于15mL密封管內(nèi)，在100°C水浴20-30min，溫度降至室溫，加入500-1000μ1正己烷震蕩萃取30s，4000-5000rpm離心2min，得到正己烷相；取100-200μL正己烷相放入已編號的GC進(jìn)樣瓶；(4)GC-MS檢測采用GC-MS對正己烷相中的脂肪酸甲酯進(jìn)行定性和定量處理，條件如下色譜柱DB-5氣相色譜柱，其規(guī)格為30m*0.25mm,0.25μm；進(jìn)樣量lyL;分流比101；進(jìn)樣口溫度280°C;GCinterface溫度270°C；氦氣流速恒壓，9IKPa；升溫程序70°C保持2min，以8°C-min"1的速度升到290°C，并在290°C保持6min；電離電壓70eV;源溫250°C；掃描范圍50-800m/z；掃描速度:2scan·；從而獲得了脂肪酸甲酯混合物中的單個(gè)脂肪酸甲酯的含量；(5)計(jì)算日產(chǎn)量根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的日產(chǎn)量P=Effi/Day/CV其中P是微藻脂肪酸甲酯日產(chǎn)量，Wi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的重量，Day是步驟(1)所述從微藻接種到微藻收獲的時(shí)間長度，CV是步驟(1)所述收獲時(shí)微藻培養(yǎng)液的體積；(6)十六烷值確定根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的十六烷值SN=E(560XPi)/MWiaINΣ(254XDXPi)/MWibCN=46.3+5458/SN-O.225XINc其中SN是皂化值；IN是碘值；CN是十六烷值；Pi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的干重百分比，MWi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的分子量，D是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的雙鍵數(shù)量。所述的微藻涉及但不限于小球藻(Chlorellasorokiniana)、柵藻(Scenedesmusobliquus)、集胞藻(Synechocystissp.PCC6803)及魚腥藻(Anabaenasp.PCC7120)。本發(fā)明提供了一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，這種方法能為比較不同培養(yǎng)體系下不同藻種產(chǎn)油能力提供標(biāo)準(zhǔn)，從而為最優(yōu)的藻種選擇和培養(yǎng)工藝優(yōu)化提供依據(jù)。圖1為小球藻不同接種密度培養(yǎng)下0D560達(dá)到1.5時(shí)的脂肪酸甲酯日產(chǎn)量變化；圖2為小球藻不同接種密度培養(yǎng)下0D560達(dá)到1.5時(shí)的脂肪酸甲酯十六烷值變化。具體實(shí)施例方式下面的實(shí)施例可以使本領(lǐng)域技術(shù)人員更全面的理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明實(shí)施例1一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，包括如下步驟(1)小球藻(Chlorellasorokiniana)細(xì)胞收集及淬滅對小球藻(Chlorellasorokiniana)進(jìn)行不同接種密度的培養(yǎng)，初始接種密度分別設(shè)置為IX104，IX105，IXIO6及IXlO7ceIls·πιΛ在細(xì)胞培養(yǎng)至0D560為1.5，每個(gè)接種密度的微藻分別取出5份藻液樣品，每份lOOmL，4°C下3000rpm，離心3min，收集下層的細(xì)胞，用4mL代謝終止液在-40°C下淬滅5分鐘，終止代謝反應(yīng)，在-80°C下冷凍干燥4h獲得凍干細(xì)胞；所述代謝終止液為含有1500mg·L4NaNO3Jemg·I^1CaCl2·2H20，75mg·L-1MgSO4·7H20和40mg·L^K2HPO4·3H20的甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇和水的體積比為12;(2)提取細(xì)胞內(nèi)脂肪酸取步驟(1)獲得的不同接種密度的凍干細(xì)胞各5份，每份15mg分別置于離心管中，每管加入0.75mL氯仿及0.3mL超純水，IOOrpm震蕩Ih；再加入2mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；向殘?jiān)屑尤?mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；反復(fù)提取3次，將氯仿相合并，再加入0.5mLIMKCl水溶液，震蕩，3000rpm,離心3min，棄水相，再加入ImL超純水，震蕩，3000rpm，離心3min，棄水相，30°C真空干燥得干物質(zhì)；所述脂肪提取液為體積百分含量為66.7%的氯仿甲醇溶液，所述氯仿甲醇溶液含有質(zhì)量百分比為0.的二丁基羥基甲苯；(3)脂肪酸甲酯化將所述干物質(zhì)溶于600μL質(zhì)量百分比為14%的三氟化硼-甲醇溶液中，加入10μg十七烷酸做為內(nèi)標(biāo)，置于15mL密封管內(nèi)，在100°C水浴20min，溫度降至室溫，加入600μ1正己烷震蕩萃取30s，4000rpm離心2min，得到正己烷相；取100μL正己烷相放入已編號的GC進(jìn)樣瓶；(4)GC-MS檢測采用GC-MS對正己烷相中的脂肪酸甲酯進(jìn)行定性和定量處理，條件如下色譜柱DB-5氣相色譜柱，其規(guī)格為30m*0.25mm,0.25μm；進(jìn)樣量lyL;分流比101；進(jìn)樣口溫度280°C;GCinterface溫度270°C；氦氣流速恒壓，9IKPa；升溫程序70°C保持2min，以8°C-min"1的速度升到290°C，并在290°C保持6min；電離電壓70eV;源溫250°C；掃描范圍50-800m/z；掃描速度2scan·；從而獲得了脂肪酸甲酯混合物中的單個(gè)脂肪酸甲酯的含量；(5)日產(chǎn)量根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的日產(chǎn)量P=Effi/Day/CV其中P是微藻脂肪酸甲酯日產(chǎn)量，Wi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的重量，Day是步驟(1)所述從微藻接種到微藻收獲的時(shí)間長度，CV是步驟(1)所述收獲時(shí)微藻培養(yǎng)液的體積；(6)十六烷值確定根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的十六烷值SN=E(560XPi)/MWiaINΣ(254XDXPi)/MWibCN=46.3+5458/SN-O.225XINc其中SN是皂化值；IN是碘值；CN是十六烷值；Pi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的干重百分比，MWi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的分子量，D是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的雙鍵數(shù)量。如圖1所示，隨著接種密度的增加，小球藻在0D560為1.5時(shí)的油產(chǎn)量不斷增加，尤其是接種密度為IO7ceIls.mL-1時(shí)，小球藻中的脂肪酸甲酯日產(chǎn)量比IO4ceIls.mL-1時(shí)提高了64.5%。由圖3可以看出當(dāng)接種密度達(dá)到IO5ceIls·mL-1后，小球藻所得生物柴油的十六烷值隨著接種密度的增加不斷提高，當(dāng)接種密度達(dá)到IO7ceIls^mr1后，其十六烷值比其他接種密度培養(yǎng)條件下起碼提高了8.6%。綜上所述，接種密度對小球藻產(chǎn)油能力有顯著的影響，且在本培養(yǎng)體系下，接種密度為1XIO4,1XIO5,1XIO6及1XIO7Cells-πιΓ1的范圍內(nèi)，接種密度越高，小球藻的產(chǎn)油能力越強(qiáng)。實(shí)施例2一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，包括如下步驟(1)小球藻(Chlorellasorokiniana)細(xì)胞收集及淬滅對小球藻(Chlorellasorokiniana)進(jìn)行不同接種密度的培養(yǎng)，初始接種密度分別設(shè)置為IX104，IX105，IXIO6及IXlO7ceIls·πιΛ在細(xì)胞培養(yǎng)至0D560為1.0，每個(gè)接種密度培養(yǎng)下的藻液取出4份樣品，每份120mL，4°C下5000rpm，離心3min，收集下層的細(xì)胞，用3mL代謝終止液在-40°C下淬滅7分鐘，終止代謝反應(yīng)，在-80°C下冷凍干燥6h獲得凍干細(xì)胞；代謝終止液同實(shí)施例1；(2)提取細(xì)胞內(nèi)脂肪酸取步驟(1)獲得的凍干細(xì)胞各4份，每份25mg分別置于離心管中，每管加入1.5mL氯仿及0.6mL超純水，IOOrpm震蕩Ih；再加入4mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；向殘?jiān)屑尤?mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；反復(fù)提取3次，將氯仿相合并，再加入ImLIMKCl水溶液，震蕩，4000rpm，離心5min，棄水相，再加入2mL超純水，震蕩，4000rpm，離心5min，棄水相，35°C真空干燥得干物質(zhì)；脂肪提取液同實(shí)施例1；(3)脂肪酸甲酯化將所述干物質(zhì)溶于IOOOyL質(zhì)量百分比為14%的三氟化硼-甲醇溶液中，加入20Ug十七烷酸做為內(nèi)標(biāo)，置于15mL密封管內(nèi)，在100°C水浴30min，溫度降至室溫，加入1000μ1正己烷震蕩萃取30s，5000rpm離心2min，得到正己烷相；取150μL正己烷相放入已編號的GC進(jìn)樣瓶；(4)GC-MS檢測采用GC-MS對正己烷相中的脂肪酸甲酯進(jìn)行定性和定量處理，條件同實(shí)施例1，從而獲得了脂肪酸甲酯混合物中的單個(gè)脂肪酸甲酯的含量；(5)日產(chǎn)量根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的日產(chǎn)量P=Effi/Day/CV其中P是微藻脂肪酸甲酯日產(chǎn)量，Wi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的重量，Day是步驟(1)所述從微藻接種到微藻收獲的時(shí)間長度，CV是步驟(1)所述收獲時(shí)微藻培養(yǎng)液的體積；(6)十六烷值確定根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的十六烷值SN=E(560XPi)/MWiaINΣ(254XDXPi)/MWibCN=46.3+5458/SN-O.225XINc其中SN是皂化值；IN是碘值；CN是十六烷值；Pi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的干重百分比，MWi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的分子量，D是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的雙鍵數(shù)量。通過實(shí)驗(yàn)證明，結(jié)果與實(shí)施例1相似。實(shí)施例3一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，包括如下步驟(1)小球藻(Chlorellasorokiniana)細(xì)胞收集及淬滅對小球藻(Chlorellasorokiniana)進(jìn)行不同接種密度的培養(yǎng)，初始接種密度分別設(shè)置為1XIO4,1XIO5,1XIO6及1XIO7Cells·mL—1，在細(xì)胞培養(yǎng)至0D560為0.5，每個(gè)接種密度培養(yǎng)下的藻液各取出3份樣品，每份150mL，4°C下3000rpm，離心4min，收集下層的細(xì)胞，用5mL代謝終止液在_40°C下淬滅10分鐘，終止代謝反應(yīng)，在_80°C下冷凍干燥6h獲得凍干細(xì)胞；代謝終止液同實(shí)施例1；(2)提取細(xì)胞內(nèi)脂肪酸取步驟(1)獲得的凍干細(xì)胞各3份，每份20mg分別置于離心管中，每管加入ImL氯仿及0.4mL超純水，IOOrpm震蕩Ih；再加入3mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；向殘?jiān)屑尤?mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；反復(fù)提取3次，將氯仿相合并，再加入0.75mLIMKCl水溶液，震蕩，3000rpm，離心3min，棄水相，再加入1.5mL超純水，震蕩，3000rpm，離心3min，棄水相，35°C真空干燥得干物質(zhì)；脂肪提取液同實(shí)施例1；(3)脂肪酸甲酯化將所述干物質(zhì)溶于600μL質(zhì)量百分比為14%的三氟化硼-甲醇溶液中，加入20yg十七烷酸做為內(nèi)標(biāo)，置于15mL密封管內(nèi)，在100°C水浴20min，溫度降至室溫，加入600μ1正己烷震蕩萃取30s，4000rpm離心2min，得到正己烷相；取200μL正己烷相放入已編號的GC進(jìn)樣瓶；(4)GC-MS檢測采用GC-MS對正己烷相中的脂肪酸甲酯進(jìn)行定性和定量處理，條件同實(shí)施例1，從而獲得了脂肪酸甲酯混合物中的單個(gè)脂肪酸甲酯的含量；(5)日產(chǎn)量根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的日產(chǎn)量P=Effi/Day/CV其中P是微藻脂肪酸甲酯日產(chǎn)量，Wi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的重量，Day是步驟(1)所述從微藻接種到微藻收獲的時(shí)間長度，CV是步驟(1)所述收獲時(shí)微藻培養(yǎng)液的體積；(6)十六烷值確定根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的十六烷值SN=E(560XPi)/MWiaINΣ(254XDXPi)/MWibCN=46.3+5458/SN-O.225XINc其中SN是皂化值；IN是碘值；CN是十六烷值；Pi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的干重百分比，MWi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的分子量，D是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的雙鍵數(shù)量。通過實(shí)驗(yàn)證明，結(jié)果與實(shí)施例1相似。本發(fā)明所采用的小球藻(Chlorellasorokiniana)只用于說明本發(fā)明，但并不用于限定本發(fā)明，實(shí)驗(yàn)證明，柵藻(Scenedesmusobliquus)、集胞藻(Synechocystissp.PCC6803)及魚腥藻(Anabaenasp.PCC7120)也可以用于本發(fā)明。權(quán)利要求1.一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，其特征是包括如下步驟(1)微藻細(xì)胞收集及淬滅取出已培養(yǎng)好的藻液樣品3-5份，每份100-150mL，4°C下3000-5000rpm，離心3_4min，收集下層的細(xì)胞，用3-5mL代謝終止液，在_40°C下淬滅5_10分鐘，終止代謝反應(yīng)，在_80°C下冷凍干燥4-6h獲得凍干細(xì)胞；所述代謝終止液為含有1500mg·L^1NaNO3,36mg·L^1CaCl2·2H20，75mg·L4MgSO4·7H20和40mg·L-1K2HPO4·3H20的甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇和水的體積比為1:2;(2)提取細(xì)胞內(nèi)脂肪酸從3-5份步驟(1)獲得的凍干細(xì)胞中各取15-25mg分別置于離心管中，每管加入0.75-1.5mL氯仿及0.3-0.6mL超純水，IOOrpm震蕩Ih；再加入2_4mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；向殘?jiān)屑尤?_4mL脂肪提取液，室溫下以IOOrpm震蕩0.5h，收集氯仿相；反復(fù)提取3次，將氯仿相合并，向其中加入0.5-lmLIMKCl水溶液，震蕩，3000-4000rpm，離心3_5min，棄水相，再加入l_2mL超純水，震蕩，3000-4000rpm，離心3-5min,棄水相，30-35°C真空干燥得干物質(zhì)；所述脂肪提取液為質(zhì)量百分比為0.的二丁基羥基甲苯的氯仿甲醇溶液，所述氯仿甲醇溶液中氯仿的體積百分含量為66.7%；(3)脂肪酸甲酯化將步驟(2)獲得的3-5份干物質(zhì)分別溶于3-5份600-1000yL質(zhì)量百分比為14%的三氟化硼-甲醇溶液中，加入10-20μg十七烷酸做為內(nèi)標(biāo)，分別置于15mL密封管內(nèi)，在100°C水浴20-30min，溫度降至室溫，加入500-1000μ1正己烷震蕩萃取30s，4000-5000rpm離心2min，得到正己烷相；取100-200μL正己烷相放入已編號的GC進(jìn)樣瓶；(4)GC-MS檢測采用GC-MS對正己烷相中的脂肪酸甲酯進(jìn)行定性和定量處理，條件如下色譜柱DB-5氣相色譜柱，其規(guī)格為30m*0.25mm,0.25μm；進(jìn)樣量1μL；分流比101；進(jìn)樣口溫度280°C；GCinterface溫度270°C；氦氣流速恒壓，9IKPa；升溫程序70°C保持2min，以8°C·mirT1的速度升到290°C，并在290°C保持6min；電離電壓:70eV；源溫2500C；掃描范圍50-800m/z；掃描速度2sCan·s—1；從而獲得了脂肪酸甲酯混合物中的單個(gè)脂肪酸甲酯的含量；(5)計(jì)算日產(chǎn)量根據(jù)如下公式，計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的日產(chǎn)量P=Effi/Day/CV其中P是微藻脂肪酸甲酯日產(chǎn)量，Wi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的重量，Day是步驟(1)所述從微藻接種到微藻收獲的時(shí)間長度，CV是步驟(1)所述收獲時(shí)微藻培養(yǎng)液的體積；(6)十六烷值確定根據(jù)如下公式計(jì)算藻類脂肪酸甲酯混合物的十六烷值SN=Σ(560XPi)/MWiaINΣ(254XDXPi)/MWibCN=46.3+5458/SN-O.225XINc其中SN是皂化值；IN是碘值；CN是十六烷值；Pi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的干重百分比，MWi是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的分子量，D是步驟(4)中所得樣品中每個(gè)脂肪酸甲酯的雙鍵數(shù)量。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，其特征是所述微藻為小球藻(Chlorellasorokiniana)、H藻(Scenedesmusobliquus)、集胞藻(Synechocystissp.PCC6803)及魚腥藻(Anabaenasp.PCC7120)。全文摘要本發(fā)明公開了一種評價(jià)微藻產(chǎn)油能力的方法，該方法包括下述步驟；(1)微藻細(xì)胞收集及淬滅；(2)提取細(xì)胞內(nèi)脂肪酸；(3)脂肪酸甲酯化；(4)GC-MS檢測；(5)計(jì)算日產(chǎn)量；(6)十六烷值確定對微藻產(chǎn)油能力進(jìn)行評價(jià)，本發(fā)明的方法能為比較不同培養(yǎng)體系下不同藻種產(chǎn)油能力提供標(biāo)準(zhǔn)，從而為最優(yōu)的藻種選擇和培養(yǎng)工藝優(yōu)化提供依據(jù)。文檔編號G01N30/02GK102495151SQ20111038475公開日2012年6月13日申請日期2011年11月28日優(yōu)先權(quán)日2011年11月28日發(fā)明者元英進(jìn),楊潔,牛艷紅,陸姝歡申請人:天津大學(xué)