專利名稱：利用CdTe納米熒光探針測定撲熱息痛的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種利用半導(dǎo)體納米材料碲化鎘作為熒光探針測定撲熱息痛的方法， 屬光分析檢測技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
量子點通常又被稱作零維納米材料、半導(dǎo)體納米粒子或納米晶體，是一種由 II - VI族、III - V族或IV - VI族元素組成的納米顆粒，大致呈球形，直徑范圍通常在1 - 20 納米。由于量子限域效應(yīng)，這種納米材料表現(xiàn)出一些不同于宏觀體相材料的特殊性質(zhì)，如小尺寸效應(yīng)、表面與界面效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)和宏觀隧道效應(yīng)等。這些效應(yīng)使這種納米材料表現(xiàn)出特異的光、電、磁、熱、力學(xué)、機(jī)械等性能。納米熒光探針是利用納米材料的熒光性質(zhì)，將它作為探針去檢測其他物質(zhì)。與傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料相比，納米熒光探針具有更加優(yōu)越的性能，例如寬的激發(fā)光譜、窄的發(fā)射光譜、可精確調(diào)諧的發(fā)射波長、較長的熒光壽命以及可忽略的光漂白等。作為一種新型的熒光試劑，量子點在生命科學(xué)研究中受到了高度的關(guān)注和較為廣泛的應(yīng)用，并迅速成為一個研究的熱點。已報道的量子點在這一領(lǐng)域的應(yīng)用，大部分集中于熒光探針的識別和成像方面，如在研究量子點與生物大分子，如蛋白質(zhì)、核酸、DNA 之間的相互作用、細(xì)胞及生物組織的熒光標(biāo)記與成像以及活體成像等方面的應(yīng)用。與此同時，基于量子點熒光猝滅或增敏的熒光探針發(fā)展亦非常迅速?，F(xiàn)如今被檢測的物質(zhì)主要有重金屬離子、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等，而利用半導(dǎo)體納米粒子測定藥物方面的應(yīng)用還并不多見。撲熱息痛屬于乙酰苯胺類藥物，在治療發(fā)燒、感冒、關(guān)節(jié)痛、神經(jīng)痛、偏頭痛及肌肉疼痛等方面都有很好的效果。通常來說，撲熱息痛是沒有副作用的，但是藥劑過量則會導(dǎo)致急性中毒、胰腺炎，甚至?xí)斐筛螇乃?。因此，建立一種簡單、快速、靈敏、準(zhǔn)確檢測撲熱息痛含量的分析方法在臨床醫(yī)學(xué)及藥理學(xué)研究方面有著重要的意義。目前對于撲熱息痛的測定方法有液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法、分光光度法、電化學(xué)方法等。但是通過納米熒光探針測定這種藥物的方法還未有報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種利用半導(dǎo)體納米材料碲化鎘作為納米熒光探針測定撲熱息痛藥物的方法。本發(fā)明一種利用半導(dǎo)體納米材料碲化鎘作為納米熒光探針測定撲熱息痛的方法， 其特征在于具有以下的過程和步驟
a. L-半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針的制備在一個圓底三頸燒瓶中，把91. 3 mg的CdCl2 ·2. 5Η20溶解在100 mL的二次蒸餾水中，然后邊攪拌邊加入121. 2 mg的L -半胱氨酸；之后用1. 0 mol/L的NaOH溶液逐滴滴加，調(diào)節(jié)溶液的pH值為11. 2，得到堿性混合溶液；然后將所述混合溶液通隊除氧30分鐘后迅速加入0. 2 mmol新制備的NaHTe溶液；繼續(xù)通入隊，將體系溫度迅速升至95°C，冷凝回流1小時左右，即得到CdTe量子點水溶液；整個過程中Cd2+ Te2" L-半胱氨酸的摩爾比例為1 0.2 2. 5;將合成的CdTe量子點水溶液濃縮為原體積的1/4，逐滴加入異丙醇，直到出現(xiàn)沉淀為止；使用高速離心機(jī)離心， 去上層清液；將離心得到的沉淀物在60°C真空條件下烘干，所得產(chǎn)物為經(jīng)過尺寸選擇性沉淀的L -半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針；
b.CdTe納米熒光探針對撲熱息痛標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定在一系列棕色、干燥的25 mL容量瓶中加入800 μ L已經(jīng)合成好的L -半胱氨酸修飾的CdTe量子點溶液和一系列已知濃度的撲熱息痛標(biāo)準(zhǔn)溶液；然后將其用磷酸緩沖溶液稀釋后定容至刻度；將配好的標(biāo)準(zhǔn)溶液在黑暗處放置一定的時間后做熒光測試；設(shè)置激發(fā)波長為330 nm，此波長處撲熱息痛沒有吸收峰存在。設(shè)置激發(fā)和發(fā)射狹縫寬度均為5 nm,掃描范圍設(shè)置為340 nm至650 nm ；最終得到標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線；
c.利用標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線測定未知濃度的溶液因CdTe納米熒光探針的相對熒光強(qiáng)度與撲熱息痛的濃度呈線性關(guān)系，并且可按線性方程Ic/I=0. 992+0. 031C,線性相關(guān)系數(shù)為 0. 9988 ；來測定未知濃度溶液。本發(fā)明的優(yōu)點和特點如下所述
本發(fā)明利用半導(dǎo)體納米粒子獨特的光學(xué)特性，高的比表面積以及一些與尺寸相關(guān)的性質(zhì)，將半導(dǎo)體納米粒子作為納米熒光探針去檢測藥物。通過優(yōu)化PH值和CdTe熒光探針與撲熱息痛的反應(yīng)時間，得出了測定的最佳條件。由于量子點的光學(xué)特性依賴于它的表面性質(zhì)， 量子點表面與分析物質(zhì)的相互作用會引起其光學(xué)性能的動態(tài)變化，因此在最佳條件下可以利用其作為熒光探針對分析物質(zhì)進(jìn)行檢測。本發(fā)明中的L -半胱氨酸修飾CdTe納米熒光探針是一種新型的熒光試劑，通過優(yōu)化測試條件，能夠直接用于撲熱息痛的快速測定，具有簡單、快速、靈敏、準(zhǔn)確等特點。


圖1為本發(fā)明中用L -半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針測定不同濃度撲熱息痛的熒光光譜圖。C (10_8 mol/L)為(a) 0; (b) 1.0; (c) 2.8; (d) 4.0; (e) 6.4; (f) 7.6; (g) 9.4; (h) 10.0; (i) 14.0; (j) 16.00從圖中可以看出，隨著撲熱息痛濃度的增加，CdTe納米熒光探針的熒光強(qiáng)度逐漸降低。圖2為本發(fā)明中CdTe納米熒光探針與不同濃度撲熱息痛存在下的相對熒光強(qiáng)度與撲熱息痛濃度的線性關(guān)系圖。其中Itl指不加撲熱息痛時CdTe納米熒光探針的熒光強(qiáng)度， I指加入不同濃度的撲熱息痛后CdTe納米熒光探針的熒光強(qiáng)度。
具體實施例方式現(xiàn)將本發(fā)明的具體實施例敘述于后。本實施例中的利用L -半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針測定撲熱息痛的步驟如下
(1) L-半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針的制備在一個圓底三頸燒瓶中，把91. 3 mg的CdCl2 ·2. 5Η20溶解在100 mL的二次蒸餾水中，然后邊攪拌邊加入121. 2 mg的L -半胱氨酸。之后用1. 0 mol/L的NaOH溶液逐滴滴加，調(diào)節(jié)溶液的pH值為11. 2，得到堿性混合溶液。然后將所述混合溶液通隊除氧30分鐘后迅速加入0. 2 mmol新制備的NaHTe溶液。繼續(xù)通入隊，將體系溫度迅速升至95°C，冷凝回流1小時左右，即得到CdTe量子點水溶液。 整個過程中Cd2+ Te2" L-半胱氨酸的摩爾比例為1 0.2 2.5。將合成的CdTe量子點水溶液濃縮為原體積的1/4，逐滴加入異丙醇，直到出現(xiàn)沉淀為止。使用高速離心機(jī)離心，去上層清液。將離心得到的沉淀物在60°C真空條件下烘干，所得產(chǎn)物為經(jīng)過尺寸選擇性沉淀的L-半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針。(2) CdTe納米熒光探針對撲熱息痛標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定在一系列棕色、干燥的25 mL 容量瓶中用移液槍加入800 μ L已經(jīng)合成好的L -半胱氨酸修飾的CdTe量子點溶液和一系列1. OX 10_8 16Χ 10_8mol/L的撲熱息痛標(biāo)準(zhǔn)溶液。通過優(yōu)化實驗條件，把加入的溶液用pH=8的磷酸緩沖溶液稀釋后定容至刻度，將配好的溶液在黑暗處放置10 min后做熒光測試。設(shè)置激發(fā)波長為330 nm，此波長處撲熱息痛沒有吸收峰存在。設(shè)置激發(fā)和發(fā)射狹縫寬度均為5 nm，掃描范圍設(shè)置為340 nm至650 nm。最終得到標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線。(3)檢測未知濃度的撲熱息痛溶液
在最佳測試條件下，如圖1所示，CdTe納米熒光探針的熒光強(qiáng)度隨撲熱息痛濃度的增大而降低。在1.0X10_8 mol/L 1.6X10_7 mol/L范圍內(nèi)，CdTe納米熒光探針的相對熒光強(qiáng)度與此濃度范圍內(nèi)撲熱息痛的濃度呈線性關(guān)系，如圖2所示。線性方程為IcZI = 0.992 + 0.031C (C, 10_8 mol/L)，線性相關(guān)系數(shù)為0.9988。因此可以利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法對未知濃度的撲熱息痛進(jìn)行分析檢測。本發(fā)明利用L -半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針測定撲熱息痛的方法具有簡單、快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點。用CdTe納米熒光探針測定撲熱息痛時，一些常見的金屬陽離子、陰離子、小分子生物分子對測定并無干擾。通過回收率實驗測定，回收率在101. 456%至 105. 133%之間。其最低檢出限為2. 0Χ1(Γ9 mol/L。
權(quán)利要求
1. 一種利用半導(dǎo)體納米材料碲化鎘作為納米熒光探針測定撲熱息痛的方法，其特征在于具有以下的過程和步驟a.L-半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針的制備在一個圓底三頸燒瓶中，把91. 3 mg的CdCl2 ·2. 5Η20溶解在100 mL的二次蒸餾水中，然后邊攪拌邊加入121. 2 mg的L -半胱氨酸；之后用1. 0 mol/L的NaOH溶液逐滴滴加，調(diào)節(jié)溶液的pH值為11. 2，得到堿性混合溶液；然后將所述混合溶液通隊除氧30分鐘后迅速加入0. 2 mmol新制備的NaHTe溶液；繼續(xù)通入隊，將體系溫度迅速升至95°C，冷凝回流1小時左右，即得到CdTe量子點水溶液；整個過程中Cd2+ Te2" L-半胱氨酸的摩爾比例為1 0.2 2. 5;將合成的CdTe量子點水溶液濃縮為原體積的1/4，逐滴加入異丙醇，直到出現(xiàn)沉淀為止；使用高速離心機(jī)離心， 去上層清液；將離心得到的沉淀物在60°C真空條件下烘干，所得產(chǎn)物為經(jīng)過尺寸選擇性沉淀的L -半胱氨酸修飾的CdTe納米熒光探針；b.CdTe納米熒光探針對撲熱息痛標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定在一系列棕色、干燥的25 mL容量瓶中加入800 μ L已經(jīng)合成好的L -半胱氨酸修飾的CdTe量子點溶液和一系列已知濃度的撲熱息痛標(biāo)準(zhǔn)溶液；然后將其用磷酸緩沖溶液稀釋后定容至刻度；將配好的標(biāo)準(zhǔn)溶液在黑暗處放置一定時間后做熒光測試；設(shè)置激發(fā)波長為330 nm，此波長處撲熱息痛沒有吸收峰存在；設(shè)激發(fā)和發(fā)射狹縫寬度均為5 nm，掃描范圍設(shè)置為340 nm至650 nm ；最終得到標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線；c.利用標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線測定未知濃度的溶液因CdTe納米熒光探針的相對熒光強(qiáng)度與撲熱息痛的濃度呈線性關(guān)系，并且可按線性方程Ic/I=0. 992+0. 031C,線性相關(guān)系數(shù)為 0. 9988 ；來測定未知濃度溶液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利用L–半胱氨酸修飾的CdTe納米粒子作為納米熒光探針對撲熱息痛的快速測定，屬光分析檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明主要是利用CdTe納米熒光探針與待測物撲熱息痛發(fā)生作用后熒光強(qiáng)度發(fā)生變化，通過熒光光譜分析對撲熱息痛進(jìn)行靈敏的定量分析測定。本發(fā)明的要點是通過優(yōu)化pH、反應(yīng)時間這些實驗條件，在最佳條件下將熒光探針應(yīng)用于撲熱息痛的定量檢測。本發(fā)明的測定過程具有簡單、快速、靈敏、準(zhǔn)確等特點。
文檔編號G01N21/64GK102519921SQ20111035760
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月14日
發(fā)明者丁亞平, 李麗, 程瑜, 羅立強(qiáng), 陸雅翔 申請人:上海大學(xué)