專利名稱:評價哺乳動物老化程度的試劑盒、檢測系統(tǒng)和8-oxoG的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及用于評價哺乳動物老化程度的新標(biāo)志物和方法,特別涉及通過檢測尿液中的游離8-oxoG評價哺乳動物的老化程度。
背景技術(shù):
老化是多種因素參與的結(jié)果,是進(jìn)行性的、多水平的、不可逆的功能減退狀態(tài),對于老化的發(fā)生機(jī)制有眾多學(xué)說,如自由基學(xué)說,基因?qū)W說,端粒酶學(xué)說等。1956年,著名學(xué)者Harman首次提出了“自由基衰老理論”,指出老化是自由基對生物分子不斷損傷的累積結(jié)果。近期的研究發(fā)現(xiàn)自由基不僅參與細(xì)胞的正常老化,而且與老化相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。自由基產(chǎn)生于生物體細(xì)胞的正常生理過程,自由基的重要作用之一是介導(dǎo)含氧物質(zhì)生成活性氧(Reactive Oxygen Species, ROS), ROS和自由基引起的氧化應(yīng)激是造成DNA氧化損傷的主要因素。目前已發(fā)現(xiàn)的堿基損傷產(chǎn)物達(dá)20多種,其中脫氧鳥苷(dG)最易被氧化,產(chǎn)物8-氧化脫氧鳥苷(8-Hydroxy_2’ -deoxyguanine, 8-oxodG,見式I)被國際公認(rèn)為是最重要的評價DNA氧化損傷的生物標(biāo)志物。式1:8_oxodG
權(quán)利要求
1.一種通過檢測尿液中的8-0X0G來評價哺乳動物老化程度的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括8-oxoG標(biāo)準(zhǔn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒進(jìn)一步包括至少一個元素被其同位素置換的8-oxoG作為內(nèi)標(biāo)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒適用于高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒進(jìn)一步包括體積含量為5-15%的甲醇和體積含量為85-95%的pH值為3. 5-4. O、濃度為5_20mM的醋酸銨。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒進(jìn)一步包括體積含量為10%的甲醇和體積含量為90%的pH值為3. 75、濃度為IOmM的醋酸銨。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項所述的試劑盒,其特征在于,所述哺乳動物是人。
7.一種評價哺乳動物老化程度的檢測系統(tǒng),包括根據(jù)權(quán)利要求1-6中任意一項所述的試劑盒和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析儀。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測系統(tǒng),其特征在于,所述高效液相色譜采用dC18色譜柱。
9.8-oxoG在制備評價哺乳動物老化程度的試劑盒中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,所述試劑盒通過檢測尿液中游離8-oxoG來評價哺乳動物老化程度。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過檢測尿液中的8-oxoG來評價哺乳動物老化程度的試劑盒、檢測系統(tǒng)及8-oxoG在評價哺乳動物老化中的應(yīng)用。本發(fā)明的試劑盒包括8-oxoG標(biāo)準(zhǔn)品,通過檢測哺乳動物樣本,特別是尿液中8-oxoG的含量來評價哺乳動物的老化程度。本發(fā)明采用8-oxoG為檢測標(biāo)的物,能夠更準(zhǔn)確、更快速和簡便地評價動物的老化程度。
文檔編號G01N30/02GK103048392SQ20111030953
公開日2013年4月17日 申請日期2011年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月13日
發(fā)明者蔡劍平, 干偉, 聶犇, 史飛 申請人:蔡劍平