專利名稱：一種檢測土壤中乙酰氧肟酸含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及土壤中乙酰氧肟酸含量的檢測，特別是利用分光光度法檢測土壤中乙 酰氧肟酸含量的方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中由于氮肥的大量施用導致了較低的氮肥利用效率，同時引起了一系列 的環(huán)境污染問題，如大氣污染、水污染。為了提高氮肥的利用效率和減少環(huán)境污染，人們研 究了各種途徑來提高氮肥的利用效率。脲酶抑制劑的應用就是一個非常有前景的方向。乙 酰氧肟酸(AHA)就是最早研究的脲酶抑制劑之一，它在提高氮肥利用效率和減輕環(huán)境氮污 染方面發(fā)揮了很重要的作用；為了更好得了解其在土壤中的基本特性和肥效期，檢測土壤 中乙酰氧肟酸的含量就顯得非常必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種檢測土壤中乙酰氧肟酸含量的方法。該方法減化了樣 品的提取過程和試驗的操作步驟，使分析結(jié)果更加精確可靠，分析重現(xiàn)性更好。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為一種檢測土壤中乙酰氧肟酸含量的方法，1)稱取 5. 0000 10. OOOOg 土樣(過 Imm 篩)置于 IOOmL 燒杯中，加入 40_80mL 去離子水，振蕩使土樣充分散開，過濾，沉淀用20-50mL去離子水2-10次洗滌，收集濾液于 IOOmL容量瓶，定溶，制成待測樣品溶液V1 ；2)吸取待測樣品溶液V2、l. 0 2. OmL于刻度試管中，加入l_3mL高氯酸鐵溶液， 加水至5mL，搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，用分光光度計在420nm下比色，測定吸光度A ；3)工作標準曲線的制備吸取AHA標準溶液0. 2mL、0. 4mL、0. 6mL、0. 8mL于刻度 試管中，加入l_3mL高氯酸鐵溶液，加水至5mL，搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，同樣品一起 420nm下比色測定吸光度A，；以一系列標準溶液中的AHA含量(0. 2mg/L, 0. 4mg/L, 0. 6mg/L, 0. 8mg/L)與吸光度 Α’制作工作標準曲線，得到斜率b ；4)根據(jù)吸光值A(chǔ)和斜率b，計算吸取待測樣品中的AHA含量S，S = A*b ；5)計算樣品中 AHA 的含量(S^V1)/(V2*m*1000)*100%其中，S為對應標準曲線查得的AHA含量(mg) J1為待測樣品的體積(mL) ;V2為吸 取待測樣品的體積(mL) ；m為稱取干土的質(zhì)量(g) ；1000為換算系數(shù)。實驗中所用的水均為去離子水，所用試劑都是分析純；待測溶液中AHA的含量在 0. 16 0. 25mg/mL 之間。本發(fā)明是將土壤中的乙酰氧肟酸(AHA)加水振蕩提取出來，在酸性條件下，乙酰 氧肟酸與三價鐵離子形成紅色化合物，且含量的高低與顏色的深淺成正比，以此為基礎(chǔ)利 用分光光度法420nm處比色測定吸光度，進而計算土壤中乙酰氧肟酸的含量。本發(fā)明優(yōu)點為1)簡化了操作步驟，;2)方法準確度高，易操作；3)結(jié)果穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好；4)選擇性 好，速度快。
具體實施例方式試劑配制1.高氯酸鐵溶液在50mL燒杯中，加入IOmL 70%高氯酸，分批加入2. Og三氯化
鐵，并不停攪拌。微熱促使完全溶解，待冷卻至室溫轉(zhuǎn)移到IOOmL容量瓶中，用適量去離子 水淋洗燒杯，并轉(zhuǎn)移到容量瓶中，稀釋至刻度。2.乙酰氧肟酸(AHA)標準溶液準確稱取1. OOOOg脲酶抑制劑AHA標準品置于 IOOOmL容量瓶中，用去離子水溶解，并稀釋至刻度，配成lmg/mL標準溶液。操作步驟1)稱取5. OOOOg 土樣(過Imm篩)置于IOOmL燒杯中，加入50mL去離子水，振蕩 Ih使土樣充分散開，過濾，沉淀用50mL去離子水多次洗滌，收集濾液于IOOmL容量瓶，定溶， 制成待測樣品溶液。待測溶液中AHA的含量在0. 16 0. 25mg/mL之間；2)吸取待測樣品溶液1. OmL于刻度試管中，加入3mL高氯酸鐵溶液，加水至5mL， 搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，用分光光度計在420nm下比色，測定吸光度A ；3)工作標準曲線的制備吸取AHA標準溶液0. 2mL、0. 4mL、0. 6mL、0. 8mL于刻度試 管中，加入3mL高氯酸鐵溶液，加水至5mL，搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，同樣品一起420nm 下比色測定吸光度Α，。以一系列標準溶液中的AHA含量(0. ang，0.^ig，0.6mg，0.8mg)與吸 光度A’制作工作標準曲線，得到斜率b ；4)根據(jù)吸光值A(chǔ)和斜率b，計算吸取待測樣品中的AHA含量S，S = A*b ；5)計算樣品中 AHA 的含量(S*V》/ (V2*m*1000) *100%其中，S為對應標準曲線查得的AHA含量(mg) J1為待測樣品的體積(mL) ;V2為吸 取待測樣品的體積(mL) ；m為稱取干土的質(zhì)量(g) ；1000為換算系數(shù)。下面列舉一個實施例對該方法進一步說明本實施例所用棕壤采自于中國科學院沈陽生態(tài)試驗站，做添加回收率試驗。設(shè)兩 個不同乙酰氧肟酸添加量0. 4%和0.45% (以干土重計)；土壤含水量均為20% (土樣 重)，用上述方法檢測土壤中乙酰氧肟酸的含量，進而計算回收率并驗證該方法的可靠性。每種濃度乙酰氧肟酸處理的土壤具體分析步驟如下1)稱取5. OOOOg 土樣(過Imm篩)置于IOOmL燒杯中，加入50mL去離子水，振蕩 Ih使土樣充分散開，過濾，沉淀用50mL去離子水多次洗滌，收集濾液于IOOmL容量瓶，定溶， 制成待測樣品溶液。待測溶液中AHA的含量在0. 16 0. 25mg/mL之間；2)吸取待測樣品溶液1. OmL于刻度試管中，加入3mL高氯酸鐵溶液，加水至5mL， 搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，用分光光度計在420nm下比色，測定吸光度A ；3)工作標準曲線的制備吸取AHA標準溶液0. 2mL、0. 4mL、0. 6mL、0. 8mL于刻度試 管中，加入3mL高氯酸鐵溶液，加水至5mL，搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，同樣品一起420nm 下比色測定吸光度Α，。以一系列標準溶液中的AHA含量(0. ang，0.^ig，0.6mg，0.8mg)與吸 光度A’制作工作標準曲線，得到斜率b ； 4)根據(jù)吸光值A(chǔ)和斜率b，計算吸取待測樣品中的AHA含量S，S = A*b ；
5)計算樣品中AHA的含量試驗結(jié)果如下
權(quán)利要求
1.一種檢測土壤中乙酰氧肟酸含量的方法，其特征在于1)稱取5.0000 10. OOOOg 土樣置于IOOmL燒杯中，加入40_80mL去離子水，振蕩使土 樣充分散開，過濾，沉淀用20-50mL去離子水2-10次洗滌，收集濾液于IOOmL容量瓶，定溶， 制成待測樣品溶液V1;2)吸取待測樣品溶液V2、l.0 2. OmL于刻度試管中，加入l_3mL高氯酸鐵溶液，加水 至5 mL，搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，用分光光度計在420nm下比色，測定吸光度A ；3)工作標準曲線的制備吸取AHA標準溶液0.2mL、0. 4mL、0. 6mL、0. 8 mL于刻度試管 中，加入l_3mL高氯酸鐵溶液，加水至5 mL，搖蕩生成穩(wěn)定的紅色絡(luò)合物，同樣品一起420nm 下比色測定吸光度Α’ ；以一系列標準溶液中的AHA含量(0. 2mg/L, 0. 4mg/L, 0. 6mg/L, 0. 8mg/L)與吸光度A， 制作工作標準曲線，得到斜率b ；4)根據(jù)吸光值A(chǔ)和斜率b，計算吸取待測樣品中的AHA含量S，S= A*b ；5)計算樣品中AHA 的含量(SW1)/(V2*m*1000)*100%其中，S為對應標準曲線查得的AHA含量(mg) 乂為待測樣品的體積(mL) ;V2為吸取待 測樣品的體積(mL) ；m為稱取干土的質(zhì)量(g) ；1000為換算系數(shù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于實驗中所用的水均為去離子水，所用 試劑都是分析純。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于待測溶液中AHA的含量在0.16 0. 25mg/mL 之間。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種檢測土壤中乙酰氧肟酸含量的方法，該方法就是將土壤中的乙酰氧肟酸(AHA)加水振蕩提取出來，在酸性條件下，乙酰氧肟酸與三價鐵離子形成紅色化合物，且含量的高低與顏色的深淺成正比，以此為基礎(chǔ)利用分光光度法420nm處比色測定吸光度，進而計算土壤中乙酰氧肟酸的含量。本發(fā)明優(yōu)點為1)簡化了操作步驟；2)方法準確度高，易操作；3)結(jié)果穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好；4)選擇性好，速度快。
文檔編號G01N21/31GK102109463SQ200910248780
公開日2011年6月29日 申請日期2009年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月25日
發(fā)明者武志杰, 陳利軍, 雋英華 申請人:中國科學院沈陽應用生態(tài)研究所