專利名稱：：一種水環(huán)境中痕量雙酚a濃度的檢測(cè)方法一種水環(huán)境中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水環(huán)境污染物的檢測(cè)
技術(shù)領(lǐng)域：
。特別涉及一種水體中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法，具體地說是針對(duì)自來水、回用中水以及地表水中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：雌激素是具有內(nèi)分泌干擾作用的環(huán)境污染物，廣受關(guān)注。雙酚A是普遍存在的、倍受關(guān)注的、具有代表性的內(nèi)分泌千擾物。環(huán)境中的雙酚A對(duì)大氣、土壤、水源等造成污染，進(jìn)而直接或間接的危害到人類和生態(tài)。當(dāng)它們進(jìn)入人體或動(dòng)物體后，會(huì)使機(jī)體關(guān)閉或逐漸改變某些生物化學(xué)反應(yīng)過程，久之會(huì)破壞體內(nèi)原有某些功能，使正常的內(nèi)分泌系統(tǒng)失調(diào)。環(huán)境雌激素與人體或動(dòng)物體激素競(jìng)爭(zhēng)耙細(xì)胞上的受體，影響正常生理活動(dòng)；環(huán)境雌激素可能抑制類固醇合成過程中某些酶的活性，使酶的功能喪失，致使類固醇不能合成，從而影響休內(nèi)激素信號(hào)的傳輸，導(dǎo)致機(jī)體的失調(diào)；同時(shí)還影響了內(nèi)分泌系統(tǒng)和其他系統(tǒng)的互動(dòng)作用。社會(huì)和環(huán)保等領(lǐng)域都很關(guān)注環(huán)境雌激素類物質(zhì)對(duì)環(huán)境和人類健康的影響，相關(guān)的檢測(cè)方法已建立了很多。但現(xiàn)行的檢測(cè)方法大多耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)，操作繁瑣，影響檢測(cè)效果。檢測(cè)痕量濃度的雌激素物質(zhì)，一般需要進(jìn)行預(yù)處理。經(jīng)檢索，目前對(duì)雙酚A測(cè)定的預(yù)處理方法多是用于氣相/質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)測(cè)定的衍生化法，其所需時(shí)間較長(zhǎng)，一般至少需要30min;濃縮富集的液相融取方法使用有機(jī)相量較大，易產(chǎn)生環(huán)境污染，固相萃取方法常有洗脫、揮發(fā)及定容等步驟，耗費(fèi)時(shí)間；液相微萃取、液液微萃取、固相微萃取技術(shù)雖富集倍數(shù)較高，但萃取時(shí)間長(zhǎng)，操作復(fù)雜而繁瑣；以強(qiáng)紫外吸收背景的表面活性劑的濁點(diǎn)現(xiàn)象為測(cè)定基礎(chǔ)的濁點(diǎn)萃取法，使其應(yīng)用受到限制。而本發(fā)明采用的預(yù)處理方法為分散液-液微萃取技術(shù)，其萃取過程在幾秒內(nèi)完成，所需有機(jī)相的體積幾微升至幾十微升，環(huán)境友好，易于操作并且富集倍數(shù)較高。氣相/質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)、液相/質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC/MS)能夠進(jìn)行測(cè)定痕量濃度的雙酚A，但操作條件繁瑣，分析時(shí)間較長(zhǎng)，至少60min;酶聯(lián)免疫法需要特定抗體綁定物；熒光檢測(cè)器要求檢測(cè)分析物在特定波長(zhǎng)處產(chǎn)生熒光。本發(fā)明采用可變波長(zhǎng)的紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，分析快速。目前，尚未見有與本發(fā)明的檢測(cè)方法及其效果類似的相關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種水休中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法，其特征在于，所述痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方案如下(1)水樣預(yù)處理將萃取劑分散劑=0.01—0.10(體積比)的混合液快速注入盛有樣品的錐形玻璃離心管內(nèi)，輕輕搖晃，然后離心分離，溶液分層；(2)液相色譜條件梯度洗脫流動(dòng)相中甲醇二次水(體積比)的比例在0—5rain內(nèi)由60呢升到87%之后，流動(dòng)相比例維持不變，9.5—llmin升至94%，11一18min維持在94%;色譜柱ZORBAXSB-C18('l6X250mm，5-micron)色譜柱，柱溫為0—18min維持在27—35。C;檢測(cè)器AgilentVWD檢測(cè)器(G1314B);檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm或280nm;進(jìn)樣方式手動(dòng)/自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣量5化。.(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，以外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量測(cè)定所述的外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制利用分析天平準(zhǔn)確稱量雙酚A，溶解于色譜純氯苯溶劑內(nèi)，配置成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣針抽取5叱溶液注入高效液相色譜儀，按上述條件進(jìn)行分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于測(cè)定樣品中分析物的量。(4)樣品測(cè)定采集待測(cè)水樣品，按步驟l對(duì)水樣預(yù)處理，再按步驟2條件進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，并與步驟3得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，最終得到待測(cè)水樣品含痕量雙酚A濃度值。利用下式分別表示回收量及冋收率^=C々機(jī)川xt^.機(jī)川(1)C('x&0—回收量，W—回收率，％;F。一初始水樣的體積，mL:—水樣預(yù)處理離心分層后，f層的有機(jī)相的體積，叱；C。一初始水樣的雙酚A的濃度，Pg/mL;C付,一水樣預(yù)處理離心分層后，下層的有機(jī)相中雙酚A濃度，mg/L。所述萃取劑為氯苯，其與水樣的體積比為1:600—1:300。所述分散劑為丙酮，其與萃取劑的體積比為lO:l—l(Xhl。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明采用可變波長(zhǎng)的紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，分析快速。環(huán)境友好、易于操作的水體中痕量濃度雙酚A的檢測(cè)手段，尤其是提供一種水樣預(yù)處理簡(jiǎn)單且環(huán)境友好、易于操作、線性范圍寬、富集倍數(shù)高，且重現(xiàn)性較好、能夠快速分析水體屮痕量雙酚A的濃度。圖1為各混合有機(jī)物標(biāo)準(zhǔn)色譜圖一化學(xué)名稱及停留時(shí)間出峰順序丙酮(acetone,3.0%)，雌三醇(E3，1845)，雙酚A(BPA，6.153)，17a-乙炔基雌二醇(EE2'7.030)，雌二醇(E2，7.207)，雌激素酮(El，7.411)，氯苯(Chlorobenzene，7.819),4-壬基酚(4-NP，12.234)。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合最佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明所述的水環(huán)境中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法予以說明。外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制(1)水樣預(yù)處理用玻璃注射器將22.5W」氯苯萃取劑和0.5mL丙酮分散劑的混合液快速注入盛有9mL水樣(pH:3.2)的錐形玻璃離心管內(nèi)，輕輕搖晃，然后離心(4000rX4min)分離，用50叱進(jìn)樣針取下層液休，進(jìn)樣量5叱，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，(2)液相色譜條件梯度洗脫流動(dòng)相中甲醇二次水(體積比)的比例在4.5inin內(nèi)由60%升到87%,4.5—9.5min維持在87%，9.5—11.Omin升至94°/。，11.0—15.0min維持在94%;色譜柱ZORBAXSB-C18(4.6X250,，5-micron)色譜柱；柱溫0-15min維持在30。C;檢測(cè)器AgilenLVWD檢測(cè)器(G1314B);檢測(cè)波長(zhǎng)280nm;進(jìn)樣方式手動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣量5A，得到水樣的色譜圖及色譜峰的停留時(shí)間(如圖1所示)。從色譜圖結(jié)果看出，本方法的檢測(cè)時(shí)間少于15min，并且可用于水環(huán)境中其它痕量雌激素(雌三醇、a-乙炔基雌二醇、雌二醇、雌激素酮和4-壬基酚)的檢測(cè)分析(如圖l所示)。并計(jì)算雙酚A的濃度。(3)樣品測(cè)定以外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量測(cè)定。所述的外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制利用分析天平準(zhǔn)確稱量雙酚A適量，溶解于色譜純氯苯溶劑內(nèi)，配置成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣針抽取溶液注入高效液相色譜儀，按上述條件進(jìn)行分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于測(cè)定樣品中分析物的量。以下列舉三個(gè)實(shí)例對(duì)本發(fā)明的檢測(cè)方法進(jìn)一步說明，但不限制本發(fā)明。實(shí)施例1準(zhǔn)確稱取一定量的雙酚A,溶于采自實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的向來水，濃度為2.5^/L，移取9mL于錐形玻璃離心管內(nèi)，將萃取劑(氯苯，22.5叱)和分散劑(丙酮，0.5mL)快速注入水樣(pH=3.2)中，溶液變混濁，輕輕搖晃，離心(4000rX4niin)分離，取下層有機(jī)相并定量，進(jìn)樣5化，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，結(jié)果如下表l所示。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實(shí)施例2準(zhǔn)確稱取一定量的雙酚A，溶于采自北京市昌平區(qū)回龍觀小區(qū)內(nèi)的回用中水，濃度為5Pg/L，移取9mL于錐形玻璃離心管內(nèi)，將萃取劑(氯苯，22.5叱)和分散劑(丙酮，0.5mL)快速注入水樣(pH二3.2)中，溶液變混濁，輕輕搖晃，離心(4000rX4min)分離，取下層有機(jī)相并定量，進(jìn)樣5叱，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，結(jié)果如下表2所示。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)施例3準(zhǔn)確稱取一定量的雙酚A，溶于采自北京市海淀區(qū)肖家河河流水，濃度為1(Hig/L，移取9mL于錐形玻璃離心管內(nèi)，將萃取劑(氯苯，22.5叱)和分散劑(丙酮，0,5mL)快速注入水樣(pH:3.2)中，溶液變混濁，輕輕搖晃，離心(4000rX4min)分離，取下層有機(jī)相并定量，進(jìn)樣5化，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，結(jié)果如下表3所示。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>從上述上述例結(jié)果表明，本方法回收率較高，可用于水環(huán)境中痕量雙酚A的檢測(cè)。也可以用于丙酮(acetone,3.096)，雌三醇(E3，4.845)，雙酚A(BPA，6.153)，17a-乙炔基雌二醇(EE2，7.030)，雌二醇(E2，7.207),雌激素酮(El，7.411)，氯苯(Ch].orobenzene，7.819)，4-壬基酚(4-NP，12.234)的檢測(cè)。權(quán)利要求1.一種水體中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法，其特征在于，所述痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方案如下(1)水樣預(yù)處理將萃取劑∶分散劑＝0.01-0.10(體積比)的混合液快速注入盛有樣品的錐形玻璃離心管內(nèi)，輕輕搖晃，然后離心分離，溶液分層，其中選取萃取劑與分散劑的最優(yōu)比例條件進(jìn)行實(shí)際水樣預(yù)處理；(2)液相色譜條件梯度洗脫流動(dòng)相中甲醇∶二次水(體積比)的比例在0-5mmin內(nèi)由60％升到87％之后，流動(dòng)相比例維持不變，9.5-11min升至94％，11-18min維持在94％；色譜柱ZORBAXSB-C18(4.6×250mm，5-micron)色譜柱，柱溫為0-18min維持在27-35℃；檢測(cè)器AgilentVWD檢測(cè)器(G1314B)；檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm或280nm；進(jìn)樣方式手動(dòng)/自動(dòng)進(jìn)樣，進(jìn)樣量5μL；(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，以外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量測(cè)定所述的外標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制利用分析天平準(zhǔn)確稱量雙酚A，溶解于色譜純氯苯溶劑內(nèi)，其中萃取劑∶分散劑＝0.045(體積比)，配置成系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣針抽取5μL溶液注入高效液相色譜儀，按上述條件進(jìn)行分析，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于測(cè)定樣品中分析物的量；(4)樣品測(cè)定采集待測(cè)水樣品，按步驟1對(duì)水樣預(yù)處理，再按步驟2條件進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，并與步驟3得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，最終得到待測(cè)水樣品含痕量雙酚A濃度值。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述水體中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法，其特征在于，所述萃取劑為氯苯；分散劑為丙酮。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述水體中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法，其特征在于，所述萃取劑與分散劑的混合液與水樣的體積比為1:600—1:300。全文摘要本發(fā)明屬于水環(huán)境污染物的檢測(cè)
技術(shù)領(lǐng)域：
。特別涉及一種水體中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法，具體地說是針對(duì)自來水、回用中水以及地表水中痕量雙酚A濃度的檢測(cè)方法。包括采用萃取劑和分散劑對(duì)水樣進(jìn)行處理，取下層有機(jī)相并定量，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，可以定量得到痕量雙酚A濃度值，水樣預(yù)處理簡(jiǎn)單且環(huán)境友好、易于操作、線性范圍寬、富集倍數(shù)高，且重現(xiàn)性較好、能夠快速分析水體中痕量雙酚A的濃度。并且可應(yīng)用于丙酮、雌三醇、17a-乙炔基雌二醇、雌二醇、雌激素酮、氯苯和4-壬基酚的檢測(cè)。文檔編號(hào)G01N30/00GK101315354SQ20081011588公開日2008年12月3日申請(qǐng)日期2008年6月30日優(yōu)先權(quán)日2008年6月30日發(fā)明者劉建林,魚李,王曉麗,翦英紅,董德明申請(qǐng)人:華北電力大學(xué)