專利名稱：：四川川芎的鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥材的鑒別方法，具體是川芎的鑒定方法，特別是利用高效毛細(xì)管電泳的指紋圖譜鑒定四川川芎的方法。技術(shù)背景中藥材川芎是傘形科植物川芎("g"Wic咖c力"a/7.yio/^Hort.〕的干燥根莖，具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效，臨床用于治療月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，頭痛，風(fēng)濕痹痛等。川芎始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品?！秷D經(jīng)本草》指出"以蜀川為勝"，故名川芎。川芎主產(chǎn)于四川灌縣、重慶和都江堰市等地，以灌縣產(chǎn)為最佳，在江西、湖北及云南等地亦有栽培，其中江西所產(chǎn)也稱撫芎，云南所產(chǎn)也稱云芎。不同產(chǎn)地川芎的藥效并不完全相同，清宮醫(yī)案中就已將川芎和撫芎區(qū)別使用，御醫(yī)臨證處方頗有不同。市場(chǎng)上不同產(chǎn)地的川芎很容易混淆，使用者多依據(jù)性狀鑒別，經(jīng)驗(yàn)依賴性強(qiáng)。中藥色譜指紋圖譜方法是近年來(lái)研究較多的一種中藥鑒別和質(zhì)量控制方法，該方法在實(shí)現(xiàn)物質(zhì)群體整體控制方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)，并得到了國(guó)際社會(huì)的認(rèn)可。英國(guó)草藥典、印度草藥典、德國(guó)藥用植物學(xué)會(huì)、加拿大藥用及芳香植物學(xué)會(huì)均接收指紋圖譜的質(zhì)控方法。用"中藥色譜指紋圖譜方法"鑒別中藥的真?zhèn)?，控制其質(zhì)量更能客觀地反映中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的整體觀，是更為科學(xué)、有效的質(zhì)控方法。陳閩軍等人公開(kāi)了鑒別川芎產(chǎn)地的方法，該方法是利用高效液相方法制備產(chǎn)于云南玉溪、四川灌縣、湖北咸寧和江西九江等21批川芎水提物的指紋圖譜，這些圖譜中選出15共有峰作為指紋特征，然后對(duì)這些指紋特征通過(guò)聚類分析、主成分分析以及相關(guān)主成分分析進(jìn)行考察，并用相似性度量方法鑒別，其指紋圖譜的制譜條件為高效液相色譜儀AgilentIIOO型，色譜柱ShimadzuVP-0DS，150mmX4.6醒，流速O.5mL/min，進(jìn)樣量20pL,檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，流動(dòng)相甲醇-水、梯度洗脫，檢測(cè)時(shí)間70min(陳閩軍，吳永江，等.(2003)."色譜指紋圖譜分析技術(shù)用于鑒別中藥川芎產(chǎn)地."中國(guó)中藥雜志28(7):606-610.)。該方法用于鑒別川芎雖然具有精密度高和重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)，但方法較為復(fù)雜，且分析時(shí)間長(zhǎng)?！洞ㄜ核幉牡腍PCE-FP方法學(xué)研究》一文公開(kāi)了一種利用高效毛細(xì)管電泳制備川芎指紋圖譜的方法，其毛細(xì)管電泳的條件為未涂層石英毛細(xì)管50pmIDX66.5cm，有效長(zhǎng)度為58cm;檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm;進(jìn)樣液為川芎60%乙醇超聲提物；壓力進(jìn)樣50油ar，5s;分離電壓為24kV;運(yùn)行緩沖液為硼砂、磷酸二氫鈉和甲醇的混合水溶液，其中硼砂的濃度為40m咖ol/L、磷酸二氫鈉的濃度為40mmmol/L、甲醇的含量為5%。；電泳時(shí)間為35min。該文還對(duì)產(chǎn)于湖南、內(nèi)蒙、山東、云南、湖北、河南、浙江、江西、四川和貴州的川芎在上述電泳條件下進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析，得到各個(gè)產(chǎn)地川芎的指紋圖譜，發(fā)現(xiàn)各個(gè)產(chǎn)地的川芎指紋圖譜中的共有峰組成都不相同；并聲稱在四川川芎的指紋圖譜中發(fā)現(xiàn)15個(gè)共有峰，提供了這15個(gè)峰的遷移時(shí)間和相對(duì)峰面積(孫沂，郭濤，等.(2003)."川芎藥材的HPCE-FP方法學(xué)研究."中國(guó)中藥雜志)28(2):167-171.)。但該文沒(méi)有提供除灌縣以外其他四川產(chǎn)區(qū)的川芎的指紋圖譜，也沒(méi)有說(shuō)明用于制譜的四川川芎來(lái)自于四川的哪些產(chǎn)區(qū)，因此，該方法的適用范圍并不明確，且該方法獲得的指紋圖譜有的共有特征峰不易辨認(rèn)。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種四川川芎的鑒定方法。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案是四川川芎的鑒定方法，該方法由以下步驟組成稱取待測(cè)藥材粗粉，加水回流提取13次，每次加水530倍量提取lh2h，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至每1ml藥液相當(dāng)于川芎藥材0.5lg，取濃縮液加水稀釋至原體積10倍，500010000轉(zhuǎn)/分離心510min，取上清液用0.45nm微孔濾膜過(guò)濾；取濾液作為進(jìn)樣液，采用壓力進(jìn)樣法對(duì)內(nèi)徑為75|jm、總長(zhǎng)度60cm、有效長(zhǎng)度為50cm的eCApTM毛細(xì)管進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為137.9kpa，進(jìn)樣時(shí)間為5秒，然后在分離電壓為25kV、溫度為2(TC下進(jìn)行電泳分離20min30min，最后用295nm的紫外光檢測(cè)分離物，獲得所測(cè)藥材的指紋圖譜，該指紋圖譜具有以下特征峰峰1:遷移時(shí)間為4.94min土0.10min、相對(duì)峰面積為29.34%±3.34%，峰2:遷移時(shí)間為5.55min士0.13min、相對(duì)峰面積為2.27%±0.31%,峰3:遷移時(shí)間為5.%min土0.14min、相對(duì)峰面積為2.35%±0.37%，峰4:遷移時(shí)間為6.83min土0.16min、相對(duì)峰面積為4.61%±0.53%，峰5:遷移時(shí)間為7.53min土0,19min、相對(duì)峰面積為0.9%±0.21%，峰6:遷移時(shí)間為8.54min土0,22min、相對(duì)峰面積為1.61%±0.31%，峰7:遷移時(shí)間為8.83min士0.23min、相對(duì)峰面積為1.32%±0.28%，峰8:遷移時(shí)間為10.84min土0.29min、相對(duì)峰面積為3.56%±0.71%，峰9:遷移時(shí)間為11.66min土0.32min、相對(duì)峰面積為1.6%±0.32%，峰〗0:遷移時(shí)間為12.04min土0.34min、相對(duì)峰面積為7.27%±U4%，峰ll:遷移時(shí)間為12.32min±0.36min、相對(duì)峰面積為25.31%±3.12%，峰12:遷移時(shí)間為12.86min士0.40min、相對(duì)峰面積為1.74%±0.39%，峰13:遷移時(shí)間為13.28min±0.42min、相對(duì)峰面積為1.67%±0.40%,峰14:遷移時(shí)間為14.30min土0.47min、相對(duì)峰面積為2.07%±0.41°/0，峰15:遷移時(shí)間為16.00min土0.58min、相對(duì)峰面積為4.17%±0.93%,峰16:遷移時(shí)間為16.98min±0.72min、相對(duì)峰面積為9.47%±1.49%，峰17:遷移時(shí)間為18.47min土0.90min、相對(duì)峰面積為2.04%±0.50%。本發(fā)明方法中電泳所用的緩沖液是含5%乙腈的30mmol/L硼砂溶液，PH為9.60。本發(fā)明方法中用于確定川芎的17個(gè)特征峰是10批分別來(lái)自四川各個(gè)產(chǎn)區(qū)的川芎按照相同條件提取和高效毛細(xì)管電泳分離獲得的指紋圖譜中共有的特征峰，且譜峰清晰分離，每個(gè)特征都具有明確的遷移時(shí)間和相對(duì)峰面積，較全面地反映了四川川芎的主要成分的組成特點(diǎn)，可用于四川川芎的真?zhèn)舞b別和品質(zhì)檢驗(yàn)。本發(fā)明方法所建立的川芎指紋圖譜峰分離良好，易于辨認(rèn)，尤其兩個(gè)主峰川芎嗪和阿魏酸均達(dá)到很好的基線分離，有利于這兩個(gè)指標(biāo)成份的定量分析。此外，本發(fā)明方法還具有樣品制備方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、易于掌握；所需分析時(shí)間短；有機(jī)溶劑的用量少，經(jīng)濟(jì)環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。附圖說(shuō)朋圖1是川芎嗪對(duì)照品的高效毛細(xì)管電泳圖譜。圖2是阿魏酸對(duì)照品的高效毛細(xì)管電泳圖譜。圖3是川芎藥材高效毛細(xì)管電泳標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。圖4是10批來(lái)自四川不同產(chǎn)區(qū)川芎的高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜，其中Sl:四川彭州蒙陽(yáng)鎮(zhèn)藥材公司，S2:四川彭州敖平鎮(zhèn)采挖，S3:四川彭州市藥材公司，S4:四川新都縣新都鎮(zhèn)采挖，S5:四川新都縣藥材公司，S6:四川新都縣新民鎮(zhèn)巿售，S7:四川都江堰石羊鎮(zhèn)采挖，S8:四川都江堰竹瓦村采挖，S9:四川都江堰市藥材公司，S10:四川都江堰大觀鎮(zhèn)藥材公司。圖5四川彭州蒙陽(yáng)鎮(zhèn)川芎樣品高效毛細(xì)管電泳圖譜，色譜峰所標(biāo)數(shù)字依次代表峰號(hào)、遷移時(shí)間、峰面積百分率。圖6是同一批產(chǎn)于四川彭州蒙陽(yáng)鎮(zhèn)川芎樣品連續(xù)進(jìn)樣5次的高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜。圖7是同一批產(chǎn)于四川彭州蒙陽(yáng)鎮(zhèn)川芎樣品不同時(shí)間段進(jìn)樣的高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜。圖8是同一批產(chǎn)于四川彭州蒙陽(yáng)鎮(zhèn)川芎處理6份的高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜。圖9河南川芎樣品高效毛細(xì)管電泳圖譜，色譜峰所標(biāo)數(shù)字依次代表峰號(hào)、遷移時(shí)間、峰面積百分率。圖10四川川芎標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜與河南川芎圖譜相似性比較，其中S1表示四川川芎標(biāo)準(zhǔn)圖譜；S2表示河南川芎圖譜)。具體實(shí)施方式本發(fā)明方法中川芎共有峰的確定1儀器、樣品、試藥1.1儀器P/ACETMMDQ毛細(xì)管電泳系統(tǒng)(美國(guó)>Beckman)，二極管硨列檢測(cè)器，毛細(xì)管為eCApTM(75iJniX60cm，有效長(zhǎng)度50cm)。采用國(guó)家藥典委員會(huì)指定的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行指紋圖譜分析。1.2樣品IO批川芎樣品，分別來(lái)自四川彭州3批，四川新都縣3批，四川都江堰4批,經(jīng)鑒定均為川芎("^/WJ'c湖c/"朋;r/0/^Hort.)的干燥根莖。1.3試劑川芎嗪、阿魏酸為色譜純(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供)，乙腈、硼砂為分析純，水為超純水。2方法與結(jié)果2.1將川芎嗪和阿魏酸分別按下述方法進(jìn)行高效毛細(xì)管電泳分析將川芎嗪溶于超純水、阿魏酸溶于卯％甲醇(含5%冰乙酸)配制成一定濃度的對(duì)照品溶液，采用壓力進(jìn)樣法進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為137.9kpa，進(jìn)樣時(shí)間為5秒，然后在分離電壓為25kV、溫度為2(TC下進(jìn)行電泳2030min，電泳緩沖液為含5%乙腈的3Ommol/L硼砂溶液，用NaOH調(diào)PH至9.60，最后用295nm的紫外光檢測(cè)分離物，獲得川芎嗪和阿魏酸的標(biāo)準(zhǔn)電泳圖，如圖1和圖2所示。2.2將四川各產(chǎn)地的川芎分別按下述方法制備供試品溶液并進(jìn)行高效毛細(xì)管電泳分析-精密稱取川芎粗粉5.00g，加水回流提取2次，每次加水10倍量提取lh，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至每lral藥液相當(dāng)于川芎藥材l.OOg，取濃縮液lml加水稀釋至10ml，10000轉(zhuǎn)/分離心5min，取上清液用0.45ura微孔濾膜過(guò)濾；取濾液作為進(jìn)樣液，采用壓力進(jìn)樣法進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為137.9kpa，進(jìn)樣時(shí)間為5秒，然后在分離電壓為25kV、溫度為20'C下進(jìn)行電泳2030min，電泳緩沖液為含5%乙腈的3Ommol/L硼砂溶液，用NaOH調(diào)PH至9.60，最后用295nm的紫外光檢測(cè)分離物，獲得所測(cè)藥材的指紋圖譜，見(jiàn)圖4。在圖4的基礎(chǔ)上，采用國(guó)家藥典委員會(huì)指定的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行指紋圖譜分析，得到如圖3所示的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜和下表1所示的數(shù)據(jù)。表l:川芎藥材指紋圖譜特征峰遷移時(shí)間及峰面積百分率(n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>峰12'12.863.091.7422.31峰1313.283.151.6724.15ii1414.33.322.0719.76峰15163.654.1722.37峰1616"84.239.4715.76峰1718.474.862.0424.78注其中A表示峰遷移時(shí)間(min)，RSDA表示峰遷移時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差；B代表各峰占總峰面積的百分率(％)，即相對(duì)峰面積，RSDB表示相對(duì)峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。將圖1和圖2與圖3進(jìn)行比較可知，遷移時(shí)間為4.94min和12.32min的特征峰分別是川芎嗪和阿魏酸，再?gòu)谋?可清楚看出所述川芎嗪和阿魏酸的相對(duì)峰面積分別為29%和25%。例2川芎的鑒定以及本發(fā)明方法的精密度、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性試驗(yàn)1儀器、樣品、試藥-1.1儀器P/ACEMDQ毛細(xì)管電泳系統(tǒng)(美國(guó)，Beckman)，二極管陣列檢測(cè)器，毛細(xì)管為eCApTM(75pmX60cm,有效長(zhǎng)度50cni)。采用國(guó)家藥典委員會(huì)指定的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行指紋圖譜分析。1.2樣品產(chǎn)于四川彭州蒙陽(yáng)鎮(zhèn)的川芎1.3試劑乙腈、硼砂為分析純，水為超純水。2方法2.1鑒別將川芎分別按下述方法進(jìn)行高效毛細(xì)管電泳分析精密稱取川芎粗粉5.00g，加水回流提取2次，每次加水IO倍量提取lh，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至每1ml藥液相當(dāng)于川芎藥材1.00g，取濃縮液lml加水稀釋至10ml，10000轉(zhuǎn)/分離心5min，取上清液用0.45ym微孔濾膜過(guò)濾；取濾液作為進(jìn)樣液，采用壓力進(jìn)樣法進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為137.9kpa，進(jìn)樣時(shí)間為5秒，然后在25kV、2(TC下進(jìn)行電泳分離2030min，電泳緩沖液為含5%乙腈的30mmol/L硼砂溶液，用NaOH調(diào)PH至9.60，最后用295nm的紫外光檢測(cè)分離物，獲得所測(cè)藥材的指紋圖譜(見(jiàn)圖5)。該批川芎的指紋圖譜如圖5所示，具有遷移時(shí)間分別為4.97min、5.59min、6.Olmin、6.90min、7.62min、8.65min、8.95min、11.02min、11.87min、12.27min、12.57min、13.llmin、13.55min、14.64min、16.40min、17.44min、18.99min和峰面積百分率為25.89%、1.35%、0.89%、4.43%、0.84%、1.76%、1.02%、3.76%、1.24%、7.70%、28.20%、2.30%、1.70%、2.64%、5.15%、9.24%、1.81%的特征峰，判斷為四川川芎，判斷結(jié)果與實(shí)際相符。2.2本發(fā)明方法的精密度、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性試驗(yàn)2.2.1本發(fā)明方法的精密度試驗(yàn)按2.1方法制備川芎供試品溶液，并按2.1電泳條件連續(xù)進(jìn)樣5次，將所得色譜圖進(jìn)行相似度比較，5次進(jìn)樣的相似度(中位數(shù))結(jié)果見(jiàn)表2，結(jié)果表明相似度均在0.99上，說(shuō)明精密度良好，精密度試驗(yàn)色譜圖見(jiàn)圖6。表2川芎指紋圖譜精密度試驗(yàn)相似度計(jì)算結(jié)果(n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2.2.2本發(fā)明方法的穩(wěn)定性試驗(yàn)按2.1方法制備川芎供試品溶液，并按2.1電泳條件，分別在O、6、12、24、36h進(jìn)樣分析，將所得色譜圖進(jìn)行相似度(中位數(shù))比較，結(jié)果見(jiàn)表3，結(jié)果表明相似度均在0.99以上，說(shuō)明樣品在試驗(yàn)時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定性好，精密度試驗(yàn)色譜圖見(jiàn)圖7。表3川芎指紋圖譜穩(wěn)定性試驗(yàn)相似度計(jì)算結(jié)果(n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2.2.3本發(fā)明方法的重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批川芎6份，分別按2.1方法制備供試品溶液，并按2.1電泳條件，將所得色譜圖進(jìn)行相似度(中位數(shù))比較結(jié)果見(jiàn)表4，結(jié)果表明相似度均在0.99以上，說(shuō)明本方法重現(xiàn)性好，重現(xiàn)性試驗(yàn)色譜圖見(jiàn)圖8。表4川芎指紋圖譜重現(xiàn)性試驗(yàn)相似度計(jì)算結(jié)果(n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>例3電泳條件應(yīng)用1儀器、樣品、試藥1.1儀器P/ACEMDQ毛細(xì)管電泳系統(tǒng)(美國(guó)，Beckman)，二極管陣列檢測(cè)器，毛細(xì)管為eCApTM(75pmX60cm，有效長(zhǎng)度50cm)。采用國(guó)家藥典委員會(huì)指定的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行指紋圖譜分析。1.2樣品來(lái)自河南省的川芎。1.3試劑乙腈、硼砂為分析純，水為超純水。2.1鑒別將河南川芎分別按下述方法進(jìn)行高效毛細(xì)管電泳分析精密稱取川芎粗粉5.00g，加水回流提取2次，每次加水10倍量提取lh，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至每1ml藥液相當(dāng)于川芎藥材1.00g,取濃縮液lml加水稀釋至lOml，10000轉(zhuǎn)/分離心5min,取上清液用0.45nm微孔濾膜過(guò)濾；取濾液作為進(jìn)樣液，采用壓力進(jìn)樣法進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為137.9kpa，進(jìn)樣時(shí)間為5秒，然后在25kV、20。C下進(jìn)行電泳分離2030min,電泳緩沖液為含5%乙腈的30mmol/L硼砂溶液，用NaOH調(diào)PH至9.60,最后用295nm的紫外光檢測(cè)分離物，獲得所測(cè)藥材的指紋圖譜見(jiàn)圖9，遷移時(shí)間及峰面積百分率見(jiàn)表5。表5河南川芎HPCE指紋圖譜與四川川芎標(biāo)準(zhǔn)圖譜類別S](min)S2(min)Sl(%)S2(%)峰14.944.9129.3424.08峰25.555.482.271.445.840.42峰35.965.891.051.02峰46.836.754.613.46峰57.537.460.90.86峰68.548.471.610.92峰78.838.691.321.01峰810.8410.723.564.27峰911.6611.571.61.61峰1012.04無(wú)7.27無(wú)峰1112.3211.925.3135.9512.251.18峰1212.8612.751.742.01峰1313.2813.191.671.97峰1414.313.752,071.43峰51615.634.174.54峰1616.9816.789.4711.27峰718.4718.312.042.52注S]代表四川川芎標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，Sl(min)遷移吋間S(％)峰面積百分率;S2代表河南川芎指紋圖譜，S2(min)遷移時(shí)間S2(%)峰面積百分率。從表5可以看出，雖然河南川芎的HPCE指紋圖譜與四川川芎的指紋圖譜在各特征峰的遷移時(shí)間上沒(méi)有顯著差別，但各峰的相對(duì)峰面積與四川川芎的差異較大，基本上都不在四川川芎各特征峰的波動(dòng)范圍內(nèi)，可見(jiàn)本發(fā)明四川川芎的HPCE指紋圖譜是四川川芎特有的，本發(fā)明所述的方法可用于四川川芎的鑒定。權(quán)利要求1.一種四川川芎的鑒定方法，該方法由以下步驟組成稱取待測(cè)藥材粗粉，加水回流提取1～3次，每次加水5～30倍量提取1h～2h，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至每1ml藥液相當(dāng)于川芎藥材0.5～1g，取濃縮液加水稀釋至原體積10倍，5000～10000轉(zhuǎn)/分離心5～10min，取上清液用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾；取濾液作為進(jìn)樣液，采用壓力進(jìn)樣法對(duì)內(nèi)徑為75μm、總長(zhǎng)度60cm、有效長(zhǎng)度為50cm的eCAPTM毛細(xì)管進(jìn)樣，進(jìn)樣壓力為137.9kpa，進(jìn)樣時(shí)間為5秒，然后在分離電壓為25kV、溫度為20℃下進(jìn)行電泳分離20min～30min，最后用295nm的紫外光檢測(cè)分離物，獲得所測(cè)藥材的指紋圖譜，該指紋圖譜具有以下特征峰峰1遷移時(shí)間為4.94min±0.10min、相對(duì)峰面積為29.34％±3.34％，峰2遷移時(shí)間為5.55min±0.13min、相對(duì)峰面積為2.27％±0.31％，峰3遷移時(shí)間為5.96min±0.14min、相對(duì)峰面積為2.35％±0.37％，峰4遷移時(shí)間為6.83min±0.16min、相對(duì)峰面積為4.61％±0.53％，峰5遷移時(shí)間為7.53min±0.19min、相對(duì)峰面積為0.9％±0.21％，峰6遷移時(shí)間為8.54min±0.22min、相對(duì)峰面積為1.61％±0.31％，峰7遷移時(shí)間為8.83min±0.23min、相對(duì)峰面積為1.32％±0.28％，峰8遷移時(shí)間為10.84min±0.29min、相對(duì)峰面積為3.56％±0.71％，峰9遷移時(shí)間為11.66min±0.32min、相對(duì)峰面積為1.6％±0.32％，峰10遷移時(shí)間為12.04min±0.34min、相對(duì)峰面積為7.27％±1.14％，峰11遷移時(shí)間為12.32min±0.36min、相對(duì)峰面積為25.31％±3.12％，峰12遷移時(shí)間為12.86min±0.40min、相對(duì)峰面積為1.74％±0.39％，峰13遷移時(shí)間為13.28min±0.42min、相對(duì)峰面積為1.67％±0.40％，峰14遷移時(shí)間為14.30min±0.47min、相對(duì)峰面積為2.07％±0.41％，峰15遷移時(shí)間為16.00min±0.58min、相對(duì)峰面積為4.17％±0.93％，峰16遷移時(shí)間為16.98min±0.72min、相對(duì)峰面積為9.47％±1.49％，峰17遷移時(shí)間為18.47min±0.90min、相對(duì)峰面積為2.04％±0.50％；所述的電泳所用的緩沖液是含5％乙腈的30mmol/L硼砂溶液，用NaOH調(diào)PH為9.60。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種四川川芎的鑒定方法，其特征是特征峰中峰1為川芎嗪的特征峰，峰ll為阿魏酸的特征峰。全文摘要本發(fā)明提供了一種四川川芎的鑒定方法，該方法由以下步驟組成以川芎的水提物作為供試品溶液，進(jìn)行HPCE分析，電泳條件為毛細(xì)管為eCAP^TM(75μm×60cm，有效長(zhǎng)度50cm)，緩沖液為含5％乙腈的30mmol/L硼砂，NaOH調(diào)pH至9.60；壓力進(jìn)樣137.9kpa，5sec，分離條件25KV，20℃，檢測(cè)波長(zhǎng)295nm；得到川芎HPCE指紋圖譜，該圖譜中具有如表1所示的特征峰，即說(shuō)明所檢測(cè)川芎為四川的地道川芎。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是樣品制備方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、易于掌握；所需分析時(shí)間短；有機(jī)溶劑的用量少，經(jīng)濟(jì)環(huán)保；利用指紋圖譜可有效鑒別四川川芎，并保證其質(zhì)量的穩(wěn)定、均一、可控。文檔編號(hào)G01N30/00GK101226177SQ20081002610公開(kāi)日2008年7月23日申請(qǐng)日期2008年1月29日優(yōu)先權(quán)日2008年1月29日發(fā)明者孫學(xué)剛,肖亞聰,魏鳳環(huán)申請(qǐng)人:南方醫(yī)科大學(xué)