專利名稱：用于快速診斷的試驗(yàn)裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及檢測(cè)生物樣品中分析物或其類似物的方法和裝 置。本發(fā)明涉及改進(jìn)的快速試驗(yàn)，例如"試紙"裝置。具體而言， 本發(fā)明涉及由 一個(gè)或更多個(gè)活性側(cè)構(gòu)成的試驗(yàn)裝置，允許進(jìn)行單路 或多路檢測(cè)、定量或半定量檢測(cè)。本發(fā)明中所述的裝置允許利用一 次操作來檢測(cè)或識(shí)別各種生物制品或化學(xué)制品。
背景技術(shù)：
已經(jīng)開發(fā)了用于檢測(cè)生物樣品中的分析物的若干種方法，例 如在診斷實(shí)驗(yàn)室中通過免疫色譜法進(jìn)行的常規(guī)診斷。EP 0 088 636、 EP 0 186 799、 EP 0 284 232和WO 88/08534 公開了薄板狀色譜裝置，其至少包括第一和第二區(qū)域。這些文獻(xiàn)中 公開的現(xiàn)有技術(shù)裝置包括-第一區(qū)，其包含多孔活性材料以允許液體移動(dòng)到涂有特異性 試劑的敏化區(qū)。該第一區(qū)包括在其上干燥的或浸入其中的檢測(cè)試 劑。它還可以包括應(yīng)用(分)區(qū)和/或吸收(分)區(qū)。該第一區(qū)一般 稱為施加區(qū)；-第二區(qū)，也稱為檢測(cè)區(qū)，由吸附有特異性試劑的多孔活性材 料制成。布置在該裝置第二區(qū)的分區(qū)(例如線)的這些試劑中的一 些對(duì)待檢測(cè)分析物是特異的，并且應(yīng)當(dāng)與標(biāo)記樣品分析物的試劑復(fù) 合物反應(yīng)，而最終布置在第二區(qū)的另外分區(qū)(例如另外的線)上的 其它非特異性試劑則用于與過量的檢測(cè)試劑反應(yīng)。優(yōu)選用硝化纖維 素制成的該第二區(qū)還可以包含對(duì)照分區(qū)，優(yōu)選位于檢測(cè)區(qū)的后面； 和-第三區(qū)，'由多孔材料制成，用于吸收穿過第一區(qū)和第二區(qū)的 過量液體。該區(qū)一般稱為吸收區(qū)。7現(xiàn)有技術(shù)的(免疫)色譜裝置可以具有塑料或其它的背襯支 持體和/或可以容納在不透水的外殼中。上述三個(gè)區(qū)以毛細(xì)管形式相互接觸以允許液體從施加區(qū)移動(dòng) 到第三區(qū)。盡管目前的使用測(cè)試條的色i普裝置可以使用，它們?nèi)跃哂性S 多缺點(diǎn)。許多樣品(例如糞便樣品)含有可能堵塞色譜介質(zhì)孔的顆 粒物質(zhì)，極大地阻礙免疫色譜過程。此外，現(xiàn)有的色譜試驗(yàn)裝置經(jīng) 常難以將樣品施加到色譜介質(zhì)以便使樣品前沿均勻地穿過色譜介 質(zhì)以確保樣品以均勻、直線方式到達(dá)進(jìn)行結(jié)合的區(qū)域。制備樣品和產(chǎn)生廢物是目前可用的免疫色鐠裝置和技術(shù)的其 它問題。幾乎不可能將樣品(例如糞便)或取樣器(例如喉拭子) 直接施加到色鐠介質(zhì)。通常在將樣品施加到色譜介質(zhì)前，需要若干 次提取和預(yù)處理反應(yīng)。這些反應(yīng)通常由醫(yī)生或技術(shù)員在例如試管或 微量離心管等若干小容器中進(jìn)行，需要使用諸如移液管等轉(zhuǎn)移裝 置。這些被污染的裝置均必須用專門的預(yù)防措施處置，以便使可能 無意中接觸廢物的工作人員或人不被污染。因此，期望擁有能夠直接接收可能是污染的樣品或樣品制備 裝置的色鐠檢測(cè)裝置，以消除對(duì)提取容器和轉(zhuǎn)移裝置的需要。優(yōu)選 呈測(cè)試條形式的這種裝置還應(yīng)該能夠?qū)蓄w粒物的樣品進(jìn)行化 驗(yàn)，而沒有堵塞或干擾，并且應(yīng)該能夠?qū)悠肪鶆虻剡f送到色譜介 質(zhì)，以提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確度和精度。改進(jìn)化驗(yàn)裝置的該方面對(duì)避免假 陰性和假陽性尤為重要。發(fā)明目的本發(fā)明的目的在于提供高度柔性的薄板狀裝置，其適于檢測(cè)溶 液或生物樣品中的多種分析物或其類似物，這些檢測(cè)在同 一裝置中進(jìn) 行。該薄板狀裝置設(shè)計(jì)為使液體通過重力和毛細(xì)管作用來運(yùn)動(dòng)。發(fā)明內(nèi)容在第一方面，本發(fā)明提供一種(重力驅(qū)動(dòng)的)由一個(gè)或更多活 性側(cè)面構(gòu)成的試驗(yàn)裝置，其允許通過重力驅(qū)動(dòng)過程進(jìn)行單路或多路檢測(cè)、定量或半定量檢測(cè)，該重力驅(qū)動(dòng)過程會(huì)使液體樣品接觸該裝置的 不同反應(yīng)區(qū)域。具體而言，本發(fā)明提供檢測(cè)樣品中至少一種分析物的試驗(yàn)裝置，其包括固體支持體，其上提供若干并列的區(qū)，由此樣品能夠從樣品 接收區(qū)向樣品檢測(cè)區(qū)遷移，由此檢測(cè)至少一種分析物(如果存在的話), 由此兩個(gè)區(qū)都包括使樣品的毛細(xì)管流通過所述區(qū)的材料，其特征在于 在所述區(qū)之間設(shè)置有輸送樣品的中間區(qū)，該中間區(qū)不含任何毛細(xì)管材 料，以允許樣品通過重力遷移到處于豎直位置的支持體上。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)的試驗(yàn)裝置尤 其適用于免疫檢測(cè)，并且包括免疫試劑作為捕獲試劑(capture reagent )。在第二方面，本發(fā)明提供一種分析物檢測(cè)方法，用于檢測(cè)樣品 中的至少一種分析物，其包括以下步驟使根據(jù)本發(fā)明的試驗(yàn)裝置與 樣品接觸，并使所述樣品在重力作用下從該裝置的頂部向該裝置的底 部移動(dòng)穿過非毛細(xì)管區(qū)，以及檢測(cè)所述至少一種分片斤物。具體而言，該分析物檢測(cè)方法包括使裝置上的樣品接收區(qū)接觸 樣品，使樣品通過毛細(xì)管作用遷移通過樣品接收區(qū)到達(dá)非毛細(xì)管區(qū)， 使樣品在重力作用下遷移通過非毛細(xì)管區(qū)到#測(cè)區(qū)，和使樣品在毛 細(xì)管作用下遷移通過檢測(cè)區(qū)并檢測(cè)分析物。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述試驗(yàn)裝置(1)包括在固體支持體 (18)的一個(gè)或更多側(cè)面上的從該裝置的一端向該裝置的另一端布置 的*第一毛細(xì)管區(qū)，其包括樣品施加區(qū)(2);*第二毛細(xì)管區(qū)，其包括檢測(cè)區(qū)(4)、緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布 置的任選的中間區(qū)(6)、和緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布置的任選 的吸收區(qū)(5)，所述檢測(cè)區(qū)(4)任選包括對(duì)照分區(qū)；和*非毛細(xì)管區(qū)(14)，其將樣品施加區(qū)(2)與檢測(cè)區(qū)(4)或任 選的中間區(qū)(6)隔開，其中檢測(cè)E (4)包括特異性識(shí)別至少一種分析物或'其類似物的至 少一種捕獲試劑；并且9其中樣品施加區(qū)(2)包括至少一種分析物特異性綴合物，其具有 用于檢測(cè)至少一種分析物或其類似物的直接或間接標(biāo)記。該裝置上可 以存在或不存在中間區(qū)(6),并且中間區(qū)(6 )可以任選包括至少一種 分析物特異性綴合物，其具有用于檢測(cè)至少一種分析物或其類似物的 直接或間接標(biāo)記。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，分析物檢測(cè)方法包括以下步 驟豎直放置試驗(yàn)裝置，將樣品施加到裝置頂部，使樣品遷移通過樣 品施加區(qū)(2)并使至少一種分析物特異性綴合物7jc合，使所述樣品中 的至少 一種分析物與至少 一種分析物特異性綴合物>^應(yīng)，由此形成至 少一種復(fù)合物，使至少一種復(fù)合物到達(dá)非毛細(xì)管區(qū)(14)，在重力作用 下通過非毛細(xì)管區(qū)(14)以接觸和遷移通過任選的中間區(qū)(6)并通過 檢測(cè)區(qū)(4)，由此與至少一種捕獲試劑反應(yīng)并產(chǎn)生檢測(cè)信號(hào)，從而檢 測(cè)所述至少 一種分;f斤物。在另 一方面，本發(fā)明提供用于檢測(cè)樣品中的至少一種分析物的 分析物檢測(cè)方法，其包括以下步驟使樣品接觸化驗(yàn)裝置，使樣品在 重力作用下從所述裝置的頂部移動(dòng)到底部，并且檢測(cè)至少一種分析物 或其類似物，其中所述化驗(yàn)裝置選自根據(jù)本發(fā)明的(重力驅(qū)動(dòng)的)試 驗(yàn)裝置、測(cè)試條、試紙條、診斷條(diagnostic strip )、流式裝置和側(cè) 流式裝置。本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置和方法尤其適合于但不限于檢測(cè)樣 品中的分析物，具體而言，適用于檢測(cè)來自(有害)微生物的一種或 更多種分析物或類似物，所述微生物包括小球隱孢子蟲 (Oj/7tos/7on.rf/w附戸rv"-附)、鼠弓形體(7bjwp/fl湖"gowd,T)、蘭伯賈第蟲 (GzVin//fl/fl i6//")、 ^艮難梭菌(C.力:伊"7e)、大腸桿菌(Eco//)、痢疾阿米 巴(E/^to(v"cff)、 A型和B型流感病毒、輪狀病毒、RSV(呼吸道合 胞病毒)、40 & 41型腺病毒或其它腺病毒組、嗜肺性軍團(tuán)菌(丄^/0/^// /meMW0/7/w7fl)尿抗原、人和動(dòng)物源性的冠狀病毒和人偏肺病毒。本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置和方法可適用于多種類型的分析， 尤其可有利地用于免疫測(cè)定或寡核苷酸色譜快速檢驗(yàn) (oligochromatographic rapid assays )'以改善常規(guī)的固相免疫測(cè)定。 此外，與現(xiàn)有技術(shù)中的化驗(yàn)相比，根據(jù)本發(fā)明生產(chǎn)的裝置相對(duì)容易使 用，需要較少的操作步驟和較不復(fù)雜的化驗(yàn)技術(shù)，并且還為未知樣品10的檢驗(yàn)提供快速的定量、半定量或定性結(jié)果的額外優(yōu)點(diǎn)。該裝置還有 利地適合用作對(duì)照，例如用于評(píng)估這類化驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。而且， 本發(fā)明裝置在制造過程中可以相對(duì)容易地制造。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)利用本發(fā)明 的這種裝置的化驗(yàn)對(duì)各種水平的分析物高度敏感。從在此對(duì)本發(fā)明的 詳細(xì)描述、附圖和說明本發(fā)明的實(shí)施例中，前述優(yōu)點(diǎn)以及其它優(yōu)點(diǎn)會(huì) 變得顯而易見。


圖1、2和3代表根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置的 截面?zhèn)纫晥D。圖4代表根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置的截面?zhèn)?視圖(4a、 4al、 4a2、 4a3)和正視圖(4b、 4c、 4d和4e)。圖5代表根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的包裝的透視圖(5a)和分解 圖(5b)。圖6代表根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的包裝的截面圖(6a)和半分 解正視圖(6b)。圖7代表根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的包裝的截面圖(7a)和后視 圖(7b)。
具體實(shí)施方式
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種試驗(yàn)裝置(1)，也稱為 "薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置"，用于檢測(cè)樣品中的至少 一種分析物， 該裝置包括固體支持體(18)，其包括從支持體的一端向另一端 并列布置的(i)作為樣品接收區(qū)(2)的第一毛細(xì)管區(qū)、(ii)非毛 細(xì)管區(qū)(14)和(iii)作為樣品檢測(cè)區(qū)(4)的第二毛細(xì)管區(qū)。根據(jù) 本發(fā)明，該裝置包括布置在支持體縱軸兩端的兩個(gè)毛細(xì)管區(qū)，其通 過非毛細(xì)管區(qū)相互流動(dòng)連通，其中待試驗(yàn)樣品可以在重力作用下流 動(dòng)。所述固體支持體可以是任意合適的形狀，包括但不限于矩形、 正方形、三角形或任意其它形狀。優(yōu)選地，所述固體支持體(18) 為基本矩形的形狀。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，該試驗(yàn)裝置的樣品接收區(qū)包括樣品施加區(qū)(2),樣品檢測(cè)區(qū)包括檢測(cè)區(qū)(4)和任選的緊靠所述 檢測(cè)區(qū)(4)布置的中間區(qū)(6)，其中所述檢測(cè)區(qū)(4)任選包括對(duì) 照分區(qū)。優(yōu)選地，所述中間區(qū)(6)和所述檢測(cè)區(qū)(4)相互接觸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述檢測(cè)區(qū)包括緊靠檢測(cè)區(qū)(4)布置 并與其彼此毛細(xì)管流連通的吸收區(qū)(5)。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，用于檢測(cè)樣品中至少一種 分析物的試驗(yàn)裝置(1)包括在固體支持體(18)的一個(gè)或更多 側(cè)面上從該裝置的一端向另一端布置的(a) 第一毛細(xì)管區(qū)，其包括樣品施加區(qū)(2),(b) 第二毛細(xì)管區(qū)，其包括檢測(cè)區(qū)(4)、緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4) 布置的任選的中間區(qū)(6)和緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布置的任選的吸收 區(qū)(5),其中所述檢測(cè)區(qū)(4)任選地包括對(duì)照分區(qū)；和(c) 非毛細(xì)管區(qū)(14)，其將第一毛細(xì)管區(qū)的樣品施加區(qū)(2)與 第二毛細(xì)管區(qū)的檢測(cè)區(qū)(4)或任選的中間區(qū)(6)隔開，其中所述樣品施加區(qū)(2)、所述非毛細(xì)管區(qū)(14)和所述檢測(cè) 區(qū)(4)或所述任選的中間區(qū)(6)經(jīng)布置4吏得當(dāng)使用該裝置時(shí)樣品可 以在重力作用下從樣品施加區(qū)(2)流到檢測(cè)區(qū)(4)或流到任選的 中間區(qū)(6)。根據(jù)一個(gè)具體實(shí)施方案，檢測(cè)區(qū)(4)包括特異性識(shí)別至少一 種分析物或其類似物的至少一種捕獲試劑；并且樣品施加區(qū)(2)包括 至少一種分析物特異性綴合物，其具有用于檢測(cè)至少一種分析物或其 類似物的直接或間接標(biāo)記。根據(jù)另一個(gè)具體實(shí)施方案，中間區(qū)(6)可 以包括至少一種分析物特異性綴合物，其具有用于檢測(cè)至少一種分析 物或其類似物的直接或間接標(biāo)記。根據(jù)另一個(gè)具體實(shí)施方案，檢測(cè)區(qū)(4)包括特異性識(shí)別至少兩 種分析物或其類似物的至少兩種捕獲試劑；并且樣品施加區(qū)(2)包括 至少兩種分析物特異性綴合物，其具有用于檢測(cè)至少兩種分析物或其 類似物的直接或間接標(biāo)記。根據(jù)又一個(gè)具體實(shí)施方案，檢測(cè)區(qū)(4)包括特異性識(shí)別至少三 種分析物或其類似物的至少三種捕獲試劑；并且樣品施加區(qū)(2)包括 至少三種分析物特異性綴合物，其具有用于檢測(cè)所述至少三種分析物 或其類似物的直接或間接標(biāo)記。本發(fā)明尤其適用于進(jìn)行多路檢測(cè)，其中檢測(cè)多于一種的分析物。本文使用的術(shù)語"試驗(yàn)裝置"和"重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)(GDT)裝置" 可以互換使用，指的是一種試驗(yàn)裝置，其中該裝置的不同區(qū)經(jīng)布置使 得當(dāng)使用該裝置時(shí)樣品可以在重力作用下從樣品施加區(qū)(2)通過非 毛細(xì)管區(qū)(14)而流到檢測(cè)區(qū)(4)。根據(jù)本發(fā)明裝置的非毛細(xì)管區(qū) (14)提供混合區(qū)，由此允許正確和快速地混合試劑，從而提高化 驗(yàn)的準(zhǔn)確性和一致性。即使樣品是粘性的，采用本發(fā)明裝置的試驗(yàn) 也可快速進(jìn)行。這與需要耗費(fèi)長(zhǎng)得多的時(shí)間進(jìn)行的常規(guī)試驗(yàn)不同。 由于所述非毛細(xì)管區(qū)(14),所述裝置僅能在豎直位置上使用。參照附圖的圖1、 2、 3和4,本發(fā)明重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置的具 體實(shí)施方案一般顯示于(1)。根據(jù)本發(fā)明的裝置(1)是例如基本 矩形的薄板狀裝置，特別是測(cè)試條，其包括基本平面的柔性、剛性 或半剛性支持體(18)，所述支持體(18)包括在其一個(gè)或更多側(cè) 面上的樣品施加區(qū)(2)、任選的中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和任選的 吸收區(qū)(5),其中所述中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相 互接觸。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，非毛細(xì)管區(qū)(14)將中間區(qū)(6) 與樣品施加區(qū)(2)隔開。區(qū)(2)由非毛細(xì)管區(qū)(14)與區(qū)(6)、 (4) 和(5)隔開。固體支持體上的各區(qū)沿測(cè)試條的縱軸設(shè)置，相互緊 靠。圖4a示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)施方案的沒有中間區(qū)(6)的 裝置。在圖4a中，該裝置包括在剛性或半剛性支持體(18)的一 個(gè)或更多側(cè)面上的樣品施加區(qū)(2)、檢測(cè)區(qū)(4)和任選的吸收區(qū) (5),其中所述檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互毛細(xì)管流連通。樣 品施加區(qū)(2)設(shè)置在固體支持體的一端，并通過不含任何毛細(xì)管 材料的區(qū)(14)與檢測(cè)區(qū)(4)(圖4a)或任選的中間區(qū)(6)(圖4al) 隔開。在一個(gè)實(shí)施方案中，樣品施加區(qū)(2)包括反應(yīng)區(qū)(3)。在一 個(gè)具體實(shí)施方案中，樣品施加區(qū)(2)包括一個(gè)或幾個(gè)在本文中稱為"第一吸收膜(12)"的吸收膜(12)和在反應(yīng)區(qū)(3)中的綴合 物區(qū)或墊(13 )。本文使用的"綴合物區(qū)(13 )"或"綴合物墊(13 )" 可以互換使用。樣品施加區(qū)(2)可以包括處于包括綴合物區(qū)或墊 (13)的第一反應(yīng)區(qū)(3)中的數(shù)種分析物特異性綴合物，所述綴 合物具有檢測(cè)所述分析物或其類似物的直接或間接標(biāo)記。樣品施加 區(qū)(2)包括至少一種分析物特異性綴合物。在一個(gè)替代實(shí)施方案中，樣品施加區(qū)(2)包括吸收膜(12)， 中間區(qū)(6)可以包括具有綴合物區(qū)或墊的反應(yīng)區(qū)。中間區(qū)(6)可以 包括處于包括綴合物區(qū)或墊的反應(yīng)區(qū)中的數(shù)種分析物特異性綴合 物，所述綴合物具有檢測(cè)所述分析物或其類似物的直接或間接標(biāo) 記。在另一個(gè)替代實(shí)施方案中，所述樣品施加區(qū)(2)和/或中間 區(qū)(6)都包括反應(yīng)區(qū)，所述反應(yīng)區(qū)包括含有一種或更多種分析物特異 性綴合物的綴合物區(qū)或墊，所述綴合物具有檢測(cè)所述分析物或其類似 物的直接或間接標(biāo)記。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述樣品施加區(qū)(2)還可以包括至少一 種對(duì)照綴合物，也稱為"遷移對(duì)照綴合物"。特異性綴合物和/或遷 移對(duì)照綴合物包括選自下組的標(biāo)記物，該組包括但不限于綴合的金 屬膠體、綴合的聚苯乙烯微球、碳納米管和具有特定顏色的微米或 納米顆粒、熒光碳納米管和熒光微米或納米顆粒。在一個(gè)實(shí)施方案 中，特異性綴合物和/或遷移對(duì)照綴合物包括金顆粒和/或聚苯乙烯 微球和/或碳納米管作為直接標(biāo)記物，并且導(dǎo)致對(duì)照和試驗(yàn)信號(hào)的出 現(xiàn)。在一個(gè)實(shí)施方案中，中間區(qū)(6)包括一種或幾種在本文中稱 為"第二吸收膜(15)"的吸收膜(15)，并且可以含有一種或更多種 特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，檢測(cè)區(qū)(4)包括由硝化纖維素或其它基 質(zhì)制成的活性膜(16),所述活性膜可以涂有與位于施加區(qū)中或存 在于待試驗(yàn)樣品中的其它試劑相互作用的試劑。優(yōu)選地，檢測(cè)區(qū)(4 ) 包括例如硝化纖維素作為活性膜(16)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述14檢測(cè)區(qū)(4)可以具有對(duì)照分區(qū)。檢測(cè)區(qū)可以包括幾種特異性識(shí)別 試驗(yàn)樣品中待檢測(cè)的分析物或其類似物或只位于綴合物區(qū)或墊 (13)中的對(duì)照綴合物的捕獲試劑(7、 7，)。捕獲試劑(7、 7，)可 以涂在檢測(cè)區(qū)(4)的不同水平處。捕獲試劑可以是分析物特異性 捕獲試劑(7)或?qū)φ?參照)捕獲試劑(7，)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí) 施方案中，檢測(cè)區(qū)(4)包括至少一條對(duì)照試驗(yàn)線，其具有至少一 種特異性識(shí)別在施加區(qū)(2)或中間區(qū)(6)中的對(duì)照綴合物的對(duì)照 捕獲試劑(7，)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，分析物特異性綴合物和/或?qū)φ?綴合物包括選自下組的標(biāo)記物，該組包括但不限于綴合的金屬膠 體、綴合的聚苯乙烯微球、碳納米管、具有特定顏色的微粒和熒光 微粒，優(yōu)選為選自金顆粒和聚苯乙烯微球的直接或間接標(biāo)記物。在一個(gè)實(shí)施方案中，吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17),其在本 文中稱為"第三吸收膜(17)"。根據(jù)本發(fā)明，非毛細(xì)管區(qū)(14)使樣品施加區(qū)(2)與檢測(cè)區(qū) (4)或與如果存在的中間區(qū)(6)的第二吸收膜(15)隔開。所述 非毛細(xì)管區(qū)用作混合區(qū)，其導(dǎo)致在使用該裝置時(shí)提高化驗(yàn)準(zhǔn)確性和 一致性。此外，由于沒有對(duì)所述樣品遷移的毛細(xì)管約束，所以非毛 細(xì)管區(qū)允許樣品快速遷移通過該裝置。還避免了堵塞。任選地，本發(fā)明的裝置可以容納在外殼中，所述外殼允許樣 品施加區(qū)的至少部分能夠與所述外殼的外部連通，使得樣品可以被 施加到所述裝置，所述外殼還包括并置在所述裝置的至少部分上方 的窗，位于所述部分的樣品檢測(cè)區(qū)與外殼的外部視覺連通。任選地，本發(fā)明裝置可以嵌入在由特定聚合物制成的外殼狀 系統(tǒng)中，使得樣品可以被施加到所述裝置。窗可以并置在所述裝置 的至少部分上方，即位于所述部分的樣品檢測(cè)區(qū)與聚合物嵌入件的 外部視覺連通。圖1、 4a3和2a具體顯示不同的實(shí)施方案，其中裝置(1)包 括中空或熱模制的外殼或殼體(11)。典型地，所述外殼(11)包 括中空殼構(gòu)造，并且由不透水的固體材料例如合適的塑料材料制成。外殼(11)允許樣品施加區(qū)(2)的至少部分與所述外殼(11) 的外部直接連通，使得所述樣品可以通過外殼接收區(qū)(IO)施加到 所述裝置(1 )。外殼(11)還包括并置在裝置(1)的至少部分上方的窗，使 得包括所述在裝置(1)中的至少檢測(cè)區(qū)(4)與外殼(11)的外部 視覺連通。所述窗可以是任意合適的形狀，以允許清楚地看見至少 檢測(cè)區(qū)(4)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述窗可以是矩形形式，優(yōu)選其 寬度比裝置(1)的寬度稍窄。圖2b、 4a、 4al、 4a2和3顯示本發(fā)明的不同實(shí)施方案，其中 裝置(1)沒有中空外殼(11)。圖2b、 4a2和3示出根據(jù)本發(fā)明實(shí) 施方案的裝置(1)，其中粘附物(20)可以覆蓋樣品施加區(qū)(2)、 非毛細(xì)管區(qū)(14)(如此形成空間，樣品可以在其中通過重力自由 移動(dòng))和中間區(qū)(6)并部分地與檢測(cè)區(qū)(4 )重疊。第二粘附物(21) 還可以覆蓋吸收區(qū)(5)。粘附物(20、 21)可以用于使液體流入不 同的膜(12、 13、 15、 16、 17)中，而不會(huì)從測(cè)試條表面逸出。在 一個(gè)替代實(shí)施方案中，圖2b和3中描述的裝置(1)可以用粘附物 覆蓋或包裹在熱模制的塑料管中或嵌入在特定聚合物中以避免在 測(cè)試條側(cè)面上的任何液體泄漏。圖4a和圖4al顯示根據(jù)本發(fā)明實(shí) 施方案的沒有中空外殼和粘附物的裝置(1)。參照?qǐng)D1,其示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的裝置(1)，包 括支持體(18)，在其一個(gè)側(cè)面上包括樣品施加區(qū)(2)、非毛細(xì) 管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)，其中中間區(qū) (6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互接觸。樣品施加區(qū)(2)與中 間區(qū)(6)由非毛細(xì)管區(qū)(14)隔開。固體支持體上的各區(qū)沿測(cè)試條 的縱軸設(shè)置，相互緊靠。樣品施加區(qū)(2)包括位于所述樣品施加 區(qū)(2) —端的反應(yīng)區(qū)(3)。具體而言，樣品施加區(qū)(2)包括第一 吸收膜(12)和處于所述樣品施加區(qū)(2)的反應(yīng)區(qū)(3)中的綴合 物區(qū)或墊(13)。中間區(qū)(6)包括第二吸收膜(15)。在一個(gè)實(shí)施方 案中，所述綴合物區(qū)專墊(13)帶有一種或更多種特異性綴命物和 /或?qū)φ站Y合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二吸收膜(15)'帶有 一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在第三實(shí)施方案中，16所述綴合物墊(13)和所述第二吸收膜(15)都帶有一種或更多種 特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。檢測(cè)區(qū)(4)包括含有分析物特異 性捕獲試劑(7)和對(duì)照(參照)捕獲試劑(7，)的活性膜(16)。 吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17)。裝置(1)容納在外殼(11)中， 所述外殼(11)允許第一吸收膜(12 )的至少部分與所述外殼(11) 的外部直接連通，使得可以通過外殼接收區(qū)(10)將樣品施加到所 述裝置(1 )。參照?qǐng)D2a，其示出根據(jù)本發(fā)明另一實(shí)施方案的裝置(1)，包 括支持體(18)，在其一側(cè)上從裝置的一端到裝置的另一端包括 設(shè)置在綴合物區(qū)或墊(13)兩側(cè)面上的第一吸收膜(12)、非毛細(xì) 管區(qū)(14)、第二吸收膜(15)、含有分析物特異性捕獲試劑(7) 和對(duì)照(參照)捕獲試劑(7，)的活性膜(16 )和第三吸收膜(17 )。 第二吸收膜(15)、活性膜(16)和第三吸收膜(17)相互接觸。 第一吸收膜(12)由非毛細(xì)管區(qū)(14)與第二吸收膜(15)隔開。 固體支持體上的膜和墊沿測(cè)試條的縱軸設(shè)置，相互緊靠。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)帶有一種或更多種特異性綴合 物和/或?qū)φ站Y合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二吸收膜(15) 帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在第三實(shí)施方案 中，所述綴合物區(qū)或塾(13)和所述第二吸收膜(15)都帶有一種 或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。裝置(1 )容納在外殼(11) 中，所述外殼(11)允許第一吸收膜(12)的至少部分能夠與所述 外殼(11)的外部直接連通，使得可以通過外殼接收區(qū)(10)將樣 品施加到所述裝置(1)。參照?qǐng)D2b，其示出根據(jù)本發(fā)明又一實(shí)施方案的裝置(1)，包 括支持體(18),在其一個(gè)側(cè)面上包括反應(yīng)區(qū)(3)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)，其中中間區(qū)(6)、 檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互接觸。反應(yīng)區(qū)(3)由非毛細(xì)管區(qū)(14)與中間區(qū)(6)隔開。固體支持體上的各區(qū)沿測(cè)試條的縱軸設(shè) 置，相互緊靠。反應(yīng)區(qū)(3)包括綴合物區(qū)或墊(13)。中間區(qū)(6) 包括第二吸收膜(15)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13) 帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在另 一個(gè)實(shí)施方 案中，所述第二吸收膜(15)帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在第三實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)和所 述第二吸收膜(15 )都帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y 合物。檢測(cè)區(qū)(4 )包括含有分析物特異性捕獲試劑(7 )和對(duì)照(參 照)捕獲試劑(7，)的活性膜(16 )。吸收區(qū)(5 )包括吸收膜(17 )。 粘附物(20)覆蓋反應(yīng)區(qū)(3)、非毛細(xì)管區(qū)(14)和中間區(qū)(6)， 并且部分地與檢測(cè)區(qū)(4)重疊。第二粘附物(21)覆蓋吸收區(qū)(5)。參照?qǐng)D3，其示出根據(jù)本發(fā)明另一實(shí)施方案的裝置(1)。所 述裝置(1)包括支持體(18 ),在其一個(gè)側(cè)面上包括樣品施加區(qū)(2 )、 非毛細(xì)管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)，其中 中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互接觸。樣品施加區(qū)(2) 由非毛細(xì)管區(qū)(14)與中間區(qū)(6)隔開。固體支持體上的各區(qū)沿測(cè) 試條的縱軸設(shè)置，相互緊靠。樣品施加區(qū)(2)包括位于所述樣品 施加區(qū)(2) —端的反應(yīng)區(qū)(3)。具體而言，樣品施加區(qū)(2)包括 第一吸收膜(12)和處于所述樣品施加區(qū)(2)的反應(yīng)區(qū)(3)中的 綴合物區(qū)或墊(13)。中間區(qū)(6)包括第二吸收膜(15)。在一個(gè)實(shí) 施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)帶有一種或更多種特異性綴合 物和/或?qū)φ站Y合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二吸收膜(15) 帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在第三實(shí)施方案 中，所述綴合物區(qū)或墊(13)和所述第二吸收膜(15)都含有一種 或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。檢測(cè)區(qū)(4)包括含有分 析物特異性捕獲試劑(7 )和對(duì)照(參照)捕獲試劑(7，)的活性膜 (16)。吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17)。粘附物(20)覆蓋反應(yīng)區(qū)(3) 、非毛細(xì)管區(qū)(14)和中間區(qū)(6),并且部分地與檢測(cè)區(qū)(4) 重疊。第二粘附物(21)覆蓋吸收區(qū)(5)。圖4a示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)施方案的沒有中間區(qū)(6) 和中空外殼及粘附物的裝置(1)。在圖4a中，裝置(1)包括支持 體(18),其上設(shè)置有樣品施加區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、檢測(cè)區(qū)(4) 和吸收區(qū)(5)，其中檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互接觸。 樣品施加區(qū)(2)由非毛細(xì)管區(qū)(14)與檢測(cè)區(qū)(4)隔開。固體支 持體上的各區(qū)沿測(cè)試條的縱軸設(shè)置，相互緊靠。樣品施加區(qū)(2) 包括位于所述樣品施加區(qū)(2) —端的反應(yīng)區(qū)(3)。具體而言，樣 品施加區(qū)(2)包括第一吸收膜(12)和處于所述樣品施加區(qū)(2)18的反應(yīng)區(qū)(3)中的綴合物區(qū)或墊(13)。所述綴合物區(qū)或墊(13) 含有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。檢測(cè)區(qū)(4)包 括含有分析物特異性捕獲試劑(7)和對(duì)照(參照)捕獲試劑(7，) 的活性膜(16)。吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17)。圖4al示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)施方案的沒有中空外殼及 粘附物的裝置(1 )。在圖4al中，裝置(1)包括支持體(18 )，其 上設(shè)置有樣品施加區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū) (4)和吸收區(qū)(5),其中中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5) 相互接觸。樣品施加區(qū)(2)由非毛細(xì)管區(qū)(14)與中間區(qū)(6)隔 開。固體支持體上的各區(qū)沿測(cè)試條的縱軸設(shè)置，相互緊靠。樣品施 加區(qū)(2)包括位于所述樣品施加區(qū)(2) —端的反應(yīng)區(qū)(3)。具體 而言，樣品施加區(qū)(2)包括第一吸收膜(12)和處于所述樣品施 加區(qū)(2)的反應(yīng)區(qū)(3)中的綴合物區(qū)或墊(13)。中間區(qū)(6)包 括第二吸收膜(15)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13) 帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在另一個(gè)實(shí)施方 案中，所述第二吸收膜(15)帶有一種或更多種特異性綴合物和/ 或?qū)φ站Y合物。在第三實(shí)施方案中，所述綴合物墊(13 )和所述第 二吸收膜(15 )都帶有一種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。 檢測(cè)區(qū)(4)包括含有分析物特異性捕獲試劑(7)和對(duì)照(參照) 捕獲試劑(7，)的活性膜(16)。吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17)。圖4a2示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)施方案的用于進(jìn)行多路化 驗(yàn)的裝置(1 )。裝置(1)包括支持體(18 ),其上設(shè)置有樣品施加 區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)， 其中中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互接觸。樣品施加 區(qū)(2)通過非毛細(xì)管區(qū)(14)與中間區(qū)(6)隔開。固體支持體上 的各區(qū)沿測(cè)試條的縱軸設(shè)置，相互緊靠。樣品施加區(qū)(2)包括位 于所述樣品施加區(qū)(2) —端的反應(yīng)區(qū)(3)。具體而言，樣品施加 區(qū)(2)包括第一吸收膜(12)和處于所述樣品施加區(qū)(2)的反應(yīng) 區(qū)(3)中的綴合物區(qū)或墊(13)。中間區(qū)(6)包括第二吸收膜(15)。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)帶有兩種或更多種特 異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二吸收 膜(15)帶有兩種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在第三實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)和所述第二吸收膜(15)都 帶有兩種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。檢測(cè)區(qū)(4)包 括含有至少兩種分析物特異性捕獲試劑(71、 72)和對(duì)照(參照) 捕獲試劑(7，)的活性膜(16)。吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17)。粘 附物(20)覆蓋反應(yīng)區(qū)(3)、非毛細(xì)管區(qū)(14)和中間區(qū)(6),并 且部分地與檢測(cè)區(qū)(4)重疊。第二粘附物(21)覆蓋吸收區(qū)(5)。圖4a3示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)具體實(shí)施方案的用于進(jìn)行多路化 驗(yàn)的裝置(1 )。裝置(1)包括支持體(18 )，其上設(shè)置有樣品施加 區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)， 其中中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和吸收區(qū)(5)相互接觸。樣品施加 區(qū)(2)由非毛細(xì)管區(qū)(14)與中間區(qū)(6)隔開。固體支持體上的 各區(qū)沿測(cè)試條的縱軸設(shè)置，相互緊靠。樣品施加區(qū)(2)包括位于 所述樣品施加區(qū)(2) —端的反應(yīng)區(qū)(3)。具體而言，樣品施加區(qū)(2) 包括第一吸收膜(12)和所述處于樣品施加區(qū)(2)的反應(yīng)區(qū)(3) 中的綴合物區(qū)或墊(13)。中間區(qū)(6)包括第二吸收膜(15)。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)帶有三種或更多種特 異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二吸收 膜(15)帶有三種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。在第三 實(shí)施方案中，所述綴合物區(qū)或墊(13)和所述第二吸收膜(15)都 帶有三種或更多種特異性綴合物和/或?qū)φ站Y合物。檢測(cè)區(qū)(4)包 括含有三種分析物特異性捕獲試劑(71、 72、 73)和對(duì)照(參照) 捕獲試劑(7，)的活性膜(16)。吸收區(qū)(5)包括吸收膜(17)。裝 置(1)容納在外殼(11)中，所述外殼(11)使第一吸收膜(12) 的至少部分能夠與所述外殼(11)的外部直接連通，使得樣品可以 通過外殼接收區(qū)(10)施加到所述裝置(1)。本發(fā)明的裝置優(yōu)選是免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置。在本發(fā)明的一 個(gè)實(shí)施方案中，圖4b到4e示意性地示出可以在裝置(1)上表示 結(jié)果的方式，即圖4b顯示試驗(yàn)之前的裝置(1),其中樣品檢測(cè) 區(qū)包括一種分析物特異性捕獲試劑(7)和對(duì)照(參照)捕獲試劑 (7，)。圖4c顯示陽性結(jié)果，其中在分析物特異性綴合物和所檢測(cè) 的分析物之間形成復(fù)合物，并且由此在捕獲試劑(7)特異性識(shí)別 出復(fù)合物的樣品檢測(cè)區(qū)處產(chǎn)生有色線(8)。對(duì)照捕獲試劑(7，)和參照綴合物之間的反應(yīng)產(chǎn)生對(duì)照線(9)。圖4d顯示陰性結(jié)果，其 中沒有檢測(cè)的分析物，因此也沒有有色線(8),并且對(duì)照捕獲試劑 (7，)和參照綴合物之間的反應(yīng)產(chǎn)生對(duì)照線(9 )。圖4e顯示無效結(jié) 果，其中對(duì)照捕獲試劑(7，)和參照綴合物之間沒有反應(yīng)，因此也 沒有對(duì)照線(9)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，在使用該裝置時(shí)，在陽性反應(yīng)的情 況下，即在分析物特異性綴合物和待檢測(cè)分析物之間形成一種或更 多種復(fù)合物的情況下，在沉積捕獲試劑(7)的檢測(cè)區(qū)(4)處產(chǎn)生 特定信號(hào)。捕獲試劑(7)特異性識(shí)別復(fù)合物以產(chǎn)生有色線(8)。 在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，對(duì)照捕獲試劑(7，)與參照綴合物之間 的反應(yīng)產(chǎn)生檢測(cè)區(qū)(4)中可見的對(duì)照線(9)。如上所述，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，裝置(1)的檢測(cè)區(qū)(4) 可以用一種或更多種試劑(分析物特異性捕獲試劑)(7)和遷移對(duì) 照捕獲試劑(對(duì)照捕獲試劑)(7')來敏化。試劑(7)的目的是直 接或間接檢測(cè)樣品中的待檢測(cè)分析物，而遷移對(duì)照捕獲試劑(7，) 或者針對(duì)偶聯(lián)至直接標(biāo)記物的抗分析物抗體，或者針對(duì)與待檢測(cè)的 分析物無關(guān)的特異性綴合物。捕獲試劑(7、 7，)和綴合物試劑優(yōu)選為免疫試劑、寡核苷酸、 配體或受體分子或其類似物。捕獲試劑(7、 7，)和綴合物試劑可以 選自下組寡核苷酸或其類似物、多克隆或單克隆抗體或超變抗體 片段、或通過血清化合物如IgG、 IgA、 IgE和IgM識(shí)別的抗原、 或像生物素-抗生物素蛋白鏈菌素那樣的配偶對(duì)中之一的特異性試 劑。檢測(cè)標(biāo)記物優(yōu)選為直接顆粒標(biāo)記物，尤其是選自包括綴合的 金屬膠體、綴合的聚苯乙烯微球、微米或納米顆?；蚓哂刑囟伾?的納米管和熒光微米或納米顆?；驘晒饧{米管的組的直接標(biāo)記物。具體而言，本發(fā)明涉及一種由聚合物質(zhì)構(gòu)成的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn) 裝置(1)，所述聚合物質(zhì)層疊在由聚合物制成的剛性或半剛性支持 體(18)上。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，剛性固體支持體(18)是 塑料背襯，例如塑料。本發(fā)明的裝置有利地允許檢測(cè)能夠以不同方式在活性膜(16)上反應(yīng)的不同分析物或其類似物。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，樣品施加區(qū)(2)的膜由玻璃纖維 制成，其具有由聚酯或其它基質(zhì)制成的第一反應(yīng)區(qū)(3)。在一個(gè)具 體實(shí)施方案中，檢測(cè)區(qū)(4)的膜由硝化纖維素制成，中間區(qū)(6) 的膜由玻璃纖維、聚酯或纖維素制成，而吸收區(qū)(5)的膜由纖維 素制成。樣品施加區(qū)(2)和第一反應(yīng)區(qū)(3)可以由相同的材料制 成。作為替代方案，可以將綴合物直接浸漬到樣品施加區(qū)(2)上。本發(fā)明的裝置(1)非常適用于檢測(cè)諸如溶液或生物樣品的試 驗(yàn)樣品中可能存在的幾種分析物或其類似物。該分析物或其類似物 可以從(有害的)微生物獲得或產(chǎn)生，所述(有害的)微生物例如 為但不卩艮于小球隱孢子蟲(Oj^似s/^wWw柳/mrv /w)、 鼠弓形體 (7i JW/7/fls柳fl go/i^r7)、 蘭4白賈第蟲(G7"nft'tf /"柳6//")、》艮難梭菌(C ^^"7e)、艱難梭菌毒素(C. Aj^"7"ov:/w力、大腸桿菌(E 痢疾阿 米巴(E/^to(^/c")、 RSV (呼吸道合胞病毒)、A型和B型流感病毒、 輪狀病毒、40 & 41型腺病毒或其它腺病毒組、嗜肺性軍團(tuán)菌 (丄eg/( /ie〃fl /mew/wo/7Mfl)尿抗原、人和動(dòng)物源性的冠狀病毒和人偏肺 ^^"^"。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，利用根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)裝 置來檢測(cè)多于一種的分析物或其類似物。本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝 置(1)非常適用于多路檢測(cè)。例如，可以在同一裝置中檢測(cè)A型 流感和B型流感或腺病毒和RSV的存在。其它的例子是輪狀病毒 和腸腺病毒的檢測(cè)或小球隱孢子蟲、艱難梭菌毒素、蘭伯賈第蟲和 痢疾阿米巴的檢測(cè)。本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案涉及一種薄板狀免疫重力驅(qū)動(dòng)試 驗(yàn)裝置(l),其包括在剛性或半剛性固體支持體(18)上的任選 具有綴合物區(qū)或墊(13)的樣品施加區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、 任選的中間區(qū)(6)和可能具有對(duì)照分區(qū)的檢測(cè)區(qū)(4)，以及任選的 吸收區(qū)(5)。裝置(1)的檢測(cè)區(qū)(4)利用試驗(yàn)試劑(7)來敏化。 其還用對(duì)照抗體(7，)來敏化。非毛細(xì)管區(qū)(14)避免了樣品施加 區(qū)和樣品檢測(cè)區(qū)之間的任何直接和毛細(xì)管接觸，而現(xiàn)有技術(shù)裝置中 通常觀察到毛細(xì)管接觸并有記載。優(yōu)選地，在樣品施加區(qū)下部中的第一反應(yīng)區(qū)(3)上干燥綴合物。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，在檢測(cè)區(qū)(4)中使用抗體。優(yōu)選地， 將對(duì)照抗體，尤其是遷移對(duì)照抗體(7，)涂覆在檢測(cè)區(qū)(4)的對(duì)照 區(qū)中，所述對(duì)照區(qū)位于試驗(yàn)區(qū)下方，該試驗(yàn)區(qū)涂覆有試驗(yàn)抗體、尤 其是分析物特異性抗體。如上所述，試驗(yàn)和對(duì)照綴合物可以是以下 試劑，例如寡核普酸或其類似物、多克隆或單克隆抗體或例如超變 抗體片段、或例如通過血清化合物如IgG、 IgA、 IgE和IgM識(shí)別 的抗原、或像生物素-抗生物素蛋白鏈菌素那樣的配偶對(duì)中之一的特 異性試劑。試驗(yàn)或特異性綴合物的標(biāo)記物和對(duì)照綴合物的標(biāo)記物可以是直接標(biāo)記物，尤其是選自綴合的金屬膠體、綴合的聚苯乙烯顆 粒和具有特異性特定顏色或熒光的微米或納米顆?；蚣{米管的直接標(biāo)記物。有利地，本發(fā)明裝置(1)中存在的對(duì)照綴合物不干擾可能存 在的分析物或其類似物的檢測(cè)。有利地，該對(duì)照產(chǎn)生與特定信號(hào)無 關(guān)的強(qiáng)度恒定的信號(hào)。所述對(duì)照可以允許對(duì)所檢測(cè)的分析物或其類 似物進(jìn)行定量或半定量。根據(jù)本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)易于使用和操縱， 并且在使用中柔性非常好。本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)允許 例如在相同的裝置(1)上使用不同種類的顆粒和/或不同種類的樣 品和/或綴合物墊。因此，本發(fā)明提供易于操縱的裝置(1)，并且該 裝置(1)允許對(duì)試驗(yàn)樣品中的多種分析物進(jìn)行快速而準(zhǔn)確的檢測(cè) 和/或診斷(多路檢測(cè))。本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案涉及一種根據(jù)本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng) 試驗(yàn)裝置(1)，其中可以選擇孔隙度為8、 10、 12、 15 nm等的活 性膜(16 )。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及一種重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1), 其中活性膜(16)是由具有相,似或不同孔隙度的不同材料制成的。 例如，活性膜可由纖維素或PredatorTM (Pall)或Porex膜組成。 本領(lǐng)域的技術(shù)人員知道其它的可能性。用于檢測(cè)區(qū)(4)中的可能23的活性膜(16)包括但不限于纖維素、硝化纖維素、醋酸纖維素、 玻璃纖維、尼龍、丙烯酸共聚物/尼龍、聚醚砜、聚乙烯和聚酯。本發(fā)明還涉及使用上述重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置之一的檢測(cè)方法， 其可以用來檢測(cè)分析物或其類似物的存在?？梢越?jīng)過肉眼進(jìn)行檢測(cè) 和/或在讀片器(stripreader )和用于檢測(cè)和/或量化分析物或其類 似物的特定軟件程序的幫助下自動(dòng)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案涉及一種如上所述的方法，其中 在固定試驗(yàn)或分析物特異性捕獲試劑(7)(例如試驗(yàn)或分析物特異 性抗體)的位置處信號(hào)(例如有色信號(hào))的產(chǎn)生或未產(chǎn)生表示存在 或不存在分析物或其類似物。有利地，在固定對(duì)照捕獲試劑(7，)(例如遷移對(duì)照抗體)的 位置處產(chǎn)生信號(hào)(例如有色信號(hào))表示樣品已經(jīng)移動(dòng)到根據(jù)本發(fā)明 的(免疫)重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)的活性膜上。有利地，在固定對(duì)照試劑(例如對(duì)照抗體)的位置處產(chǎn)生信 號(hào)(例如有色信號(hào))表示根據(jù)本發(fā)明的薄板狀(免疫)重力驅(qū)動(dòng)試 驗(yàn)裝置(1)的正確使用和良好狀態(tài)、干燥綴合物的品質(zhì)以及捕獲 反應(yīng)(例如免疫反應(yīng))的完成。有利地，在對(duì)照捕獲試劑(遷移和可能的參比對(duì)照試劑)(例 如對(duì)照抗體)的固定位置的信號(hào)(例如有色信號(hào))產(chǎn)生與樣品中待 檢測(cè)的分析物或其類似物的存在與否無關(guān)。因此，本發(fā)明提供用于快速檢測(cè)分析物或其類似物的新型裝 置，以及它們?cè)跈z測(cè)試驗(yàn)樣品(例如生物樣品)中可能存在的(多 種)分析物或其類似物中的用途。根據(jù)本發(fā)明的裝置顯示出比現(xiàn)有 技術(shù)裝置更好的反應(yīng)性。具有非毛細(xì)管區(qū)和重力驅(qū)動(dòng)遷移允許處理 各種樣品包括培養(yǎng)物上清液、生物流體如鼻咽分泌物、血液、血清、 尿、精液、唾液或排泄物。具體而言，本發(fā)明的裝置允許試驗(yàn)各種 類型的樣品(例如糞便試樣、漿料、膠體等)而不會(huì)堵塞。在使用 中，本發(fā)明裝置允許樣品快速遷移通過裝置，而與樣品粘度或復(fù)雜 性無關(guān)。優(yōu)選的裝置包括在支撐聚合物(18)的一個(gè)或更多側(cè)面上 的樣品施加區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)24和吸收區(qū)(5)。檢測(cè)區(qū)(4)可以包含幾個(gè)限定的分區(qū)(優(yōu)選為線)， 每個(gè)分區(qū)專門用于檢測(cè)一種或更多種特定的分析物、 一組分析物或一 組特定的分析物產(chǎn)物。其可以包括至少一個(gè)對(duì)照區(qū)。本發(fā)明的裝置可 以是一體式薄板狀裝置，或者可以由相互接觸的幾個(gè)部件組成。對(duì)于(免疫)色鐠裝置的原理和不同化合物(例如分析物、 綴合物和諸如免疫試劑的捕獲試劑)之間的反應(yīng)，可參照現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)，例如EP 0 088 636、 EP 0 186 799、 EP 0 284 232和WO 88/08534。這些文獻(xiàn)的^Hf內(nèi)容通過引用全部并入本文。根據(jù)本發(fā)明的裝置(1)是由多孔聚合物質(zhì)構(gòu)成的，該多孔聚 合物質(zhì)優(yōu)選層疊在剛性或半剛性聚合物(18)的一個(gè)或更多個(gè)側(cè)面 上以提供機(jī)械強(qiáng)度，使得本發(fā)明的裝置(1)易于操縱。聚合物質(zhì) 的孔隙度應(yīng)該使得流體和其成分能夠因重力沿再水合的綴合物從 測(cè)試條的頂部向底部運(yùn)動(dòng)，而不受任何阻礙。這些聚合物的親水性 能也允許這些特性。合適聚合物的例子為纖維素、硝化纖維素、醋 酸纖維素、玻璃纖維、尼龍、丙烯酸共聚物/尼龍、聚醚砜、聚乙烯 和聚酯。術(shù)語"分析物或其類似物"或"分析物，，可以互換使用，并 涉及生物樣品中的待檢測(cè)分子和其類似物和衍生物(當(dāng)這些類似物 和衍生物以與該分析物自身基本等同的方式結(jié)合化驗(yàn)中所用的另 一種分子時(shí))。這些分子的非限制性實(shí)例包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、脂 蛋白、肽、糖肽、半抗原、多糖、脂多糖、核酸、病毒顆粒、微生 物例如細(xì)菌、病毒、原生動(dòng)物和寄生生物的部分、或者任意來源的 化合物。根據(jù)本發(fā)明的裝置(1)尤其可用于檢測(cè)生物樣品中的有害微 生物或其化合物，包括但不限于檢測(cè)小球隱孢子蟲的卵嚢、蘭伯賈 第蟲胞嚢、RSV (呼吸道合胞病毒)、大腸桿菌、艱難梭菌、艱難梭菌 毒素、痢疾阿米巴、A型和B型流感病毒、輪狀病毒、40&41型腺 病毒、腺病毒組、嗜肺性軍團(tuán)菌尿抗原、人和動(dòng)物源性冠狀病毒和人 偏肺病毒。有利地，該裝置可以設(shè)計(jì)為允許經(jīng)過單次試驗(yàn)(l)來檢測(cè) 幾種這樣的分析物或其類似物，和/或允許檢測(cè)由給定的分析物所產(chǎn) 生的超過一種的有害化合物(例如大腸桿菌志賀樣毒素I和II)和/或允許檢測(cè)多種血清化合物，例如病原體感染后產(chǎn)生的IgG、 IgA 和IgM。懷疑含有分析物或其類似物的試驗(yàn)樣品(優(yōu)選液體試驗(yàn)樣品) 可以源自任何生物樣品，包括但不限于培養(yǎng)物上清液、鼻咽分泌物、 糞便試樣、血清等。在施加樣品之前，優(yōu)選將諸如糞便試樣的樣品 懸浮在溶液中，該溶液允許液體遷移通過裝置(1 )?？梢杂帽景l(fā)明 系統(tǒng)試驗(yàn)的樣品包括生物樣品例如血液、尿、精液、唾液或排泄物， 優(yōu)選源自人類主體。也可以對(duì)源自動(dòng)物、植物、食品、水、污水和 土壤的樣品進(jìn)行試驗(yàn)。對(duì)分析物或其類似物特異的特異性標(biāo)記試劑用于對(duì)樣品中可 能存在的分析物或其類似物進(jìn)行檢測(cè)和/或量化。特異性標(biāo)記試劑 (綴合物)會(huì)與各個(gè)分析物或其類似物分別形成復(fù)合物，然后通過 分析物特異性試劑(7)捕獲這些復(fù)合物。標(biāo)記試劑可用于與優(yōu)選 吸附到第二多孔區(qū)上的對(duì)照試劑最后反應(yīng)。捕獲試劑(7、 7，)可以 是寡核苷酸或其類似物、或多克隆或單克隆抗體、或本領(lǐng)域已知的 超變抗體片段、或通過血清化合物如IgG、 IgA、 IgE和IgM識(shí)別 的抗原、或像生物素-抗生物素蛋白鏈菌素那樣的配偶對(duì)中之一的特 異性試劑。優(yōu)選使用單克隆抗體或其超變片段。 一些捕獲試劑(7、 7，)可以通過基因工程來生產(chǎn)。標(biāo)記試劑或檢測(cè)試劑固定(浸漬)在惰性材料上，該惰性材 料可以是玻璃纖維或聚酯或任何其它在物理和化學(xué)上惰性的材料， 并且具有足夠的孔隙度和潤(rùn)濕性以在液體樣品到達(dá)時(shí)允許顆粒運(yùn) 動(dòng)并允許標(biāo)記試劑容易且充分地再水合。當(dāng)液體樣品接觸這些再水 合的檢測(cè)試劑時(shí)，各個(gè)分析物會(huì)與它們的特異性標(biāo)記試劑形成復(fù)合 物，并且這些復(fù)合物會(huì)與吸附在樣品檢測(cè)區(qū)上的特異性試劑反應(yīng)， 同時(shí)標(biāo)記的對(duì)照試劑會(huì)自由運(yùn)動(dòng)到達(dá)吸附在對(duì)照區(qū)上的對(duì)照試劑 以與其反應(yīng)。各種檢測(cè)系統(tǒng)是本領(lǐng)域中已知的。本領(lǐng)域已知的有色或可見 (直接)顆粒標(biāo)記物包括但不限于由聚苯乙烯(膠乳)聚合物制成 的顆粒、金屬膠體例如金、碳、脂質(zhì)體、銀、銅等，其可以綴合到 通常與待檢測(cè)分析物反應(yīng)的結(jié)合試劑上。還可以使用熒光檢測(cè)系統(tǒng)。定量和/或半定量是可能的。本發(fā)明涉及一種利用根據(jù)本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置 (1 )來快速并特異性鑒定幾種源自生物樣品或?qū)嶒?yàn)室樣品的病原 體的方法。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，特異性綴合物和對(duì)照綴合 物包括可見(直接)標(biāo)記物，該綴合物與對(duì)分析物或其類似物特異 性的試劑或?qū)φ赵噭┙Y(jié)合(與其綴合)。分析物或其類似物或?qū)φ?試劑和它們的綴合物之間形成的復(fù)合物在重力作用下會(huì)移動(dòng)到中間區(qū)(6),然后遇到檢測(cè)區(qū)(4)的膜(優(yōu)選為硝化纖維素)并到達(dá)涂 覆在其上的特異于分析物或其類似物的試劑或?qū)φ赵噭?7、 7，)。 由于顆粒會(huì)積累并產(chǎn)生可見信號(hào)(8、 9),所以將使復(fù)合物和分析 物或其類似物的試劑或?qū)φ赵噭?7、 7，)之間的反應(yīng)可見。該信號(hào) 允許用戶特異性識(shí)別分析的樣品中存在何種分析物或其類似物，并 且優(yōu)選對(duì)其在試驗(yàn)樣品中存在的量進(jìn)行定量或半定量(可以通過對(duì) 照線(9)進(jìn)行)。下面，將提供有關(guān)根據(jù)本發(fā)明特定重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置的一般 方面和優(yōu)選組合物以及構(gòu)造的更多細(xì)節(jié)。為了進(jìn)行重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)測(cè)試，根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的裝 置(1)優(yōu)選分成沿縱向并列(并置)的5個(gè)區(qū)，包括位于裝置(1) 的一個(gè)或更多側(cè)面上的樣品施加區(qū)(2)、非毛細(xì)管區(qū)(14)、可能 的中間區(qū)(6)、檢測(cè)區(qū)(4)和可能的吸收區(qū)(5)。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，樣品施加區(qū)(2)的膜是由玻璃纖 維或纖維素制成的，并具有由聚酯制成的綴合物墊(13)，中間區(qū) (6)的膜是由玻璃纖維或纖維素制成的，檢測(cè)區(qū)(4)的膜是由硝化 纖維素制成的，吸收區(qū)(5)的膜是由纖維素制成的。在具體的實(shí) 施方案中，樣品施加區(qū)(2)和綴合物塾(13)可以由相同的物質(zhì) 或材料制成。然而，還可以將綴合物直接浸漬到樣品施加區(qū)(2) 上。，第一反應(yīng)區(qū)(3)可以被第一吸收膜(12)全部或部分覆蓋。 吸收膜和綴合物墊可以由相同的物質(zhì)或材料制成。在該情況下，可以將綴合物直接噴涂到在第一吸收膜(12)中也用來吸收樣品液體 的聚合物上。綴合物墊浸漬有涂覆了一些化合物的顆粒以形成分析物特異 性綴合物，這些化合物可以包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、脂蛋白、肽、糖 肽、半抗原、多糖、脂多糖、核酸或類似物(PNA、 LNA等)。這 些化合物會(huì)在某處與可能存在于待分析樣品中的分析物或其類似 物進(jìn)行特異性反應(yīng)。合適顆粒的實(shí)例包括但不限于膠體金顆粒；膠 體硫顆粒；膠體頓顆粒；膠體硫酸鋇顆粒；膠體硫酸鐵顆粒；金屬 碘酸鹽顆粒；卣化銀顆粒；膠體銀、膠體鈀、膠體鉑、膠體銠、二 氧化硅顆粒；膠體金屬(含水的)氧化物顆粒；膠體金屬硫化物顆 粒；膠體硒化鉛顆粒；膠體竭化鎘顆粒；膠體金屬砩酸鹽顆粒；膠 體金屬鐵酸鹽顆粒；碳納米管；涂有有機(jī)或無機(jī)層的任何上述膠體 顆粒；蛋白質(zhì)或肽分子；脂質(zhì)體；有色微粒、有色納米顆粒、熒光 微米和納米顆粒或有機(jī)聚合物聚苯乙烯顆粒。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，顆粒為膠體金顆?；蚓郾揭蚁?膠乳)微球。膠體金顆粒的 直徑可以為約5到約60納米。優(yōu)選地，使用直徑為約20到約40 納米的顆粒?？梢允褂靡呀?jīng)由幾種化學(xué)官能團(tuán)例如羧基、胺基、羥 基和巰基活化的聚苯乙烯(膠乳)微球。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中， 使用未活化的和胺活化的聚苯乙烯微球。優(yōu)選地，使用直徑為約20 到約1000納米和優(yōu)選約150到約350納米的微球。為了進(jìn)行多色檢測(cè)，使用不同的有色微球(例如，分析物A 用紅色，分析物B用藍(lán)色，而對(duì)照線用綠色)。在本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)中使用的分析物特 異性顆粒涂覆有與待檢測(cè)分析物或其類似物直接或間接特異性結(jié)合的化合物。根據(jù)本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)的檢測(cè)區(qū)(4) 可由纖維素、硝化纖維素、醋酸纖維素、玻璃纖維、尼龍、丙烯酸 共聚物/尼龍、聚醚砜、聚乙烯和聚酯制成，但是優(yōu)選由來自 Advanced Microdevices Pvt， Ltd.的硝化纖維素制成。還可以使用來 自其它供應(yīng)商(Schleicher & Schuell或Millipore或Porex或Pall 或Whatman)的膜。優(yōu)選通過在合適的緩沖液中稀釋試劑(7、 7，)并利用接觸系 統(tǒng)(例如lmagen Technology的IsoFlow )將其分配到優(yōu)選為硝化纖 維素(16)的膜上來進(jìn)行涂覆。速度分布可以為從約50mm/s到約 10mm/s，但是優(yōu)選固定到約40mm/s或較好在約30 mm/s。分配的 材料體積為約0.5至約3 jil/cm，優(yōu)選為約0.7至約2 pl/cm,更確切 而言為從約1至約2 nl/cm。試劑濃度為從約0.1至約10 mg/ml,優(yōu)選為約0.15至約2 mg/ml。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，用于涂覆的緩沖液由pH 約為7.2的磷酸鹽緩沖的鹽溶液(NaCl)構(gòu)成。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn) 裝置(1)包括吸收已經(jīng)輸送到硝化纖維素(16)末端的溶液的吸 收區(qū)(5)。物質(zhì)的實(shí)例包括纖維素和玻璃纖維。已經(jīng)優(yōu)選使用了纖 維素(MDI)或玻璃纖維(Schleicher & Schuell )。本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)優(yōu)選還包括優(yōu)選含有 至少一條對(duì)照線的對(duì)照分區(qū)(在其它內(nèi)部對(duì)照和/或遷移對(duì)照之中)。 遷移對(duì)照綴合物不應(yīng)與特異性綴合物反應(yīng)，也不應(yīng)與分析物本身反 應(yīng)，也不應(yīng)與在待分析樣品中可能存在的任何物質(zhì)反應(yīng)。優(yōu)選遷移 對(duì)照線形成為總是具有相同的強(qiáng)度，并且不依賴于特異性信號(hào)及其 強(qiáng)度。如上文所述涂覆對(duì)照試劑。遷移捕獲綴合物或者與特異性綴 合物在綴合物墊中混合，或者單獨(dú)浸漬。重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置優(yōu)選豎直(即處于直立位置)安放在固定 器、支持體或空試管中。本文使用的術(shù)語"豎直"指的是基本直立的位置。當(dāng)豎直放 置該裝置時(shí)，本發(fā)明中使用的測(cè)試條可以與水平面形成45° ~ 135°， 優(yōu)選60°~120。，優(yōu)選80。~100。的角。含有待檢測(cè)的分析物或其類 似物的液體樣品置于裝置(1)的頂部并遷移通過第一吸收膜(12) 到達(dá)綴合物塾(13)并且使兩種綴合物(即特異于分析物或其類似 物的綴合物和對(duì)照綴合物)再次水合。如果存在相關(guān)的分析物或其 類似物，則會(huì)形成幾種復(fù)合物。它們會(huì)到達(dá)非毛細(xì)管區(qū)(14)并在 此混合。由于液體靠重力前進(jìn)，所以它穿過第二吸收膜(15)以經(jīng)29歷優(yōu)選用硝化纖維素制成的活性膜(16)。所述復(fù)合物在陽性反應(yīng) 的情況下會(huì)產(chǎn)生可見的(例如紅色、藍(lán)色、綠色等)線或分區(qū)，同 時(shí)對(duì)照綴合物也前進(jìn)到達(dá)并與其涂覆試劑反應(yīng)產(chǎn)生可見的有色線 (綠色)。對(duì)照信號(hào)除了表明試驗(yàn)已經(jīng)正常進(jìn)行之外，在沒有特異 性反應(yīng)時(shí)也出現(xiàn)。對(duì)照信號(hào)還可以充當(dāng)定量的參照。特異性信號(hào)和 對(duì)照信號(hào)可以具有相同或不同的顏色。對(duì)照綴合物和特異性綴合物 的顆粒尺寸可以相同或不同。在根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案 中，優(yōu)選為金綴合物的兩種(對(duì)照和特異性)綴合物浸漬到可以為 聚酯或尼龍的固體惰性膜中。優(yōu)選為聚酯。此處所用的聚酯膜具有 27 x 260 mm的尺寸，并且來自Advanced Microdevices Pvt， Ltd(印 度)。在進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，用經(jīng)歷特定緩沖液中稀釋步驟之后的優(yōu)選金 綴合物浸漬所述膜以提供利用液體樣品的最佳再水合。Schleicher & Schuell的AccuFlow G膜也可用于該目的，并且綴合物可有利 地直接噴涂到吸收膜上。在根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方案中，優(yōu)選為聚苯乙烯有 色微球的兩種(對(duì)照和特異性)綴合物浸入到可為聚酯或玻璃纖維 的固體惰性膜上。優(yōu)選為玻璃纖維。此處所用的玻璃纖維膜具有27 x 260 mm的尺寸，并且來自Whatman。當(dāng)l吏用Advanced Microdevices Pvt的聚酯膜時(shí)，可以通過浸 入適當(dāng)?shù)男∑恐衼斫n膜，該小瓶具有1.6ml的有限體積，但是可 以根據(jù)所用的浸漬系統(tǒng)減小至1.3ml。膜在室溫下干燥過夜。然后 將其在約55。C的烘箱中干燥約20分鐘。干燥后，將膜存放在最大 相對(duì)濕度為10%的具有干燥劑的專用箱中。將膜(稱為綴合物墊 (13))切成寬約5mm的片，并粘到如圖1、 2和3中示出的疊層 的第一粘合部上。為了達(dá)到特定用途所期望的最大可檢測(cè)性，這些 膜的位置很重要。然后，將玻璃纖維制成的吸收紙或任何其它吸收 物質(zhì)粘到測(cè)試條的上粘合部上，前提是它們通過重疊或邊對(duì)邊地與 含有綴合物的聚酯膜相接觸，以允許液體再7JC合綴合物并使綴合物 與樣品中存在的分析物或其類似物反應(yīng)。當(dāng)使用AccuFlow G或Standard 14或膜8964 (Alstr6hm) 的膜時(shí),綴合物噴涂有l(wèi)magen Technology的IsoFlow Atomizing30Nozzle系統(tǒng)。在該情況下，在1 ~20磅/平方英寸的壓力下以50 mm/s 的速度噴涂綴合物，噴涂量為0.8 jil/mm ~3.0 pL/mm。膜在室溫下 干燥過夜。然后將其在約55'C的烘箱中干燥約IO分鐘。干燥后， 將膜存放在最大相對(duì)濕度為10%的具有干燥劑的專用箱中。將這些 膜(稱為綴合物墊(13))切成寬約5 ~10mm的片或不切成片， 并粘到如圖1、 2和3中示出的疊層的上粘合部上。為了達(dá)到特定 用途所期望的最大可檢測(cè)性，這些膜的位置很重要。然后將玻璃纖 維制成的吸收紙(Whatman的Fusion 5)或任何其它吸收物質(zhì)軲 到測(cè)試條的上粘合部上,前提是它們邊對(duì)邊地接觸含有綴合物的聚 酯膜或通過部分或完全覆蓋含有綴合物的膜，以允許液體使綴合物 再水合并使綴合物與樣品中存在的分析物或其類似物反應(yīng)。一些試驗(yàn)需要進(jìn)行定量以知曉例如抗原的濃度或血清對(duì)例如 待檢測(cè)抗原的響應(yīng)是否高于或低于規(guī)定的截止水平。這可以通過比 較檢測(cè)線(特異性線(8))的強(qiáng)度和強(qiáng)度恒定或漸變的一條或幾條 對(duì)照線(9)的強(qiáng)度來完成。以該方式獲得的參比刻度由它們之間 的強(qiáng)度不同的幾條線構(gòu)成，但是對(duì)于它們之一則是恒定的和可再現(xiàn) 的。由此優(yōu)選在預(yù)定濃度下干燥每種綴合物以獲得恒定的強(qiáng)度。試 驗(yàn)線信號(hào)的強(qiáng)度會(huì)與例如抗原的濃度成比例，至少在包括截止水平 的期望預(yù)定濃度范圍內(nèi)是如此。本發(fā)明還包括引入才艮據(jù)本發(fā)明裝置的試劑盒，包裝并入所述 裝置、組合外殼、固定器和用于支持所述裝置的設(shè)備。所述支持設(shè) 備也稱為支持構(gòu)件，指的是可以起到將根據(jù)本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn) 裝置保持在基本豎直位置并且使樣品施加區(qū)位于所述裝置頂端的 作用的材料。用作支持設(shè)備的材料包括但不限于玻璃、塑料等。在本發(fā)明的另一方面，提供用于檢測(cè)樣品中至少一種分析物 或其類似物的試驗(yàn)試劑盒。這些試驗(yàn)試劑盒可以包括分別包裝的或 一起包裝的根據(jù)本發(fā)明的薄板狀重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置和任選的用于 處理或提取樣品的任何附加試劑。本文使用的術(shù)語'"試劑盒"指的是可用于實(shí)施本發(fā)明方法的 試劑或裝置的任意組合。本發(fā)明的試劑盒還可以包括任何附加的試 劑、緩沖液、賦型劑、容器和/或如本文中描述所需要的或本領(lǐng)域已知的裝置來實(shí)施本發(fā)明的方法。其它的試劑盒元件可以包括用于包 裝一個(gè)或更多個(gè)裝置元件的容器、包裝材料、供裝置使用的水溶液 等。上述裝置可以包裝并作為用于檢測(cè)分析物的試劑盒出售。實(shí)際上，上述獨(dú)立成套(self-contained )且便于使用的裝置自身也是試 劑盒。通常還包括一組用于指導(dǎo)用戶使用根據(jù)本發(fā)明裝置或方法的 使用說明。在另一方面中，本發(fā)明提供用于檢測(cè)樣品中至少一種分析物 的分析物檢測(cè)方法，其包括使試驗(yàn)裝置接觸樣品，允許樣品在重力 作用下從所述裝置的頂部移到底部，和檢測(cè)所述分析物或其類似 物。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，分析物檢測(cè)方法包括以下步 驟豎直放置(即放置在基本垂直的位置)試驗(yàn)裝置，將樣品施加 到裝置頂部，使樣品遷移通過裝置，由此允許所述樣品中的分析物 與捕獲試劑反應(yīng)并產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)，由此檢測(cè)所述分析物。本文使用的術(shù)語"試驗(yàn)裝置"包括根據(jù)本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試 驗(yàn)裝置以及測(cè)試條、試紙條、診斷條(diagnostic strip )、流式裝置和 側(cè)流式裝置等。測(cè)試條、試紙條、流式裝置和側(cè)流式裝置是常規(guī)形式 的；因此，本領(lǐng)域的技術(shù)人員會(huì)非常熟悉這類測(cè)試條的設(shè)計(jì)，在此 將不再詳細(xì)地對(duì)其進(jìn)行描述。然而，每個(gè)測(cè)試條、試紙條、流式裝 置和側(cè)流式裝置會(huì)具有優(yōu)選相互毛細(xì)管連通的用于結(jié)合分析物(以 表示分析物樣品中存在分析物的陽性試驗(yàn)結(jié)果)的試驗(yàn)區(qū)和用于結(jié) 合示蹤劑(以表示試驗(yàn)的正確運(yùn)行)的對(duì)照區(qū)。本發(fā)明方法由此包括在基本豎直的位置使用該試驗(yàn)裝置，其 中樣品施加區(qū)在所述裝置的頂部，使得在施加樣品時(shí)，樣品從裝置 的頂部遷移到底部。出人意料地，即使是對(duì)于通常由于堵塞和粘度 而難以移動(dòng)的樣品，與在裝置底部施加樣品并允許樣品通過毛細(xì)管 作用從裝置底部移動(dòng)到頂部的現(xiàn)有技術(shù)方法相比，本發(fā)明方法也允 許所述樣品遷移得更快且更容易。在另一方面，本發(fā)明涉及一種適用于包裝試驗(yàn)裝置的制造或 包裝制品，其包括在包裝上的或與包裝相關(guān)的指明其內(nèi)含物的標(biāo)簽，和含有使用說明的包裝插入物。優(yōu)選試驗(yàn)裝置選自下組，包括 根據(jù)本發(fā)明的重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置、測(cè)試條、試紙條、流式裝置和側(cè) 流式裝置等。優(yōu)選地，每個(gè)測(cè)試條的試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)位于各測(cè)試條 上的相同位置處，使得可以以并列的方式查看各個(gè)測(cè)試條。根據(jù)本 發(fā)明的包裝提供快速存取、單元試驗(yàn)裝置計(jì)量性和對(duì)試驗(yàn)裝置更好 的物理保護(hù)。圖5、 6和7示出適用于重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)和/或免疫色譜和寡核 脊酸色鐠(oligochromatography)試驗(yàn)裝置(34)的包裝(30 )的 不同實(shí)施方案。參照?qǐng)D5a，根據(jù)本發(fā)明的包裝(30)由用于容納一個(gè)或更多 個(gè)試驗(yàn)裝置(34)的固定器(31)組成。固定器(31)可以至少部 分用蓋板(32)封閉。任選地，固定器(31)的部分另外用可剝?nèi)?的活動(dòng)蓋板(33)封閉，所述活動(dòng)蓋板(33)優(yōu)選與蓋板(32)的 部分重疊。圖5b以分解圖示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的包裝。 根據(jù)本發(fā)明的包裝(30 )由包括用于容納一個(gè)或更多個(gè)測(cè)試條(34 ) 的一個(gè)或更多個(gè)小室(311)的固定器(31)組成。優(yōu)選所述小室 (311)是熱成型的。各個(gè)小室通過凸起的隔離物與固定器(31) 中的相鄰小室隔開。小室(311)通常為矩形形式，優(yōu)選其寬度比 試驗(yàn)裝置(34)的寬度略窄。在一個(gè)實(shí)施方案中，可以沿凸起的隔 離物的長(zhǎng)度方向使其削弱(例如預(yù)切)以能夠?qū)⒚總€(gè)小室彼此拆開。 相應(yīng)地，封在固定器上的蓋板和活動(dòng)蓋板還可以配有對(duì)應(yīng)的預(yù)切割 線，用于斷開包括一個(gè)裝置的組合包裝。所述固定器(31)優(yōu)選由選自單金屬層、多金屬層、單塑料 層、多塑料層以及金屬和塑料復(fù)合層的不透水固體材料制成，而蓋 板(32)和/或(33)是選自單金屬層、多金屬層、金屬和塑料復(fù)合 層、金屬和紙復(fù)合層以及金屬、塑料和紙復(fù)合層的薄板。所述固定 器(31)優(yōu)選由塑料材料制成。參照?qǐng)D6，包裝(30)由包括用于容納一個(gè)或更多個(gè)實(shí)驗(yàn)裝 置(34)的一個(gè)或更多個(gè)小室'(311)的固定器(31)組成，其中 所述小室的一端包括樣品存放區(qū)(312),其可以與具有樣品施加區(qū) 的試驗(yàn)裝置(34)的一端直接連通，使得可以將樣品通過樣品存放區(qū)(312)施加到所述試驗(yàn)裝置(34)。固定器由蓋板(32)和任選部分重疊所述第一蓋板(32)的 活動(dòng)蓋板(33)部分封閉。圖7b示出根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案的 包裝(30)的后視圖，其中固定器(31)任選配有并置在試驗(yàn)裝置 (34 )至少部分上方的觀察窗(35 )，使得包含在所述試驗(yàn)裝置(34 ) 中的至少檢測(cè)區(qū)(4)與固定器(31)的外部視覺連通。作為替代 方案，與試驗(yàn)裝置(34)檢測(cè)區(qū)重疊的固定器(31)的部分是透明 的，以允許在視覺上觀察待檢查的每個(gè)區(qū)中顯示的結(jié)果。作為替代 方案，蓋板(32)是透明的，以允許在視覺上觀察待檢查的每個(gè)區(qū) 中顯示的結(jié)果。試驗(yàn)裝置(34)可以通過粘附到每個(gè)小室的底板上來固定到 小室(311)內(nèi)；然而，將蓋板(32)放置到固定器(31)上已足 以將試驗(yàn)裝置(34)保持在小室(311)中。為此，蓋板(32)和/ 或活動(dòng)蓋板(33)可以方便地由不透明帶構(gòu)成，其中沿樣品檢測(cè)區(qū) 形成至少一個(gè)用于查看試驗(yàn)結(jié)果的透明窗。為了將蓋板(32)固定 到固定器(31)上以及將試驗(yàn)裝置(34)固定到小室(311)內(nèi)， 將蓋板(32)壓入一定位置以在蓋(32)和固定器(31)的橫欄上 緣之間形成粘附性連接。方便地，蓋(32)和/或活動(dòng)蓋板(33)還 配有透明的窗，通過該窗，可以看到試驗(yàn)裝置(34)上的標(biāo)簽。該 標(biāo)簽(未圖示)可以印有試驗(yàn)中所用的信息，例如可用各試驗(yàn)裝置 檢測(cè)的分析物的特性。根據(jù)本發(fā)明的包裝尤其適用于實(shí)施根據(jù)本發(fā)明的檢測(cè)方法， 其中在將樣品施加到試驗(yàn)裝置的樣品施加區(qū)上之后，豎直放置所述 試驗(yàn)裝置，使得樣品施加區(qū)在所述裝置的頂端，并且其中允許樣品 在重力作用下遷移通過所述裝置。例如，可以豎直放置包裝以豎直 放置試驗(yàn)裝置。為此，包裝可以包括額外的支持設(shè)備，用于將所述 包裝保持在基本豎直的位置。在使用中，優(yōu)選將包括一個(gè)或更多個(gè)試驗(yàn)裝置(34)的包裝 (30)安放在豎直位置，其中活動(dòng)蓋板(33)位于所迷包裝(30) 的頂端。然后可以移去活動(dòng)蓋板(33)以露出各自包括樣品存放區(qū) (312)和裝置(34)的一個(gè)或更多個(gè)小室(311)。含有待檢測(cè)分34析物或其類似物的液體樣品置于裝置(34)的頂部，并遷移通過用 于結(jié)合分析物的試驗(yàn)區(qū)和用于結(jié)合示蹤物并產(chǎn)生可檢測(cè)信號(hào)的對(duì) 照區(qū)，由此檢測(cè)所述分析物。本發(fā)明通過以下實(shí)施例進(jìn)一步舉例說明，但是這些實(shí)施例并 不以任何方式來限制本發(fā)明。實(shí)施例實(shí)施例1:檢測(cè)輪狀病毒和40/41型腸腺病毒(組F，林40 & 41 )。制備聚苯乙烯微球在特定的洗滌緩沖液(Coris BioConcept)中洗滌聚苯乙烯微 球(Estapor )。然后在13000轉(zhuǎn)/分下將孩i球離心5 ~ 10分鐘以回收 lml體積。然后將小球重新懸浮在活化緩沖液中并攪拌l小時(shí)。然 后懸浮體在所述洗滌緩沖液中洗滌兩次，在最終離心之后最終重新 懸浮在偶聯(lián)緩沖液中。將抗體偶聯(lián)到未活化和氨基活化的聚苯乙烯微球基本按制造商提供的方案將試劑偶聯(lián)到聚苯乙烯微球。利用針對(duì)A組輪狀病毒抗原的小鼠單克隆抗體以及藍(lán)色 NH2-聚苯乙烯微球來進(jìn)行第 一次偶聯(lián)。利用針對(duì)腸腺病毒(40和41型)的小鼠單克隆抗體以及未 活化的紅色聚苯乙烯微球來進(jìn)行第二次偶聯(lián)。利用具有天然雞IgY的未活化綠色聚苯乙烯微球來進(jìn)行第三 次偶聯(lián)。免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置本實(shí)施例的薄板狀免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)由塑料背板固 體支持體(MDI) ( 2 )構(gòu)成，其上具有由Fusion 5 ( Whatman )構(gòu) 成的樣品施加區(qū)(2 )(該樣品施加區(qū)覆蓋由含有所述三種綴合物的 Standard 14( Whatman )構(gòu)成的綴合物墊(13 ))、非毛細(xì)管區(qū)(14 )、由GFBR-1 (MDI)構(gòu)成的中間區(qū)(6)、由硝化纖維素(MDI)制 成的檢測(cè)區(qū)(4)和由纖維素(MDI)制成的吸收區(qū)(5)。用三種試劑敏化硝化纖維素膜。所遇到的第一試劑是針對(duì)腺 病毒的單克隆抗體，位于檢測(cè)區(qū)(4)的活性膜(16)的上部。這 被定義為"Ad40/41試驗(yàn)線"。樣品遇到的第二試劑是針對(duì)輪狀病毒 的豚鼠多克隆抗體，位于樣品檢測(cè)區(qū)中的活性膜的中部。這被定義 為"Rota試驗(yàn)線"。第三試劑是抗雞IgY多克隆抗體，位于檢測(cè)區(qū)(4)的活性膜(16)的下部。這被定義為遷移對(duì)照線。使用三種 綴合物綴合至藍(lán)色NH2-聚苯乙烯微球的針對(duì)輪狀病毒的單克隆 抗體，綴合至紅色聚苯乙烯孩i球的針對(duì)腸腺病毒(40和41型)的 單克隆抗體和綴合至綠色聚苯乙烯微球的雞IgY多克隆抗體。這三 種綴合物的混合物被置于該裝置的樣品施加區(qū)的第一反應(yīng)區(qū)(3)(Whatman的Standard 14 )中。該膜被第 一吸收膜(12 X Whatman 的Fusion 5)全部覆蓋。中間區(qū)由與活性膜(16 )重疊1 mm的GFBR-1 ( MDI)膜構(gòu)成。粘附物可以覆蓋所有三個(gè)第一區(qū)，即樣品施加區(qū)、非毛細(xì)管 區(qū)(提供液體通過重力在其中會(huì)自由移動(dòng)的空間)、和中間區(qū)。其 粘附在活性區(qū)(16)上2mm。實(shí)施試驗(yàn)通過將本發(fā)明的免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置放在試管中來豎直地 進(jìn)行試驗(yàn)，其中樣品施加區(qū)在頂部。在樣品緩沖液中稀釋含有輪狀病毒或腸腺病毒(40或41型) 的樣品。吸取100~250 nL該溶液并置于樣品施加區(qū)上的裝置頂部。通過在樣品檢測(cè)區(qū)的上部區(qū)中出現(xiàn)的紅線(Ad 40/41試驗(yàn)線) 將檢測(cè)到腸腺病毒(40或41型)的存在，而通過在檢測(cè)區(qū)的中部 區(qū)中出現(xiàn)的藍(lán)線(Rota試驗(yàn)線)將檢測(cè)到輪狀病毒的存在。雞的綠 色聚苯乙烯綴合物的遷移將與涂覆的抗雞IgY反應(yīng)，產(chǎn)生綠色的遷 移對(duì)照線。試驗(yàn)進(jìn)行10分鐘。在所有的情況下，遷移對(duì)照線出現(xiàn)，表明樣品已經(jīng)從免疫重 力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)的頂部移動(dòng)到了底部。實(shí)施例2:檢測(cè)嗜肺性軍團(tuán)菌尿抗原 制備膠體金顆粒約40 nm 的膠體金顆粒購(gòu)自商業(yè)來源(Diagam)。 偶聯(lián)抗體至膠體金顆粒將抗體偶聯(lián)至膠體金顆粒是本領(lǐng)域公知的。在本實(shí)施例中， 使用純化的針對(duì)嗜肺性軍團(tuán)菌尿抗原的兔抗體。用碳酸鉀溶液對(duì)膠 體金顆粒懸浮液進(jìn)行緩沖處理以獲得期望的pH,然后膠體金顆粒 懸浮液與純化的多血清(polyserum)反應(yīng)。該pH是預(yù)定的，對(duì)于 各種免疫試劑而言可以不同。待用于偶聯(lián)反應(yīng)的純化多血清的稀釋 度在預(yù)備實(shí)驗(yàn)中確定。在該預(yù)備實(shí)驗(yàn)中，將增加稀釋度的多血清與緩沖的膠體金顆 粒反應(yīng)三分鐘，然后加入氯化鈉來達(dá)到約1%的最終濃度。記錄在 630 nm處的吸光度。選擇吸光度等于或近似于利用稀釋度較低的 多血清獲得的吸光度的最高多血清稀釋度作為用于將試劑偶聯(lián)至 膠體金顆粒的參比稀釋度。對(duì)于偶聯(lián)本身，使選定稀釋度的多血清和緩沖的膠體金顆粒 反應(yīng)三分鐘。然后使此所謂的綴合物飽和，并通過離心和再懸浮而 洗滌幾次以除去任何未綴合的抗體，并最終懸浮在保存緩沖液中。使用由純化的雞IgY多克隆抗體制成的第二綴合物作為對(duì)照 綴合物，并且根據(jù)如上文所述相同的方案進(jìn)行偶聯(lián)。免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置本實(shí)施例的薄板狀免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)由其上具有施 加區(qū)、，非毛細(xì)管區(qū)、中間區(qū)、檢測(cè)區(qū)和吸收區(qū)^f塑料背板固體支持 體(MDI) (18)構(gòu)成。才羊品施加區(qū)(2)由AccuflowG ( Whatman-Schleicher &37Schuell)構(gòu)成，中間區(qū)(6)由GFBR-1 (MDI)構(gòu)成，檢測(cè)區(qū)(4) 由硝化纖維素(MDI)制成，其優(yōu)選具有但不限于10 nm的空隙， 而吸收區(qū)(5)由纖維素(MDI)制成。利用兩種試劑來敏化硝化纖維素膜。第一試劑是針對(duì)嗜肺性 軍團(tuán)菌尿抗原的純化兔多血清試劑，位于檢測(cè)區(qū)(4)的活性膜(16) 的上部。這被定義為"Lp試驗(yàn)線"。第二試劑是純化的兔多血清抗 雞IgY，會(huì)與偶聯(lián)至膠體金顆粒的雞IgY多克隆抗體反應(yīng)。其位于 檢測(cè)區(qū)(4)的活性膜(16)的下部區(qū)中。這被定義為"遷移對(duì)照 線"。特異性嗜肺性軍團(tuán)菌尿抗原綴合物和雞IgY對(duì)照綴合物都浸漬 在樣品施加區(qū)(2 )的AccuflowG ( Whatman-Schleicher & Schuell) 中。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，將稀釋緩沖液噴涂到AccuFlow G 膜的頂部，產(chǎn)生不需液體緩沖液的試驗(yàn)。實(shí)施試驗(yàn)本試驗(yàn)的目的是利用本發(fā)明的免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(1)來 檢測(cè)嗜肺性軍團(tuán)菌尿抗原。其實(shí)施類似于第 一實(shí)施例中所述。在特定緩沖液中以3V/V的比例稀釋含有嗜肺性軍團(tuán)菌抗原的 尿樣。將本發(fā)明的免疫重力驅(qū)動(dòng)試驗(yàn)裝置(l)放在試管中，樣品施加 區(qū)在頂部。當(dāng)特定稀釋緩沖液已經(jīng)浸漬到AccuFlow G樣品膜上時(shí)， 將尿樣直接放到施加區(qū)。吸取100 ~ 250 pi的該溶液并置于裝置頂部的樣品施加區(qū)上。試驗(yàn)顯示具有特異性隨含有嗜肺性軍團(tuán)菌抗原的樣品出現(xiàn) "Lp試驗(yàn)線"，并且其強(qiáng)度隨樣品稀釋度的增加而降低。同樣，在所有的情況下都出現(xiàn)"對(duì)照線"，即使在樣品對(duì)尿抗 原呈陰性時(shí)也具有相同的強(qiáng)度。試驗(yàn)進(jìn)行15分鐘。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測(cè)樣品中至少一種分析物的試驗(yàn)裝置，包括固體支持體，其上設(shè)置數(shù)個(gè)并列的區(qū)，由此所述樣品能夠從樣品接收區(qū)朝樣品檢測(cè)區(qū)遷移，由此若分析物存在則檢測(cè)所述分析物，由此兩個(gè)區(qū)包括允許所述樣品的毛細(xì)管流通過所述區(qū)的材料，其特征在于，在所述區(qū)之間提供輸送樣品的中間區(qū)，所述中間區(qū)不含任何毛細(xì)材料，允許所述樣品通過重力遷移到所述支持體上。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試驗(yàn)裝置(1 )，其中所述樣品接收區(qū)包括樣 品施加區(qū)(2),其中所述樣品檢測(cè)區(qū)包括檢測(cè)區(qū)(4)和緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布置的 任選中間區(qū)(6),所述檢測(cè)區(qū)(4)任選包括對(duì)照分區(qū)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的試驗(yàn)裝置(1),其中所述樣品檢測(cè)區(qū)包括緊 靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布置的并與其毛細(xì)管流連通的吸收區(qū)(5)。
4. 一種用于檢測(cè)樣品中的至少一種分析物的試驗(yàn)裝置(1),包括 在所述固體支持體(18)的一個(gè)或更多側(cè)面上從所述裝置的一端向 另一端布置的(a) 第一毛細(xì)管區(qū)，其包括樣品施加區(qū)(2);(b) 第二毛細(xì)管區(qū)，其包括檢測(cè)區(qū)(4)、緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4) 布置的任選的中間區(qū)(6)和緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布置的任 選的吸收區(qū)(5)，所述檢測(cè)區(qū)(4)任選包括對(duì)照分區(qū)；和(c) 非毛細(xì)管區(qū)(14)，其將所述第一毛細(xì)管區(qū)的所述樣品施加區(qū)(2)與所述第二毛細(xì)管區(qū)的所述檢測(cè)區(qū)(4)或所述任選的 中間區(qū)(6)隔開，其中所述樣品施加區(qū)(2)、所述非毛細(xì)管區(qū)(14)和所述檢測(cè)區(qū)(4) 或所述任選的中間區(qū)(6)經(jīng)布置使得當(dāng)使用所述裝置時(shí)，樣品可以 僅通過重力從所述樣品施加區(qū)(2)流到所述檢測(cè)區(qū)(4)或流到所 述任選的中間區(qū)(6)。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2~4中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述檢測(cè)區(qū)U) 包括特異性識(shí)別所述至少 一種分析物或其類似物的至少 一種捕獲試 劑；并且其中所述樣品施加區(qū)(2)包括具有用于檢測(cè)所述至少一種分 析物或其類似物的直接或間接標(biāo)記的至少 一種分析物特異性綴合物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2~5中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述樣品施加 區(qū)(2)還包括至少一種對(duì)照綴合物。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2~6中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述檢測(cè)區(qū)(4) 包括具有特異性識(shí)別所述施加區(qū)(2 )中所述對(duì)照綴合物的至少一種對(duì) 照捕獲試劑(7，)的至少一種對(duì)照試驗(yàn)線。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2~7中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述分析物特 異性綴合物和/或所述對(duì)照綴合物包括標(biāo)記物，所述標(biāo)記物選自包括 綴合的金屬膠體、綴合的聚苯乙烯微球、碳納米管和具有特定顏色 的微米或納米顆粒和熒光微米或納米顆粒的組。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2 ~ 8中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述檢測(cè)區(qū)(4 ) 包括由硝化纖維素或另一種能夠被試劑涂覆的基質(zhì)制成的活性膜(16 )，所述試劑與位于所述施加區(qū)中的或存在于待試驗(yàn)樣品中的 其它試劑反應(yīng)。
10. 根據(jù)權(quán)利要求2 ~ 9中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述中間區(qū)(6) 包括吸收膜(15 )。
11. 根據(jù)權(quán)利要求2 ~ 10中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中粘附物(20 ) 覆蓋所述樣品施加區(qū)(2 )、所述非毛細(xì)管區(qū)(14 )和所述中間區(qū)(6 )， 并且與所述檢測(cè)區(qū)(4)部分重疊。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1~11中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述裝置設(shè) 置在中空外殼或熱模制外殼中或嵌入聚合物中。
13. 根據(jù)權(quán)利要求2~12中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置，其中所述捕獲試 劑為免疫試劑、寡核普酸或其類似物。
14. 根據(jù)權(quán)利要求13所述的試驗(yàn)裝置，其中所述捕獲試劑和綴合物試 劑選自下組寡核苷酸或其類似物、多克隆或單克隆抗體或超變抗 體片段或通過血清化合物如IgG、 IgA、 IgE和IgM識(shí)別的抗原或 像生物素-抗生物素蛋白鏈菌素那樣的配偶對(duì)中之一的特異性試劑。
15. —種用于檢測(cè)樣品中至少一種分析物的分析物檢測(cè)方法，其包括 以下步驟:使根據(jù)權(quán)利要求1 ~ 14中任一項(xiàng)所述的試驗(yàn)裝置接觸樣品， 允許所述樣品通過重力從所述裝置的頂部向底部移動(dòng)通過非毛細(xì)管 區(qū)，以及檢測(cè)所述分析物。
16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的分析物檢測(cè)方法，其包括使所述裝置上的 樣品接收區(qū)接觸樣品，允許所述樣品通過毛細(xì)管作用遷移通過所述樣 品接收區(qū)到達(dá)非毛細(xì)管區(qū)，允許所述樣品在重力作用下遷移通過所述 非毛細(xì)管區(qū)到達(dá)檢測(cè)區(qū)，和允許所述樣品通過毛細(xì)管作用遷移通過所 述檢測(cè)區(qū)并檢測(cè)所述分析物。
17. 根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的分析物檢測(cè)方法，其中所述試驗(yàn)裝 置(1)包括在固體支持體(18 )的一個(gè)或更多側(cè)面上從所述裝置的一 端向另一端布置的*第一毛細(xì)管區(qū)，其包括樣品施加區(qū)(2); 第二毛細(xì)管區(qū)，其包括檢測(cè)區(qū)(4 )、緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4 )布置 的任選的中間區(qū)(6)和緊靠所述檢測(cè)區(qū)(4)布置的任選的吸 收區(qū)(5);所述檢測(cè)區(qū)(4)任選地包括對(duì)照分區(qū)；和*非毛細(xì)管區(qū)(14 ),其將所述樣品施加區(qū)(2 )與所述檢測(cè)區(qū)(4 ) 或所述任選的中間區(qū)(6)隔開，其中所述檢測(cè)區(qū)(4)包括特異性識(shí)別所述至少一種分析物或其類 似物的至少一種捕獲試劑；和其中所述樣品施加區(qū)(2)包括具有用于檢測(cè)所述至少一種分析物 或其類似物的直接或間接標(biāo)記的至少 一種分析物特異性綴合物。
18. 根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析物檢測(cè)方法，包括以下步驟豎直放置所述試驗(yàn)裝置， 將樣品施加到所述裝置頂部，使所述樣品遷移通過所述樣品施加區(qū)(2 )并使所述至少一種分析物特 異性綴合物水合，使所述樣品中的至少一種分析物與所述至少一種分析物特異性綴合物 反應(yīng)，由此形成至少一種復(fù)合物，^_所述至少一種復(fù)合物到達(dá)所述非毛細(xì)管區(qū)，以通過重力穿過所述非 毛細(xì)管區(qū)來接觸和遷移通過所述任選的中間區(qū)(6)并通過所述檢測(cè)區(qū) (4)，由此與所述至少一種捕獲試劑反應(yīng)，和產(chǎn)生檢測(cè)信號(hào)，從而檢測(cè)所述至少一種分析物。
19. 根據(jù)權(quán)利要求15~18中任一項(xiàng)所述的分析物檢測(cè)方法，用于檢測(cè) 來自(有害)微生物的分析物或類似物，所述微生物包括小球隱孢子 蟲(CVj/ 似s/7onW/"附/7"rvw附)、鼠弓形體(7i AY /;/fls柳fl gow力7)、蘭4白賈第 蟲(G/flfY^/"附6/,Vi)、大腸桿菌(五.co/,)、痢疾阿米巴CE"./^to/j;ricfl)、 艱難梭菌(C.力j^"7e)、艱難梭菌毒素(C rf()^d/etoaVis)、 RSV(呼吸 道合胞病毒)、A型和B型流感病毒、輪狀病毒、40&41型腺病毒或其它腺病毒組、嗜肺性軍團(tuán)菌(丄^/^^//"/7財(cái)"附0 / /^7")尿抗原、人和動(dòng)物源性的冠狀病毒和人偏肺病毒(Humaii Metapneumo viruses)。
20. 根據(jù)權(quán)利要求17~19中任一項(xiàng)所述的分析物檢測(cè)方法，其中所述 捕獲試劑選自下組寡核苷酸或其類似物、多克隆或單克隆抗體或 超變抗體片段或通過血清化合物如IgG、 IgA、 IgE和IgM識(shí)別的 抗原或像生物素-抗生物素蛋白鏈菌素那樣的配偶對(duì)中之一的特異 性試劑。
21. —種用于檢測(cè)樣品中至少一種分析物的分析物檢測(cè)方法，其包 括以下步驟使試驗(yàn)裝置接觸樣品，允許所述樣品在重力作用下從 所述裝置的頂部移動(dòng)到底部，和檢測(cè)所述至少一種分析物或其類似物，其中所述試驗(yàn)裝置選自根據(jù)權(quán)利要求1 11中任一項(xiàng)所述的試 驗(yàn)裝置、測(cè)試條、試紙條、診斷條、流式裝置和側(cè)流式裝置。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的分析物檢測(cè)方法，其包括以下步驟豎直 放置所述試驗(yàn)裝置，將所述樣品施加到所述裝置的頂部，使所述樣 品遷移通過所述裝置，由此允許所述樣品中的分析物與捕獲試劑反 應(yīng)并產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)，由此檢測(cè)所述分析物。
全文摘要
本發(fā)明涉及檢測(cè)生物樣品中分析物或其類似物的裝置，包括固體支持體，其上設(shè)置數(shù)個(gè)并列的區(qū)，由此樣品能夠從樣品接收區(qū)向樣品檢測(cè)區(qū)移動(dòng)，由此檢測(cè)可能存在的所述分析物，由此兩個(gè)區(qū)包括允許所述樣品的毛細(xì)管流通過所述區(qū)的材料，其特征在于，在所述區(qū)之間提供輸送樣品的中間區(qū)，所述中間區(qū)不含任何毛細(xì)管材料，允許所述樣品通過重力移動(dòng)到處于豎直位置的所述支持體上。本發(fā)明還涉及用于檢測(cè)生物樣品中的分析物或其類似物的方法。
文檔編號(hào)G01N33/558GK101326441SQ200680046016
公開日2008年12月17日 申請(qǐng)日期2006年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月8日
發(fā)明者勞倫斯·德諾爾梅, 帕斯卡爾·默滕斯, 蒂埃里·勒克利普特 申請(qǐng)人:可瑞斯生物概念公司