專利名稱：：利用磁性納米顆粒分離靶成分的方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種在生命科學、醫(yī)學診斷等領域中從生物樣品諸如血清或血漿中分離靶成分的方法。例如，本發(fā)明涉及一種從生物樣品諸如血清或血漿中分離特定的脂蛋白級分的方法。本發(fā)明的方法能夠用于測定HDL級分中膽固醇等的含量，這樣的測定可用于進行臨床檢查。
背景技術：
：在血液中，脂質與脫輔基蛋白結合形成脂蛋白，然后脂蛋白被代謝。根據比重可將脂蛋白分為若干級分，諸如乳糜粒(CMs)，極低密度脂蛋白(VLDLs)，中等密度脂蛋白(IDLs)，低密度脂蛋白(LDLs)和高密度的脂蛋白(HDLs)。已知多種疾病影響這些脂蛋白的代謝，從而增加或降低血液中的脂蛋白級分。具體地，已知HDLs從多種組織，包括動脈壁獲得膽固醇，并且參與積累在細胞中的膽固醇的去除作用，HDLs是多種動脈硬化，如冠狀動脈硬化的危險防范因子，它在血液中的水平是預見動脈硬化發(fā)生的有用的指示劑。因此，在臨床檢查中進行對HDL級分中膽固醇的含量的測量，從而預防或診斷缺血性心臟病等。作為分離脂蛋白的方法，已知超速離心法、電泳法、凝膠過濾法等。因為這些方法要求非常復雜的程序，所以這些方法在臨床檢查中不經常使用。因而，在臨床檢査中經常使用的是一種沉淀法(分級法)。廣泛而普遍地用作測定HDL膽固醇(下文中稱為HDL-C)的方法是分級法，該方法涉及通過向樣品添加分級劑來凝集除HDL外的脂蛋白，通過離心去除該脂蛋白，再測量僅含有分離的HDL的上清液中的膽固醇。為了測定HDL級分中膽固醇的含量，能夠利用用于測定膽固醇含量的已知試劑來測量所收集上清液的HDL級分中含有的膽固醇含量。作為在上述沉淀法中所使用的沉淀劑，經常使用聚陰離子或聚陰離子和二價陽離子的組合。該聚陰離子的已知實例包括硫酸化的多聚糖如葡聚糖硫酸鹽和肝素，磷鎢酸及其鹽，和聚乙二醇。二價陽離子的已知實例包括Mg2+，Mn2+，Ca2+和N產。然而，由于上述沉淀法涉及通過添加分級劑進行分離的操作，所以該方法在下列方面存在問題需要相對大量的樣品，需要儀器，如離心機，且可能出現(xiàn)人為操作的誤差。此外，所述沉淀(分級)法在應用于自動分析器時存在問題，而所述自動分析器在臨床檢查中經常使用。特別地，所述沉淀法要求通過離心來分級樣品的步驟，這樣該方法需要特定的處理時間以獲得分析對象的級分。因此，很難使用該方法對大量樣品進行快速分近期，一種不要求這些復雜的操作并能用在自動分析器中的直接方法已迅速傳播開。例如，已知一種涉及使除HDL外的脂蛋白與用作凝集劑的環(huán)糊精硫酸鹽完全反應，然后再容許利用聚乙二醇修飾的酶與之作用，從而特定地測量HDL中的膽固醇。然而，需要修飾環(huán)糊精以抑制除HDL外共存脂蛋白的反應以及利用高成本產品如酶和抗體。此外，已經報道了一種測定法，借此法并使用干的載玻片進行了沉淀法。然而，問題在于這樣的載玻片的構造很復雜(日本專利公開(KoKai)號2005-49346A)。此外，該沉淀法也主要用在干式化學領域中，但是近期發(fā)明了利用直接方法的干式試樣的新型技術。然而，這樣的技術在生產過程中涉及非常復雜的步驟，且存在高成本的問題。日本專利公開(Kokai)號6-242110A(1994)公開了生物樣品中特定脂蛋白級分中含有的一種成分的含量是通過下述步驟直接測定的凝集除了感興趣的特定級分外的脂蛋白級分；使該成分與一種試劑反應，利用該試劑能夠檢測其含量待測定的成分；終止該反應的同時或其后，溶解所述凝集級分；并再測量由該反應所引起的變化。另外，日本專利號2913608公開了一種將樣品中的第一類脂蛋白從該樣品中的第二類脂蛋白中分離出來的方法。具體地，該方法涉及利用用于選擇性化學沉淀的試劑來沉淀第二類脂蛋白，使該樣品與磁反應性粒子(該磁反應性粒子誘發(fā)脂蛋白的沉降，所述脂蛋白已經隨著所述粒子的沉降而沉淀)接觸，將該樣品置于磁場中直到所述磁反應性粒子沉降，從而沉降第二類沉淀的脂蛋白，并且因而容許第一類脂蛋白保留在該樣品的上清液中。在這種方法的情形中，向脂蛋白添加沉淀劑如葡聚糖硫酸鹽和磁性粒子引起除特定脂蛋白級分外的級分的沉淀。其次，當引起磁體作用于該產物，磁性粒子與該沉淀物形成混合物。該磁性粒子和該沉淀物共同沉淀并分離。所述磁性粒子是與脂蛋白不反應的磁體。最后，測定保留在上清液中的特定級分中膽固醇的含量。在另一方面，已經使用了利用磁性粒子的分離方法，且一些產品可商業(yè)獲得(IatronCo.和OrthoClinical)。然而，由于這些方法使用具有大小為100nm或更大的磁性粒子，因此需要在立即將要使用前對其進行攪拌并證明其完全均勻。
發(fā)明內容本發(fā)明實現(xiàn)的目標是解決現(xiàn)有技術中的上述問題。具體地，本發(fā)明實現(xiàn)的目標是提供一種測定生物樣品中特定脂蛋白級分所含成分含量的方法，該方法利用自動分析器，且不需要通過離心來分級樣品的步驟。具體地，本發(fā)明實現(xiàn)的目標是提供一種測定HDL級分中膽固醇含量的有效方法。作為實現(xiàn)上述目標而進行的徹底研究的結果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了磁性納米顆粒能夠引起除特定脂蛋白級分外的脂蛋白級分的凝集，從而容許在使用磁場的條件下，從所述特定脂蛋白級分中容易地分離出該脂蛋白。本發(fā)明人還揭示了能夠精確地測定靶成分的含量，這是通過檢測保留在上清液中的特定級分中該成分進行的。由此，本發(fā)明人完成了本發(fā)明。由此，本發(fā)明提供一種分離生物樣品中耙成分的方法，其包括以下步驟(1)使生物樣品與獨立分散的磁性納米顆粒相接觸，從而形成所述磁性納米顆粒和能夠與所述磁性納米顆粒相互作用的生物分子的凝集物，所述磁性納米顆粒具有50nm或更小的顆粒大小，且在其表面具有陰離子官能團；和(2)利用外部磁場收集所述凝集物。優(yōu)選地，能夠與磁性納米顆粒相互作用的生物分子具有與所述磁性納米顆粒的顆粒大小相同或比其更大的大小。優(yōu)選地，所述磁性納米顆粒的表面經如下分子式所代表的化合物所修飾R^-(OCH2CH2VO-L-X，其中R'代表Cl-24的烷基，n代表l-20間的整數(shù)，L代表單鍵或C1-10亞垸基，和X代表羧酸基團，磷酸基團，磺酸基團或硼酸基團。優(yōu)選地，形成了生物樣品中除特定脂蛋白級分外的脂蛋白與磁性納米顆粒的凝集物，且利用外部磁場收集所述凝集物，從而分離該生物樣品中所述特定脂蛋白級分。優(yōu)選地，所述特定級分是高密度脂蛋白(HDL)。優(yōu)選地，分離所述特定級分，從而測定所述特定級分中膽固醇的含量。優(yōu)選地，在凝集促進劑的共同存在下使所述生物樣品與磁性納米顆粒相接觸。優(yōu)選地，使用聚陰離子作為所述凝集促進劑。優(yōu)選地，所述聚陰離子是選自下列各項的聚陰離子磷鎢酸、糊精硫酸鹽、環(huán)糊精硫酸鹽、杯芳烴或肝素。優(yōu)選地，所述獨立分散的，具有50nm或更小顆粒大小的磁性納米顆粒是磁鐵礦。本發(fā)明的另一個方面提供一種臨床檢查方法，其包括以下步驟(1)利用根據本發(fā)明的上述方法分離生物樣品中的靶成分，和(2)測定由此分離的靶成分的含量。優(yōu)選地，所述靶成分的含量是利用干式分析元素(dryanalyticalelement)觀lj定白勺。本發(fā)明的另一個方面提供一種自動臨床檢查設備，其至少包括(1)容器，在所述容器中磁性納米顆粒與生物樣品相接觸，從而形成凝集物，(2)磁場產生工具，其用于在容器內產生收集所述凝集物的磁場，和(3)干式分析元素，所述干式分析元素用于檢測與所述凝集物分離的生物樣品中的靶成分。本發(fā)明的另一個方面提供用于進行根據本發(fā)明的上述方法的檢查試劑盒，其包括獨立分散的的磁性納米顆粒，所述磁性納米顆粒具有50nm或更小顆粒大小，并且在其表面具有陰離子官能團。附圖簡述圖1顯示利用不具有級分輔助劑的級分溶液進行測量的結果。圖2顯示利用級分溶液進行測量的結果，所述級分溶液含有糊精硫酸鹽作為級分輔助劑。本發(fā)明優(yōu)選的實施方案本發(fā)明的實施方案將在下文中詳細描述。根據本發(fā)明的分離生物樣品中靶成分的方法包括以下步驟(1)使生物樣品與獨立分散的磁性納米顆粒相接觸，從而形成所述磁性納米顆粒和能夠與所述磁性納米顆粒相互作用的生物分子的凝集物，所述磁性納米顆粒具有50nm或更小的顆粒大小，且在其表面具有陰離子官能團；禾口(2)利用外部磁場收集所述凝集物。依靠使用本發(fā)明的方法，通過與磁性納米顆粒的凝集能夠將血液中除特定脂蛋白級分外的級分捕獲，所述磁性納米顆粒在其表面具有陰離子官能團，如羧酸。這些凝集物能通過磁體分離。隨后，能夠測定保留在上清液中的特定級分中膽固醇的含量。根據本發(fā)明的方法，生物樣品中特定脂蛋白級分所含成分含量以如下方式快速測定。凝集除所述特定級分外的脂蛋白級分，使該產物與試劑或載玻片反應，利用該試劑或載玻片能夠檢測其量待測定的成分(保留在所述上清液中)，然后測量由該反應產生的產物。由此，能夠測定所述特定脂蛋白級分所含成分的含量。這里，特定級分可為高密度脂蛋白(HDL)。而且，其量待測定的成分可為膽固醇。在本發(fā)明中，獨立分散的具有50nm或更小顆粒大小的磁性納米顆粒用于使除靶成分外的成分(例如，除特定脂蛋白級分外的級分)的凝集，所述磁性納米顆粒在其表面具有陰離子官能團。"獨立分散"指顆粒在溶液中不形成任何凝集物而獨立分散的狀態(tài)。另外，磁性納米顆粒具有50nm或更小的顆粒大小，進一步優(yōu)選地為40nm或更小，和特別優(yōu)選地為30nm或更小。作為磁性納米顆粒，能夠使用任何顆粒，只要所述顆粒能夠分散或懸浮在水性介質中并能夠通過磁場的應用從分散液或混懸液中分離出來。用于本發(fā)明中的磁性納米顆粒的實例包括鐵、鈷或鎳的鹽、氧化物、硼化物或硫化物；及具有高磁化率的稀土元素(赤鐵礦和鐵酸鹽)。也能于此使用的這種磁性納米顆粒的具體實例包括鐵磁有序合金，如磁鐵礦(Fe304),FePd，F(xiàn)ePt和CoPt。本發(fā)明中優(yōu)選的磁性納米顆粒選自金屬氧化物和具體地選自由氧化鐵和鐵酸鹽(Fe,M)304所組成的組。這樣的氧化鐵的實例具體地包括磁鐵礦、磁赤鐵礦及其混合物。在上述分子式中，"M"代表當與鐵離子結合使用時能夠形成磁性金屬氧化物的金屬離子。該金屬離子典型地選自過渡金屬，且最優(yōu)選地為Zn2+,Co2+，Mn2+,Cu2+，N產，Mg"等。M/Fe的摩爾比率根據所選擇鐵酸鹽的化學計量成分測定。金屬鹽以固體或溶液形式提供，且優(yōu)選地為氯化鹽、溴化鹽或硫酸鹽。其中，氧化鐵和鐵酸鹽在安全考慮方面是優(yōu)選的。磁鐵礦(Fe304)特別優(yōu)選。用于本發(fā)明的磁性納米顆粒在其表面具有陰離子官能團。陰離子官能團的實例包括羧酸基團，磷酸基團，磺酸基團和硼酸基團。特別地，羧基組是優(yōu)選的。優(yōu)選地，能夠使用具有這樣的表面的磁性納米顆粒，所述表面經由分子式R、OCH2CH2)n-0-L-X代表的化合物所修飾。在該分子式中，W代表C1-24烷基，n代表l-20的整數(shù)，L代表單鍵或C1-10亞垸基，和X代表羧酸基團，磷酸基團，磺酸基團或硼酸基團。在本發(fā)明中，使磁性納米顆粒與生物樣品接觸。依賴于所述生物樣品，還可以使磁性納米顆粒與所述生物樣品在凝集促進劑存在下相接觸。這里，凝集促進劑指誘導凝集的物質。適合的物質能夠單獨使用或聯(lián)合使用，這依賴于待凝集級分的類型。針對除特定脂蛋白級分外的級分且引起免疫凝集反應的抗體也能用作凝集促進劑?？梢允褂萌魏蔚哪龠M劑，只要其能夠完成本發(fā)明的目的。優(yōu)選地加入聚陽離子或聚陰離子作為凝集促進劑，從而控制凝集的速度。例如，為了引起除HDL級分外的脂蛋白級分凝集的目的，可以使用聚乙二醇(PEG)和聚陰離子。磷鎢酸，糊精硫酸鹽，環(huán)糊精硫酸鹽，杯芳烴，肝素等可以作為聚陰離子使用。這些可以單獨使用或與陽離子，如Mg2、Mn2+，Ca2+，L產或N產聯(lián)合使用。當在本發(fā)明中使用凝集促進劑時，糊精硫酸鹽是特別優(yōu)選的。根據本發(fā)明優(yōu)選的實施方案，形成生物樣品中除特定脂蛋白級分外的脂蛋白和磁性納米顆粒的凝集物。再使用外部磁場收集所述凝集物，從而可以分離所述生物樣品中的所述特定脂蛋白級分。此處所用的"特定級分"優(yōu)選地指高密度脂蛋白(HDL)。在本發(fā)明中，可以分離特定級分，從而測定所述特定級分所含膽固醇的含量。作為用于檢測和測定本發(fā)明中特定脂蛋白級分中所含成分含量的試劑，可以使用多種在臨床檢查等領域已知的試劑。例如，當用于膽固醇含量測定反應時(當測定HDL級分中膽固醇的含量時)，可以使用具有高反應特異性的稱作酶方法的酶反應。這樣的酶方法的實例包括涉及在使用膽固醇酯酶(CE)和膽固醇氧化酶(CO)與過氧化物酶(POD)和色原聯(lián)合下測量可見區(qū)吸光度的方法；和涉及在使用CE和膽固醇脫氫酶(CHD)以及與輔酶聯(lián)合下測量紫外區(qū)吸光度的方法。具體地，當測定HDL級分中膽固醇含量時，可以使用利用CE，CO和POD的試劑或利用CE和CHD的試劑。而且，HDL級分中膽固醇含量還能夠利用含有上述試劑的干式分析元素進行測定。此外，本發(fā)明提供一種自動臨床檢查設備，其至少包括(1)容器，在所述容器中使磁性納米顆粒與生物樣品相接觸，從而形成凝集物，(2)磁場產生工具，其用于在容器內產生收集所述凝集物的磁場，和(3)干式分析元素，其用于檢測與所述凝集物分離的生物樣品中的靶成分。在其中使磁性納米顆粒與生物樣品相接觸從而形成凝集物的容器的類型和形狀不受特殊限制。該容器可以是具有至少一個開口的一般的反應容器(包括試管等)。磁體等可以用作磁場產生工具。另外，可以使用含有用于檢測耙成分的試劑的干式分析元素。當所述靶成分是膽固醇時，作為試劑，可以包含CE，CO和POD的聯(lián)合或CE和CHD的聯(lián)合。干式分析元素的構造不受特殊限制。例如，可以用于此處的干式分析元素具有這樣的形式:至少一個功能層和至少一個展開層，且這些層以該順序在平坦不透水支架的一側分層，從而形成完整的層壓材料。多種上述試劑還可存在于所述功能層中，如果必要，存在于所述展開層中。本發(fā)明將通過參考實施例進一步進行具體的描述。然而，本發(fā)明的范圍不受這些實施例的限制。實施例實施例1:配制磁性納米顆粒分散液將10.8g氯化鐵(III)6-水合物和6.4g氯化鐵(II)4-水合物溶解于并與80ml的IN的鹽酸水溶液混合。隨著攪拌該溶液，向該溶液中以2ml/分鐘的速度加入96ml氨水(28wt.%)。隨后在8(TC加熱30分鐘后，將所得產物冷卻到室溫。通過用水的潷析來純化由此獲得的凝集物。具有微晶尺寸約12mn的磁鐵礦(Fe304)的產生由X-射線衍射法證實。將通過溶解2.3g聚氧乙烯(4，5)月桂基醚乙酸鹽配制的100ml水溶液(其pH己經用NaOH調節(jié)為6.8)加入到上面所獲得的凝集物中，從而分散所述凝集物。由此，配制了磁性納米顆粒分散液。實施例2將10Pi磷鴇酸(0.2%或0.8%)加入到190具有含量為10.2g/l的Fe304的磁性納米顆粒溶液中。此外，加入50u1標準血清(116mg/dlLDL-C和86.1mg/dlHDL-C)。利用渦流攪拌器攪拌所述溶液，然后容許在室溫靜置30秒。將該溶液轉移到磁體上，再容許該溶液靜置30秒。收集該上清液。利用LDL-C'HDL-C檢測試劑盒(由KYOWAMEDEXCO.,LTD.生產)測定來源于各種脂蛋白的膽固醇的量。其結果在下表1中顯示。LDL的分離與去除以及測定HDL含量的能力能夠得到證實。(1)加入0.20%的磷鎢酸(2)加入0.80%的磷鎢酸表l<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例3將10ul含有0.5%磷鎢酸的0.1MMES緩沖劑(pH6.0)加入到190u1具有含量為3.62g/l的Fe304的磁性納米顆粒溶液中。將50P1對照血清(119mg/dlLDL-C和26mg/dlHDL-C)加入到該溶液中。利用渦流攪拌器攪拌所述溶液，然后容許在室溫靜置30秒。然后將該溶液轉移到磁體上，再容許該溶液靜置30秒。收集該上清液，并將其點樣在FUJIDRY-CHEMHDL-C-P載玻片(由FUJIPHOTOFILMCO.，LTD,生產)上。然后測定HDL膽固醇含量。此外，利用通過離心的分級獲得上清液，該離心是利用與HDL-C-P載玻片共同提供的分級測試溶液(PR)進行的。收集該上清液，并將其點樣在所述載玻片上。也顯示了通過測定獲得的數(shù)據。在用磁性納米顆粒處理后測定的HDL-C測量結果為28.06mg/dl在用PR處理后測定的HDL-C測量結果為26.28mg/dl如上述結果所示，在利用FUJIDRY-CHEMHDL-C-P載玻片測定膽固醇含量中，通過利用磁性納米顆粒的分級所獲得的結果幾乎與通過利用PR的常規(guī)方法所獲得的相同。而且，預處理時間能夠從20分鐘縮短到1分鐘。實施例4(不用級分輔助劑配制級分溶液)將40u1的0.2MMES緩沖劑(pH5.0)加入到120u1具有含量為15g/l的Fe304的磁性納米顆粒(大小12-15nm)溶液中，從而配制級分溶液。將40ul樣品加入到由此配制的級分溶液中，并攪拌該溶液。然后容許該溶液靜置30秒。再將裝有該混合溶液的容器放置于neodium磁體上，再容許其靜置60秒。收集該上清液并點樣于FUJIDRY-CHEMHDL-C載玻片(由FUJIPHOTOFILMCO.,LTD.生產)上。然后測定HDL膽固醇含量。為了比較，使用了由利用磷鎢酸法測量該樣品所獲得的值。20個樣品(N=20)的多重抽樣相關性如圖l所示。實施例5(利用糊精硫酸鹽作為級分輔助劑配制級分溶液)將40u1的0.2MMES緩沖劑(pH5.0)禾卩10y1的0.4%糊精硫酸鈉(MW500，000)(WakoPureChemicalIndustries,Ltd.)力卩入至U100u1具有含量為21g/1的Fe304的磁性納米顆粒(大小12-15nm)溶液中，從而配制級分溶液。將50M樣品加入到由此配制的級分溶液中，并攪拌該溶液。然后容許該溶液靜置30秒。再將裝有該混合溶液的容器放置于neodium磁體上，在容許其靜置60秒。收集該上清液并點樣于FUJIDRY-CHEMHDL-C載玻片(由FUJIPHOTOFILMCO.,LTD.生產)上。然后測定HDL膽固醇含量。為了比較，使用了由利用磷鎢酸法測量該樣品所獲得的值。20個樣品(N:20)的多重抽樣相關性如圖2所示。工業(yè)使用性通過本發(fā)明的方法，除特定脂蛋白級分外的脂蛋白級分能夠在其凝集后利用磁場快速分離。因此，本發(fā)明的方法允許利用臨床檢查中的自動分析器通過直接使用常規(guī)檢測法或干載玻片的測量。而且，本發(fā)明的方法能夠顯著程度地縮短分離和檢測的測量時間。由此，本發(fā)明的方法在臨床檢査中非常有用。進一步，在本發(fā)明中，所述磁性非常小，且當使其靜置時以不沉淀形式存在。因此，本發(fā)明的方法在如下方面是有利的在使用前無需攪拌操作和使該磁性均勻化。進一步，在本發(fā)明中，當除HDL外的脂蛋白形成凝集物時，該凝集物能夠在l分鐘內利用磁體沉淀，且由此本發(fā)明的方法適合于自動化過程。權利要求1.一種分離生物樣品中靶成分的方法，其包括以下步驟(1)使生物樣品與獨立分散的磁性納米顆粒相接觸，從而形成所述磁性納米顆粒和能夠與所述磁性納米顆粒相互作用的生物分子的凝集物，所述磁性納米顆粒具有50nm或更小的顆粒大小，且在其表面具有陰離子官能團；和(2)利用外部磁場收集所述凝集物。2.根據權利要求1的方法，其中能夠與所述磁性納米顆粒相互作用的所述生物分子具有與所述磁性納米顆粒的顆粒大小相同或比其更大的大小。3.根據權利要求1或2的方法，其中所述磁性納米顆粒的表面經如下分子式所代表的化合物所修飾RL(OCH2CH2VO-L-X，其中R1代表C1-24的垸基，n代表l-20間的整數(shù)，L代表單鍵或C1-10亞垸基，和X代表羧酸基團，磷酸基團，磺酸基團或硼酸基團。4.根據權利要求1-3中任一項的方法，其包括形成生物樣品中除特定脂蛋白級分外的脂蛋白與磁性納米顆粒的凝集物，且利用外部磁場收集所述凝集物，從而分離所述生物樣品中的所述特定脂蛋白級分。5.根據權利要求4的方法，其中所述特定級分是高密度脂蛋白(HDL)。6.根據權利要求4或5的方法，其中分離所述特定級分，從而測定所述特定級分中膽固醇的含量。7.根據權利要求6的方法，其中在凝集促進劑的共同存在下使所述生物樣品與磁性納米顆粒相接觸。8.根據權利要求7的方法，其中使用聚陰離子作為所述凝集促進劑。9.根據權利要求8的方法，其中所述聚陰離子是選自下列各項的聚陰離子磷鎢酸、糊精硫酸鹽、環(huán)糊精硫酸鹽、杯芳烴或肝素。10.根據權利要求1-9中任一項的方法，其中所述獨立分散的，具有50nm或更小顆粒大小的磁性納米顆粒是磁鐵礦。11.一種臨床檢查方法，其包括以下步驟(1)利用根據要求l-10中任一項的方法分離生物樣品中的靶成分，和(2)測定由此分離的靶成分的含量。12.根據權利要求11的臨床檢查方法，其中所述靶成分的含量是利用干式分析元素測定的。13.—種自動臨床檢查設備，其至少包括(1)容器，在所述容器中使磁性納米顆粒與生物樣品相接觸，從而形成凝集物，(2)磁場產生工具，其用于在容器內產生收集所述凝集物的磁場，和(3)干式分析元素，其用于檢測與所述凝集物分離的生物樣品中的靶成分。14.用于進行根據權利要求1-12中任一項的方法的檢查試劑盒，其包括獨立分散的磁性納米顆粒，所述磁性納米顆粒具有50nm或更小顆粒大小，并且在其表面具有陰離子官能團。全文摘要本發(fā)明實現(xiàn)的目標是提供一種測定生物樣品中特定脂蛋白級分所含成分含量的方法，該方法利用自動分析器，且不要求通過離心分級樣品的步驟。本發(fā)明提供一種分離生物樣品中靶成分的方法，其包括以下步驟(1)使生物樣品與獨立分散的磁性納米顆粒相接觸，從而形成所述磁性納米顆粒和能夠與所述磁性納米顆粒相互作用的生物分子的凝集物，所述磁性納米顆粒具有50nm或更小的顆粒大小，且在其表面具有陰離子官能團；和(2)利用外部磁場收集所述凝集物。文檔編號G01N33/92GK101189523SQ200680019430公開日2008年5月28日申請日期2006年6月29日優(yōu)先權日2005年6月30日發(fā)明者小島政芳,平井博幸,景山茂樹,阿部義彥申請人:富士膠片株式會社