專利名稱：免疫組織化學(xué)用磁鋼密封腔的制作方法
專利說(shuō)明
一、技術(shù)領(lǐng)域本實(shí)用新型涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，具體涉及一種在免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中所用磁鋼密封腔。
二背景技術(shù)：
免疫組織化學(xué)，又稱免疫組化，是運(yùn)用抗原抗體原理，檢測(cè)組織或細(xì)胞中特定蛋白質(zhì)表達(dá)的一種方法。
免疫組化可在病理切片或培養(yǎng)細(xì)胞上進(jìn)行，涉及到清洗、固定、加入一抗、二抗、顯色劑等一系列步驟。目前所用方法是將病理切片或培養(yǎng)有細(xì)胞的蓋玻片逐一放入各種溶液中，所用溶液量必須能夠覆蓋玻片，需達(dá)到1毫升或數(shù)毫升以上。而實(shí)驗(yàn)中所用一抗、二抗價(jià)格昂貴，造成大量浪費(fèi)，實(shí)驗(yàn)成本很高。
三
發(fā)明內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的在于提供一種免疫組化用磁鋼密封腔。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便、材料性質(zhì)穩(wěn)定、密封性能好。用于病理切片或培養(yǎng)細(xì)胞的免疫組化實(shí)驗(yàn)，可極大地節(jié)約實(shí)驗(yàn)中所用貴重溶液，降低實(shí)驗(yàn)成本，同時(shí)縮小了實(shí)驗(yàn)范圍，使實(shí)驗(yàn)易于控制，重現(xiàn)性提高。
本實(shí)用新型涉及的密封腔由性質(zhì)穩(wěn)定、對(duì)細(xì)胞無(wú)刺激作用的磁鋼制造。包括上部磁鋼密封腔和下部磁鋼圈兩部分。
上部磁鋼密封腔外直徑15毫米，空心內(nèi)圈直徑可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)要求制成2毫米、4毫米、6毫米、8毫米、10毫米等不同規(guī)格，密封腔高度3-6毫米。密封腔底面經(jīng)拋光打磨，光滑平整。
下部磁鋼圈外直徑15毫米，空心內(nèi)圈直徑10毫米，高度3毫米。
本實(shí)用新型用于免疫組化實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先將病理切片或培養(yǎng)有細(xì)胞的蓋玻片用濾紙吸干，然后將本實(shí)用新型的上部磁鋼密封腔底面輕輕置于玻片上面，將下部磁鋼圈置于玻片下面相對(duì)位置(磁鋼南北極相對(duì))，輕輕順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)磁鋼，使兩磁鋼位置完全相對(duì)。內(nèi)圈空心處為所研究的切片組織或培養(yǎng)的細(xì)胞。本實(shí)用新型的上部磁鋼密封腔底面經(jīng)拋光打磨光滑平整，在強(qiáng)磁力作用下可保證與玻片密封。上部?jī)?nèi)圈空心處可加入一系列溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。溶液量可減少至50-100微升，較不用密封腔所用溶液量(1000-2000微升)大大節(jié)省。
本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)有第一、本實(shí)用新型極大地節(jié)約免疫組化實(shí)驗(yàn)中所用貴重溶液，節(jié)約量根據(jù)所選用密封腔內(nèi)徑不同，可達(dá)70-95％，降低實(shí)驗(yàn)成本明顯。
第二、本實(shí)用新型使免疫組化實(shí)驗(yàn)集中于密封腔中，環(huán)境范圍縮小，易于控制，使實(shí)驗(yàn)者將工作重點(diǎn)放在所感興趣的組織或細(xì)胞上。
第三、本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便、材料性質(zhì)穩(wěn)定、對(duì)細(xì)胞無(wú)刺激作用，同時(shí)所用磁鋼磁力強(qiáng)，密封性能好，無(wú)滲漏現(xiàn)象。
四

圖1本實(shí)用新型磁鋼密封腔用于免疫組化實(shí)驗(yàn)示意圖。
1為上部磁鋼密封腔外圈，直徑15毫米。
2為上部磁鋼密封腔內(nèi)圈，直徑2、4、6、8、10毫米(不同規(guī)格)。
3為上部磁鋼密封腔外側(cè)，高度3、4、5、6毫米(不同規(guī)格)。
4為上部磁鋼密封腔底面，拋光打磨。
5為切片組織或細(xì)胞。
6為玻片。
7為下部磁鋼密封圈外圈，直徑15毫米。
8為下部磁鋼密封圈內(nèi)圈，直徑10毫米。
9為下部磁鋼密封圈外側(cè)，高度3毫米。
五、具體實(shí)施實(shí)例下面以免疫組化檢測(cè)PC12細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子1α蛋白表達(dá)為例說(shuō)明本實(shí)用新型實(shí)施實(shí)例1、PC12細(xì)胞培養(yǎng)于多聚賴氨酸包被的玻璃蓋玻片上。
2、4℃ PBS沖洗2次(2×5分鐘)。
3、-20℃ 100％甲醇固定10分鐘。
4、待甲醇揮發(fā)，在顯微鏡下確定要研究的細(xì)胞。
5、將細(xì)胞周圍用濾紙吸干。
6、根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選用一種規(guī)格磁鋼密封腔。
7、將上部磁鋼密封腔底面整理清潔。
8、將上部磁鋼密封腔輕輕置于玻片上面，內(nèi)圈部分為所要研究的細(xì)胞。
9、將下部磁鋼圈置于玻片下面相對(duì)位置(磁鋼南北極相對(duì))。
10、輕輕順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)磁鋼，使兩磁鋼位置完全相對(duì)。
11、輕按密封腔，以使密封腔與蓋玻片密封，但用力不可太大，以免壓碎蓋玻片。
12、將4℃ PBS滴入上部磁鋼密封腔中，沖洗2次(2×5分鐘)。
13、將1∶50鼠抗缺氧誘導(dǎo)因子1α單克隆抗體50-100微升(根據(jù)密封腔規(guī)格不同選用不同量)滴入上部磁鋼密封腔，4℃ 1小時(shí)。
14、4℃PBS沖洗2次(2×5分鐘)。
15、加入FITC-羊抗鼠IgG抗體。
16、4℃ PBS沖洗2次(2×5分鐘)。
17、共聚焦顯微鏡下觀察和分析熒光圖象。
權(quán)利要求1.一種免疫組織化學(xué)用磁鋼密封腔，其特征在于由性質(zhì)穩(wěn)定、對(duì)細(xì)胞無(wú)刺激作用的磁鋼制造，包括上部磁鋼密封腔和下部磁鋼圈兩部分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的免疫組織化學(xué)用磁鋼密封腔，其特征在于上部磁鋼密封腔外直徑15毫米，空心內(nèi)圈直徑可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)要求制成2-10毫米等不同規(guī)格，密封腔高度3-6毫米，密封腔底面經(jīng)拋光打磨，光滑平整。
專利摘要本實(shí)用新型涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，具體涉及一種在免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)中所用磁鋼密封腔。由性質(zhì)穩(wěn)定、對(duì)細(xì)胞無(wú)刺激作用的磁鋼制造。包括上部磁鋼密封腔和下部磁鋼圈兩部分。上部磁鋼密封腔內(nèi)圈直徑可根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)要求制成2－10毫米等不同規(guī)格，底面經(jīng)拋光打磨，光滑平整。用于病理切片或培養(yǎng)細(xì)胞的免疫組化實(shí)驗(yàn)，可極大地節(jié)約實(shí)驗(yàn)中所用貴重溶液，減少量達(dá)70－95％，降低了實(shí)驗(yàn)成本，同時(shí)縮小了實(shí)驗(yàn)范圍，使實(shí)驗(yàn)易于控制，重現(xiàn)性提高。
文檔編號(hào)G01N33/53GK2658749SQ20032012022
公開日2004年11月24日 申請(qǐng)日期2003年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月5日
發(fā)明者嚴(yán)虹, 王斌 申請(qǐng)人:南京醫(yī)科大學(xué)