專利名稱：一種免疫分析分離用磁性分離器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于免疫分析分離技術(shù)中的分離器，特別涉及一種適用于孔板式磁性免疫分析分離技術(shù)中的的磁性分離器。
背景技術(shù)：
自從1959年，Yallow和Berson發(fā)明了免疫分析之后，免疫分析在臨床化學(xué)和環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域中，日益成為主要的分析工具。免疫分析有均相免疫分析和非均相免疫分析。均相免疫分析速度快、方便、且易自動化，但在實(shí)際應(yīng)用中并不像后者那樣成功。非均相免疫分析包括一個把結(jié)合的和游離的配體加以分離的步驟。因此，分離裝置在非均相免疫分析中起著關(guān)鍵作用。最早使用的分離方法是電泳和色譜法，它們是依據(jù)分子的大小及電荷差異分離，只適用于比較小的分子。這類方法的缺點(diǎn)是非特異性吸附高，同時也很費(fèi)時。后來，在70和80年代發(fā)展起來了葡聚糖涂覆活性碳法和分級沉淀法。這種方法盡管比較實(shí)用，但非特異性吸附仍很高，同時需要冷凍離心設(shè)備。目前非均相免疫分析中，一般采用二抗或一抗的固相化，使用的固相載體包括磁性微粒、纖維膜、聚苯乙烯管、微孔板等。這幾種固相載體中，磁性材料具有表面積大，捕獲分析對象快，可以有效進(jìn)行分離和洗滌等優(yōu)點(diǎn)，最受到免疫學(xué)家的青睞。因此，隨之而來的免疫磁性分離(IMS)技術(shù)也應(yīng)允而生。
在免疫分析中，所使用的任何一種分離方法和分離裝置都應(yīng)該簡單、快速、耗費(fèi)低，并且盡可能多得適用于較多分析對象。目前，免疫分析中，已公開使用的分離方法和裝置有以下幾種(1)板式分離方法及裝置將抗體或抗原通過物理吸附或共價結(jié)合的方式包被酶標(biāo)板，然后加入抗原或抗體，免疫反應(yīng)后，倒去上清液，洗滌，即可完成分離。這種分離技術(shù)使用于吸附性較強(qiáng)的酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板，但反應(yīng)速度慢，且包被量不易均勻。Staimer，N.等人將抗原通過N-羥基琥珀酰亞氨酯方法共價結(jié)合到96-孔酶標(biāo)板上，使用酶免疫分析方法對人尿液中的苯基-β-D-硫糖醛酸苷進(jìn)行了分析，Darwish，I.A.等人將抗體通過物理吸附包被酶標(biāo)板，使用一步免疫分析法對血清中的Cd2+進(jìn)行了研究。(Norbert Staimer，Shirley J.Gee，Bruce D.Hammock，Development of asensitive enzyme immunoassy for the detection of phenyl-β-D-thioglucuronide in humanurine，F(xiàn)resenius.J.Anal.Chem.，2001，369，273-279；Ibrahim A.Darwish and Diane A.Blake，Development and Validation of OneOStep Immunoassay for Determination ofCadminm in Human Serum，Anal.chem.，2002，74，52-58.)。
(2)管式磁性分離技術(shù)及裝置目前，北京倍愛康生物技術(shù)有限公司已經(jīng)商業(yè)化，公開使用了管式磁性分離器。此管式磁性分離器是在每一個聚苯乙烯圓形管底，放有一個相對應(yīng)的圓形小磁鐵；當(dāng)免疫分析試劑加入管內(nèi)之后，將試管架放在磁性分離器上，磁珠在磁場作用下，沉淀到孔的底部，然后將管和磁性分離器一同倒扣到干凈的濾紙上，并重叩底部，除去上清液。此設(shè)計適合于人工操作分離、洗滌。(北京倍愛康生物技術(shù)有限公司，HCG SEROZYME，CODE10331504)。
最常用的分離裝置有磁性分離裝置和板式包被分離裝置兩種。免疫磁性分離與微孔板相結(jié)合的磁性分離裝置也逐步發(fā)展起來并受越來越多的關(guān)注。這種技術(shù)的關(guān)鍵是磁性分離器的設(shè)計。一般設(shè)計的磁性分離器的磁場或者呈梯狀，或者是均衡的。不同類型的分離器，使用于不同孔數(shù)的酶標(biāo)板，進(jìn)而會影響分析的效率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是在于提供一種免疫分析分離用磁性分離器；該磁性分離器使用聯(lián)體磁鐵作為磁性板，在各個空間都產(chǎn)生相同的磁感應(yīng)強(qiáng)度，適用范圍廣?？蛇m用于6-，12-，24-，32-，40-，48-，96-，192-，384-孔等所有等尺寸的不同孔數(shù)的包括透明的和不透明的平底酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板；適用于各種不同的分析檢測方法；磁性材料可使用永久磁鐵或電磁鐵等所有其磁感應(yīng)強(qiáng)度均大于2000Hz的材料；該磁性分離器制作和使用都很簡單、方便，分離速度快、效率高，在臨床化學(xué)、環(huán)境污染、以及對大規(guī)模的流行病檢測方面將具有廣闊的應(yīng)用前景。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下本發(fā)明提供的免疫分析分離用磁性分離器，包括平行放置、大平面疊放且其間夾裝有磁性板2的上軛鐵板1和下軛鐵板3，磁性板2、上軛鐵板1和下軛鐵板3尺寸一致，所述下軛鐵板3的兩側(cè)面上各固定一條狀板式框架4，所述條狀板式框架4的上端面上帶有向里彎曲的倒鉤，所述兩條狀板式框架4之間的距離為7-10.50cm，上軛鐵板1與所述倒鉤的下端面之間留有1.0-2.0cm間距；所述的磁性板2為由釹鐵硼磁鐵、永久鐵氧體、電磁體、軟磁鐵氧體、鋁鎳鈷或釤鈷磁性材料制作的磁鐵板，或?yàn)橐徽麎K/幾塊磁鐵板拼接而成的磁鐵板。
使用時，當(dāng)所有免疫反應(yīng)進(jìn)行完畢，需進(jìn)行分離時，將酶標(biāo)板從一側(cè)插入到磁性分離器的中間，磁性微粒在磁場作用下，全部吸附到酶標(biāo)板的孔內(nèi)。1分鐘后，將酶標(biāo)板連帶分離器倒扣，將上清液倒出，然后倒扣在干凈的濾紙上，輕輕將殘余液體扣掉。從一側(cè)抽出，即可完成分離。
本發(fā)明與現(xiàn)有的技術(shù)相比具有如下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明提供的適用于孔板式磁性免疫分析分離技術(shù)中的磁性分離器，可以與各種不同孔數(shù)的酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板聯(lián)用。與已知的磁性分離器相比，操作簡單、方便，分離效率高、速度快、使用得范圍更廣。尤其是可以用于384-孔或更多孔板數(shù)的酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板檢測，此磁性分離器可以進(jìn)行大批量的樣品檢測，大大提高了分析效率。在臨床化學(xué)、環(huán)境污染、以及大規(guī)模的流行病檢測方面將具有廣闊的應(yīng)用前景。


圖1是本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖；圖2是本發(fā)明的磁性板的示意圖；圖3是本發(fā)明的框架的示意圖；圖4是本發(fā)明的上、下軛鐵板的結(jié)構(gòu)示意圖；其中上軛鐵板1下軛鐵板2 磁性板3 框架4孔具體實(shí)施方式
以適用96-孔酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板的本發(fā)明的磁性分離器的具體實(shí)施方式
為例本實(shí)施例的磁性分離器的制作根據(jù)軛鐵的導(dǎo)磁機(jī)理，對于磁鐵的拼接具有促進(jìn)作用。我們將兩塊105mm×74mm×8.5mm的釹鐵硼磁鐵板拼接成一塊磁性板2(也可直接使用一塊尺寸為105mm×148mm×8.5mm105mm×148mm×8.5mm的磁性板)，放在一塊105mm×148mm×8.5mm的下軛鐵板3上，磁性板2上面再放一塊上軛鐵板1，然后再將上軛鐵板1、下軛鐵板2和軛鐵板3固定在一起(上、下、左、右須對齊，尺寸一致)；同時在下軛鐵板3的兩長側(cè)面上分別打孔5；兩條鋁合金制作的條狀板式框架4(長度為148mm，高度為28mm)相應(yīng)部位開有相應(yīng)的孔，用以將兩條狀板式框架4分別固定在下軛鐵板3的兩側(cè)邊，即完成本發(fā)明的磁性分離器的制作；所述條狀板式框架4的上端面上設(shè)有向里彎曲的頂部邊緣寬度約為15mm的倒鉤，該倒鉤下端面距上軛鐵板1的上表面之間的距離為1.0-2.0cm，兩條狀板式框架4之間的距離為7-10.50cm。
可根據(jù)適用的平底酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板的型號和尺寸，尤其是寬度和厚度尺寸設(shè)計將兩條狀板式框架4之間的距離設(shè)計為7cm、10.50cm、8cm或9cm等不同尺寸，將上軛鐵板1與所述倒鉤的下端面之間的間距留設(shè)計為1.0cm、2.0cm、1.20cm或1.50cm等尺寸；使用時，將免疫分析試劑和磁性分離劑加入酶標(biāo)板或組織培養(yǎng)板中，反應(yīng)完全后，將酶標(biāo)板從一側(cè)推進(jìn)磁性分離器中，1min之內(nèi)，即可得到分離。然后將酶標(biāo)板連同分離器倒扣，上清液倒出，放在干凈的濾紙上，輕輕將殘余液體扣掉。從另一側(cè)抽出酶標(biāo)板，即可完成分離。洗滌后待下次分離時在重復(fù)使用，方便，便捷，而且適用范圍廣。
權(quán)利要求
1.一種免疫分析分離用磁性分離器，其特征在于，包括平行放置、大平面疊放且其間夾裝有磁性板(2)的上軛鐵板(1)和下軛鐵板(3)，磁性板(2)、上軛鐵板(1)和下軛鐵板(3)尺寸一致，所述下軛鐵板(3)的兩側(cè)面上各固定一條狀板式框架(4)，所述條狀板式框架(4)的上端面上帶有向里彎曲的倒鉤，兩條狀板式框架(4)之間的距離為7-10.50cm，上軛鐵板(1)與所述倒鉤的下端面之間留有1.0-2.0cm間距。
2.權(quán)利要求1所述的免疫分析分離用磁性分離器，其特征在于，所述的磁性板(2)為由釹鐵硼磁鐵、永久鐵氧體、電磁體、軟磁鐵氧體、鋁鎳鈷或釤鈷磁性材料制作的磁鐵板，或?yàn)橐徽麎K/幾塊磁鐵板拼接而成的磁鐵板。
全文摘要
本發(fā)明的磁免疫分析分離用磁性分離裝置，包括平行放置、大平面疊放且其間夾裝有磁性板的上軛鐵板和下軛鐵板，磁性板和上、下軛鐵板尺寸一致，下軛鐵板兩側(cè)面上各固定一條狀板式框架，該框架的上端面上帶有向里彎曲的倒鉤，兩條狀板式框架(4)之間的間距為7－10.50cm，上軛鐵板與倒鉤下端面之間留有1.0－2.0cm間距；條狀板式框架材質(zhì)為非磁性材料；磁性板為由釹鐵硼磁鐵、永久鐵氧體、電磁體、軟磁鐵氧體、鋁鎳鈷或釤鈷磁性材料制作磁鐵板，為一整塊/幾塊磁鐵板拼接而成；與已知的磁性分離器相比，本發(fā)明具有結(jié)構(gòu)簡單、使用方便、分離速度快、效率高，適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號G01N33/543GK1553192SQ03138349
公開日2004年12月8日 申請日期2003年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月27日
發(fā)明者林金明, 趙利霞, 屈鋒 申請人:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心