專利名稱：毛細(xì)管電泳－固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器及制備方法。
背景技術(shù)：
三聯(lián)吡啶釕的電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)(ECL)是電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)中最靈敏的方法之一，用于藥物分子、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)和核酸的檢測(cè)。通常的毛細(xì)管電泳-電化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)模式是將三聯(lián)吡啶釕溶液置于毛細(xì)管電泳的陰極池中，這樣試劑的耗費(fèi)量較大，由于三聯(lián)吡啶釕試劑較為昂貴，因此這種模式并不適宜廣泛的推廣使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的材料；本發(fā)明的另一目的是提供一種毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的制備方法。
本發(fā)明首次采用磺酸聚合物和溶膠-凝膠及聚乙烯醇接枝共聚物共混，將三聯(lián)吡啶釕固定在微電極的表面，制備毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器。三聯(lián)吡啶釕的試劑消耗量非常的少。
本發(fā)明采用聚苯乙烯磺酸與溶膠-凝膠及聚乙烯醇接枝共聚物共混，形成富含磺酸集團(tuán)的高分子共混材料，三聯(lián)吡啶釕吸附在此材料中。采用溶膠-凝膠的目的是使膜材料形成三維結(jié)構(gòu)。采用聚乙烯醇接枝共聚物的目的在于增強(qiáng)膜的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。膜材料經(jīng)旋涂固定在微電極的表面，形成固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器。
聚苯乙烯磺酸、溶膠-凝膠以及聚乙烯醇接枝共聚物的質(zhì)量比在1∶1～100∶1～100，三聯(lián)吡啶釕的濃度在0.2聚苯乙烯磺酸10mM范圍，電極材料可以是金屬電極，如金，鉑；也可以碳基電極，如玻碳電極，石墨電極。
制備過程取1％聚苯乙烯磺酸溶液10μL，加入10～100μL 16.8％的溶膠-凝膠溶液，8～80μL的20％接枝共聚物溶液，以及1～200μL的20mM三聯(lián)吡啶釕超聲共混；取1μL滴加到微電極的表面，3000～8000轉(zhuǎn)/分鐘的速度懸涂30～120秒后，電極放置于冰箱中1～12小時(shí)，制備得到三聯(lián)吡啶釕修飾的毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器，使用時(shí)將該檢測(cè)器放置在毛細(xì)管末端的出口處。
具體實(shí)施例方式
如下實(shí)施例1取1％聚苯乙烯磺酸溶液10μL，加入10μL 16.8％的溶膠-凝膠溶液，8μL的20％接枝共聚物溶液，以及1μL的20mM三聯(lián)吡啶釕超聲共混。取1μL滴加到微電極的表面，3000轉(zhuǎn)/分鐘的速度懸涂30秒后，電極放置于冰箱中1小時(shí)，制備得到三聯(lián)吡啶釕修飾的毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器，使用時(shí)將該檢測(cè)器放置在毛細(xì)管末端的出口處。
三丙胺和脯胺酸的檢測(cè)將電極放入含有0.1M的磷酸鹽溶液中pH＝9.5的毛細(xì)管電泳陰極池中，電極放置在毛細(xì)管的出口處，毛細(xì)管的內(nèi)徑為75μm。對(duì)三丙胺和脯胺酸的檢測(cè)如

圖1所示，毛細(xì)管電泳-固體電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器測(cè)定TPA(1)和脯胺酸，分離電壓15KV；電動(dòng)采樣，15KV3秒；檢測(cè)電位1.1V；電泳緩沖液10mM磷酸鹽。由此可見，該電極對(duì)胺類物質(zhì)的檢測(cè)有很好的靈敏度。
實(shí)施例2取1％聚苯乙烯磺酸溶液10μL，加入50μL 16.8％的溶膠-凝膠溶液，20μL的20％接枝共聚物溶液，以及50μL的20mM三聯(lián)吡啶釕超聲共混。取1μL滴加到微電極的表面，6000轉(zhuǎn)/分鐘的速度懸涂1分鐘后，電極放置于冰箱中6小時(shí)，制備得到三聯(lián)吡啶釕修飾的毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器，使用時(shí)將該檢測(cè)器放置在毛細(xì)管末端的出口處。
三丙胺(TPA)的檢測(cè)將電極放入含有0.1M的磷酸鹽溶液中pH＝7.5的毛細(xì)管電泳陰極池中，電極放置在毛細(xì)管的出口處，毛細(xì)管的內(nèi)徑為75μm。對(duì)三丙胺連續(xù)六次的檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)偏差為9.8％。電極在0.1M的磷酸鹽中浸泡16個(gè)小時(shí)后，檢測(cè)器的靈敏度沒有明顯的下降。由此可見，該檢測(cè)器對(duì)TPA檢測(cè)具有很好的穩(wěn)定性。
實(shí)施例3取1％聚苯乙烯磺酸溶液10μL，加入100μL 16.8％的溶膠-凝膠溶液，80μL的20％接枝共聚物溶液，以及200μL的20mM三聯(lián)吡啶釕超聲共混。取1μL滴加到微電極的表面，8000轉(zhuǎn)/分鐘的速度懸涂2分鐘后，電極放置于冰箱中12小時(shí)，制備得到三聯(lián)吡啶釕修飾的毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器，使用時(shí)將該檢測(cè)器放置在毛細(xì)管末端的出口處。
草酸根離子的測(cè)定將電極放入含有0.1M的硫酸鈉溶液中pH＝7.0的毛細(xì)管電泳陰極池中，電極放置在毛細(xì)管的出口處，毛細(xì)管的內(nèi)徑為50μm。對(duì)草酸根離子連續(xù)六次的檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.5％，檢測(cè)的靈敏度為0.1μmol/L。由此可見，該檢測(cè)器對(duì)草酸根檢測(cè)具有較高的靈敏度。
權(quán)利要求
1.一種毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的材料，由聚苯乙烯磺酸、溶膠-凝膠以及聚乙烯醇接枝共聚物組成，其質(zhì)量比為1∶1～100∶1～100，三聯(lián)吡啶釕的濃度在0.2聚苯乙烯磺酸10mM范圍，電極材料可以為金屬電極金，鉑；也可以是碳基電極玻碳電極，石墨電極。
2.一種毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的制備方法，其特征在于取1％聚苯乙烯磺酸溶液10μL，加入10～100μL 16.8％的溶膠-凝膠溶液，8～80μL的20％接枝共聚物溶液，以及1～200μL的20mM三聯(lián)吡啶釕超聲共混；取1μL滴加到微電極的表面，3000～8000轉(zhuǎn)/分鐘的速度懸涂30～120秒后，電極放置于冰箱中1～12小時(shí)，制得三聯(lián)吡啶釕修飾的毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器。
3.如權(quán)利要求2所述的毛細(xì)管電泳-固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器的制備方法，其特征在于包括使用權(quán)利要求1的材料配比。
全文摘要
本發(fā)明是采用一種磺酸聚合物A與溶膠－凝膠及聚乙烯醇接枝共聚物共混,形成富含磺酸集團(tuán)的高分子共混材料,三聯(lián)吡啶釕吸附在此材料中。膜材料經(jīng)旋涂固定在微電極的表面,制備出毛細(xì)管電泳固態(tài)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器。用于毛細(xì)管電泳的分離檢測(cè)。
文檔編號(hào)G01N27/30GK1379240SQ0211645
公開日2002年11月13日 申請(qǐng)日期2002年4月5日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月5日
發(fā)明者曹衛(wèi)東, 郟建波, 楊秀榮, 汪爾康 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所