專利名稱：膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)性肝炎病毒的鑒別診斷生物芯片。
各類肝炎病毒對人群健康的危害很大，可導(dǎo)致嚴(yán)重的肝硬化、甚至肝癌，臨床正確診斷鑒別尤為重要。目前這些病原體IgG、IgM抗體的檢測通常采用酶聯(lián)免疫吸附法，其需要離心機(jī)、孵育箱、酶標(biāo)儀等醫(yī)療設(shè)備，且操作過程復(fù)雜，每次只能檢測一種蛋白，該法檢測時需攢夠一定數(shù)量的病例才行，因此不能隨時隨地的進(jìn)行，檢測所需時間較長。
本實(shí)用新型提供一種使用方便，操作簡單，能即時、準(zhǔn)確、一次性的對甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)型多種肝炎病毒進(jìn)行鑒別診斷的膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型采用的技術(shù)方案為一種膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特殊之處在于所述芯片由至少一條特異性IgG抗體檢測裝置21、至少一條特異性IgM抗體檢測裝置22和一條HBs抗原檢測裝置23構(gòu)成；檢測裝置21、22、23由塑料板11，設(shè)置于塑料板11上的玻璃纖維加樣區(qū)1，與加樣區(qū)1相鄰的膜觀察區(qū)9和吸水紙10構(gòu)成；(a)所述一條IgG抗體檢測裝置21的加樣區(qū)1上含有硒標(biāo)抗人IgG二抗，觀察區(qū)9的膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgG抗體檢測線2、4、5、6、7，和含HBc抗原的特異性IgG抗體檢測線3，觀察區(qū)9后的膜內(nèi)設(shè)置含有人IgG的對照線8；(b)所述一條IgM抗體檢測裝置22的加樣區(qū)1上含有硒標(biāo)抗人IgM二抗，觀察區(qū)9的膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgM抗體檢測線15、17、18、19、20，和含HBc抗原的特異性IgM抗體檢測線16，觀察區(qū)9后的膜內(nèi)設(shè)置含有人IgM的對照線12；(c)所述一條HBs抗原檢測裝置23的加樣區(qū)1上含有硒標(biāo)抗HBs的抗體，觀察區(qū)9的膜上設(shè)有含抗HBs抗體的HBs抗原檢測線13，觀察區(qū)9后的膜內(nèi)設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測對照線14。
上述IgG抗體檢測裝置可為兩條、三條、四條、五條、六條，檢測裝置觀察區(qū)的膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六種抗原的特異性IgG抗體檢測線可任意組合。
上述IgM抗體檢測裝置可為兩條、三條、四條、五條、六條，檢測裝置觀察區(qū)的膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六種抗原的特異性IgM抗體檢測線可任意組合。
本實(shí)用新型還可采用如下技術(shù)方案一種膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特殊之處在于所述芯片由甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六條特異性IgG抗體檢測裝置，六條特異性IgM抗體檢測裝置和HBs抗原檢測裝置構(gòu)成；上述檢測裝置由塑料板11，設(shè)置于其上的玻璃纖維加樣區(qū)1，與加樣區(qū)1相鄰的膜觀察區(qū)9和吸水紙10構(gòu)成；(a)所述單項(xiàng)IgG抗體檢測裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)9膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測線24，含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對應(yīng)抗體的IgG抗體檢測對照線25；(b)所述單項(xiàng)IgM抗體檢測裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)9膜內(nèi)含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測線26和含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對應(yīng)抗體的IgM抗體檢測對照線27；(c)所述HBs抗原檢測裝置的加樣區(qū)1上含有硒標(biāo)抗HBs抗體，觀察區(qū)9的膜上設(shè)有含抗HBs抗體HBs抗原檢測線13，觀察區(qū)9后的膜內(nèi)設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測對照線14。
上述同一種病毒的兩種IgG、IgM的抗體檢測裝置可放于同一條抗體檢測裝置上，抗體檢測裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)9膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測線24和含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測線26，膜內(nèi)含有相應(yīng)的特異性抗原對應(yīng)抗體的IgG和IgM抗體檢測對照線28。
上述兩個技術(shù)方案的觀察區(qū)9的膜為硝酸纖維素膜，硝酸、醋酸纖維素混合膜或尼龍膜。其檢測裝置的檢測線和對照線也可采用點(diǎn)、“+”、“-”、“S”等形狀作為標(biāo)記。
本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用硒標(biāo)蛋白技術(shù)，所以使用方便，操作簡單，不需要任何設(shè)備，用肉眼能即時、準(zhǔn)確的觀察結(jié)果，可采用全血、血漿、血清等不同的標(biāo)本進(jìn)行診斷，檢測速度快，一次性可完成所有肝炎病毒的鑒別診斷，因而具有很高的使用價值。
以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳細(xì)描述

圖1為本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例的肝炎病毒的特異性IgG抗體檢測裝置剖示圖；圖2為本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例的肝炎病毒的特異性IgM抗體檢測裝置剖示圖；圖3為本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例的HBV肝炎病毒的特異性HBs抗原檢測裝置剖示圖；圖4為本實(shí)用新型的第二種實(shí)施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG抗體檢測裝置剖示圖；圖5為本實(shí)用新型的第二種實(shí)施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgM抗體檢測裝置剖示圖；圖6為本實(shí)用新型的第三種實(shí)施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG、IgM抗體檢測裝置剖示圖；圖7為膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片的整體結(jié)構(gòu)示意圖。
參見附圖，其標(biāo)號說明如下1—加樣區(qū)，2—甲(HAV)IgG抗體檢測線，3—乙(HBV)IgG抗體檢測線，4—丙(HCV)IgG抗體檢測線，5—丁(HDV)IgG抗體檢測線，6—戊(HEV)IgG抗體檢測線，7—庚(HGV)IgG抗體檢測線，8—含有IgG的IgG抗體檢測對照線，9—觀察區(qū)，10—級水紙，11—塑料板，12—含有IgM的IgM抗體檢測對照線，13—含有抗HBs抗體的HBs抗原檢測線，14—含有二抗的HBs抗原檢測對照線，15—甲(HAV)IgM抗體檢測線，16—乙(HBV)IgM抗體檢測線，17—丙(HCV)IgM抗體檢測線，18—丁(HDV)IgM抗體檢測線，19—戊(HEV)IgM抗體檢測線，20—庚(HGV)IgM抗體檢測線，21—IgG抗體檢測裝置，22—IgM抗體檢測裝置，23—HBs抗原檢測裝置，24—含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測線，25—含有甲(HAV)特異性抗原對應(yīng)抗體的IgG抗體檢測對照線，26—含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測線，27—含有甲(HAV)特異性抗原對應(yīng)抗體的IgM抗體檢測對照線，28—含有甲(HAV)特異性抗原對應(yīng)抗體的IgG和IgM抗體檢測對照線，參見圖1、圖2、圖3、圖7，本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例如下，在塑料板11上的左端設(shè)置加樣區(qū)1其右端設(shè)置吸水紙10，中間為帶有膜的觀察區(qū)9，觀察區(qū)9的膜片采用硝酸纖維素膜或硝酸、醋酸纖維素混合膜。在加樣區(qū)1內(nèi)加入標(biāo)本，標(biāo)本可采用全血、血清或分泌物，其標(biāo)本與加樣區(qū)1內(nèi)的硒標(biāo)二抗相混合，并沿著裝置的左端向右端層析至觀察區(qū)9。當(dāng)被檢樣本中含有上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗體)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)六種病毒的特異性IgG或IgM抗體時，會與加樣區(qū)1內(nèi)的硒標(biāo)抗IgG或IgM抗體結(jié)合，結(jié)合的復(fù)合物將沿著該裝置層析至觀察區(qū)9內(nèi)，將分別與觀察區(qū)9內(nèi)的六種IgG與IgM抗體檢測線上包被的相應(yīng)特異性抗原相結(jié)合，在觀察區(qū)內(nèi)形成肉眼可辨的藍(lán)色條帶，過量的復(fù)合物或未結(jié)合的硒標(biāo)物會繼續(xù)層析，與對照線8或12上的IgG或IgM相結(jié)合形成藍(lán)色條帶，可肉眼觀察結(jié)果；若IgG抗體檢測裝置上2、3、4、5、6、7如出現(xiàn)藍(lán)色條帶，則表照上述6種病毒的IgG抗體陽性，否則陰性；IgM抗體檢測裝置15、16、17、18、19、20如出現(xiàn)藍(lán)色條帶，則表明上述6種病原體的IgM抗體陽性，否則陰性；HBs抗原檢測裝置13位置如出現(xiàn)藍(lán)色條帶，則表明HBs抗原檢測陽性，否則陰性。強(qiáng)陽性標(biāo)本在5～10分鐘出現(xiàn)結(jié)果，一般在25～30分鐘即可觀察結(jié)果，對照線也質(zhì)控線，在檢測時，對照線都應(yīng)形成藍(lán)色條帶，否則，此檢測裝置失效。
實(shí)施例1中的肝炎鑒別診斷芯片可分為IgG抗體檢測和IgM抗體檢測兩種檢測芯片，分別使用；其也應(yīng)屬于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
上述IgG抗體檢測裝置和IgM抗體檢測裝置可為兩條、三條、四條、五條、六條，檢測裝置觀察區(qū)的膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六種抗原的特異性抗體檢測線可任意組合。
上述肝炎鑒別診斷芯片也可有六種病原體中的任意兩種、三種、四種或五種組成一個新的IgG或IgM鑒別診斷芯片。檢測其IgG和/或IgM抗體。例如丙(HCV)和丁(HDV)型肝炎的組合。
參見圖4、圖5，為本實(shí)用新型第二種技術(shù)方案的實(shí)施方式該方式將檢測上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗體)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)6種病毒IgG抗體分別檢測，圖4為甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG抗體檢測裝置剖示圖，加樣區(qū)1內(nèi)分別含有硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)9上設(shè)有內(nèi)含抗人IgG二抗的特異性IgG抗體檢測線24和內(nèi)含甲(HAV)的相應(yīng)病原體的特異性抗原的抗體的檢測對照線25，其原理與實(shí)施例1中的IgG抗體檢測原理相同；上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗體)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)6種病毒IgM抗體也可分別檢測，圖5為甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgM抗體檢測裝置剖示圖，加樣區(qū)1內(nèi)分別含有硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)9上設(shè)有內(nèi)含抗人IgM二抗的特異性IgM抗體檢測線26和內(nèi)含甲(HAV)的相應(yīng)病原體的特異性抗原的抗體的檢測對照線27，其原理與實(shí)施例1中的IgM抗體檢測原理相同。
參見圖6，為第二種技術(shù)方案的另一種實(shí)施方式該方式將每一種病原體的IgG與IgM檢測的在同一裝置，圖6為甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG、IgM抗體檢測裝置剖示圖，加樣區(qū)1內(nèi)分別含有硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)9上設(shè)硒標(biāo)抗人IgG二抗的特異性IgG檢測線24和設(shè)有含抗人IgM二抗的特異性IgM檢測線26和含甲(HAV)的相應(yīng)病原體特異性抗原的抗體的IgG和IgM抗體檢測對照線28，檢測原理同實(shí)施例1。
權(quán)利要求1.一種膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述芯片由特異性IgG抗體檢測裝置(21)、特異性IgM抗體檢測裝置(22)和一條HBs抗原檢測裝置(23)構(gòu)成；檢測裝置(21、22、23)由塑料板(11)，設(shè)置于塑料板(11)前部的玻璃纖維加樣區(qū)(1)，中部的與加樣區(qū)相鄰接的膜觀察區(qū)(9)和后部的吸水紙(10)構(gòu)成；(A)所述IgG抗體檢測裝置(21)的加樣區(qū)(1)上含有硒標(biāo)抗人IgG二抗，觀察區(qū)(9)的膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgG抗體檢測線(2、4、5、6、7)，和含HBc抗原的特異性IgG抗體檢測線(3)，觀察區(qū)(9)的膜內(nèi)設(shè)置含有人IgG的對照線(8)；(B)所述IgM抗體檢測裝置(22)的加樣區(qū)(1)上含有硒標(biāo)抗人IgM二抗，觀察區(qū)(9)的膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgM抗體檢測線(15、17、18、19、20)，和含HBc抗原的特異性IgM抗體檢測線(16)，觀察區(qū)(9)后的膜內(nèi)設(shè)置含有人IgM的對照線(12)；(C)所述一條HBs抗原檢測裝置(23)的加樣區(qū)1上含有硒標(biāo)抗HBs的抗體，觀察區(qū)(9)的膜上設(shè)有含抗HBs抗體的HBs抗原檢測線(13)，觀察區(qū)(9)后的膜內(nèi)設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測對照線(14)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述IgG抗體檢測裝置為兩條、三條、四條、五條；IgG抗體檢測裝置的觀察區(qū)(8)的膜內(nèi)的含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的五種抗原的特異性IgG抗體檢測線(2、3、4、5、6)可任意組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述IgM抗體檢測裝置為兩條、三條、四條、五條；IgM抗體檢測裝置的觀察區(qū)(8)的膜內(nèi)的含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的五種抗原的特異性IgM抗體檢測線(12、13、14、15、16)可任意組合。
4.一種膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述芯片由甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六條特異性IgG抗體檢測裝置，六條特異性IgM抗體檢測裝置和HBs抗原檢測裝置構(gòu)成；上述檢測裝置由塑料板(11)，設(shè)置于其上的玻璃纖維加樣區(qū)(1)，與加樣區(qū)(1)相鄰的膜觀察區(qū)(9)和吸水紙(10)構(gòu)成。(A)所述單項(xiàng)IgG抗體檢測裝置的加樣區(qū)(1)玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)(9)膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測線(24)，和含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對應(yīng)抗體的IgG抗體檢測對照線(25)；(B)所述單項(xiàng)IgM抗體檢測裝置的加樣區(qū)(1)玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)(9)膜內(nèi)含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測線(26)，和含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對應(yīng)抗體的IgM抗體檢測對照線(27)；(C)所述HBs抗原檢測裝置的加樣區(qū)(1)上含有硒標(biāo)抗HBs抗體，觀察區(qū)(9)的膜上設(shè)有含抗HBs抗原的抗體HBs抗原檢測線(13)，觀察區(qū)(9)后設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測對照線(14)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述同一種病毒的兩種IgG、IgM的抗體檢測裝置可放于同一條抗體檢測裝置上，抗體檢測裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的硒標(biāo)抗原，觀察區(qū)(9)后的膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測線(24)和含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測線(26)，對照線內(nèi)含有相應(yīng)的特異性抗原對應(yīng)抗體的IgG和IgM抗體檢測對照線(28)。
6.根據(jù)上述權(quán)利要求任意一項(xiàng)所述的膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于觀察區(qū)(9)的膜為硝酸纖維素膜，硝酸、醋酸纖維素混合膜或尼龍膜。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述檢測裝置的檢測線和對照線也可采用點(diǎn)、“+”、“-”、“S”等形狀作為標(biāo)記。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒的鑒別診斷生物芯片。膠體硒標(biāo)記的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片由特異性IgG抗體檢測裝置、特異性IgM抗體檢測裝置和HBs抗原檢測裝置構(gòu)成;檢測裝置由塑料板,設(shè)置于塑料板上的玻璃纖維加樣區(qū),膜觀察區(qū)和吸水紙構(gòu)成;在玻璃纖維加樣區(qū)和膜觀察區(qū)分別設(shè)置抗原或抗體,利用硒標(biāo)技術(shù)來鑒定肝炎病毒類型。其使用方便,可同時檢測多種病原體,用肉眼能即時準(zhǔn)確觀察結(jié)果。
文檔編號G01N33/576GK2499832SQ01265759
公開日2002年7月10日 申請日期2001年10月22日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月22日
發(fā)明者王冰 申請人:王冰