專利名稱:一種分離純化制備神經(jīng)節(jié)苷脂工藝的制作方法
本發(fā)明屬于制備具有生物活性物質(zhì)的工藝。
神經(jīng)節(jié)苷脂有重要生物功能和活性,它主要存在于動(dòng)物腦細(xì)胞膜,現(xiàn)有一般制備方法〔1-3〕,是將腦組織勻漿后的提取液濃縮、透析再經(jīng)過無機(jī)吸附柱或離子交換樹脂柱分離純化,用有機(jī)溶劑洗脫,再濃縮、冷凍干燥而得。該工藝周期長,有機(jī)溶劑耗量大,神經(jīng)節(jié)苷脂部分有效組分損失,產(chǎn)品實(shí)收率較低。
本發(fā)明的特點(diǎn)主要是利用中等極性的大孔徑吸附樹脂層析柱,當(dāng)含有機(jī)溶劑(氯仿和甲醇)的腦組織勻漿清液(有機(jī)溶劑與水之比為3∶2~4∶3,PH為2-6)通過層析柱時(shí),神經(jīng)節(jié)苷脂的有效組分全部吸附于柱上,雜質(zhì)(有機(jī)的和無機(jī)的)可洗去,再改變有機(jī)溶劑與水的配比即8∶1-9∶1,進(jìn)行洗脫,可將神經(jīng)節(jié)苷脂洗脫下來。從而省去了提取濃縮及透析等過程。將洗脫液濃縮、冷凍干燥即可得純品。這大大簡化了現(xiàn)有生產(chǎn)工藝過程。同時(shí)可避免有效組分在透析和離子交換柱中的丟失和破壞。本工藝處理過程周期短,條件溫和,可保持有效組分的生物活性,全過程所需時(shí)間只相當(dāng)現(xiàn)有生產(chǎn)工藝的五分之一,產(chǎn)品純度高,組分全。
實(shí)例將鮮腦組織5Kg勻漿,同時(shí)加入有機(jī)溶劑和水(3∶2)。棄渣,得提取清液約40立升。將清液通過大孔樹脂柱,流出液可回收有機(jī)溶劑,再用有機(jī)溶劑(與水之比8∶1)洗脫。
a.收集全部洗脫液,經(jīng)濃縮、干燥,得粗制品15g。粗制品中唾液酸含量20%,粗制品實(shí)收率為~3g/Kg鮮組織。
b.如將收集的洗脫液,再上一次樹脂柱,經(jīng)洗脫、干燥,得精制品8g,實(shí)收率為~1.6g/Kg鮮組織。精制品含唾液酸為30%。
參考文獻(xiàn)1.Biochem.Biophys.Acta.61797-109 (1980)2.Biochem.Biophys.Acta.60350 (1962)
3.Biochem.J. 88373(1963)
權(quán)利要求
1.一種分離純化制備神經(jīng)節(jié)苷脂工藝,其特征在于將細(xì)胞勻漿提取清液直接通過大孔吸附樹脂層析柱,再用有機(jī)溶劑(氯仿和甲醇)與水的混合液洗脫,得純神經(jīng)節(jié)苷脂。
2.按照權(quán)利要求
1所說的分離純化制備神經(jīng)節(jié)苷脂工藝,其特征在于細(xì)胞勻漿提取清液中含有機(jī)溶劑(氯仿和甲醇)和水,其有機(jī)溶劑與水之比為3∶2~4∶3,PH為2-6。
3.按照權(quán)利要求
1所說的分離純化制備神經(jīng)節(jié)苷脂工藝,其特征在于所用大孔吸附樹脂為中等極性的吸附樹脂。
4.按照權(quán)利要求
1所說的分離純化制備神經(jīng)節(jié)苷脂工藝,其特征在于洗脫用的有機(jī)溶劑與水之比為8∶1~9∶1。
專利摘要
一般分離純化制備神經(jīng)節(jié)苷脂工藝是將細(xì)胞勻漿清液濃縮后透析,再用無機(jī)吸附或離子交換樹脂柱分離純化。本工藝使用新型大孔吸附樹脂直接及附勻漿清液中的全部神經(jīng)節(jié)苷脂成分,可在層析柱上完成濃縮、脫鹽、純化全部過程。大大節(jié)省時(shí)間和有機(jī)溶劑用量,并簡化中間處理程序。產(chǎn)品純度高。實(shí)收率高。
文檔編號(hào)B01D15/08GK85102590SQ85102590
公開日1985年11月10日 申請(qǐng)日期1985年4月1日
發(fā)明者商宗一, 張金紅 申請(qǐng)人:南開大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan