專利名稱：一種萊克多巴胺免疫親合柱及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于飼料中違禁藥物和畜產(chǎn)品中獸藥殘留檢測(cè)分析技術(shù)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種β2-興奮劑—萊克多巴胺的免疫親合層析柱及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
萊克多巴胺(Ractopamine)屬于β2-興奮劑，是一種苯乙醇胺類藥物，其作為“瘦肉精”的替代品目前被非法用于畜牧生產(chǎn)中。
當(dāng)萊克多巴胺高殘留于內(nèi)臟組織時(shí)，出現(xiàn)中毒反應(yīng)，癥狀表現(xiàn)為骨骼肌收縮增加，破壞快縮肌纖維與慢縮肌纖維之間的融合，引發(fā)肌肉震顫，四肢和肌肉尤為明顯，其他中毒癥狀包括心動(dòng)過速、心律失常、腹痛、肌肉疼痛、惡心和暈眩等，嚴(yán)重危害人體健康。因此我國(guó)已經(jīng)禁止使用，我國(guó)農(nóng)業(yè)部第176號(hào)公告規(guī)定萊克多巴胺為禁止在飼料和動(dòng)物飲用水中使用的藥物。但是由于其經(jīng)濟(jì)效益明顯，所以在畜牧漁業(yè)生產(chǎn)中仍有非法使用。鑒于此，對(duì)動(dòng)物性食品中萊克多巴胺殘留進(jìn)行嚴(yán)格檢測(cè)是非常必要的但是，目前所用的確證方法對(duì)樣品要求高，前處理復(fù)雜，限制了監(jiān)測(cè)的效率。實(shí)際工作中，由于生物樣本的成分復(fù)雜，而且大多數(shù)取樣量很少，這對(duì)分析方法的特異性和靈敏度提出了很高的要求。因此，有必要建立一種操作快捷，且具有很高的特異性和靈敏度的方法。
免疫親和層析技術(shù)是一種即免疫反應(yīng)和層析技術(shù)相結(jié)合的分析方法，在提純物質(zhì)上是一項(xiàng)效率高、提純物質(zhì)純度高、快速的技術(shù)，可以使免疫檢測(cè)技術(shù)(如ELISA等)和層析技術(shù)在特異性、分離能力、速度和靈敏度方面得到互補(bǔ)，避免了免疫分析法直接測(cè)定樣品的不足免疫親和柱是上個(gè)世紀(jì)90年代在分析領(lǐng)域中得到應(yīng)用的技術(shù)，但用免疫親和柱提取樣品中的萊克多巴胺未見報(bào)道。因此，本發(fā)明人通過大量試驗(yàn)，研制成功了一種具有高特異性和靈敏度且操作快捷的萊克多巴胺免疫親合柱。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種快速提取β2-興奮劑-萊克多巴胺的免疫親合柱及其制備方法和用途。
本發(fā)明的原理是根據(jù)抗原抗體的特異性反應(yīng)和可解離的特性，用β2-興奮劑-萊克多巴胺抗體提取飼料及畜產(chǎn)品中的β2-興奮劑萊克多巴胺殘留。
一方面，本發(fā)明提供了一種制備萊克多巴胺免疫親合柱的方法，該方法包括下列步驟該方法包括下列步驟
a)將萊克多巴胺特異性抗體與溴化氰活化的Sepherose4B膠混合，用轉(zhuǎn)鼓攪拌，偶聯(lián)過夜；燒結(jié)玻璃濾器抽濾偶聯(lián)膠，PBS洗脫未結(jié)合抗體，每次5毫升，洗4次；用1M乙醇胺封閉未結(jié)合位點(diǎn)，加過量乙醇胺孵育2.5小時(shí)，抽濾乙醇胺，用偶聯(lián)緩沖液抽洗，然后再用HAC，Tris-Hcl緩沖液交替洗滌共4次，每次5ml；b)將偶聯(lián)后的膠裝入親和層析塑料柱中，裝注1ml/柱，稍用力壓緊，即得所述的萊克多巴胺免疫親合柱。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述的萊克多巴胺免疫親合柱的制備方法具體操作為取Sepherose4B(100-120目)濕重4g(6ml)，用0.1M pH9.5 Na2CO3溶液浸泡4小時(shí)。通風(fēng)廚中稱取溴化氰0.8g溶于1.2ml Na2CO3(2g溶液3ml緩沖液)，電磁攪拌10分鐘。冰浴電磁攪拌下，將溴化氰溶液加入Sepherose4B中，2分鐘內(nèi)完成，滴加2N NaOH，使pH值保持在11，冰浴反應(yīng)10分鐘。
將反應(yīng)后的Sepherose4B倒入布氏漏斗中，用預(yù)冷的Na2CO3溶液4-10℃洗2-3分鐘內(nèi)完成，抽洗25倍體積的液體準(zhǔn)備交聯(lián)蛋白。
4℃下，將實(shí)施例1制備的抗體(多克隆抗體或單克隆抗體)溶液與溴化氰活化的Sepherose4B膠混合，用轉(zhuǎn)鼓攪拌，偶聯(lián)反應(yīng)過夜。
燒結(jié)玻璃濾器抽濾偶聯(lián)膠，PBS洗脫未結(jié)合抗體，每次5毫升，洗4次。分別測(cè)定抗體含量。
用1M乙醇胺(ethanolamine)封閉未結(jié)合位點(diǎn)，加過量乙醇胺孵育2.5小時(shí)。抽濾乙醇胺，用偶聯(lián)緩沖液抽洗。然后再用交替的HAC，Tris-Hcl緩沖液洗4次，每次5ml。
最后，將偶聯(lián)后的膠裝入親和層析塑料柱中，裝注1ml/柱，稍用力壓緊，即得到本發(fā)明所述的萊克多巴胺免疫親合柱。
另一方面，本發(fā)明提供了一種萊克多巴胺免疫親合柱，該免疫親合柱包括偶聯(lián)有萊克多巴胺特異性抗體的Sepharose4B與裝載該親和材料的塑料柱。
其中所述的萊克多巴胺特異性抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。本發(fā)明所述的萊克多巴胺特異性抗體通過下述方法制備1)按小分子半抗原的免疫方法制備萊克多巴胺與載體蛋白偶聯(lián)物；以及，2)用該偶聯(lián)物作為免疫原免疫動(dòng)物(例如，兔)，分離血清，純化得到多克隆抗體；或者3)免疫小鼠，通過雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體。
其中所述的載體蛋白包括但不限于，例如牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白、卵清蛋白和鑰孔銅蘭蛋白(keyhole limpet hemocyanin，KLH)。所述的萊克多巴胺與載體蛋白的偶聯(lián)物采用重氮化法或多元酸酐法與混合酸酐法聯(lián)合方法偶聯(lián)。
本發(fā)明所述免疫親和柱的保存條件為0.01％硫柳汞鈉的磷酸鹽緩沖液(PBS，0.01mol/L，pH7.4)，4℃保存。
另外，為方便現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用，本發(fā)明所述免疫親合柱還可以進(jìn)一步包括上樣緩沖液、淋洗液及洗脫液。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述的上樣緩沖液為PBS(0.02MPB-0.05MNaCl，PH7.2)，所述的淋洗液為PBST(0.02MPB-0.05MNaCl-0.2％Tween20，PH7.2)；所述的親合柱洗脫液為甲醇/1M乙酸(V/V為97/3)。
另一方面，本發(fā)明提供了一種萊克多巴胺免疫親合柱的使用方法，該方法包括a)取出4℃保存的免疫親和柱及上樣緩沖液、淋洗液及洗脫液，回至室溫，用上樣緩沖液充分淋洗親和柱，除去儲(chǔ)存Buffer中含的蛋白和防腐劑；b)將處理好的待檢樣品用上樣緩沖液稀釋至所需體積，上樣，上樣液滴干后，淋洗液淋洗柱體，棄去，吸耳球吹干柱內(nèi)溶液；c)用洗脫液洗脫特異性結(jié)合的萊克多巴胺，收集洗脫液，保存待檢。
本發(fā)明使用飼料、豬肉及生豬尿液進(jìn)行了回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明萊克多巴胺免疫親合柱的回收率在80％-110％之間，回收率達(dá)到了分析方法的回收率要求。
因此，另一方面，本發(fā)明提供了所述萊克多巴胺免疫親合柱在提取動(dòng)物源性產(chǎn)品和動(dòng)物代謝物中萊克多巴胺殘留的用途。
一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述的動(dòng)物源性產(chǎn)品為豬肉。
另一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述的動(dòng)物代謝物為豬尿。
提供下述實(shí)施例是為了更好地進(jìn)一步理解本發(fā)明，而決不對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容和保護(hù)范圍構(gòu)成任何限制。
實(shí)施例實(shí)施例1抗萊克多巴胺抗體的制備1.1抗萊克多巴胺多克隆抗體的制備參考現(xiàn)有技術(shù)中偶聯(lián)物合成方法(Shelver W L，et al.，Journal of Immunoassay，2000，21(1)1-23；Hong X Z，et al，19933-4，11-14；Brunswick D J，et al.，Life Sciences，1978，22137-146)，合成萊克多巴胺-載體蛋白偶聯(lián)物。具體操作如下，稱取鹽酸萊克多巴胺68mg(約0.2mmol)，加入到4ml含22.8mg(約0.2mmol)戊二酸酐的吡啶溶液中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)22小時(shí)。反應(yīng)完成后，氮?dú)獯蹈蛇拎?。?ml溶劑(DMF和1，4-二惡烷1∶1混合)溶解Rac-戊二酸酐半醛，加入52.4μl(約0.2mmol)三丁胺，冰中攪拌10min，加入氯甲酸異丁酯28.8μl(約0.2mmol)，轉(zhuǎn)入室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1小時(shí)。
活化的鹽酸萊克多巴胺溶液逐滴加入到10ml、0.1M pH8.5冰冷載體蛋白硼酸鈉溶液中，1小時(shí)內(nèi)加完，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。載體用量BSA50mg，KLH100mg。偶聯(lián)物過SephadexG-25M層析柱提純。用紫外吸收法測(cè)定載體濃度作為偶聯(lián)物濃度。提純的偶聯(lián)物加等量甘油-20℃保存。
選擇健康、無病、雄性、體重1.5kg純種新西蘭白兔5只。首免用注射器對(duì)抽法將弗氏完全佐劑與免疫原按1∶1混合成油包水的乳濁液，每只兔0.25mg免疫原，背部皮下多點(diǎn)注射，注射劑量多點(diǎn)平均分配。每隔兩周加強(qiáng)免疫一次，用弗氏不完全佐劑，劑量、方法同首免。從第三次免疫開始，免疫后10天，耳緣靜脈取血1ml，室溫凝固2h后4℃過夜，8000r/min分離血清，用以檢測(cè)抗體效價(jià)。效價(jià)不再升高時(shí)，不加佐劑末次免疫(第八次)后7天，頸動(dòng)脈放血，分離出抗全血清，用40％的飽和硫酸銨溶液沉淀，得粗多克隆抗體，然后用DE-52離子交換層析分離除去其他血清蛋白，得純多克隆抗體。
通過間接ELISA和間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定，結(jié)果表明本發(fā)明制備的多克隆抗體具有很高的效價(jià)和良好的特異性。
1.2抗萊克多巴胺單克隆抗體的制備1.2.1萊克多巴胺的重氮化在一試管中，取鹽酸克侖特羅溶于去離子水中，以1M鹽酸將pH調(diào)至1.5，在黑暗4℃條件下緩慢滴加亞硝酸鈉的去離子水并時(shí)時(shí)攪拌。反應(yīng)混合物放置30分鐘。
1.2.2重氮化的克侖特羅與HAS的偶聯(lián)將上述溶液中緩緩加入到BSA的0.1mol/L PB(pH7.5)中，反應(yīng)過程中用1M的氫氧化鈉溶液使pH保持7.5，反應(yīng)后4℃放置過夜。
SephadexG-25M凝膠進(jìn)一步層析柱去除小分子1.2.3免疫動(dòng)物及細(xì)胞融合 對(duì)8周齡雌性Balb/c小鼠(體重18～22g)，首次免疫用100μgCL-BSA與等量福氏完全佐劑混勻，腹腔注射。3周后第一批用10μgCL-BSA脾內(nèi)注射，3天后取脾融合。第二批再用100μgCL-BSA與等量福氏不完全佐劑混勻后，腹腔注射追加免疫，3周后用10μgCL-BSA脾內(nèi)注射，3天后按常規(guī)方法取脾融合。當(dāng)鏡檢雜交瘤克隆生長(zhǎng)達(dá)1/3～1/2視野時(shí)，取上清液進(jìn)行篩選。
1.2.4雜交瘤篩選及抗體檢測(cè) 以CL-BSA為包被抗原，用間接非競(jìng)爭(zhēng)性ELISA法篩選分泌抗CL抗體的細(xì)胞孔，用間接競(jìng)爭(zhēng)抑制性ELISA法確證。以免疫小鼠的血清為陽(yáng)性對(duì)照，以Sp2/0細(xì)胞培養(yǎng)的上清液為陰性對(duì)照，陽(yáng)性細(xì)胞孔的判定標(biāo)準(zhǔn)為(A試驗(yàn)-A空白)/(A對(duì)照-A空白)≥2.1。
1.2.5雜交瘤細(xì)胞的克隆化 采用培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)準(zhǔn)確計(jì)數(shù)稀釋法，將陽(yáng)性克隆細(xì)胞吹勻，取一微滴至培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，倒置顯微鏡下準(zhǔn)確計(jì)數(shù)細(xì)胞個(gè)數(shù)，稀釋為70個(gè)/ml，再取1ml稀釋20倍，接種入96孔培養(yǎng)板中進(jìn)行亞克隆。直至所有細(xì)胞孔的培養(yǎng)上清均呈陽(yáng)性為止。
1.2.6單克隆抗體的生產(chǎn) 采用動(dòng)物體內(nèi)誘生單克隆抗體的方法。吹打培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，1000r/min離心10min，棄上清，用生理鹽水將雜交瘤細(xì)胞懸浮混勻，并將細(xì)胞數(shù)調(diào)至2×106/ml，每只Balb/c小鼠腹腔注射0.5ml雜交瘤細(xì)胞，并同時(shí)于對(duì)側(cè)腹腔注射0.5ml降植烷和不完全福氏佐劑混合物(1∶1混合)，10～14天后收集腹水。
1.2.7單克隆抗體的純化 采用硫酸銨沉淀法對(duì)腹水進(jìn)行純化或用離子交換法提純。
實(shí)施例2萊克多巴胺免疫親合柱制備本實(shí)施例是萊克多巴胺免疫親合柱的制備取Sepherose4B(100-120目)濕重4g(6ml)，用0.1M pH9.5 Na2CO3溶液浸泡4小時(shí)。通風(fēng)廚中稱取溴化氰0.8g溶于1.2ml Na2CO3(2g溶液3ml緩沖液)，電磁攪拌10分鐘。冰浴電磁攪拌下，將溴化氰溶液加入Sepherose4B中，2分鐘內(nèi)完成，滴加2N NaOH，使pH值保持在11，冰浴反應(yīng)10分鐘。
將反應(yīng)后的Sepherose4B倒入布氏漏斗中，用預(yù)冷的Na2CO3溶液4-10℃洗2-3分鐘內(nèi)完成，抽洗25倍體積的液體準(zhǔn)備交聯(lián)蛋白。
4℃下，將實(shí)施例1制備的抗體(多克隆抗體或單克隆抗體)溶液與溴化氰活化的Sepherose4B膠混合，用轉(zhuǎn)鼓攪拌，偶聯(lián)反應(yīng)過夜。
燒結(jié)玻璃濾器抽濾偶聯(lián)膠，PBS洗脫未結(jié)合抗體，每次5毫升，洗4次。分別測(cè)定抗體含量。
用1M乙醇胺(ethanolamine)封閉未結(jié)合位點(diǎn)，加過量乙醇胺孵育2.5小時(shí)。抽濾乙醇胺，用偶聯(lián)緩沖液抽洗。然后再用交替的HAC，Tris-Hcl緩沖液洗4次，每次5ml。
最后，將偶聯(lián)后的膠裝入親和層析塑料柱中，裝柱，1ml/柱，稍用力壓緊，即得所述的萊克多巴胺免疫親合柱。
保存條件0.01％硫柳汞鈉的磷酸鹽緩沖液(PBS，0.01mol/L，pH7.4)，4℃保存。
實(shí)施例3用實(shí)施例2所述方法制備的萊克多巴胺免疫親合柱提取飼料中萊克多巴胺免疫殘留。
取空白(事先經(jīng)檢測(cè)確定為萊克多巴胺陰性)飼料6份，每份5g；取3份，每份加入萊克多巴胺，使其添加濃度為20mg/kg，另外3份作為空白對(duì)照。
將上述飼料樣本用80％甲醇抽提，取一定量的抽提液氮?dú)獯蹈珊笥蒙蠘泳彌_液溶解，準(zhǔn)備上親合柱。
將從4℃冰箱中取出的免疫親和柱及所有試劑室溫放置1小時(shí)，用上樣緩沖液充分淋洗親和柱5ml×6次，除去儲(chǔ)存Buffer中含的蛋白和防腐劑。
將待檢飼料的空白和添加樣品各5ml，循環(huán)上樣5次，(接取上樣流出液再次上此親和柱)。上樣液滴干后，用淋洗液淋洗5次，每次1ml，吸耳球吹干柱內(nèi)溶液。
先加1ml洗脫液浸泡親合柱10分鐘，然后用吸耳球吹干柱內(nèi)溶液；再加1ml洗脫液浸泡3分鐘，最后用2ml洗脫液分4次洗脫，即每次0.5ml。整個(gè)洗脫過程共用洗脫液4ml。
GC/MS(NY/XQ421-2003)標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)萊克多巴胺洗脫液含量。
測(cè)定飼料添加樣品的萊克多巴胺含量為90-110ng之間，因?yàn)榇擞H合柱的柱容量為110ng，結(jié)果表明該親合柱滿足提取要求。
實(shí)施例4取陰性(事先經(jīng)檢測(cè)確定為萊克多巴胺陰性)豬肉12份，每5份5g；先將豬肉勻漿后，取9份，分3組，每組添加萊克多巴胺濃度分別為50ug/kg、80ug/kg、100ug/kg作為陽(yáng)性樣品，另外3份作為陰性對(duì)照。
將上述豬肉樣本用10ml80％甲醇溶解，離心取上清，氮?dú)獯蹈珊笥蒙蠘泳彌_液溶解，準(zhǔn)備上親合柱。
將從4℃冰箱中取出的免疫親和柱及所有試劑室溫放置1小時(shí)，用上樣緩沖液充分淋洗親和柱5ml×6次，除去儲(chǔ)存Buffer中含的蛋白和防腐劑。
將待檢陰性豬肉提取液和添加樣品提取液各5ml，循環(huán)上樣5次，(接取上樣流出液再次上此親和柱)。上樣液滴干后，用淋洗液淋洗5次，每次1ml，吸耳球吹干柱內(nèi)溶液。
先加1ml洗脫液浸泡親合柱10分鐘，然后用吸耳球吹干柱內(nèi)溶液；再加1ml洗脫液浸泡3分鐘，最后用2ml洗脫液分4次洗脫，即每次0.5ml。整個(gè)洗脫過程共用洗脫液4ml。
GC/MS(NY/XQ421-2003)標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)萊克多巴胺洗脫液含量。
測(cè)定豬肉添加樣品的平均回收率為90-110％之間，表明該方法滿足分析方法要求。
實(shí)施例5用實(shí)施例2所述方法制備的萊克多巴胺免疫親合柱提取生豬尿樣中萊克多巴胺免疫殘留。
將已知空白(事先經(jīng)檢測(cè)確定為萊克多巴胺陰性)尿樣12份，每5份10ml，取其中9份，分3組，每組添加萊克多巴胺濃度分別為1ug/kg、5ug/kg、10ug/kg作為陽(yáng)性樣品，另外3份作為陰性對(duì)照。將上述樣品4000rpm離心20分鐘，每個(gè)樣品取3ml上清，用1M NaOH調(diào)pH致7.1～7.3備用。用上樣緩沖液將上述處理后的尿樣稀釋10倍，從中各取5ml，準(zhǔn)備過柱。
將從4℃冰箱中取出的免疫親和柱及所有試劑室溫放置1小時(shí)，用上樣緩沖液充分淋洗親和柱5ml×6次，除去儲(chǔ)存Buffer中含的蛋白和防腐劑。
將處理好的尿樣各5ml，循環(huán)上樣5次，(接取上樣流出液再次上此親和柱)。上樣液滴干后，淋洗液洗5次，每次1ml，吸耳球吹干柱內(nèi)溶液。
先加1ml洗脫液浸泡親合柱10分鐘，然后用吸耳球吹干柱內(nèi)溶液；再加1ml洗脫液浸泡3分鐘，最后用2ml洗脫液分4次洗脫，即每次0.5ml。整個(gè)洗脫過程共用洗脫液4ml。
GC/MS(NY/XQ421-2003)標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)萊克多巴胺洗脫液含量。
測(cè)定陽(yáng)性添加尿樣的平均回收率為萊克多巴胺80-110％之間，表明該方法滿足分析方法要求。
權(quán)利要求
1.一種制備萊克多巴胺免疫親合柱的方法，該方法包括下列步驟a)將萊克多巴胺特異性抗體與溴化氰活化的Sepherose4B膠混合，用轉(zhuǎn)鼓攪拌，偶聯(lián)過夜；燒結(jié)玻璃濾器抽濾偶聯(lián)膠，PBS洗脫未結(jié)合抗體，每次5毫升，洗4次；用1M乙醇胺封閉未結(jié)合位點(diǎn)，加過量乙醇胺孵育2.5小時(shí)，抽濾乙醇胺，用偶聯(lián)緩沖液抽洗，然后再用HAC，Tris-Hcl緩沖液交替洗滌共4次，每次5ml；b)將偶聯(lián)后的膠裝入親和層析塑料柱中，裝注1ml/柱，稍用力壓緊，即得所述的萊克多巴胺免疫親合柱。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法制備的萊克多巴胺免疫親合柱，該免疫親合柱包括偶聯(lián)有萊克多巴胺特異性抗體的Sepharose4B與裝載該親和材料的塑料柱。
3.權(quán)利要求2所述的萊克多巴胺免疫親合柱，其中所述的萊克多巴胺特異性抗體為多克隆抗體或單克隆抗體。
4.權(quán)利要求2或3所述的萊克多巴胺免疫親合柱，其進(jìn)一步還包括上樣緩沖液、淋洗液及洗脫液。
5.權(quán)利要求4所述的萊克多巴胺免疫親合柱，其中所述的上樣緩沖液為PBS，所述淋洗液為PBST，所述的洗脫液為體積比為97∶3的甲醇/1M乙酸混合物。
6.權(quán)利要求2所述的萊克多巴胺免疫親合柱的使用方法，該方法包括a)取出4℃保存的免疫親和柱及上樣緩沖液、淋洗液及洗脫液，回至室溫，用上樣緩沖液充分淋洗親和柱，除去儲(chǔ)存Buffer中含的蛋白和防腐劑；b)將處理好的待檢樣品用上樣緩沖液稀釋至所需體積，上樣，上樣液滴干后，淋洗液淋洗柱體，棄去，吸耳球吹干柱內(nèi)溶液；c)用洗脫液洗脫特異性結(jié)合的萊克多巴胺，收集洗脫液，保存待檢。
7.權(quán)利要求2所述的萊克多巴胺免疫親合柱在提取飼料以及動(dòng)物源性產(chǎn)品和動(dòng)物代謝物中萊克多巴胺殘留的用途。
8.權(quán)利要求7所述的用途，其中所述的動(dòng)物代謝物為尿液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提取β2－興奮劑(萊克多巴胺)免疫親合柱。本發(fā)明所提供的免疫親合柱用來提取飼料和畜產(chǎn)品中的違禁藥物β2－興奮劑(萊克多巴胺)，包括β2－興奮劑(萊克多巴胺)特異性抗體、偶聯(lián)有β2－興奮劑(萊克多巴胺)特異性抗體Sepharose4B、裝載親和材料的塑料柱、上樣緩沖液、淋洗液及洗脫液。本發(fā)明的β2－興奮劑(萊克多巴胺)免疫親合柱使用方便，具有高特異性、可快速提取飼料及畜產(chǎn)品中殘留的β2－興奮劑(萊克多巴胺)。
文檔編號(hào)B01D15/00GK1916591SQ200610103898
公開日2007年2月21日 申請(qǐng)日期2006年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月8日
發(fā)明者楊曙明, 于洪俠 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所