專利名稱：診斷裝置的制作方法
相關申請的交叉引用本申請要求申請日為2002年10月11日的美國臨時專利申請60/417,794的權益，其全部內容在此被引為參考。
背景技術：
本發(fā)明涉及用于液體樣品分析化驗的工作臺，裝置和方法。尤其是涉及測定小體積全血中一種或多種分析物的存在，盡管其并不限制于此。
目前已經(jīng)開發(fā)了很多免疫測定程序，其利用發(fā)生在干燥多孔載體例如硝化纖維膜上的反應，將被分析的樣品通過毛細管作用流過該膜，反應產(chǎn)物可通過視覺或儀器例如反射計或熒光計檢出。盡管不那么受限制，這些程序經(jīng)常包括抗體/抗原反應，其中反應對中的一方用可檢出的標簽來標記。典型地，該標簽為酶標簽或者粒子引導標簽，比如溶膠標簽，如金。本領域已發(fā)現(xiàn)了許多有用的標簽以及它們的操作方法。
具有這種特性的典型免疫色譜分析裝置在一些美國和外國專利中作出了描述，其中包括美國專利4,703,017；4,774,192；4,839,297；4,861,711；4,960,691；5,075,078；5,110,724；5,120,643；5,135,716；5,591,645；5,622,871；5,654,162；5,656,503；5,714,389；5,989,921；6,020,147；6,156,271；6,171,870；6,187,598；6,214,629；6,228,660；6,319,676；6,352,862；6,410,341；6,485,982；以及6,534,320。
這些專利廣泛描述的裝置由兩部分組成干燥多孔載體，通過該載體，液體通過毛細管作用運動并且發(fā)生分析物的決定性反應；形成有樣品施加裝置的外罩，其支撐該干燥多孔載體并可包括一窗口以方便對結果的觀察。樣品的體積一般在其施加到干燥多孔載體前已被稱量過。
這些具有代表性的裝置在醫(yī)療和獸醫(yī)領域已提供了較大的診斷進步。但是，它們中的一些還不夠完善，因為它們的制造非常昂貴，不易使用或者不能以所需的速度工作。它們中還沒有一個被證明能在不添加額外溶液的小體積樣品上完成免疫測定，這些樣品典型地可以從手指刺孔中得到。本發(fā)明的裝置緩解了這些問題，因為它們容易制造，即使在初學者或非熟練人員手中，通過使用像一滴那么少的樣品也能快速并且有效地提供所需的信息。本發(fā)明的裝置還裝有一機構，其在測試之前可確保最小體積的樣品并且在測試過程中保持該最小體積量的樣品。
本發(fā)明的產(chǎn)品和程序以及它們所公開的改進能被用于許多診斷目的，而且可用于哺乳動物的疾病和治療的后續(xù)課題。一個特別的優(yōu)點是該產(chǎn)品和方法可應用于較小體積的全血，該全血可從例如簡單的手指刺孔中得到。本發(fā)明可應用于基本上任何領域，其中配體或分析物通過抗體/抗原或其等效的反應而被檢出或量化。
根據(jù)本發(fā)明，可被檢出的分析物包括，例如指示懷孕，排卵，癌癥如前列腺癌和心血管故障的物質。分析物包括hCG(人絨毛膜促性腺激素)，LH(黃體激素)，PSA(特效抗原蛋白質)，肌球素，肌鈣蛋白以及肌酸酐激酶MB。
本發(fā)明的其它應用包括對與病毒性感染有關的分析物的認識，例如肝炎和細菌感染，如引起胃腸潰瘍的幽門哈比特屬(Helicobacter)和由沙門氏菌屬以及革蘭氏陽性菌如Bacillus anthracis，S.pyrogenes，S.pneumoniae和E.faecalis引起的感染。
正如本發(fā)明下文將要描述的那樣，這將非常明顯，即除了用于小體積樣品化驗外，其它非常重要的優(yōu)點在于其應用于免疫測定和非免疫測定格式，這需要通過液體通道將紅血球從血漿中分離。
該裝置的簡便性使得未受過訓練的人員在家里或醫(yī)生的辦公室里對其的使用成為了可能，并且在救護車，急救室，緊急救護中心以及實驗室里作出快速測定也是可能的。
術語表本發(fā)明說明書中所使用的術語的通用含義如下。
工作臺是上層和下層的組合，其可以是不透明/半透明或者透明的，并形成為容納以及定位干燥多孔載體的構造。這些層被構造并裝配以形成工作臺流道，其與載體以相協(xié)作的關系形成了流體通道，從而允許施加到工作臺上游端的給定體積的液體樣品通過毛細管作用流向載體的遠端。在本發(fā)明的裝置中，它們通常由具有親水表面的硬塑料，例如丙烯酸聚合物，通過已知的標準程序包括沖壓，澆鑄，加工以及其它等效工藝制成。
干燥多孔載體和干燥多孔載體層指的是支撐在工作臺中的多孔材料，液體樣品通過毛細管作用流過該多孔材料。這種產(chǎn)品通常指的是膜。它們是分析反應發(fā)生的主要場所。
裝置是工作臺和干燥多孔材料的操作組合，其用于在液體樣品中定性或定量測定一種或多種組份，例如分析物或其它配體。
分析物是存在于體液或釋放到體液中的用以指示生理學或病理學狀態(tài)的物質。它們包括例如，心臟分析物，它們是由于心臟組織出現(xiàn)惡化而從心肌細胞釋放到循環(huán)的蛋白質，指示懷孕的激素，用于監(jiān)測糖尿病人狀態(tài)的葡萄糖，以及由感染引起的各種蛋白質或毒素。
頂層或底層是在工作臺中配置成用于支撐干燥多孔載體的上層和下層，它們與多孔載體相互協(xié)作而在膜的上游形成了一個流體通道，并且提供了將要被檢測的液體樣品的通道。
抗原是一種大分子或者連結到大分子的半抗原，其存在于哺乳動物中，用于引起抗體的產(chǎn)生。本發(fā)明的裝置在確定液體中抗原或抗體的存在是非常有效的。它們對于分析體液特別是全血尤其有效?？乖ǔＶ傅氖恰胺治鑫铩?，因為它們是特殊生理學或病理學狀態(tài)例如懷孕，感染，癌變狀態(tài)的表征。
通道是任何形態(tài)的導管或通路，被分析的液體樣品在分析測試裝置中流過該通道。在本發(fā)明的產(chǎn)品中，通道由上層和下層的臨近表面以及干燥多孔載體的協(xié)作配置和構造形成。為方便起見，在本發(fā)明說明書中，工作臺中的通道指的是工作臺流道，干燥多孔載體有時指的是膜通道。它們一起形成了流體通道。
快速意味著可檢出的產(chǎn)品在足夠短的時間，例如2至10分鐘內作出，從而允許用戶得出有意義和有用的結論。
高效意味著可檢出的產(chǎn)品能在小體積的液體，例如一滴或數(shù)滴(從約10μl至約50μl)全血中作出，即使分析物或其它配體以非常低的濃度存在時，也能使用少量的試劑，很多分析物的情形通常也正是如此，例如心臟肌鈣蛋白I。
檢測試劑是這樣一種材料，其通常是將在液體樣品中被檢出的分析物的抗體。它典型地可釋放地束縛于干燥多孔載體或液體樣品施加點的下游。對于大多數(shù)免疫化學分析，其由可檢出的標簽如膠體金來標記，并且其與將被測定的分析物形成絡合物。
捕獲試劑是這樣一種材料，其通常是將在液體樣品中被檢出的分析物的第二種抗體。其固定到檢測試劑的載體下游。其與載體上的絡合物發(fā)生反應并富集該絡合物，以便形成肉眼可見或借助于合適的儀器而可讀的產(chǎn)品。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供了設計原理和裝置，每一裝置包括一工作臺，其形成以接收并測量用于分析的小體積液體樣品，并且其包括一干燥多孔載體，反應發(fā)生在該載體上，這允許用戶檢測該樣品中的一種或多種組份。在操作方法中，一旦足夠的樣品接收在工作臺流道中時，樣品被添加到工作臺流道并通過毛細管作用流向載體的下游或遠端。樣品在干燥多孔載體的流動過程中，其首先遇到在載體上的或載體下游部分的干燥檢測試劑。為了檢測抗原性的分析物，檢測試劑典型地為一種或多種抗體，用可檢出的標簽標記。每一抗體與分析物上的抗原決定基反應。如果該樣品是全血，載體的上游部分可以是血漿離析器物質。
檢測試劑可釋放地束縛于載體膜上。與樣品接觸的結果是，發(fā)生抗原/抗體反應以便在液體樣品中形成了絡合物，并且其通過毛細管作用向下游流去，直到它遇到固定不動的捕獲試劑為止，該捕獲試劑典型地是與分析物上的不同抗原發(fā)生反應的第二抗體。
與固定捕獲試劑的反應將濃縮該絡合物，以便形成一肉眼可見或通過適當?shù)膬x器可見的固定線。
本發(fā)明的裝置可應用于多種診斷工藝，特別是使用全血作為樣品的工藝。
在本發(fā)明裝置的眾多優(yōu)點中，該裝置樣品的過載并不影響其測試結果而該裝置由于樣品裝載不足將不會產(chǎn)生結果。此外，它們容易制造，容易使用，使用小體積樣品并可快速提供結果。對于全血樣品，它們不需要樣品處理和將分離的樣品聚集或者測量以及轉移裝置。使用該裝置不需要額外的溶液。樣品本身就是所需的用以完成所需結果的全部。一個特別的優(yōu)點是，本發(fā)明的裝置包括三個單獨的元件，工作臺，干燥多孔載體和這兩者的聯(lián)合以便形成該檢測裝置。每一元件可被單獨制造。
本發(fā)明的裝置特別有用于全血分析以用于分析物的存在，該全血可從手指刺孔中得到，該分析物可能是心肌損壞的結果。這些分析物包括肌鈣蛋白，大腦促尿鈉排泄縮氨酸，以及其它物質。應該認識到，本裝置的使用并不限定于這些特定的分析物，或者就限定于全血，它也可同樣地適用于許多其它診斷工藝。


通過參照示出本發(fā)明代表性實施例的附圖，本發(fā)明將會得到更好的理解。
圖1是本發(fā)明具體裝置各部分的分解示意圖；圖2，3，和4示出了本發(fā)明的優(yōu)選膜構造，其展現(xiàn)了可用于圖1的工作臺的檢測膜和捕獲膜的尺寸和配置。這些尺寸僅僅是示例性的，因為根據(jù)膜的類型，樣品和所需的靈敏度及其它因素，尺寸的變化是可能的。示于圖2，3和4的膜的特定尺寸能在10分鐘內分析一滴全血(約35μl)；圖5示出了本發(fā)明的另一實施例，其中工作流道在底層的頂表面形成有凹槽。
具體實施例方式
根據(jù)本發(fā)明，提供了一種快速色譜分析裝置，其利用小體積的樣品，例如典型地可從手指刺孔中得到的一滴全血。該裝置消除了現(xiàn)有裝置的一些不足，比如對小體積的全血進行分析。所消除的其它不足包括需要對單獨樣品的聚集，體積測量和移動的裝置，需要多于一滴(＞35μl)的樣品，以及需要額外的溶液以使樣品更容易地充分流動。
該裝置利用下列設計原則樣品流道形成在工作臺的上層和下層之間，每一層都具有親水表面，其尺寸可允許毛細管流動。工作臺流道與干燥多孔載體相聯(lián)通，并且其體積等于或大于檢測所需的樣品體積。在優(yōu)選裝置中，工作臺流道的上游端可包括靠近工作臺流道入口的切口，以方便施加樣品。例如，當用指尖按壓該裝置而導致主開口堵塞時，圖1和5的小切口可提供備用的樣品進入工作臺流道的入口。工作臺流道的下游端變窄，以增加毛細作用并且在樣品流進入到干燥多孔載體前使其均勻流動。開口區(qū)域設計在工作臺流道周圍，以便如果工作臺流道未通過例如粘合劑或焊接密封時，可阻止樣品滲漏到上層和下層之間的間隙。工作臺上層和下層之間狹窄的面對面的重疊區(qū)域設計在工作臺的流道周圍，以便產(chǎn)生更大的毛細作用，從而在工作臺流道被填充之前，重疊區(qū)域將首先被樣品填充。這作為密封機構，可阻止空氣滲漏到已經(jīng)填充有樣品的工作臺流道中，該滲漏的空氣可阻止樣品的流動。該工作臺的重要特征在于，樣品從面對頂部的邊緣進入到干燥多孔載體。在現(xiàn)有裝置中，樣品被施加到干燥多孔載體的頂部，由于液體的向外分散特性，總有一些浪費的樣品逆向主流動方向流動。這種損失對用于小體積樣品的裝置來說是顯著的。
干燥多孔載體的尺寸根據(jù)所檢測的體積來設計。干燥多孔載體的長度根據(jù)檢測所需的時間來設計。對于全血樣品，優(yōu)選的存在兩種類型的適用于干燥多孔載體的物質。第一種物質，位于干燥多孔載體上游部的血漿離析器具有維持樣品紅血球部分的液體容量。第二種物質，固定的捕獲試劑的位置具有大致相等于樣品中血漿體積的液體容量。干燥多孔載體內的液體容量和樣品流速可通過幾次簡單的觀察而被測定。
對于小體積的樣品，需要使樣品的任何顯著部分發(fā)生的蒸發(fā)最小，因此，在干燥多孔載體的表面上使用阻止蒸汽的擋板是優(yōu)選的。
圖1示出了被設計用于一滴全血樣品的本發(fā)明實施例。
圖1中包括工作臺的上層1的底視圖，其具有孔口或窗口2，通過該孔口或窗口可看見干燥多孔載體的結構以及在其上或其內發(fā)生的反應。如果工作臺的頂層是透明的或半透明的，那么該窗口是可有可無的。如果工作臺是不透明的，則該窗口是必須的。
凹槽3與位于底層5的具有切口4a和4b的支撐4協(xié)作提供了樣品的額外進入裝置。
在所顯示的裝置中，進入裝置與工作臺流道相對準，其形成為在上層1的底表面9上包括凹槽6。上層1的底表面9與底層5的頂表面10在開口區(qū)域7和8相接觸。這些開口區(qū)域阻止樣品從工作臺流道流入到兩個表面之間的間隙。開口區(qū)域7和8延伸到區(qū)域12，以阻止樣品從干燥多孔載體11和20流出而進入到兩個表面9和10之間的間隙。
工作臺流道終止于干燥多孔載體11上游端的頂點13。干燥多孔載體11的該部分由從底層5的頂表面10延伸出來的Y形突起14支撐。應該注意到，工作臺流道的下游端在15處收縮，以便樣品均勻地流入到頂點13處的干燥多孔載體11。在干燥多孔載體的邊緣16和上層1的收縮15下游側的變寬區(qū)域的側壁之間也存在面對面的接觸。由于該間隙比收縮15更為狹窄，其被樣品迅速填充從而導致樣品更均勻地進入到干燥多孔載體11。干燥多孔載體比工作臺流道具有更大的毛細管作用，從而導致工作臺流道內的所有樣品移動到干燥多孔載體。只有當接收足夠的血量后，毛細管作用的相互作用才是允許本發(fā)明的裝置啟動診斷反應的主要因素，從而避免了由于樣品體積的不足而引起的錯誤結果。
在底層5的頂表面10具有凹槽17并且矩形突起18從上層1的底表面9突出。這些特征具有兩個目的。一是幫助將該兩層支撐在一起。另一目的是當該裝置完成裝配時，將干燥多孔載體牢固地保持在其位置處。
為進一步幫助將該兩層支撐在一起以形成工作臺，在底層10的頂表面上存在有圓柱形的柱子19，其與上層1底表面9上的圓柱形凹槽21相對準。
考慮到根據(jù)圖2，3和4所示的尺寸，很明顯，檢測膜11的頂點13與工作臺流道的下游端相接觸。檢測膜11的下游端與捕獲膜20的上游端稍微地重合。于是，形成了一個流體通道，其允許樣品從工作臺流道流入到檢測膜11直到捕獲膜20的封閉端22。捕獲膜20和檢測膜11的總吸收量基本上相等于檢測所需的體積。于是，當液體樣品完成了到膜20的端部的毛細流動后，工作臺流道基本上排空了。這種配置作為一種控制，可在診斷反應開始之前確保足夠樣品體積的存在。
圖2，3和4的設計希望能在10分鐘內檢測一滴全血中的分析物。其示出了一優(yōu)選結構，在該結構中有兩層膜，上游檢測和血漿分離膜11以及下游捕獲膜20。
圖5示出了本發(fā)明范圍內的另一結構。示出的裝置與圖1的裝置相似，不同之處在于工作臺流道形成在底層5的頂表面10之外。在該圖中，與前面附圖中等效的裝置部件以相同的附圖標記表示。但是，工作臺流道通過突起25形成，其與底層5頂表面10上的凹槽6相對準，從而形成工作臺流道。工作臺流道也可通過頂層底表面上的凹槽與底層頂表面的對準來形成。工作臺的變化對于本領域技術人員來說是顯而易見的。
檢測膜11具有兩個功能。它執(zhí)行過濾功能，以將血漿從全血液流中分離出來。它還作為用于分析物的檢測反應物的沉積場所，例如具有標簽的抗體，以形成抗原/抗體絡合物。盡管這不是優(yōu)選的，檢測反應物也可被置于捕獲膜20上或者工作臺的流道中。
目前用于檢測膜11的優(yōu)選材料是玻璃纖維產(chǎn)品，例如華特門(Whatman)F487-14膜(從新澤西州，克里夫頓的華特門公司可以得到)。其它有用的膜材料為合成纖維膜，可從紐約，長島的頗爾(Pall)公司得到，以及聚醚砜和吡咯烷酮產(chǎn)品，可從加拿大，多倫多的光譜診療公司得到。
應用于本發(fā)明實踐的免疫化學方法與應用于先前已知的裝置類似，其不同在于由于該工作臺的獨特結構，它消除了由于過度填充或填充量不足而引起錯誤結果。此外，樣品的量可以很少并可以較快的速度橫穿該裝置。于是，將試劑置于膜上或膜中的方法相似于先前的程序。樣品穿過的膜的通道為從施加區(qū)向下游直到分析物捕集點，在那里，得到可檢出的結果。穩(wěn)定的試劑，和使運輸便利的試劑可根據(jù)標準實驗操作被使用，盡管它們的使用是可選擇的。
為了方便處理，膜可通過支撐帶(未顯示)來支撐，典型地為聚苯乙烯帶，其帶有合適的粘結劑并且不會轉移到膜上。一種這樣的帶子為超級懷特(Super White)聚苯乙烯帶，可從加利福利亞，圣何塞的G&L得到。
還可存在一種用于膜的透明覆蓋帶(未顯示)，用以限制由于樣品的蒸發(fā)而從膜中的損失。典型地，這些覆蓋帶為約50μm厚的薄聚酯膜，其帶有非轉移的粘結劑。有一種這樣的膜為ARcare clear聚酯，可從賓夕法尼亞，Glen Rock的粘結劑研究公司得到。
作為這些分析類型的標準，反應的結果可通過觀察捕獲線23(圖4)和可選擇的控制線24(圖4)來得到。在免疫化學分析中，可檢測的捕獲線23是具有標簽的抗體/分析物/固定抗體產(chǎn)品的形成位置。控制線24可包括任何反應物，其將與樣品的組份或與在分析反應中形成的或被利用的可移動試劑形成可見的產(chǎn)品。
為實現(xiàn)本發(fā)明的優(yōu)點，特別是操作的速度，對膜11和20的尺寸、形狀和放置進行選擇是很重要的。
在所顯示的實施例中，為了獲得樣品快速穿過兩層膜的移動，并保持捕獲線和控制線充分地分隔開以便其從窗口2中可見，捕獲膜20形成為具有一狹窄的中間部分和一圓形的下游部分。對膜的尺寸進行選擇，以便捕獲膜和檢測膜的總吸收量大體上與所需樣品的體積相等。
后一特征也可通過將膜形成為長矩形的外形來實現(xiàn)。但是，導致完成測試的時間卻不期望地延長了。還可以通過使矩形縮小以及增加其橫向尺寸來實現(xiàn)。這可減少完成測試的時間，但是捕獲線和控制線必須非常地靠近，以致于通過窗口2它們不易被區(qū)別。這種構造也減小了測試的靈敏度。
測試的完成可通過樣品流入到捕獲膜20的端部22并且在上層1的窗口2中明顯可見來指示。因此，對于判定測試的完成，計時裝置僅僅是可選擇的。
能提供給本領域技術人員的任何種類的標簽都可用于本發(fā)明的裝置。金屬標簽和酶標簽是優(yōu)選的。金屬標簽是特別優(yōu)選的，因為它們具有非同尋常的靈敏度。在金屬中，金是最優(yōu)選的，主要是因為金的特性已被充分地了解了。
應用于本發(fā)明的用金標記的抗體的優(yōu)選粒子大小為約20至65nm，盡管根據(jù)已充分了解的因素，例如測試的分析靈敏度和反應物的親和力，尺寸的其它明顯改變也是容許的。
為了分析全血，捕獲膜20優(yōu)選地由硝化纖維或等效產(chǎn)品來形成。其可從Whatman得到。
在不偏離本發(fā)明精神和范圍的前提下，很多明顯的改變是可能的。例如，如上文所述，工作臺流道的凹槽可形成在頂層或底層。
盡管已被描述的本發(fā)明的各實施例主要用于夾層結構的化驗，但本發(fā)明的裝置和原理也可容易地適合于競爭分析法或其它化驗，這對本領域技術人員來說是明顯的。
本發(fā)明的所有工作臺，膜和裝置都是由在商業(yè)上容易得到的材料并通過傳統(tǒng)的，公知工藝制備的。
在本發(fā)明典型地應用于全血樣品時，檢測膜由一粘附的標簽可釋放的抗體浸漬，該抗體將與分析物上的抗原決定基反應。這些反應物可以是，例如人絨膜促性腺激素(hCG)；肌球素(Myoglobin)；CReactive Protein；LH；肌鈣蛋白(Troponin)I或T；ApoB100；PSA；Creatinine Kinase MB；以及Brain Natriuretic Peptide。第二或捕獲膜是已被浸漬了的，固定的第二抗體與分析物上的另一抗原決定基發(fā)生反應的場所。第二抗體的下游有一浸漬控制試劑，其將反應以指示該測試的有效性。
全血樣品通過工作臺流道添加到裝置中并且流入和穿過檢測膜。在檢測膜中，紅血球通過過濾而從樣品中移除。該樣品與被標記了的第一抗體接觸，從而導致在液體樣品中形成了帶有標記的抗體/分析物絡合物，并且該絡合物向下游流入到捕獲膜。在捕獲膜中，絡合物與捕獲抗體反應，從而形成帶有標記的抗體/分析物/捕獲抗體產(chǎn)物，其在捕獲線處得到濃縮。血漿繼續(xù)流過捕獲線到達捕獲線下游的控制位。在該控制位存在著一個反應，其通過控制線的出現(xiàn)而指示測試的有效性。
受益于所公開的示教，本領域技術人員可容易地使用本發(fā)明的新裝置而將任何數(shù)量的公知方法，和試劑適用于檢測分析物或其它配體。
本發(fā)明通過下面的例子1進一步地展示，但是該例子不應被認為是對本發(fā)明范圍的限制。
示例1根據(jù)本發(fā)明，準備了使用一滴全血樣品的人絨膜促性腺激素(hCG)檢測裝置。工作臺和干燥多孔載體根據(jù)圖1-4來構造。
硝化纖維捕獲膜(Whatman)通過使用傳統(tǒng)的液體分配器而被控制溶液和捕獲溶液浸漬?？刂迫芤喊?mg/mL的山羊抗鼠(anti-mouse)IgG多細胞抗體，其可從Arista Biologicals得到。捕獲溶液包含2mg/mL的類似凈化的山羊反人體(anti-human)hCG α鏈多細胞抗體(也可從Arista Biologicals得到)。該浸漬膜在37℃培養(yǎng)30分鐘以便固定抗體。配合金，可從40nm的金粒子制得，單細胞抗體，特別是人類hCG β鏈，可從Arista Biologicals買到，并具有最終的3.0至540nm的光密度。檢測膜，血漿離析器(Whatman)，被噴灑膠體配合金溶液并隨后冷凍干燥以移除水分。試片由25μm厚的透明聚酯帶覆蓋(粘結劑研究)并且通過由G & L Precision Die Cutting公司可獲得的聚苯乙烯帶所支撐。試片的外形通過使用沖模切割工具來生產(chǎn)。使用35μL全血的這種配置的裝置顯示出極好的血漿分離和樣品流動。檢測程序花費大約6分鐘即可完成。可觀察到20mIU hCG/mL的靈敏度。
本領域技術人員將會理解到，在不偏離本發(fā)明精神的前提下，可對示于這里的實施例和說明書作出各種改變和改進。所有這些改進和改變都被所附的權利要求覆蓋了。
權利要求
1.一種用于容納一個或多個干燥多孔膜的工作臺，用于檢測小體積液體樣品中的至少一種組份，該膜設置有膜通道，液體樣品可通過毛細管作用流動通過該通道，同時發(fā)生確定該樣品中至少一種組份的反應；該工作臺形成有樣品施加裝置，并具有帶親水表面的頂層和底層，以便包圍并定位該膜，每一層都具有頂層表面和底層表面，其形成以便頂層的底表面和底層的頂表面可面對面的固定接觸，因此這些層包圍并支撐該膜于其位置處，并且在該膜的上游形成了工作臺流道，并且在至少一個親水表面上包括有凹槽，所形成的通道與膜相聯(lián)通，從而允許液體樣品以連續(xù)的路徑從樣品施加裝置流到膜的遠端。
2.根據(jù)權利要求1所述的工作臺，其中工作臺流道在頂層的底表面上形成有凹槽。
3.根據(jù)權利要求1所述的工作臺，其中工作臺流道形成在底層的頂表面上。
4.根據(jù)權利要求1所述的工作臺，其中工作臺流道在底層的頂表面和頂層的底表面上形成有凹槽。
5.根據(jù)權利要求1所述的工作臺，其中在頂層上有用于觀察發(fā)生在膜上反應結果的窗口。
6.一種用于快速且高效地檢測小體積液體樣品中的至少一種組份的裝置，該裝置包括膜，其中確定該樣品中至少一種組份存在的反應發(fā)生在該膜上；該膜被包圍在工作臺中，工作臺形成有樣品施加裝置并具有帶親水表面的頂層和底層，該兩層通過頂層的底表面和底層的頂表面的面對面的接觸而被固定在一起，以便包圍并定位該膜，這種面對面接觸的表面在膜的上游形成了工作臺流道，并且在至少一個親水表面上包括有凹槽，所形成的通道與膜相聯(lián)通，以便允許液體樣品以連續(xù)的路徑從施加裝置流到膜的遠端。
7.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中工作臺流道在頂層的底表面上形成有凹槽。
8.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中工作臺流道在底層的頂表面上形成有凹槽。
9.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中工作臺流道在底層的頂表面和頂層的底表面上形成有凹槽。
10.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中在頂層上有用于觀察發(fā)生在膜上反應結果的窗口。
11.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括一種或多種用于檢測一種或多種分析物的試劑。
12.根據(jù)權利要求11所述的裝置，其中分析物選自包括hCG，LH，PSA，Myoglobin，Troponin I，Troponin T，Creatinine Kinase MB，CReactive Protein，ApoB 100，以及Brain Natriuretic Peptide的組。
13.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測Troponin I或Troponin T的試劑。
14.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測hCG的試劑。
15.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測LH的試劑。
16.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測PSA的試劑。
17.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測C ReactiveProtein的試劑。
18.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測ApoB 100的試劑。
19.根據(jù)權利要求6所述的裝置，其中膜包括用于檢測BrainNatriuretic Peptide的試劑。
20.一種用于快速且高效檢測全血樣品中的一種或多種組份的裝置，該裝置包括上游檢測膜和下游捕獲膜，檢測膜構造為將基本上所有的紅血球從樣品中過濾掉，并包括可移動的帶標簽的檢測試劑，該檢測試劑將與組份反應以形成向檢測膜下游移動的反應產(chǎn)物；捕獲膜位于檢測膜的下游并且包括固定的、不移動的捕獲試劑，該捕獲試劑將與反應產(chǎn)物反應，并且在捕獲線處濃縮該反應產(chǎn)物，檢測膜的下游端略微與捕獲膜的上游端重疊；這些膜被包圍在工作臺中，工作臺形成有樣品施加裝置并具有帶親水表面的頂層和底層，該兩層通過頂層的底表面和底層的頂表面面對面的接觸而被固定在一起，以便包圍兩層膜，同時它們保持相重疊的關系；這種面對面接觸的表面在檢測膜的上游形成工作臺流道，并且在至少一個親水表面上包括有凹槽，所形成的通道與檢測膜的上游端相聯(lián)通，以便允許樣品以連續(xù)的路徑從施加裝置穿過檢測膜并流入到捕獲膜的遠端。
21.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中工作臺流道在頂層的底表面上形成有凹槽。
22.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中工作臺流道在底層的頂表面上形成有凹槽。
23.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中工作臺流道在底層的頂表面和頂層的底表面上形成有凹槽。
24.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中在頂層上有用于觀察發(fā)生在捕獲膜上反應結果的窗口。
25.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括一種或多種用于檢測一種或多種分析物的試劑。
26.根據(jù)權利要求25所述的裝置，其中分析物選自包括hCG，LH，PSA，Myoglobin，Troponin I，Troponin T，Creatinine Kinase MB，CReactive Protein，ApoB 100，以及Brain Natriuretic Peptide的組。
27.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括用于檢測hCG的試劑。
28.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括用于檢測LH的試劑。
29.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括用于檢測PSA的試劑。
30.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括用于檢測CReactive Protein的試劑。
31.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括用于檢測ApoB100的試劑。
32.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜包括用于檢測BrainNatriuretic Peptide的試劑。
33.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中檢測膜為玻璃纖維膜并且捕獲膜為硝化纖維膜。
34.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中所述膜由透明的覆蓋層覆蓋。
35.根據(jù)權利要求20所述的裝置，其中覆蓋層為聚酯薄膜。
全文摘要
本發(fā)明涉及快速且高效免疫色確定液體樣品中的一種或多種組份的分析方法，工作臺和裝置。該裝置(1)尤其可用于通過使用膜(11)和第二膜(20)來鑒別小體積全血樣品中的分析物，膜(11)主要用于分離粒子，例如將紅血球從血漿中分離，第二膜(20)作為鑒別分析物的反應場所。
文檔編號B01L3/00GK1703277SQ200380101236
公開日2005年11月30日 申請日期2003年10月8日 優(yōu)先權日2002年10月11日
發(fā)明者史沁衛(wèi) 申請人:Zbx公司