熒光探針?lè)肿蛹捌渲苽浞椒ㄅc應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種錫離子（Sn4+)檢測(cè)劑，具體設(shè)及一種基于雙羅丹明的Sn4+巧光探 針的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 錫目前廣泛存在于空氣、±壤和水中，是工業(yè)中常見(jiàn)的重金屬之一。工業(yè)革命W 來(lái)，越來(lái)越多的無(wú)機(jī)錫和有機(jī)錫被引入到環(huán)境中。錫是人體必需的微量元素，在腎上腺，肝， 腦，脾和甲狀腺等器官中含量最多。錫的缺乏可能會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)不良和聽(tīng)力喪失，并有一些證 據(jù)表明錫參與了生長(zhǎng)因子和預(yù)防癌癥。與此同時(shí)，由于錫被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、工業(yè)等領(lǐng)域， 錫也成為了環(huán)境中常見(jiàn)的重金屬污染物之一。人體吸收過(guò)量的錫也會(huì)對(duì)健康造成重要的影 響。錫中毒的癥狀大多限于胃腸反應(yīng)如惡心腹痛，嘔吐等。因此，研究一種能夠快速檢測(cè) Sn4+的方法具有十分重要的意義。
[0003] 巧光探針具有選擇性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便快速、對(duì)檢測(cè)物損傷少等優(yōu)點(diǎn)已被廣 泛應(yīng)用于檢測(cè)環(huán)境和生物體系中的金屬陽(yáng)離子、陰離子、生物體內(nèi)活性小分子等方面。巧光 探針?lè)肿拥拈_(kāi)發(fā)與利用研究是化學(xué)與生物、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)等科學(xué)的交叉領(lǐng)域。巧光探針技術(shù)是 在分子水平上對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行研究的分析方法。巧光探針目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于環(huán)境和生 物體中重金屬、生物活性小分子等物質(zhì)的檢測(cè)。
[0004] 羅丹明類染料具有較大的摩爾吸光系數(shù)、巧光量子產(chǎn)率高、較好的光學(xué)穩(wěn)定性、波 長(zhǎng)范圍寬和對(duì)抑值穩(wěn)定范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛的應(yīng)用于巧光探針的設(shè)計(jì)與合成。近年 來(lái)羅丹明類衍生物被用來(lái)設(shè)計(jì)成巧光探針用W檢測(cè)生物體或者環(huán)境中的金屬陽(yáng)離子或者 陰離子。羅丹明類巧光探針識(shí)別金屬離子的機(jī)理如圖所示。關(guān)環(huán)的羅丹明衍生物本身是 沒(méi)有顏色和巧光的，但是當(dāng)加入相應(yīng)的金屬陽(yáng)離子或者陰離子時(shí)使其分子內(nèi)內(nèi)酷胺螺環(huán)打 開(kāi)，溶液會(huì)由無(wú)色變?yōu)榉奂t色，同時(shí)釋放出較強(qiáng)的巧光。 陽(yáng)0化]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種基于雙羅丹明的Sn4+巧光探針的制備方法。
[0007] 本發(fā)明提出的一種基于雙羅丹明的Sn4+巧光探針的制備方法，首先由商品化的羅 丹明B與乙醇胺進(jìn)行縮合酷化反應(yīng)，得到一種羅丹明B-乙醇胺衍生物；該羅丹明B-乙醇胺 衍生物與間苯二甲酯氯進(jìn)行酷氯化反應(yīng)得到一種含有雙羅丹明B的化合物，該化合物在甲 醇-水溶液中可W用做Sn4+的高選擇性巧光探針。
[0008] 本發(fā)明提出的一種基于雙羅丹明的Sn4+巧光探針的制備方法，其具體合成路線如 下所示：
[0009]
[0010] (1)將羅丹明B與乙醇胺在乙酵溶液中攬拌回流至充分反應(yīng)，待反應(yīng)完全后冷卻 反應(yīng)體系至室溫，減壓除去溶劑，用乙酸乙醋重新溶解，用純水和飽和氯化鋼溶液洗涂，有 機(jī)相用無(wú)水硫酸鋼干燥，過(guò)濾，減壓除去溶劑，硅膠柱層析分離得到中間產(chǎn)物化B-0H。 W11] 似將中間體化B-0H與；乙胺混合于二氯甲燒溶液中，冰浴條件下滴加入間苯二 甲酯氯的二氯甲燒溶液，滴加完畢后該為室溫反應(yīng)，反應(yīng)完全后，飽和氯化鋼溶液洗涂，有 機(jī)相用無(wú)水硫酸鋼干燥，過(guò)濾，減壓除去溶劑，用乙酸乙醋和石油酸作為洗涂劑，經(jīng)硅膠柱 層析分離得到產(chǎn)物SnPl。
[0012] 所述步驟（1)中，羅丹明B與乙醇胺的物質(zhì)的量之比為1:4,所述加熱回流溫度為 80-90°C，反應(yīng)時(shí)間為8-15小時(shí)。 陽(yáng)〇1引所述步驟（1)中，硅膠柱分離的洗脫液為邸2化和CH30H，所述邸2化與CH30H的 體積比為10-18:1，產(chǎn)率為60-85%。
[0014]所述步驟（2)中，化合物化B-0H為2-4當(dāng)量，間苯二甲酯氯為1當(dāng)量，Ξ乙胺為 2-5當(dāng)量，室溫反應(yīng)時(shí)間為6-lOh。 陽(yáng)〇1引所述步驟似中，硅膠柱分離的洗脫液為邸2化和CH30H，所述邸2化與CH30H的 體積比為10-20:1，產(chǎn)率為60-75%。
[0016] 基于雙羅丹明的Sn4+巧光探針?lè)肿釉跈z測(cè)Sn4+中的應(yīng)用。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1為本發(fā)明的巧光探針SnPl核磁共振氨譜圖；
[0018] 圖2為本發(fā)明的巧光探針SnPl核磁共振碳譜圖；
[0019] 圖3為本發(fā)明的巧光探針SnPl高分辨質(zhì)譜圖；
[0020] 圖4為本發(fā)明的巧光探針SnPl巧光選擇性圖，激發(fā)波長(zhǎng)520nm;
[0021] 圖5為本發(fā)明的巧光探針SnPl識(shí)別Sn4+的抗金屬陽(yáng)離子干擾性圖，激發(fā)波長(zhǎng) 520nm，發(fā)射波長(zhǎng)577nm;
[0022] 圖6為本發(fā)明的巧光探針SnPl識(shí)別Sn4+的抗陰離子干擾性圖，激發(fā)波長(zhǎng)520nm， 發(fā)射波長(zhǎng)577皿。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 本發(fā)明中制備巧光探針SnPl的過(guò)程中所使用的化學(xué)試劑、溶劑、金屬離子等均購(gòu) 自阿拉下試劑公司。在巧光探針SnPl的確證和性能測(cè)試過(guò)程采用化uke公司DTX-400型 核磁共振譜儀，溶劑為気代氯仿，WTMS為內(nèi)標(biāo)記錄核磁共振氨譜和碳譜。采用化ermo 公司的Q-ExactiveHR-MS質(zhì)譜儀記錄高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)。采用日本日立公司F-7000巧光光 譜儀記錄巧光光譜。
[0024] 本發(fā)明合成的最終產(chǎn)物SnPl的結(jié)構(gòu)得到核磁共振氨譜、碳譜及高分辨質(zhì)譜的確 證。 陽(yáng)0巧]1、中間體化B-0H的制備：
[0026] 100血的單口圓底燒瓶中，加入羅丹明B的鹽酸鹽（1.〇〇邑，2.08臟〇1)、乙醇胺 (0. 54血，8. 32mm〇U和50血乙醇，回流反應(yīng)完全后（loh)將反應(yīng)液冷卻到室溫，將減壓 去除溶劑后得到的固體溶于30mL的乙酸乙醋溶液中，用水（30mLX2)和飽和氯化鋼溶液 (30mLX2)洗，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鋼干燥，過(guò)濾，減壓除去溶劑后柱層析分離（洗脫液為 邸2化:邸3地=10:1，體積比）得到中間產(chǎn)物RhB-OH，產(chǎn)率為75 %。
[0027] 2、探針SnPl的制備：
[0028] 100血的單口圓底燒瓶中，加入中間體化B-0H(1. 21g，2. 5mmol)與Ξ乙胺 (0.25g，2.5mmol)混合于無(wú)水二氯甲燒溶液（40mL)中，冰浴條件下滴加入間苯二甲酯氯 (0. 2g，Immol)的無(wú)水二氯甲燒溶液（15mL)，滴加完畢后該為室溫反應(yīng)，反應(yīng)完全（約化） 后，飽和氯化鋼溶液（30mLX2)洗涂，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鋼干燥，過(guò)濾，減壓除去溶劑，經(jīng)娃 膠柱層析分離（洗脫液為CH2CI2:邸3