一種提取草莓果實中花青苷的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及花青苷分離純化技術領域,尤其涉及一種提取草莓果實中花青苷的方法。
【背景技術】
[0002]花青苷是一類廣泛存在于植物花、果、莖、葉和種子中的水溶性天然色素,在27個科72個屬中都有分布,其中以葡萄皮、阿龍尼亞苦味果、黑醋栗、草莓、樹莓和藍莓等含量最為豐富。其中最常見的有6種:天竺葵花色素、矢車菊花色素、飛燕草花色素、芍藥花色素、矮牽?;ㄉ?、錦葵花色素。
[0003]草莓是一種多年生草本植物,果實色、香、味俱佳,富含多種營養(yǎng)物質。在草莓成熟過程中最直觀的特征是色澤的變化,花青苷在草莓果實色澤的形成過程中發(fā)揮著重要作用。花青苷對果實品質具有雙重意義。一方面,花青苷的積累水平是評價果實成熟度和果品質量的一個重要指標,另一方面,作為食物同樣為消費者提供基本的有益身體健康的元素。已有研宄表明水果中的花青苷具有抗氧化、清除活性氧、延緩衰老的作用,此外花青苷還有增強抵抗力、恢復視力、減少肥胖產生等作用。有報道稱漿果和紅酒等富含花青苷的食物有利于人們的健康,特別是對預防心血管疾病和特定的癌癥有特別功效。因此,開展草莓花青苷合成積累調控機理研宄對改善果實品質和遺傳育種具有重要意義。建立一種草莓果實花青苷提取及其檢測方法對研宄草莓花青苷功效及調控積累機制具有重要的作用。
【發(fā)明內容】
[0004]本發(fā)明針對現有中的缺點,公開了一種提取草莓果實中花青苷的方法。
[0005]為了解決上述技術問題,本發(fā)明通過下述技術方案得以解決。
[0006]一種提取草莓果實中花青苷的方法,包括以下步驟,
[0007]A.草莓果實冷凍干燥,獲得草莓粉末;本發(fā)明通過冷凍干燥草莓果實,得到草莓粉末,在粉碎草莓的同時,沒有破壞花青苷,進而保障了最終得到的花青苷純度高。
[0008]B.對草莓粉末進行脫脂,得到脫脂草莓粉末;
[0009]C.黑暗狀態(tài)下,溫度控制在4°C,用體積濃度為0.1 %?0.5%的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止;將提取液離心后,濾掉殘渣,取上清液進行濃縮,得到花青苷粗提物;本發(fā)明選用體積濃度為0.1%?0.5%的HCl-甲醇溶液提取,阻止無?;ㄇ嘬盏慕到?。即使隨著被濃縮,也不會降解花青苷;解決了現有技術中濃縮花青苷時PH值升高,進而花青苷會被降解的技術問題。本發(fā)明提取花青苷時,用體積濃度為0.1%?0.5%的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止,能夠徹底提取花青苷。
[0010]D.精制花青苷粗提物。利用高效液相色譜檢測花青苷。利用本發(fā)明的方法可從草莓果實中快速、簡單的提取得到含量大于90%的花青苷。
[0011]作為優(yōu)選,步驟A中,用冷凍干燥機對草莓果實進行冷凍干燥。草莓果實的冷凍干燥是利用冷凍干燥機進行的,樣品處理時間為24?48小時,具體以草莓中的水份全部凍干為準。冷凍干燥機型號可選用LABCONCO Freezone-18L。
[0012]作為優(yōu)選,步驟B中,用索氏提取器對草莓粉末進行脫脂。索氏提取儀型號可選用SXT-02o
[0013]作為優(yōu)選,將草莓粉末加入到索氏提取器中,加入石油醚,其中草莓粉末與石油醚的質量比為1:3?10,反應2?24小時。
[0014]作為優(yōu)選,步驟C中,用體積濃度為0.1%?0.5%的HCl-甲醇溶液提取脫脂草莓粉末中的花青苷,提取2?24小時?;ㄇ嘬找兹苡诩状?,且甲醇較其他醇對花青苷的提取率高。花青苷的穩(wěn)定性受酶、溫度、氧氣、光、PH值、金屬離子等理化性質的影響,在中性和堿性條件下不穩(wěn)定。本發(fā)明選用HCl-甲醇溶液提取,能夠破壞植物細胞膜并溶解水溶性色素,且提取得到的花青苷穩(wěn)定。
[0015]作為優(yōu)選,步驟C中,在28-35°C濃縮花青苷。在28_35°C濃縮花青苷時,花青苷不會被降解。
[0016]作為優(yōu)選,步驟C中,在30°C用旋轉蒸儀濃縮花青苷。在30°C用旋轉蒸儀濃縮花青苷,花青苷不會被降解,而且含量大于90%的花青苷。
[0017]作為優(yōu)選,步驟D中,將花青苷粗提物利用水進行溶解,溶解后進行固相萃取,用純水洗滌、15-25 %甲醇淋洗、純甲醇洗脫后,得到花青苷。
[0018]作為優(yōu)選,步驟D中,將花青苷粗提物利用蒸餾水進行溶解,溶解后放置于固相萃取儀中進行固相萃取,用純水洗滌、20%甲醇淋洗、純甲醇洗脫后,得到花青苷。
[0019]與現有技術相比,本發(fā)明的有益效果為:
[0020]利用本發(fā)明的方法可從草莓果實中快速、簡單的提取得到含量大于90%的花青苷;解決了現有技術中提取花青苷時,提取液濃度低的技術問題。
[0021]本發(fā)明通過冷凍干燥草莓果實,得到草莓粉末,在粉碎草莓的同時,沒有破壞花青苷,進而保障了最終得到的花青苷純度高。
[0022]本發(fā)明選用體積濃度為0.1%?0.5%的HCl-甲醇溶液提取,阻止無?;ㄇ嘬盏慕到狻<词闺S著被濃縮,也不會降解花青苷;解決了現有技術中濃縮花青苷時pH值升高,進而花青苷會被降解的技術問題。本發(fā)明提取花青苷時,用體積濃度為0.1%?0.5%的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止,能夠徹底提取花青苷。
【附圖說明】
[0023]圖1是實施例7提取的花青苷的高效液相色譜圖。
[0024]圖2是實施例8提取的花青苷的高效液相色譜圖。
【具體實施方式】
[0025]實施例1
[0026]一種提取草莓果實中花青苷的方法,包括以下步驟,
[0027]A.草莓果實冷凍干燥,獲得草莓粉末;
[0028]B.對草莓粉末進行脫脂,得到脫脂草莓粉末;
[0029]C.黑暗狀態(tài)下,溫度控制在4°C,用體積濃度為0.1 %?0.5%的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止;將提取液離心后,濾掉殘渣,取上清液進行濃縮,得到花青苷粗提物;
[0030]D.精制花青苷粗提物。
[0031]實施例2
[0032]一種提取草莓果實中花青苷的方法,包括以下步驟,
[0033]A.草莓果實冷凍干燥,用冷凍干燥機對草莓果實進行冷凍干燥,獲得草莓粉末;
[0034]B.對草莓粉末進行脫脂,將草莓粉末加入到索氏提取器中,加入石油醚,其中草莓粉末與石油醚的質量比為1:3,反應2小時,得到脫脂草莓粉末;
[0035]C.黑暗狀態(tài)下,溫度控制在4°C,用體積濃度為0.1 %的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止,提取2小時;將提取液離心后,濾掉殘渣,取上清液進行在28°C,濃縮,得到花青苷粗提物;
[0036]D.將花青苷粗提物利用水進行溶解,溶解后進行固相萃取,用純水洗滌、15%甲醇淋洗、純甲醇洗脫后,得到花青苷。
[0037]實施例3
[0038]一種提取草莓果實中花青苷的方法,包括以下步驟,
[0039]A.草莓果實冷凍干燥,用冷凍干燥機對草莓果實進行冷凍干燥,獲得草莓粉末;
[0040]B.對草莓粉末進行脫脂,將草莓粉末加入到索氏提取器中,加入石油醚,其中草莓粉末與石油醚的質量比為1:10,反應24小時,得到脫脂草莓粉末;
[0041]C.黑暗狀態(tài)下,溫度控制在4°C,用體積濃度為0.5%的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止,提取24小時;將提取液離心后,濾掉殘渣,取上清液進行在35°C,濃縮,得到花青苷粗提物;
[0042]D.將花青苷粗提物利用水進行溶解,溶解后進行固相萃取,用純水洗滌、25%甲醇淋洗、純甲醇洗脫后,得到花青苷。
[0043]實施例4
[0044]一種提取草莓果實中花青苷的方法,包括以下步驟,
[0045]A.草莓果實冷凍干燥,用冷凍干燥機對草莓果實進行冷凍干燥,獲得草莓粉末;
[0046]B.對草莓粉末進行脫脂,將草莓粉末加入到索氏提取器中,加入石油醚,其中草莓粉末與石油醚的質量比為1:6,反應12小時,得到脫脂草莓粉末;
[0047]C.黑暗狀態(tài)下,溫度控制在4°C,用體積濃度為0.3%的HCl-甲醇溶液反復提取,直到脫脂草莓粉末變成白色為止,提取12小時;將提取液離心后,濾掉殘渣,取上清液進行在30°C,用旋轉蒸儀濃縮,得到花青苷粗提物;
[0048]D.將花青苷粗提物利用蒸餾水進行溶解,溶解后放置于固相萃取儀中進行固相萃取,用純水洗滌、20 %甲醇淋洗、純甲醇洗脫后,得到花青苷。
[0049]實施例5
[0050]一種提取草莓果實中花