一種甲殼素的提取方法及甲殼素制品的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，公開了一種甲殼素的提取方法，提取步驟如下：先將新鮮的蝦殼清洗干凈后，加入濃度為20％的檸檬酸溶液，室溫下超聲反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，將蝦殼用水洗至中性；加入2.5mol/L氫氧化鈉溶液，軟皂，持續(xù)攪拌6小時(shí)，停止攪拌，放置18小時(shí)，將殼撈出，再用2.5mol/L氫氧化鈉溶液，浸泡24小時(shí)，將兩次浸泡后的殼撈出，紗布過濾，水洗至中性，稍瀝干，加入1mol/L的鹽酸溶液，攪拌反應(yīng)30分鐘，再將殼撈出，用1mol/L的鹽酸液攪拌反應(yīng)30分鐘，紗布過濾，大量水洗至中性，擠去水分，曬干即得甲殼素，并公開以甲殼素做成復(fù)方，還公開了其在制備具有抗急性腎衰藥物中的應(yīng)用。
【專利說明】
一種甲殼素的提取方法及甲殼素制品
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種甲殼素的提取方法及甲殼素制品。
【背景技術(shù)】
[0002] 急性腎功能衰竭(Acute Renal Failure，ARF)是由多種原因引起的臨床綜合征， 可見于臨床各科病人，發(fā)病率高且往往帶來嚴(yán)重后果，其特點(diǎn)為短期內(nèi)（數(shù)小時(shí)至數(shù)天)神 功能急劇下降，臨床表現(xiàn)為急性少尿(尿量<400mLPd)或無尿(尿量〈lOOmLPd)，體內(nèi)氮質(zhì)代 謝產(chǎn)物排出產(chǎn)生障礙，迅速出現(xiàn)氮質(zhì)血癥，水及電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂，并引起全身各系統(tǒng) 相應(yīng)功能失調(diào)。引起急性腎衰的主要因素是腎血流量的急劇減少，以及由于腎組織缺血引 起的氧化應(yīng)激和細(xì)胞損傷，最終導(dǎo)致腎臟組織結(jié)構(gòu)的破壞和功能的惡化。目前臨床上尚無 公認(rèn)的治療急性腎衰有效的藥物，僅能通過糾正水電解質(zhì)平衡，糾正酸中毒等對癥治療措 施改善癥狀，后期還需要通過血液透析維持機(jī)體機(jī)能。在改善腎臟血流灌注障礙和減輕腎 組織損傷方面有明顯療效的臨床藥物少見。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 發(fā)明目的：為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種甲殼素的提取方法及 甲殼素制品。
[0004] 技術(shù)方案:本發(fā)明的目的是通過如下的方案實(shí)現(xiàn)的：
[0005] -種甲殼素的提取方法，提取步驟如下:先將新鮮的蝦殼清洗干凈后，加入濃度為 20%的檸檬酸溶液，室溫下超聲反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，將蝦殼用水洗至中性;加入 2.5mol/L氫氧化鈉溶液，軟皂，持續(xù)攪拌6小時(shí)，停止攪拌，放置18小時(shí)，將殼撈出，再用 2.5mol/L氫氧化鈉溶液，浸泡24小時(shí)，將兩次浸泡后的殼撈出，紗布過濾，水洗至中性，稍瀝 干，加入lmol/L的鹽酸溶液，攪拌反應(yīng)30分鐘，再將殼撈出，用lmol/L的鹽酸液攪拌反應(yīng)30 分鐘，紗布過濾，大量水洗至中性，擠去水分，曬干即得甲殼素。
[0006] 所述甲殼素的提取方法，檸檬酸溶液用量為蝦殼重量的10倍，氫氧化鈉溶液為蝦 殼重量的20倍，軟皂為蝦殼重量的3倍。
[0007] -種甲殼素制品，它所含的活性成分由下列重量份原料配比制備而成：甲殼素 2 份、水田七30份、葉下珠35份、大人血七40份、華東木藍(lán)28份、蜈蚣七40份，甲殼素為上述方 法制備而得。
[0008] 所述甲殼素制品，制備方法步驟為:取上述除甲殼素外其他藥材合并，加水煎煮兩 次，合并煎液，濃縮至65 °C時(shí)相對密度為1.10-1.20,加入乙醇，攪拌，使含醇量按體積百分 比計(jì)算達(dá)65-85 %，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65 °C時(shí)相對密度為1.20-1.30并回收乙醇， 將濃縮液噴霧干燥，所得顆粒粉碎成干浸膏粉，加入甲殼素和輔料，制成所需制劑。
[0009]所述甲殼素制品，制備方法中煎煮條件為:第一次加水量為藥材重量的8-12倍量， 煎煮1-2h，第二次加水量為藥材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。
[0010]所述甲殼素制品，制備方法中噴霧干燥條件為:進(jìn)風(fēng)溫度為90-110°C，出風(fēng)溫度為 60-90°C，物料溫度為60-90°C，霧化壓力為0.2-0.5兆帕，噴霧速度為l-10ml/s。
[0011] 所述甲殼素制品在制備抗急性腎衰藥物中的應(yīng)用。
[0012] 甲殼質(zhì)(C8H1305N)n，又稱甲殼素、幾丁質(zhì)，英文名Chitin<a811年法國學(xué)者布拉克 諾(Braconno)發(fā)現(xiàn)，1823年由歐吉爾（Odier)從甲殼動(dòng)物外殼中提取。淡米黃色至白色，溶 于濃鹽酸/磷酸/硫酸/乙酸，不溶于堿及其它有機(jī)溶劑，也不溶于水。甲殼質(zhì)的脫乙?；?生物(〇1；11：0 8311(161'；^31：；^6 8)殼聚糖(〇11；[1：08311)不溶于水，可溶于部分稀酸。甲殼素具有 抗癌抑制癌、瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移，提高人體免疫力及護(hù)肝解毒作用。尤其適用于糖尿病、肝腎病、高 血壓、肥胖等癥，有利于預(yù)防癌細(xì)胞病變和輔助放化療治療腫瘤疾病。濟(jì)南海得貝海洋生物 工程有限公司生產(chǎn)。
[0013]水田七為筠翦薯科植物裂果薯的塊莖，拉丁學(xué)名 SchizocapsaplantagineaHanceTaccaplantaginea，清熱解毒，散瘀消腫，理氣止痛，截癥。 用于咽喉腫痛，急性胃腸炎，泌尿道感染，牙痛，慢性胃炎，胃、十二指腸潰瘍，風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎，月經(jīng)不調(diào)，瘧疾，跌打損傷;外用治瘡瘍腫毒，外傷出血。
[0014] 葉下珠，學(xué)名:Phyllanthus urinaria L.)，一年生草本植物，高數(shù)寸至尺許。莖帶 紫紅色，有縱棱。葉互生，作復(fù)瓦狀排列，形成二行，很似羽狀復(fù)葉，葉片矩圓形，長二、三分， 全綠，先端尖或鈍，基部圓形，幾無葉柄。夏秋沿莖葉下面開白色小花，無花柄?；ê蠼Y(jié)扁圓 形小果，形如小珠，排列于假復(fù)葉下面。清熱利尿，明目，消積。用于腎炎水腫，泌尿系感染、 結(jié)石，腸炎，痢疾，小二疳積，眼角膜炎，黃疸型肝炎;外用治青竹蛇咬傷
[0015] 大人血七為罌粟科金罌粟屬植物人血草Stylophorum lasiocarpum(01 iv ·) Fedde，以全草入藥。秋季采集，曬干。苦、澀，平。活血調(diào)經(jīng)，散淤止痛。用于月經(jīng)不調(diào)，跌打損 傷。
[0016] 華東木藍(lán)為豆科木藍(lán)屬植物華東木藍(lán)Indigofera fortunei Craib，以根和葉入 藥。春秋采，洗凈切碎，曬干。清熱解毒，消腫止痛。流行性乙型腦炎，咽喉腫痛，肺炎，蛇咬 傷。本發(fā)明采用全草入藥。
[0017] 蜈蟻七為蘭科杓蘭屬植物大花杓蘭Cypripedium macranthum Swartz，以根、根狀 莖和花入藥。秋季采挖，洗凈曬干。利尿消腫，活血祛瘀，祛風(fēng)鎮(zhèn)痛。用于全身浮腫，下肢水 月中，小便不利，白帶，風(fēng)濕腰腿痛，跌打損傷。本發(fā)明以根入藥。其余為藥典品種。
[0018] 有益效果:本發(fā)明中水田七、葉下珠清熱解毒，散瘀消腫，理氣止痛為君藥，大人血 七、華東木藍(lán)、蜈蚣七活血調(diào)經(jīng)，散淤止痛為臣藥，甲殼素為佐使藥，諸藥相合，用于治療急 性腎衰。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 以下通過實(shí)施例形式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不應(yīng)將此 理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均 屬于本發(fā)明的范圍。
[0020] 實(shí)施例1:取新鮮的蝦殼10kg清洗干凈后，加入濃度為20 %的檸檬酸溶液，室溫下 超聲反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，將蝦殼用水洗至中性;加入2.5mol/L氫氧化鈉溶液，軟 皂，持續(xù)攪拌6小時(shí)，停止攪拌，放置18小時(shí)，將殼撈出，再用2.5mol/L氫氧化鈉溶液，浸泡24 小時(shí)，將兩次浸泡后的殼撈出，紗布過濾，水洗至中性，稍瀝干，加入lmol/L的鹽酸溶液，攪 拌反應(yīng)30分鐘，再將殼撈出，用lmo 1/L的鹽酸液攪拌反應(yīng)30分鐘，紗布過濾，大量水洗至中 性，擠去水分，曬干即得甲殼素。所述甲殼素的提取方法，檸檬酸溶液用量為蝦殼重量的10 倍，氫氧化鈉溶液為蝦殼重量的20倍，軟皂為蝦殼重量的3倍。
[0021]實(shí)施例2:取新鮮的蝦殼20kg清洗干凈后，加入濃度為20 %的檸檬酸溶液，室溫下 超聲反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，將蝦殼用水洗至中性;加入2.5mol/L氫氧化鈉溶液，軟 皂，持續(xù)攪拌6小時(shí)，停止攪拌，放置18小時(shí)，將殼撈出，再用2.5mol/L氫氧化鈉溶液，浸泡24 小時(shí)，將兩次浸泡后的殼撈出，紗布過濾，水洗至中性，稍瀝干，加入lmol/L的鹽酸溶液，攪 拌反應(yīng)30分鐘，再將殼撈出，用lmo 1/L的鹽酸液攪拌反應(yīng)30分鐘，紗布過濾，大量水洗至中 性，擠去水分，曬干即得甲殼素。所述甲殼素的提取方法，檸檬酸溶液用量為蝦殼重量的10 倍，氫氧化鈉溶液為蝦殼重量的20倍，軟皂為蝦殼重量的3倍。
[0022]實(shí)施例3:取新鮮的蝦殼30kg清洗干凈后，加入濃度為20 %的檸檬酸溶液，室溫下 超聲反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，將蝦殼用水洗至中性;加入2.5mol/L氫氧化鈉溶液，軟 皂，持續(xù)攪拌6小時(shí)，停止攪拌，放置18小時(shí)，將殼撈出，再用2.5mol/L氫氧化鈉溶液，浸泡24 小時(shí)，將兩次浸泡后的殼撈出，紗布過濾，水洗至中性，稍瀝干，加入lmol/L的鹽酸溶液，攪 拌反應(yīng)30分鐘，再將殼撈出，用lmo 1/L的鹽酸液攪拌反應(yīng)30分鐘，紗布過濾，大量水洗至中 性，擠去水分，曬干即得甲殼素。所述甲殼素的提取方法，檸檬酸溶液用量為蝦殼重量的10 倍，氫氧化鈉溶液為蝦殼重量的20倍，軟皂為蝦殼重量的3倍。
[0023] 實(shí)施例4:取水田七30g、葉下珠35g、大人血七40g、華東木藍(lán)28g、蜈蚣七40g藥材混 合，加水煎煮兩次，第一次加水為藥材重量的8倍量，煎煮1.5h，第二次加水為藥材重量的6 倍量，煎煮lh，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.10 (65 °C )，加適量乙醇使含醇量(體 積分?jǐn)?shù))達(dá)65%，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度1.10(65°C)的浸 膏，經(jīng)噴霧干燥(條件為進(jìn)風(fēng)溫度為l〇〇°C，出風(fēng)溫度為80°C，物料溫度為70°C，霧化壓力為 〇. 2兆帕，噴霧速度為5ml/s。），粉碎成干浸膏粉，再加入上述實(shí)施例1制備的甲殼素2g、糊精 50g，用適量80%乙醇潤濕，制軟材，過14目篩制粒，70°C干燥，60目整粒，得顆粒劑。
[0024] 實(shí)施例5:取水田七30g、葉下珠35g、大人血七40g、華東木藍(lán)28g、蜈蚣七40g藥材混 合，加水煎煮兩次，第次加水為藥材重量的10倍量，煎煮2h，第二次加水為藥材重量的8倍 量，煎煮lh，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.15(65°C)，加適量乙醇使含醇量(體積 分?jǐn)?shù))達(dá)75 %，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度1.25 (65 °C )的浸 膏，經(jīng)噴霧干燥(條件為進(jìn)風(fēng)溫度為120°C，出風(fēng)溫度為90°C，物料溫度為80°C，霧化壓力為 〇. 3兆帕，噴霧速度為7.5/s。），粉碎成干浸膏粉，再加入上述實(shí)施例1制備的甲殼素2g、淀粉 50g，混合均勻，用適量80 %乙醇潤濕，制軟材，過30目篩制粒，于70~80 °C干燥，用60目篩整 粒，壓片，包糖衣，分裝，外包裝，送檢合格，得成品。
[0025] 實(shí)施例6:取水田七30g、葉下珠35g、大人血七40g、華東木藍(lán)28g、蜈蚣七40g藥材混 合，加水煎煮兩次，第一次加水為藥材重量的10倍量，煎煮1.5h，第二次加水為藥材重量的8 倍量，煎煮1.5h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.15(65°C )，加適量乙醇使含醇量 (體積分?jǐn)?shù))達(dá)75 %，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對密度1.25 (65 °C ) 的浸膏，經(jīng)噴霧干燥(條件為進(jìn)風(fēng)溫度為120°C，出風(fēng)溫度為90°C，物料溫度為90 °C，霧化壓 力為0.4兆帕，噴霧速度為7.5/s。），粉碎成干浸膏粉，過6號篩，加入上述實(shí)施例1制備的甲 殼素2g，再裝入1號膠囊即可得成品。
[0026] 實(shí)施例7:本發(fā)明對急性腎衰大鼠的治療作用
[0027] 試驗(yàn)藥品：按照上述實(shí)施例1的方法制備試驗(yàn)藥品。
[0028]方法:采用肌肉注射甘油致急性腎功能衰竭大鼠動(dòng)物模型。選用180~220g健康雄 性SD大鼠60只，隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組(肌肉注射生理鹽水）；模型組(肌肉注射甘油）；本發(fā) 明I組(3g生藥量/Kg));本發(fā)明Π 組(6g生藥量/Kg));本發(fā)明ΙΠ 組（12g生藥量/Kg))，各組大 鼠在甘油造模后立即尾靜脈注射生理鹽水或口服本發(fā)明，12和24小時(shí)后再給藥一次。
[0029]觀察指標(biāo):60只大鼠末次給予本發(fā)明或生理鹽水后放入代謝籠收集24小時(shí)尿，留 尿后6小時(shí)用4%水合氯醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流儀測定造模后及治療后雙側(cè) 腎臟血流量，取平均值作為單只動(dòng)物腎血流量;取血制備血清，測定血BUN和Cre;取腎臟，制 備10%腎皮質(zhì)勻漿，測定腎皮質(zhì)勻衆(zhòng)MDA、GSH、N0(均按試劑盒說明書操作）。
[0030] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:表1本發(fā)明對急性腎衰小鼠腎血流量的影響
[0031]
[0032] *P〈0.05與急性腎衰模型組對比
[0033] 實(shí)施例2:本發(fā)明對急性腎衰小鼠腎功能具保護(hù)作用
[0034] 1、試驗(yàn)藥品：按照上述實(shí)施例1的方法制備試驗(yàn)藥品。
[0035] 2、方法:模型組大鼠較假手術(shù)組大鼠24小時(shí)尿量顯著減少，分別為5.65±0.97ml 和14.78±4.80ml;中、高劑量本發(fā)明組24小時(shí)尿量顯著高于模型組(P〈0.05)，三個(gè)藥物治 療組的尿量具有劑量依賴性，分別為低劑量組6.26 ± 2.75ml，中劑量組8.49 ± 1.72ml，高劑 量組9.23 ± 1.47ml。說明本發(fā)明能改善急性腎衰大鼠的少尿癥狀。急性腎衰大鼠靜脈注射 生理鹽水24小時(shí)后，血清BUN為28.44± 1.78mmol/L，Cre為175.97 ± 16.96umol/L，明顯高于 假手術(shù)組，說明模型組動(dòng)物腎功能損害嚴(yán)重。中、高劑量本發(fā)明能劑量依賴性地改善急性腎 衰大鼠的腎功能(P〈〇. 05)。
[0036]結(jié)論:本發(fā)明能夠改善急性腎衰時(shí)的無尿或少尿癥狀，保護(hù)腎臟的功能，可以用來 制備抗急性腎衰藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種甲殼素的提取方法，其特征在于，提取步驟如下：先將新鮮的蝦殼清洗干凈后， 加入濃度為20%的檸檬酸溶液，室溫下超聲反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)結(jié)束后過濾，將蝦殼用水洗至 中性;加入2.5mol/L氫氧化鈉溶液，軟皂，持續(xù)攪拌6小時(shí)，停止攪拌，放置18小時(shí)，將殼撈 出，再用2.5mol/L氫氧化鈉溶液，浸泡24小時(shí)，將兩次浸泡后的殼撈出，紗布過濾，水洗至中 性，稍瀝干，加入lmol/L的鹽酸溶液，攪拌反應(yīng)30分鐘，再將殼撈出，用lmol/L的鹽酸液攪拌 反應(yīng)30分鐘，紗布過濾，大量水洗至中性，擠去水分，曬干即得甲殼素。2. 如權(quán)利要求1所述甲殼素的提取方法，其特征在于，檸檬酸溶液用量為蝦殼重量的10 倍，氫氧化鈉溶液為蝦殼重量的20倍，軟皂為蝦殼重量的3倍。3. -種甲殼素制品，其特征在于，它所含的活性成分由下列重量份原料配比制備而成： 甲殼素2份、水田七30份、葉下珠35份、大人血七40份、華東木藍(lán)28份、蜈蚣七40份，甲殼素為 上述權(quán)利要求1的方法制備而得。4. 如權(quán)利要求3所述甲殼素制品，其特征在于，制備方法步驟為：取上述除甲殼素外其 他藥材合并，加水煎煮兩次，合并煎液，濃縮至65°C時(shí)相對密度為1.10-1.20，加入乙醇，攪 拌，使含醇量按體積百分比計(jì)算達(dá)65-85%，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65°C時(shí)相對密度為 1.20-1.30并回收乙醇，將濃縮液噴霧干燥，所得顆粒粉碎成干浸膏粉，加入甲殼素和輔料， 制成所需制劑。5. 如權(quán)利要求4所述甲殼素制品，其特征在于，制備方法中煎煮條件為:第一次加水量 為藥材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水量為藥材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。6. 如權(quán)利要求4所述甲殼素制品，其特征在于，制備方法中噴霧干燥條件為:進(jìn)風(fēng)溫度 為90-110 °C，出風(fēng)溫度為60-90 °C，物料溫度為60-90 °C，霧化壓力為0.2-0.5兆帕，噴霧速度 為1-lOml/s。7. 如權(quán)利要求3所述甲殼素制品在抗急性腎衰藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】C08B37/08GK105837706SQ201610168446
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月23日
【發(fā)明人】卞毓平
【申請人】卞毓平