著增高。而與模型組比較，本發(fā)明中藥組合物低、中、高各個劑 量組顯著降低了肝臟指數(P<0.01)，陽性對照藥天欣泰屯、脈寧片和本發(fā)明中藥組合物本 發(fā)明中藥組合物高劑量組能夠顯著的降低肝臟指數(P<〇.05)，但效果不及本發(fā)明中藥組 合物。
[0038] 表5本發(fā)明中藥組合物對大鼠血疲模型血流變的影響(玄:主及）
注：與正常對照比較，胖<0.05，#胖<0.01;與模型組比較，沖<0.05，** P<0.01。
[0039] 實驗例21:本發(fā)明中藥組合物對RHRSP腦血栓后血腦屏障(BBB)通透性的影響 1試驗方法 2.1.1動物模型的制備： 取2 -3個月齡、體重(100±20)g的雄性SD大鼠用雙腎雙夾法狹窄腎動脈建立RHRSP 模型:大鼠腹腔麻醉，經劍突下腹正中縱行約5cm長切口，切開皮膚、腹肌，純性分離雙側腎 動脈，用內徑為0.3mm的環(huán)形銀夾分別夾住雙側腎動脈起始部。于手術前測血壓一次，手術 后每周測一次，連續(xù)12周。另取10只體重相當的SD大鼠，測其血壓作為正常對照。剔除： 手術中及術后死亡，術后12周血壓低于leOmmHg大鼠，有卒中癥狀及體征、解剖見左基底 節(jié)區(qū)小的軟化灶及蛛網膜下腔出血的大鼠。16周后血壓> 160mm化、且無腦卒中癥狀的 R皿SP為成功模型。將制備成功的R皿SP用光化學方法造成大腦中動脈閉塞(MCA0)模型 致大腦中動脈(MCA)血栓形成:2 %戊己比妥鋼按40mg/kg體重腹腔注射麻醉后，經左顛側 入路，在觀弓和顛骨鱗部結合處前下方1mm處，用牙科鉆鉆一直徑為5mm的骨窗，透過硬腦 膜可清楚看到左MCA主干及其分支。經股靜脈按40mg/kg體重的劑量注射2.5%虎紅，5min 后用YAG激光儀發(fā)生的532nm的綠色激光束(光斑直徑2mm，光照強度0.37W)持續(xù)照射MCA 主干15min，可見該MCA遠端及各分支血流中斷，并在手術顯微鏡下見局部白色血栓提示該 MCA血栓形成、MCA0模型復制成功。術中大鼠肛溫保持在(37±0.3)°C。局部傷口縫合前用 青霉素稀釋液沖洗，術后常規(guī)肌注青霉素8萬U/只。剔除術中及術后Id死亡的W及出血多 或手術顯微鏡下未明確供血是否中斷的大鼠。
[0040] 將動物隨機分6組:假手術組、模型對照組、本發(fā)明中藥組合物高、中、低劑量組、尼 莫地平組。假手術組僅開骨窗，不作激光照射;模型手術成功后的4.化，各組分別尾靜脈注 射本發(fā)明中藥組合物40mg/kg、20mg/kg、lOmg/kg，尼莫地平20mg/kg ;假手術組和模型組尾 靜脈注射同體積的生理鹽水。各組大鼠分別分批于MCA0術后（即腦血栓缺血后)6h、12h、 24h處死取腦組織標本，并于處死前化尾靜脈注射2%伊文思藍化vansBlue，EB)生理鹽 水溶液2ml/kg體重，待充分循環(huán)后，深麻動物，剖胸經屯、臟灌注生理鹽水沖洗血管內染料， 斷頭取腦。
[0041] 各組隨機抽取3只大鼠的腦組織，立即冰凍切片，連續(xù)行厚約30um的冠狀切片， 用70%甘油PBS緩沖液(P冊.5-9.0)封片，于Bio-Rad Radiance2100激光掃描共聚焦顯 微鏡下觀察腦組織中EB的滲出情況，觀察BBB開放區(qū)域及程度。未觀察時切片置4°C冰箱 避光保存。各組隨機另取5只大鼠的腦組織，吸干表面水分后稱量腦濕重;將腦組織置于勻 漿器中，加入50%Ξ氯乙酸制成組織勻漿，移入試管密封靜置60min W上;300化pm/min離 屯、lOmin，取上清液，巧光分光光度計測巧光值:激發(fā)波長620nm，發(fā)射波長680nm;按標準曲 線計算出上清液中邸含量，再計算出每克腦組織邸含量，W此反應各大鼠 BBB通透性。
[0042] 2實驗結果 2.1激光掃描共聚焦顯微鏡觀察結果 EB在激發(fā)光狀態(tài)下呈鮮艷明亮的紅色巧光。激光顯微鏡下觀察到各組動物腦組織無 BBB腦區(qū)（如松果體、最后區(qū)和腦垂體）呈現均一、彌漫性邸浸染，邊界清晰，腦膜可見紅 色巧光勾勒出的線樣輪廓。而在BBB腦區(qū)，除假手術組之外的其他各組腦組織均可見光斑， 且主要分布在丘腦、下丘腦、小腦、海馬等處，光斑大小不一，巧光強度從光斑的中屯、向外周 逐漸減弱，邊界模糊。各組的光斑數和分布明顯不同：模型組光斑最多，約有120個左右直 徑約100-200um的光斑，密集處呈片狀。各本發(fā)明中藥組合物藥物組光斑數目較模型組顯 著減少，各劑量組比較，呈現顯著劑量差異性；其中W低劑量組光斑較多，在相同平面上光 斑約有50個，但是融合成片狀的較少；中劑量組光斑較少，散在分布;高劑量組光斑很少而 散在，且巧光很弱。
[0043] 2.2大鼠腦組織邸含量檢測血腦屏障的通透性結果 各組大鼠腦組織標本由測得的巧光值計算出EB含量，數據統(tǒng)計分析見表6。
[0044] 表6本發(fā)明中藥組合物對RHRSP腦血栓后血腦屏障通透性的影響

注：與假手術組比較，#胖<0.01 ;與模型組比較，沖<0.01，*沖<0.01。
[0045] 2.3 結論 EB為水溶性染料，入血后能百分之百迅速與白蛋白結合，正常情況下不能透過血腦屏 障。由2.1及2.2結果可見，假手術組BBB腦區(qū)，腦組織顯微鏡下未見邸滲出光斑;而模型 組大鼠腦組織顯微鏡下有大量邸滲出光斑，且腦組織巧光分光光度計檢出高含量的邸，較 假手術組有顯著差異(P<〇.01)，表明腦血栓后腦組織血腦屏障破壞，通透性增加，EB結合 白蛋白可通過開放的BBB進入腦組織。實驗結果顯示本發(fā)明中藥組合物各劑量組大鼠腦組 織顯微鏡下邸光斑數W及腦組織邸檢出含量明顯減少，與模型組比較均有顯著差異(P< 0.01 )，提示本發(fā)明中藥組合物對腦損傷后血腦屏障通透性增加具有抑制作用，能保護血腦 屏障，而保護腦組織進一步受損傷。
【主權項】
1. 一種中藥組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于所述中藥組合物由以 下重量份的原料制得:桃仁30份，弟活15份，槐花15份，徐長卿10份，熟地8份，百合10份，金 銀花1 〇份，丹參6份，枸杞10份，茯苓12份，川芎12份，白芷10份，黃連素5.5份，白芍10份，紅 景天8份，甘草12份，香橡5份和遠志9份。2. 如權利要求1所述的中藥組合物在制備治療腦血栓藥物中的用途，其特征在于:所述 中藥組合物為散劑、水劑、片劑或膠囊劑。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種中藥組合物在制備治療腦血栓的藥物中的用途，屬于中藥領域。本發(fā)明中的中藥組合物以如下組分為原料制得：桃仁、羌活、槐花、徐長卿、熟地、百合、金銀花、丹參、枸杞、茯苓、川芎、白芷、黃連素、白芍、紅景天、甘草、香櫞和遠志。本發(fā)明中的中藥組合物在治療或預防腦血栓方面均具有很好的治療效果，且藥物副作用低，具有顯著的臨床推廣價值。
【IPC分類】A61K31/4375, A61P9/10, A61K36/8967
【公開號】CN105596705
【申請?zhí)枴緾N201610073746
【發(fā)明人】張寶永
【申請人】青島華之草醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2014年3月25日
【公告號】CN103830538A, CN103830538B, CN105535419A