>[0278] 提取的工藝步驟如下：
[0279] Α、裂解破壁
[0280]將培養(yǎng)好的裂壺藻發(fā)酵液經(jīng)過離心獲得濕菌泥，稱取40千克含水率90%的濕菌泥 加入反應(yīng)爸中，按濕菌泥:濃鹽酸的質(zhì)量比=1:1.5的比例向反應(yīng)爸中加入質(zhì)量濃度為37 % 的濃鹽酸60kg，稍加攪拌使酸液與濕菌泥充分混勻，通入熱水加熱，并攪拌，控制溫度70°C， 裂解反應(yīng)50min。反應(yīng)結(jié)束后迅速釋放熱水浴，并通入冷卻水使反應(yīng)釜內(nèi)的溫度降至室溫。
[0281] B、萃取
[0282] 向反應(yīng)釜內(nèi)加入100L石油醚，按實施例2所述的步驟進行萃取及有機溶劑循環(huán)利 用操作。
[0283] C、廢酸的循環(huán)利用
[0284] C1、第一次循環(huán)利用：以濕菌泥:步驟B中剩余的廢酸的質(zhì)量比= 1:1.3的比例稱取 含水率90%的濕菌泥73.8kg加入反應(yīng)釜中，攪拌混勻。將減壓蒸餾后的熱水經(jīng)水浴加熱槽 再加熱后通入反應(yīng)釜夾層，控制溫度75°C，攪拌處理60min后重復(fù)步驟B。
[0285] C2、第二次循環(huán)利用：以濕菌泥：步驟C1中剩余的廢酸的質(zhì)量比= 1:1.5的比例稱 取含水率90%的濕菌泥162.5kg加入反應(yīng)釜中，攪拌混勻。將減壓蒸餾后的熱水經(jīng)水浴加熱 槽再加熱后通入反應(yīng)釜夾層，控制溫度90°C，攪拌處理90min后重復(fù)步驟B。
[0286] C3、第三次循環(huán)利用：以濕菌泥:步驟C2中剩余的廢酸的質(zhì)量比= 1:2的比例稱取 含水率90%的濕菌泥205.8kg加入反應(yīng)釜中，攪拌混勻。將減壓蒸餾后的熱水經(jīng)水浴加熱槽 再加熱后通入反應(yīng)釜夾層，控制溫度90°C，攪拌處理90min后重復(fù)步驟B。
[0287] 收集所提取的四個批次的毛油并稱重，共得到30.6kg毛油。毛油經(jīng)本領(lǐng)域公知的 技術(shù)進行脫臭-堿煉-脫色處理得到精煉油。與Bligh-Dyer法相比本方法最終獲得油脂的相 對提取率為109.6±2· 3%。
[0288] 實施例18
[0289] 本實施例所用菌種為高山被抱霉Mortierella alpina ATCC 16266。
[0290] 種子液培養(yǎng)：以30g//L葡萄糖、10g/L酵母提取物、0.1g/L磷酸二氫鉀、O.lg/l硫酸 鎂為種子液培養(yǎng)基，pH=6.5-7.0，在28°C、120rpm的搖床中培養(yǎng)，制備種子液。
[0291] 發(fā)酵培養(yǎng)：以60g/L葡萄糖、20g/L酵母膏、2g//L磷酸二氫鉀、0.5g/L硫酸鎂為發(fā)酵 培養(yǎng)基，于發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵溫度28°C、轉(zhuǎn)速150rpm，期間補糖3次，共培養(yǎng)12天。
[0292] 提取油脂的工藝步驟如下：
[0293] A、裂解破壁
[0294] 將培養(yǎng)好的發(fā)酵液經(jīng)過離心獲得濕菌泥，稱取50千克含水率90 %的濕菌泥加入反 應(yīng)釜中，按濕菌泥:濃鹽酸的質(zhì)量比=1:1.5的比例向反應(yīng)釜中加入質(zhì)量濃度為37%的濃鹽 酸75kg，稍加攪拌使酸液與濕菌泥充分混勻，通入熱水加熱，并攪拌，控制溫度70°C，裂解反 應(yīng)lOmin。反應(yīng)結(jié)束后迅速釋放熱水浴，并通入冷卻水使反應(yīng)釜內(nèi)的溫度降至室溫。
[0295] B、萃取
[0296]向反應(yīng)釜內(nèi)加入100L正己烷，按實施例2所述的步驟進行萃取及有機溶劑循環(huán)利 用操作。
[0297] C、廢酸的循環(huán)利用
[0298] C1、第一次循環(huán)利用：以濕菌泥:步驟B中剩余的廢酸的質(zhì)量比= 1:3.3的比例稱取 含水率90%的濕菌泥36.4kg加入反應(yīng)釜中，攪拌混勻。將減壓蒸餾后的熱水經(jīng)水浴加熱槽 再加熱后通入反應(yīng)釜夾層，控制溫度90°C，攪拌處理30min后重復(fù)步驟B。
[0299] C2、第二次循環(huán)利用：以濕菌泥:步驟C1中剩余的廢酸的質(zhì)量比= 1:1的比例稱取 含水率90 %的濕菌泥152.7kg加入反應(yīng)釜中，攪拌混勻。將減壓蒸餾后的熱水經(jīng)水浴加熱槽 再加熱后通入反應(yīng)釜夾層，控制溫度90°C，攪拌處理90min后重復(fù)步驟B。
[0300] C3、第三次循環(huán)利用：以濕菌泥:步驟C2中剩余的廢酸的質(zhì)量比= 1:2的比例稱取 含水率90 %的濕菌泥145.1 kg加入反應(yīng)釜中，攪拌混勻。將減壓蒸餾后的熱水經(jīng)水浴加熱槽 再加熱后通入反應(yīng)釜夾層，控制溫度90°C，攪拌處理90min后重復(fù)步驟B。
[0301] D、制備副產(chǎn)物
[0302]萃取結(jié)束后將步驟C3剩余的廢酸液取出用活性炭吸附脫色，存于廢酸液槽中，在 攪拌過程中加入石灰石，制備氯化鈣。
[0303]收集所提取的四個批次的毛油并稱重，共得到15.5kg毛油。毛油經(jīng)本領(lǐng)域公知的 技術(shù)進行脫臭-堿煉-脫色處理得到精煉油。通過Bligh-Dyer法測得的細胞總脂含量為36.3 ± 1.7%，與B1 igh-Dyer法相比本方法最終獲得油脂的相對提取率為111. 3± 1.8%。
【主權(quán)項】
1. 一種從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特征在于包括如下工藝 步驟： A、 裂解破壁 將含有產(chǎn)油微生物的發(fā)酵液經(jīng)固液分離后得到含水質(zhì)量百分含量為70-90%的濕菌 泥，向濕菌泥中加入裂解液，升溫裂解破壁后將反應(yīng)物冷卻，所述的裂解液選用濃鹽酸、濃 硫酸或濃磷酸中的一種； B、 萃取精煉 向步驟A中冷卻后的反應(yīng)物中加入有機溶劑后得到有機相和廢酸水相，將有機相經(jīng)過 濾后減壓蒸餾獲得毛油和有機溶劑蒸汽，將毛油精煉得到精煉油； C、 廢酸的循環(huán)利用 將步驟B中產(chǎn)生的廢酸液作為裂解液循環(huán)利用到步驟A中。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特征 在于所述的步驟A中濕菌泥:裂解液的質(zhì)量比=1:0.6-10。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特征 在于所述的步驟A中升溫裂解的條件為溫度40-120°C，時間10-100分鐘。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特征 在于各工藝步驟的工藝條件如下： A、 裂解破壁 將經(jīng)過培養(yǎng)的產(chǎn)油微生物發(fā)酵液經(jīng)固液分離得到含水質(zhì)量百分含量為70-90%的濕菌 泥，按濕菌泥:裂解液的質(zhì)量比= 1:1-4.5的比例向濕菌泥中加入裂解液，在40-80°C下反應(yīng) 進行10-90分鐘裂解破壁后將反應(yīng)物冷卻，裂解液選用質(zhì)量百分比濃度為37%的濃鹽酸； B、 萃取精煉 向步驟A中冷卻后的反應(yīng)物中加入有機溶劑后得到有機相和廢酸水相，將有機相經(jīng)過 濾后減壓蒸餾獲得毛油和有機溶劑蒸汽，將毛油精煉得到精煉油； C、 廢酸的循環(huán)利用 C1、第一次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比=1:1.3-3.3向濕菌泥中加入步驟B剩余 的廢酸液，在40_90°C下進行裂解破壁反應(yīng)10-90分鐘后重復(fù)步驟B; C2、第二次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:1-2.5向濕菌泥中加入步驟C1剩余 的廢酸液，在50_90°C下進行裂解破壁反應(yīng)20-90分鐘后重復(fù)步驟B; C3、第三次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:1.5-2向濕菌泥中加入步驟C2剩余 的廢酸液，在75-90°C下進行裂解破壁反應(yīng)60-90分鐘后重復(fù)步驟B。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特征 在于各工藝步驟的工藝條件如下： A、 裂解破壁 將經(jīng)過培養(yǎng)的產(chǎn)油微生物發(fā)酵液經(jīng)固液分離得到含水質(zhì)量百分含量為70-90%的濕菌 泥，按濕菌泥:裂解液的質(zhì)量比= 1:0.6-1的比例向濕菌泥中加入裂解液，在40-70°C下反應(yīng) 進行10-90分鐘裂解破壁后將反應(yīng)物冷卻，裂解液選用質(zhì)量百分比濃度為98%的濃硫酸； B、 萃取精煉 向步驟A中冷卻后的反應(yīng)物中加入有機溶劑后得到有機相和廢酸水相，將有機相經(jīng)過 濾后減壓蒸餾獲得毛油和有機溶劑蒸汽，將毛油精煉得到精煉油； C、廢酸的循環(huán)利用 C1、第一次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比=1:2-3.5向濕菌泥中加入步驟B剩余的 廢酸液，在40-90°C下進行裂解破壁反應(yīng)10-90分鐘后重復(fù)步驟B; C2、第二次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:1.5-2.5向濕菌泥中加入步驟C1剩 余的廢酸液，在50_90°C下進行裂解破壁反應(yīng)20-90分鐘后重復(fù)步驟B; C3、第三次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:0.8-1.5向濕菌泥中加入步驟C2剩 余的廢酸液，在75-90°C下進行裂解破壁反應(yīng)60-90分鐘后重復(fù)步驟B。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特征 在于各工藝步驟的工藝條件如下： A、 裂解破壁 將經(jīng)過培養(yǎng)的產(chǎn)油微生物發(fā)酵液經(jīng)固液分離得到含水質(zhì)量百分含量為70-90%的濕菌 泥，按濕菌泥:裂解液的質(zhì)量比= 1:4.5-10的比例向濕菌泥中加入裂解液，在70-120°C下反 應(yīng)進行20-100分鐘裂解破壁后將反應(yīng)物冷卻，裂解液選用質(zhì)量百分比濃度為85%的濃磷 酸； B、 萃取精煉 向步驟A中冷卻后的反應(yīng)物中加入有機溶劑后得到有機相和廢酸水相，將有機相經(jīng)過 濾后減壓蒸餾獲得毛油和有機溶劑蒸汽，將毛油精煉得到精煉油； C、 廢酸的循環(huán)利用 C1、第一次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:4-12向濕菌泥中加入步驟B剩余的 廢酸液，在90-120°C下進行裂解破壁反應(yīng)50-100分鐘后重復(fù)步驟B; C2、第二次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:2-4向濕菌泥中加入步驟C1剩余的 廢酸液，在90-120°C下進行裂解破壁反應(yīng)70-100分鐘后重復(fù)步驟B; C3、第三次循環(huán)利用：按濕菌泥:廢酸液質(zhì)量比= 1:1-2.5向濕菌泥中加入步驟C2剩余 的廢酸液，在100_120°C下進行裂解破壁反應(yīng)90-100分鐘后重復(fù)步驟B。7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方 法，其特征在于所述的步驟A中產(chǎn)油微生物選自微藻、酵母菌、霉菌。8. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方 法，其特征在于所述的步驟A中固液分離方法選用絮凝沉淀、過濾、離心、膜脫水的一種或其 結(jié)合。9. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方 法，其特征在于在步驟A后還包括一步驟A1，該步驟是將步驟A中升溫用的熱量循環(huán)利用到 步驟B的減壓蒸餾中。10. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于所述步驟B中減壓蒸餾的溫度為35-75°C。11. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于所述的步驟B中有機溶劑選用正己烷、石油醚、6號溶劑中的一種或其結(jié) 合。12. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于所述的步驟B所述有機相過濾時使用孔徑為0.5-30微米的有機系濾膜、 陶瓷濾膜或砂板濾器。13. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于在步驟B后還包括一步驟B1，該步驟是將步驟B中的有機溶劑蒸汽經(jīng)加 壓冷凝液化形成有機溶劑，循環(huán)利用到步驟B的萃取中。14. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于步驟C中廢酸液的質(zhì)量百分比濃度不低于4%。15. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于在步驟C后還包括一步驟D，該步驟是將步驟C中的循環(huán)利用后剩余的廢 酸液經(jīng)脫色后用于制取副產(chǎn)物。16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特 征在于在步驟D中的廢酸液脫色采用吸附法，吸附劑選用活性炭、膨潤土、活性白土、硅藻 土、硅膠中的一種或其結(jié)合。17. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法，其特 征在于所述的步驟D中制取副產(chǎn)物為向脫色后的廢酸液中加入生石灰、石灰石或石灰乳用 于制備氯化鈣、硫酸鈣、磷酸鈣、磷酸二氫鈣。18. 根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任一項所述的從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂 的方法，其特征在于所述的步驟B中毛油精煉依次包括脫色、堿煉、脫臭處理。
【專利摘要】本發(fā)明屬于油脂的提取方法，特別是指一種從含有產(chǎn)油微生物細胞的發(fā)酵液中提取油脂的方法。包括裂解破壁、萃取精煉、廢酸的循環(huán)利用等工藝步驟。本發(fā)明解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的廢酸處理成本高、酸利用率低、破壁效果差、油脂提取率低等問題，具有油脂提取率高、原料成本和廢酸處理成本低、有效降低了能耗等優(yōu)點。
【IPC分類】C11B1/00, C11B1/10, C11B3/12
【公開號】CN105505555
【申請?zhí)枴緾N201610059892
【發(fā)明人】姜悅, 陳 峰, 陳璇, 柳澤深
【申請人】潤科生物工程（福建）有限公司
【公開日】2016年4月20日
【申請日】2016年1月28日