一種聚螯合樹脂去除銅離子的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及一種聚螯合樹脂去除銅離子的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]肝素系自豬或牛的腸黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬黏多糖類物質(zhì)。具有六糖或八糖重復(fù)單位的線性鏈條結(jié)構(gòu)，其分子量在3000~37000之間，平均分子量15000左右，肝素具有抗凝、抗炎、抗過敏、抗病毒、抗癌、調(diào)節(jié)血脂等多種藥理活性，但長期使用則可能產(chǎn)生某些不良反應(yīng)，如出血和誘導(dǎo)血小板減少等。低分子肝素(lowmolecular weightheparin,LMWH)是肝素分級或降解而得到的分子質(zhì)量較小的片段。近10年來。人們對低分子肝素的研究發(fā)現(xiàn)，其抗血栓作用優(yōu)于肝素，具有生物利用度高、體內(nèi)半衰期長、出血傾向小，口服易吸收等特點。由于低分子肝素有效性和安全性均優(yōu)于普通肝素，目前已成為肝素類藥物研究的熱點。
[0003]目前市場上低分子肝素鈉的制備方法主要是化學(xué)裂解法和酶解法，化學(xué)裂解法主要是由消除法、亞硝酸降解法，過氧化氫降解法、酸降解法和射線降解法等，其中過氧化氫降解法降解肝素過程中需要添加銅離子作為催化劑參與降解反應(yīng)，這就涉及到銅這一金屬離子的去除，傳統(tǒng)工藝上都是采用陽離子交換樹脂進行這些方法操作過程中反應(yīng)比較劇烈，吸附過程中pH約為2左右，在這種pH條件下容易使得低分子肝素末端的基團產(chǎn)生破壞，造成低分子肝素鈉的生物活性單位或多或少的改變，從而有可能導(dǎo)致整個產(chǎn)品的不穩(wěn)定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種聚螯合樹脂去除銅離子的方法，旨在解決傳統(tǒng)工藝上采用陽離子交換樹脂操作過程中反應(yīng)比較劇烈，吸附中pH較低使低分子肝素末端的基團產(chǎn)生破壞，造成低分子肝素鈉的生物活性單位改變，導(dǎo)致整個產(chǎn)品的不穩(wěn)定的問題。
[0005]本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，一種聚螯合樹脂去除銅離子的方法，以精品肝素鈉為原料，經(jīng)降解后所得降解液，降解液使用聚螯合樹脂進行銅離子的去除;該方法包括:
步驟一，將精品肝素鈉溶解為5%_10%濃度的溶液，調(diào)節(jié)料液pH值7.0-8.0、加入整個溶液體積的0.5%-1.0%的乙酸銅，溫度40-60°C，加入整個溶液體積的1.0%-2.0%的過氧化氫，整個降解時間為18-24h，整個反應(yīng)期間控制溫度、pH值，間歇攪拌；
步驟二，反應(yīng)完成后，加入降解液2-3倍藥用乙醇，充分?jǐn)嚢璧闷涑恋砦?，通過液相檢測主要分子量分布在4000-6000，分子量小于3000的組分不大于30%，3000-8000的組分在50%和60%之間；
將降解沉淀物溶解為10%濃度的溶液，調(diào)節(jié)料液pH值5.0-8.0、溫度20-30°C，將料液加入已處理好的聚螯合樹脂柱，用天青A指示液檢測下排液是否有料液流出，收集下排液，檢測下排液的pH值顯示為:6.5-8.0，收集完成后，加入整個料液2%的NaCL，待完全溶解后，加入料液2-3倍藥用乙醇，攪拌沉淀； 步驟三，沉淀物送檢銅含量。
[0006]進一步，所述整個溶液體積的0.5%-1.0%的乙酸銅中0.5%_1.0%為質(zhì)量體積比W /V，所述整個溶液體積的1.0%-2.0%的過氧化氫中1.0%-2.0%為體積比V/V。
[0007]進一步，所述步驟二中樹脂柱高度大于80cm，直徑為3-5cm，用純化水進行沖洗，下排液的pH值為:7.0-8.0。
[0008]進一步，所述步驟二中天青A指示液與肝素類下排溶液反應(yīng)顯示紅色。
[0009]本發(fā)明與現(xiàn)有工藝相比，優(yōu)點和有益效果在于:
1)利用肝素鈉為原料，在銅離子的催化作用下，利用過氧化氫進行降解成為低分子肝素鈉，而最終產(chǎn)品中銅離子作為一種引入雜質(zhì)，必須去除。傳統(tǒng)工藝中銅離子去除都是采用強酸性苯乙烯陽離子交換樹脂進行，料液通過強酸性苯乙烯陽離子交換樹脂時，pH約為1-2左右，該條件下容易使得肝素末端的基團產(chǎn)生破壞，造成低分子肝素鈉的生物活性改變或是被破壞，從而導(dǎo)致療效降低。而使用本發(fā)明所提到的聚螯合樹脂，整個吸附出除過程中的pH約為5.0-8.0，使用其官能基對其銅離子進行吸附，條件溫和，效果顯著。
[0010]2)本發(fā)明中的聚螯合樹脂，是由苯氛交叉鍵結(jié)合成而來，具有螯合官能基，可以在pH比較溫和的條件下進行吸附銅離子，同時可以使用0.1M的鹽酸和0.1M氫氧化鈉溶液進行循環(huán)沖洗進行再生反應(yīng)，使其吸附的銅離子與聚螯合樹脂脫離;而強酸性苯乙烯陽離子交換樹脂進行再生處理時則需要的鹽酸和氫氧化鈉的濃度最低為0.5M，這一優(yōu)勢不但節(jié)約生產(chǎn)成本，同時降低環(huán)境破壞。
[0011]本發(fā)明解決了傳統(tǒng)工藝上采用強酸性苯乙烯性陽離子交換樹脂操作過程中反應(yīng)比較劇烈，吸附中pH較低使低分子肝素末端的基團產(chǎn)生破壞，造成低分子肝素鈉的生物活性單位改變，導(dǎo)致整個產(chǎn)品的不穩(wěn)定的問題。
【附圖說明】
[0012]圖1是本發(fā)明實施例提供的聚螯合樹脂去除銅離子的方法流程圖。
[0013]
【具體實施方式】
[0014]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0015]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的應(yīng)用原理作進一步描述。
[0016]如圖1所示，本發(fā)明實施例的聚螯合樹脂去除銅離子的方法，以精品肝素鈉為原料，經(jīng)降解后所得降解液，降解液使用聚螯合樹脂進行銅離子的去除;該方法包括:
S101:將精品肝素鈉溶解為5%-10%濃度的溶液，調(diào)節(jié)料液pH值7.0-8.0、加入整個溶液體積的0.5%-1.0%的乙酸銅，溫度40-60°C，加入整個溶液體積的1.0%-2.0%的過氧化氫，整個降解時間為18_24h，整個反應(yīng)期間控制溫度、pH值，間歇攪拌；
S102:反應(yīng)完成后，加入降解液2-3倍藥用乙醇，充分?jǐn)嚢璧闷涑恋砦?，通過液相檢測主要分子量分布在4000-6000，分子量小于3000的組分不大于30%，3000-8000的組分在50%和60%之間； 將降解沉淀物溶解為10%濃度的溶液，調(diào)節(jié)料液pH值5.0-8.0、溫度20-30°C，將料液緩慢加入已處理好的聚螯合樹脂柱，用天青A指示液檢測下排液是否有料液流出，收集下排液，檢測下排液的pH值顯示為:6.5-8.0，收集完成后，加入整個料液2%的NaCL，待完全溶解后，加入料液2-3倍藥用乙醇，攪拌沉淀；
S103:沉淀物送檢銅含量。
[0017]所述整個溶液體積的0.5%_1.0%的乙酸銅中0.5%_1.0%為質(zhì)量體積比W /V，所述整個溶液體積的1.0%-2.0%的過氧化氫中1.0%-2.0%為體積比V/V。
[0018]所述步驟二中樹脂柱高度大于80cm，直徑為3-5cm，用純化水進行沖洗，下排液的pH 值為:7.0-8.0ο
[0019]所述步驟二中天青Α指示液與肝素類下排溶液反應(yīng)顯示紅色。
[0020]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的應(yīng)用原理作進一步描述:
實施例一
向lkg精品肝素鈉(東營天東制藥有限公司，效價175usp/mg)加入900ml純化水