清液，達到進一步脫色和脫腥的目的； (5) 成品：將步驟（4)的膠原蛋白清液，蒸發(fā)濃縮至原體積10%，冷凍干燥得到魚膠原蛋 白成品。
[0012] 實施例4 (1) 原料預處理：將魚骨放入高溫反應容器中，120°c高溫干燥處理25min ; (2) 粉碎處理：將干燥魚骨進行放入圓盤式超音速氣流研磨粉碎機，處理時間為6min， 成40目的魚骨粉； (3) 膠原蛋白的提取：在密閉容器中加入魚骨粉體積20倍蒸餾水攪拌均勻，加入乙酸 溶液調整pH值為3,加入魚骨粉質量0. 05%胃蛋白酶37°C反應3h，降溫到15°C去除乙酸，然 后加入魚骨粉質量0. 05%的中性蛋白酶進行酶解，酶解溫度為50 °C，酶解時間3h，然后85 °C 攪拌40分鐘滅酶，得到魚膠原蛋白粗提液； (4) 脫色、脫腥：將魚膠原蛋白粗提液加入活性炭攪拌40分鐘，然后濾液經(jīng)活性碳過濾 器得到澄清透明的魚膠原蛋白清液，達到進一步脫色和脫腥的目的； (5) 成品：將步驟（4)的膠原蛋白清液，蒸發(fā)濃縮至原體積20%，冷凍干燥得到魚膠原蛋 白成品。
[0013] 實施例5 (1) 原料預處理：將魚骨放入高溫反應容器中，125°C高溫干燥處理25min ; (2) 粉碎處理：將干燥魚骨進行放入圓盤式超音速氣流研磨粉碎機，處理時間為8min， 成100目的魚骨粉； (3) 膠原蛋白的提?。涸诿荛]容器中加入魚骨粉體積25倍蒸餾水攪拌均勻，加入乙酸 溶液調整pH值為4,加入魚骨粉質量0. 1%胃蛋白酶37°C反應4h，降溫到15°C去除乙酸，然 后加入魚骨粉質量0. 1%的中性蛋白酶進行酶解，酶解溫度為55°C，酶解時間4h，然后90°C 攪拌45分鐘滅酶，得到魚膠原蛋白粗提液； (4) 脫色、脫腥：將魚膠原蛋白粗提液加入活性炭攪拌40分鐘，然后濾液經(jīng)活性碳過濾 器得到澄清透明的魚膠原蛋白清液，達到進一步脫色和脫腥的目的； (5) 成品：將步驟（4)的膠原蛋白清液，蒸發(fā)濃縮至原體積15%，冷凍干燥得到魚膠原蛋 白成品。
[0014] 實施例6 (1)原料預處理：將魚骨放入高溫反應容器中，130°c高溫干燥處理25min ; (2) 粉碎處理：將干燥魚骨進行放入圓盤式超音速氣流研磨粉碎機，處理時間為 lOmin，成180目的魚骨粉； (3) 膠原蛋白的提?。涸诿荛]容器中加入魚骨粉體積30倍蒸餾水攪拌均勻，加入乙酸 溶液調整pH值為5,加入魚骨粉質量0. 15%胃蛋白酶37°C反應5h，降溫到15°C去除乙酸，然 后加入魚骨粉質量0. 15%的中性蛋白酶進行酶解，酶解溫度為60 °C，酶解時間5h，然后95 °C 攪拌50分鐘滅酶，得到魚膠原蛋白粗提液； (4) 脫色、脫腥：將魚膠原蛋白粗提液加入活性炭攪拌50分鐘，然后濾液經(jīng)活性碳過濾 器得到澄清透明的魚膠原蛋白清液，達到進一步脫色和脫腥的目的； (5) 成品：將步驟（4)的膠原蛋白清液，蒸發(fā)濃縮至原體積10%，冷凍干燥得到魚膠原蛋 白成品。
[0015] 實施例7 對于蛋白酶的加入順序和加入量，發(fā)明人是有做過摸索與分析，發(fā)明人以反加入胃蛋 白酶和中性蛋白酶的順序、濃度不同為變量(參見表1~2)，并通過如下公式計算提取率， 確定最佳實驗條件。
[0016] 表1為優(yōu)先加入中性蛋白酶，后加入胃蛋白酶
表2為優(yōu)先加入胃蛋白酶，后加入中性蛋白酶
由表1~2可知，當優(yōu)先加入中性蛋白酶反應后，加入乙酸調整pH值到3,再加入胃蛋白 酶后，提取效果最好，提取率最高。在上述條件下，提取得到的膠原蛋白制品色澤潔白、無異 味。
[0017] 以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非是對本發(fā)明作其它形式的限制，任 何熟悉本專業(yè)的技術人員可能利用上述揭示的技術內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等 效實施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術實質對以上實施例所 作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術方案的保護范圍。
【主權項】
1. 一種魚骨膠原蛋白的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟： (1) 原料預處理：將魚骨放入高溫反應容器中進行高溫干燥處理； (2) 粉碎處理：將干燥魚骨進行放入研磨粉碎機處理成40~180目的魚骨粉； (3 )膠原蛋白的提?。涸诿荛]容器中加入魚骨粉20~30倍蒸餾水攪拌均勻，進行酶解， 再滅酶，得到魚膠原蛋白粗提液； (4) 脫色、脫腥：將魚膠原蛋白粗提液加入活性炭攪拌40~50min，過濾得到膠原蛋白 清夜； (5) 成品：將步驟（4)的膠原蛋白清液，蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥得到魚膠原蛋白成品。2. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1)中將魚骨放在120~130°C高 溫反映容器中干燥處理25min。3. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2)中采用圓盤式超音速氣流研磨 粉碎機處理時間為6~lOmin，處理成40~180目魚骨粉。4. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3)中加入蒸餾水為魚骨粉體積 20~30倍，加入酶占魚粉質量的0. 05~0. 15%。5. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶為中性蛋白酶和胃蛋白酶， 反應步驟：加入中性蛋白酶進行酶解，酶解溫度為50~60°C，酶解時間3~5h，然后加入乙 酸溶液調整pH值為3~5,加入胃蛋白酶37°C反應3~5h，降溫到15°C結晶去除乙酸，然 后85~95°C攬摔40~50min滅酶。6. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3)中加入乙酸去除腥味，步驟（4) 中加入活性炭攪拌40~60min脫腥、脫色。7. 如權利要求1所述的方法，其特征是：所用魚體廢棄物為魚骨。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種魚骨膠原蛋白的制備方法，包括如下步驟：（1）原料預處理：將魚骨進行快速高溫干燥，防止營養(yǎng)流失；（2）粉碎處理：將干燥魚骨進行研磨處理成40～180目的魚骨粉；（3）膠原蛋白的提取：將魚骨粉進行酶解，再滅酶，得到魚膠原蛋白粗提液；（4）將上述步驟中得到的膠原蛋白粗提液進行脫色、脫腥、干燥得到膠原蛋白。本工藝提取簡單方便、綠色環(huán)保，將魚骨變成有營養(yǎng)成分的食品，完整的保留了有效成分的生物活性，所獲得的膠原蛋白產(chǎn)品質量好。
【IPC分類】C12P21/06, C07K1/14, C07K14/78
【公開號】CN105316382
【申請?zhí)枴緾N201510931401
【發(fā)明人】李國深
【申請人】李國深
【公開日】2016年2月10日
【申請日】2015年12月15日