130bp、132bp、142bp、144bp和162bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為阿壩；如果得到 124bp、126bp、128bp、136bp、138bp、140bp、142bp和160bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選 為丹麥444 ;如果得到120bp、122bp、138bp、140bp和156bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選 為鋒利；如果得到124bp、126bp、128bp、130bp、132bp、142bp、144bp和168bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、 待測(cè)草種為或候選為青引2號(hào)；如果得到122bp、124bp、126bp、140bp、142bp和156bp的擴(kuò) 增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為蘇聯(lián)；如果得到130bp、132bp、140bp、142bp和160bp的擴(kuò)增產(chǎn) 物、待測(cè)草種為或候選為青引1號(hào)；如果得到130bp、132bp、140bp、142bp和158bp的擴(kuò)增產(chǎn) 物、待測(cè)草種為或候選為隴燕3號(hào)；如果得到124bp、126bp、130bp、132bp、142bp、144bp和 160bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為青早1號(hào)；如果均不能獲得擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為 或候選為哈爾滿； (a6)采用權(quán)利要求1中所述引物對(duì)P06進(jìn)行PCR擴(kuò)增：如果得到138bp和140bp的擴(kuò) 增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為馬匹牙；如果得到138bp、140bp、142bp、144bp和146bp的擴(kuò)增 產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為阿壩；如果得到142bp、144bp、146bp、148bp、150bp和152bp的擴(kuò) 增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為丹麥444 ;如果得到148bp和150bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為 或候選為鋒利、青引2號(hào)、蘇聯(lián)、青引1號(hào)或隴燕3號(hào)；如果得到156bp和158bp的擴(kuò)增產(chǎn) 物、待測(cè)草種為或候選為哈爾滿；如果得到146bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選 為青早1號(hào)。3.-種用于鑒定待測(cè)草種為或候選為哪種燕麥國審品種的方法，包括如下步驟：以待 測(cè)草種的基因組DNA為模板，分別采用六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以丹麥444的基因組DNA 為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以鋒利的基因組DNA為模板，分別采用所 述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以哈爾滿的基因組DNA為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行 PCR擴(kuò)增；以馬匹牙的基因組DNA為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以青引1 號(hào)的基因組DNA為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以青引2號(hào)的基因組DNA 為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以青早1號(hào)的基因組DNA為模板，分別采 用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以蘇聯(lián)的基因組DNA為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn) 行PCR擴(kuò)增；以隴燕3號(hào)的基因組DNA為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；以 阿壩的基因組DNA為模板，分別采用所述六個(gè)引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增；所述六個(gè)引物對(duì)為引物 對(duì)P01、引物對(duì)P02、引物對(duì)P03、引物對(duì)P04、引物對(duì)P05和引物對(duì)P06 ;然后按照如下標(biāo)準(zhǔn) 進(jìn)行判斷： (bl)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與丹麥444采用所述六個(gè)引物 對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為丹麥444 ; (b2)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與鋒利采用所述六個(gè)引物對(duì)的 擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為鋒利； (b3)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與哈爾滿采用所述六個(gè)引物對(duì) 的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為哈爾滿； (b4)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與馬匹牙采用所述六個(gè)引物對(duì) 的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為馬匹牙； (b5)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與青引1號(hào)采用所述六個(gè)引物 對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為青引1號(hào)； (b6)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與青引2號(hào)采用所述六個(gè)引物 對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為青引2號(hào)； (b7)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與青早1號(hào)采用所述六個(gè)引物 對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為青早1號(hào)； (b8)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與蘇聯(lián)采用所述六個(gè)引物對(duì)的 擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為蘇聯(lián)； (b9)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與隴燕3號(hào)采用所述六個(gè)引物 對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為隴燕3號(hào)； (blO)如果待測(cè)草種采用所述六個(gè)引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物均與阿壩采用所述六個(gè)引物對(duì)的 擴(kuò)增產(chǎn)物一致，待測(cè)草種為阿壩。4. 一種用于鑒定待測(cè)草種為或候選為哪種燕麥國審品種的方法，包括如下步驟： 以待測(cè)草種的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1中所述引物對(duì)P04進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然 后按照如下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷： (cl)如果得到132bp、136bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為馬匹牙； (c2)如果得到140bp、142bp、148bp和150bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為阿壩；(c3)如果得到136bp、140bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為丹麥444 ; (c4)如果得到146bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為鋒利； (c5)如果得到144bp、148bp和152bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為青引2號(hào)； (c6)如果得到142bp和146bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為蘇聯(lián)； (c7)如果得到140bp、144bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為青引1號(hào)； (c8)如果得到142bp、144bp、146bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為哈爾 滿； (c9)如果得到134bp、144bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為隴燕3號(hào)； (cl〇)如果得到144bp和148bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為青早1號(hào)。5. -種用于鑒定待測(cè)草種為或候選為哪種燕麥國審品種的方法，包括如下步驟： 以待測(cè)草種的基因組DNA為模板，采用權(quán)利要求1中所述引物對(duì)P05進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然 后按照如下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷： (dl)如果得到120bp、122bp、142bp、144bp和150bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為 馬匹牙； ((12)如果得到12你口、126匕口、128匕口、13(^口、132匕口、142匕口、14你口和162匕口的擴(kuò)增產(chǎn)物、 待測(cè)草種為或候選為阿壩； ((13)如果得到12你口、126匕口、128匕口、136匕口、138匕口、14(^口、142匕口和16(^口的擴(kuò)增產(chǎn)物、 待測(cè)草種為或候選為丹麥444 ; (d4)如果得到120bp、122bp、138bp、140bp和156bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為 鋒利； ((15)如果得到12你？、126&?、128&?、13(^?、132&?、142&?、14你？和168&?的擴(kuò)增產(chǎn)物、 待測(cè)草種為或候選為青引2號(hào)； (d6)如果得到122bp、124bp、126bp、140bp、142bp和156bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或 候選為蘇聯(lián)； (d7)如果得到130bp、132bp、140bp、142bp和160bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為 青弓I1號(hào)； (d8)如果得到130bp、132bp、140bp、142bp和158bp的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為 隴燕3號(hào)； ((19)如果得到12你口、126&口、13(^口、132&口、142&口、14你口和16(^口的擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草 種為或候選為青早1號(hào)； (dlO)如果沒有得到擴(kuò)增產(chǎn)物、待測(cè)草種為或候選為哈爾滿。6. 如權(quán)利要求2至5任一所述的方法，其特征在于：所述方法中，通過電泳檢測(cè)所述 PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。7. 含有權(quán)利要求1所述引物組的試劑盒；所述試劑盒的功能為檢測(cè)待測(cè)草種是否為或 候選為飼用燕麥國審品種。8. 權(quán)利要求7所述試劑盒的制備方法，包括將權(quán)利要求1所述引物組中的各條引物分 別單獨(dú)包裝的步驟。9. 權(quán)利要求1所述引物組或權(quán)利要求7所述試劑盒在檢測(cè)待測(cè)草種是否為或候選為飼 用燕麥國審品種中的應(yīng)用。10. 如權(quán)利要求1所述引物組、權(quán)利要求2至6任一所述的方法、權(quán)利要求7所述試劑 盒、或、權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于：所述飼用燕麥國審品種為丹麥444、鋒利、哈爾 滿、馬匹牙、青引1號(hào)、青引2號(hào)、青早1號(hào)、蘇聯(lián)、隴燕3號(hào)或阿壩。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鑒定待測(cè)草種為或候選為哪種飼用燕麥國審品種方法及其專用引物組。本發(fā)明所提供的引物組，為如下(e1)、(e2)、(e3)或(e4)中的任一種：(e1)引物對(duì)P04；(e2)由引物對(duì)P01、引物對(duì)P02、引物對(duì)P03、引物對(duì)P04、引物對(duì)P05和引物對(duì)P06組成；(e3)引物對(duì)P05；(e4)引物對(duì)P01、引物對(duì)P02、引物對(duì)P03、引物對(duì)P06或由下述六個(gè)引物對(duì)中的任五對(duì)、任四對(duì)、任三對(duì)、任兩對(duì)組成：引物對(duì)P01、引物對(duì)P02、引物對(duì)P03、引物對(duì)P04、引物對(duì)P05和引物對(duì)P06。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明所提供的方法可以檢測(cè)待測(cè)草種是否為飼用燕麥國審品種。
【IPC分類】C12Q1/68, C12N15/11
【公開號(hào)】CN105296482
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510870817
【發(fā)明人】高秋, 馬金星, 馮葆昌, 孫娟, 王芳, 張義, 李存福, 李玉榮, 齊曉, 劉芳, 屠德鵬, 王梅娟, 閆敏, 何珊珊, 馬鳴
【申請(qǐng)人】全國畜牧總站
【公開日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2015年12月2日