咪唑并吡啶-6-甲酰-氨基酸芐酯，其合成，活性及應(yīng)用
【專利說明】咪畦并化惦-6-甲醜-氨基酸節(jié)醋，其合成，活性及應(yīng)用 發(fā)明領(lǐng)域
[OOOU本發(fā)明涉及3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl，涉及它的 制備，涉及它對腫瘤細胞增殖的抑制作用，涉及它對腫瘤生長的抑制作用，進一步涉及它的 抗血栓活性。本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥是一組可影響身體任何部位的多種疾病的通稱。使用的其它術(shù)語為惡性腫瘤 和賞生物。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，癌癥是世界上的頭號死因之一，尤其是在發(fā)展中國家。而 全世界癌癥死亡人數(shù)預(yù)計將繼續(xù)上升，到2030年將超過1310萬。因此，開發(fā)新的高效，低 毒，毒副作用小的抗腫瘤藥物一直是新藥研究的重要課題之一。
[0003] 隨著對腫瘤特性和發(fā)病本質(zhì)的認識，發(fā)明人曾經(jīng)公開下式代表的3H-咪哇并[4， 5-C]化巧-6-甲醜-AA-OBzl(其中AA代表甘氨基酸或其它k氨基酸殘基）在1Umol/kg劑量下顯示良好的抗腫瘤活性。通過進一步研究發(fā)明人認識到，在3H-咪哇并[4, 5-C]化 巧-6-甲醜-AA-OBzl的6-甲醜基和AA-OBzl基之間插入妒-N〇2-Arg殘基，不僅可W延緩 它的代謝達到提高抗腫瘤活性的目的，而且可W增加抗血栓活性。血栓是危害腫瘤患者預(yù) 后的并發(fā)癥。通過送種修飾，獲得具有抗腫瘤和抗血栓雙重活性的化合物，具有良好的臨床 應(yīng)用前景。根據(jù)送些認識，發(fā)明人提出了本發(fā)明。
[0004]


【發(fā)明內(nèi)容】

[000引本發(fā)明的第一個內(nèi)容是提供3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-NG-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl。
[0006]
[0007] 本發(fā)明的第二個內(nèi)容是提供制備3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲 醜-N6-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl的合成方法，該方法包括：
[0008] (1化-組氨酸在稀硫酸催化下與甲醒進行Pictet-Spengler縮合生成6S-4, 5,6， 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸；
[0009] (2) 6S-4, 5,6, 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸轉(zhuǎn)化為 6S-4, 5,6, 7-四 氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋；
[0010] (3)6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋用高儘酸鐘氧化為 3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋；
[0011] (4) 3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸甲醋在化OH溶液（2腳中皂化成3H-咪哇并 [4,5-c]化巧-6-甲酸；
[0012] 巧)3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸與NG-N〇2-Arg-〇Bzl偶聯(lián)得到3H-咪哇并[4， 5-C]化巧-6-甲醜NG-N〇2-Arg-〇Bzl;
[0013] 巧)3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-妒-N〇2-Arg-〇Bzl在化OH溶液（2腳中皂 化成3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg ;
[0014] (7) 3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg與kAla-OBzl偶聯(lián)得到 3H-咪 哇并[4,5-c]化巧-6-甲醜NG-N〇2-Arg-Ala-(ffizl。
[001引本發(fā)明的第S個內(nèi)容是評價3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-N6-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl對腫瘤細胞增殖的抑制作用。
[001引本發(fā)明的第四個內(nèi)容是評價3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-N6-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl對荷S180小鼠腫瘤生長的抑制作用。
[0017]本發(fā)明的第五個內(nèi)容是評價3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-N6-NOz-Arg-Ala-OBzl對SD雄性大鼠的體內(nèi)抗血栓活性。
【附圖說明】
[001引 圖1. 3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲醜-NG-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl的合成路線.i) 肥冊，&0,H2S04,65°C;U)MeOH，S0Cl2,0°C;iU)DMF，NMM，KMn〇4;iv)化0H，H20,0°C;v)二環(huán) 己基碳二亞胺值CO，I-居基苯并H哇（冊Bt)，N-甲基嗎晰（NMM)，DMF加)化地，H20,0°C; ViU二環(huán)己基碳二亞胺值CC)，1-居基苯并H哇（冊Bt)，N-甲基嗎晰（NMM)，DMF。
【具體實施方式】
[0019] 為了進一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實施例。送些實施例完全是例證性的，它 們僅用來對本發(fā)明進行具體描述，不應(yīng)當理解為對本發(fā)明的限制。
[0020] 實施例1制備6S-4, 5,6, 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸似
[0021] 冰浴下將15.Og(96.Smmol)k組氨酸置于250血圓底燒瓶中，加入50血蒸傭水， 再逐滴加入3血濃硫酸，攬拌均勻，完全溶解后加入15血甲醒溶液（40% )，6(TC反應(yīng)8小 時。反應(yīng)物冷卻至室溫，用濃氨水在冰浴下調(diào)抑至6,有大量無色沉淀析出，過濾。濾餅用 水洗并干燥，得到15g(93% )標題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)167[M+田+。
[002引實施例2制備6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋（3)
[0023] 冰浴下在500血茄瓶里加100血甲醇，用恒壓漏斗緩慢滴加10血二氯亞諷，1小 時后加入5.0邑(30臟〇1)65-4,5,6,7-四氨-3護咪哇并[4,5-(：]化巧-6-駿酸似，室溫反 應(yīng)3天后，TLC顯示反應(yīng)完全，反應(yīng)混合物減壓濃縮，殘留物加甲醇溶解并減壓濃縮。該操 作重復(fù)3次得無色泡狀固體，再加己離抽干重復(fù)3次得無色粉末，最后用甲醇/己離重結(jié)晶 得4. 2g(55%)標題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z)181[M+田+。
[0024] 實施例3制備3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸甲醋（4)
[002引冰浴下在100血茄瓶里加2邑(7.9臟如65-4,5,6,7-四氨-3護咪哇并[4,5-。] 化巧-6-甲酸甲醋，加DMF使溶解。向該溶液中滴加ImLH己胺調(diào)抑到8,分H次加入 1.5g(9.4mmol)高儘酸鐘。反應(yīng)6小時后，TLC監(jiān)測反應(yīng)完畢。反應(yīng)物減壓濃縮至干，得到 的黑色固體用INHCl溶液溶解，冰浴下滴加2N化OH溶液調(diào)抑到7,析出大量無色固體。該 固體W二氯甲焼/甲醇為洗脫劑用硅膠柱純化，得〇.93g(66.4% )標題化合物，為無色固 體。ESI-MS(m/z) 177[M+H]+。
[002引實施例4制備3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸巧）
[0027] 冰浴下在100血茄瓶里力日3血化OH溶液（1. 5腳，IOmin后力日入 0. 93g巧.3mmol)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋（4)，反應(yīng)1小時后TLC顯示反應(yīng) 完畢，冰浴下向反應(yīng)液中滴加2NHCl溶液調(diào)抑到7,析出大量無色固體。該固體W二氯甲 焼/甲醇為洗脫劑用硅膠柱純化，得〇.56g(65%)標題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/ z)163[M+H]+。
[0028]實施例5制備3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-L-NG-N〇2-Arg-〇BzU6)
[002引稱取194mg(l. 2mmo；L)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-駿酸于100血茄形瓶中，加 入20mLDMF。在冰浴和攬拌下依次加入211mg(l. 6mmol)冊化及333mg(l. 6mmol)DCC，活 化 30min。稱取 676mg(l. 4mmol)Tos?NG-N〇2-Arg-〇Bzl于 25血小H角瓶中，用DMF溶解 后，用NMM調(diào)抑至7,然后將該溶液滴加至茄形瓶的反應(yīng)液中，最后用NMM調(diào)反應(yīng)液抑值 至8。室溫反應(yīng)過夜，TLC顯示反應(yīng)完畢后，反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物加50血二氯 甲焼溶解，過濾除去二環(huán)己基脈值CU),濾液層依次用飽和胞肥化水溶液（20mLX3)和飽 和化Cl水溶液（20血X3)各洗3遍，己酸己醋層用無水化Clz干燥，過濾，濾液減壓濃縮 至干，得到的黃色油狀物經(jīng)硅膠柱層析純化（二氯甲焼/甲醇為洗脫劑），得到的淡黃色 固體，經(jīng)二氯甲焼/石油離重結(jié)晶得200mg(37% )標題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/ e)454[M-田-.Mpl84-186°C.[a]D化=12. 2(c= 0. 12,甲醇）.Ih-NMR巧OOMHz，DMS0-de)6/ ppm= 13. 19 (s,IH) ,9. 04(s,2H) ,8. 57 (s,IH) ,8. 52 (s,IH) ,8. 26 (s,IH), 7. 44 (m, 5H), 5. 18(m，2H)，4. 63(dd，J=甜z，J= 15Hz，lH)，3. 16(m，2H)，l. 95(m，2H)，l. 59(m，2H)。
[0030] 實施例6制備3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-kNG-N〇2-Arg (7)
[0031]稱取 200mg(0. 44mmol) 3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-kNG-N〇2-Arg-〇Bzl于 IOOmL茄瓶中，加甲醇溶液使原料溶解，冰浴攬拌下滴加2NNa0H溶液調(diào)抑到11，冰浴下 反應(yīng)3小時，TLC顯示反應(yīng)完畢。冰浴下向反應(yīng)液中滴加飽和硫酸氨鐘溶液調(diào)抑到7,反 應(yīng)化合物減壓濃縮，殘留物用甲醇復(fù)溶，濾去不溶物，濾液減壓濃縮，得74mg(46% )標題 化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z) :363[M-田-;Mpl66-169°C.[a]。25 = 9. 8(c= 0. 19， 甲醇）.Ih-NMR巧OOMHz，DMS0-de)6/ppm= 13. 14 (s，lH) ,8.99 (s，2H) ,8.65 (s，2H) ,8.54 (s, 1H)，8. 53(s，lH)，8. 29(m，2H)，4. 60(dd，J=甜z，J= 15Hz，lH)，3. 10(m，2H)，l. 79(m，2H), 1. 55(m，2H)。
[0032]實施例7制備3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-甲醜-L-NG-N〇2-Arg-Ala-〇Bzl (8)
[0033]稱取 61mg(0. 1 7mmo1)3H-咪哇并[4, 5-c] [I比巧-6_ 甲醜-kNG-N02-Arg于 10OmT,茄 形瓶中，加入20血DMF。在冰浴和攬拌下依次加入27mg(0. 2mmol)冊Bt及41. 3mg(0. 2mmol) DCC，活化 30min。稱取 60mg0). 17mmol)Tos?Ala-OBzl于 25血小H角瓶中，用DMF溶解 后，用NMM調(diào)抑至7,然后將該溶液滴加至茄形瓶的反應(yīng)液中，最后用NMM調(diào)反應(yīng)液抑值 至8。室溫反應(yīng)過夜，TLC顯示反應(yīng)完畢，反應(yīng)混合物減壓濃縮至干，殘留物加20血二氯甲 焼溶解，過濾除去二環(huán)己基脈值CU),濾液層依次用飽和NaHC03溶液（20mLX3)和飽和化Cl溶液（20mLX3)各洗H遍，有機層用無水化CI2干燥，過濾、濾液減壓濃縮至干，得到的黃 色油狀物經(jīng)硅膠柱層析純化（二氯甲焼/甲醇為洗脫劑），得到的淡黃色固體，經(jīng)二氯甲焼 /石油離重結(jié)晶得17mg(19. 2%)標題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z) :524[M-田；Mp: 111.4-114. 5