一種高純度芍藥苷和白芍苷的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然藥物提取分離領(lǐng)域，特別涉及一種高純度芍藥苷和白芍苷的制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 茍藥苷（paeoniflorin)和白茍苷（又稱茍藥內(nèi)酯苷，albiflorin)是一種單砲苷 類成份，在牡丹科植物中普遍存在，是傳統(tǒng)中藥白芍、赤芍、牡丹皮中的主要有效成份和質(zhì) 量控制標(biāo)準(zhǔn)，具有多種藥理作用和用途，白勺總苷在中國(guó)是一種治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥 物，芍藥苷和白芍苷可作為有效成份應(yīng)用于相關(guān)的藥品和功能食品領(lǐng)域。
[0003] 芍藥苷和白芍苷的制備工藝相關(guān)研究文獻(xiàn)主要集中如下：游松等（中國(guó)專利申請(qǐng) 號(hào)02133298. 3)公開(kāi)了一種"芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的組合物及其制備方法"，所述組合物從 芍藥中提取分離得到，其中芍藥苷與芍藥內(nèi)酯苷在該組合物中的比例為7 :3~9 :1，其制備 工藝主要通過(guò)吸附樹(shù)脂精制、氧化鋁柱層析和硅膠柱層析制得。張現(xiàn)濤等（中國(guó)專利申請(qǐng) 號(hào)200510041212. 5)公開(kāi)了一種"芍藥苷提取物的制備方法"，所述工藝主要采用乙醇提取 赤芍藥材，上大孔樹(shù)脂后，乙醇洗脫，洗脫液濃縮后上聚酰胺樹(shù)脂，得含量90%以上芍藥苷。 朱靜建等（中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?2110973. 7)公開(kāi)了一種"芍藥中甙類化合物單體、提取和分 離的方法"，所述成份包括芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷和羥基芍藥苷，其方法主要采 用白芍或赤芍在醇水溶液中溶脹，加熱回流，濃縮至浸膏，用丙酮溶液超聲提取，濃縮，硅膠 拌樣，上真空色譜柱粗分，再經(jīng)硅膠柱反復(fù)進(jìn)行分配色譜獲得。石任兵等（中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?200710111231.X)公開(kāi)了一種"芍藥總苷提取物及其制備方法"，所述提取物主要包括芍藥 苷、白芍藥苷、芍藥新苷、芍藥內(nèi)酯A、B、C、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷及其衍生物等，可從芍 藥科各植物部位中制備。徐娟等（中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?015103908662)公開(kāi)了一種"芍藥苷單 體的提取方法"所述提取方法為以酸性水溶液為溶劑、結(jié)合超聲-微波相結(jié)合的組合萃取技 術(shù)對(duì)芍藥苷單體進(jìn)行提取，與傳統(tǒng)的柱層析或大孔樹(shù)脂吸附法相比具有如下明顯優(yōu)點(diǎn)：a) 具有快速、徹底、效率高的優(yōu)點(diǎn)，在生產(chǎn)過(guò)程中可縮短生產(chǎn)周期和提高芍藥苷的提取率。劉 江云等（中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?01110410067. 9)公開(kāi)了一種"芍藥苷和白芍苷的制備方法"采 用乙醇提取藥材，上大孔樹(shù)脂柱，乙醇洗脫，所得精致物上硅膠柱，得到純度大于90 %的芍 藥苷和白芍苷成品。
[0004] 目前，采用大孔樹(shù)脂技術(shù)純化芍藥總苷的工藝較為成熟，但芍藥苷和白芍苷不 好分開(kāi)，采用硅膠柱層析柱效低，裝柱差異性大，不宜重復(fù)和放大，且白芍苷含量低，用 常規(guī)柱層析，回收率低，提高了生產(chǎn)成本。高速逆流色譜（High-speedcountercurrent chromatography,HSCCC)作為一種新型分離純化技術(shù)，操作方便，快捷，分離度較高，克服了 由固相載體帶來(lái)的樣品結(jié)合、失活、污染等缺點(diǎn)。已被廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物活性成分的分離 制備和總草藥的分析鑒定。
[0005] 芍藥苷和白芍苷結(jié)構(gòu)式如下：
[0006]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種高純度芍藥苷和白芍苷的制備方法，該方 法制備芍藥苷和白芍苷，產(chǎn)品純度高，品質(zhì)好，適用于各種型號(hào)高速逆流色譜儀，易于產(chǎn)業(yè) 化放大。
[0008] 本發(fā)明的一種高純度芍藥苷和白芍苷的制備方法，包括：
[0009] (1)將粉碎后的含有芍藥苷和白芍苷的牡丹科植物原料，以固液質(zhì)量比1:5-10加 入乙醇溶液，超聲提取，濃縮提取液得到浸膏；將浸膏按固液質(zhì)量比1:100-150用水溶解， 萃取，減壓濃縮得到萃取物；
[0010] (2)采用柱色譜，以大孔樹(shù)脂為填料，醇水溶液洗脫上述萃取物，收集含有芍藥苷 和白芍苷的流份，濃縮，干燥，得到粗提物；
[0011] (3)對(duì)上述粗提物采用高速逆流色譜法分離，高速逆流色譜的溶劑系統(tǒng)由三氯化 碳、丁醇、甲醇和水按體積比4:1-2:2-3:1組成；紫外檢測(cè)器在線監(jiān)測(cè)，收集流份減壓濃縮， 結(jié)晶，干燥，得到芍藥苷和白芍苷。
[0012] 所述步驟⑴中的乙醇的體積分?jǐn)?shù)為30-90 %。
[0013] 所述步驟（1)中的超聲提取次數(shù)為2~3次。
[0014] 所述步驟⑴中的萃取所用溶劑為乙酸乙酯。
[0015] 所述步驟（2)中的醇水溶液為體積分?jǐn)?shù)20-30 %的乙醇水溶液。
[0016] 所述步驟（3)中的高速逆流色譜的分離條件為：主機(jī)轉(zhuǎn)速750-1000rpm/min，流動(dòng) 相 2. 5-15.Oml/min，水浴溫度 10-35°C。
[0017] 所述步驟⑶中的溶劑系統(tǒng)的上相為固定相，下相為流動(dòng)相。
[0018] 本發(fā)明將樣品進(jìn)行特殊簡(jiǎn)便預(yù)處理，使的樣品中芍藥苷和白芍苷純度提高，上樣 量可以增加，同時(shí)制備高純度的（含量大于95%)芍藥苷和白芍苷兩種物質(zhì)，提高了產(chǎn)能。
[0019] 有益效果
[0020] (1)本發(fā)明分離方法簡(jiǎn)便，快捷，分離周期短，可以短時(shí)間內(nèi)分離制備高純度芍藥 苷和白芍苷。傳統(tǒng)的柱色譜方法操作繁瑣，需要反復(fù)的進(jìn)行柱層析分離，分離周期長(zhǎng)，目標(biāo) 成分死吸附嚴(yán)重。
[0021] (2)本發(fā)明單體制備量大，根據(jù)所需芍藥苷和白芍苷的質(zhì)量，可以調(diào)節(jié)被分離樣品 的進(jìn)樣量，采用制備型高速逆流色譜儀，工藝重現(xiàn)性好，產(chǎn)品純度高，具有良好的應(yīng)用前景。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1為實(shí)施例1HSCCC分離得到的芍藥苷和白芍苷的高速逆流色譜色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定 的范圍。
[0024] 實(shí)施例1
[0025] 取經(jīng)干燥的牡丹科植物原料粉碎，稱1000g，每次加入10L80 %乙醇溶液超聲提 取60分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮得到浸膏200g。